川芎嗪对血红蛋白H病患者红细胞膜MDA、SOD和T-AOC的影响

川芎嗪对血红蛋白H病患者红细胞膜MDA、SOD和T-AOC的影响 川芎嗪对血红蛋白H病患者红细胞膜 MDA、SOD和T-AOC的影响 ? 8O4?JournalofClinicalandExperimentalMedicineVo1.9,No.11Jun.2010 川芎嗪对血红蛋白H病患者红细胞膜 MDA,SOD和T—AOC的影响 刘四喜李长钢代冬伶方建培石红松王樱 (1深圳市儿童医院血液肿瘤科广东深圳518026; 2中山大学附二医院儿科广东广州510120) 【摘要】目的川芎嗪治疗前后血红蛋白H(HbH)病患者红细胞膜丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶 (SOD)活性及总抗氧化能力(T—AOC)的变化,初步探讨川芎嗪治疗HbH病的可能机制.方法对2005年1月至2008 年l2月我院25例HbH病确诊患者给予川芎嗪片治疗6个月,分别检测治疗前和治疗后1,3,6个月患者Hb浓度,红细 胞膜MDA含量,SOD活性及总抗氧化能力.结果川芎嗪治疗后与治疗前相比,患者Hb,红细胞膜SOD活性及T— AOC均显着升高,而红细胞膜MDA含量则显着下降;治疗后1,3,6个月与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0. 05),而治疗后1个月,3个月及6个月进行相互比较,其差异均无统计学意义(P>0.05).结论芎嗪能减轻HbH病 的贫血严重程度.川芎嗪可能影响患者体内氧化/抗氧化系统,以此清除病人体内过多的氧自由基,从而减少红细胞破 坏,延长红细胞寿命. 【关键词】血红蛋白H病红细胞膜川芎嗪丙二醛超氧化物歧化酶总抗氧化能力 EffectofLigustrazineonMDA,SODandT—AOCinErythrocyteMembraneinPatientswithHemoglobinHDisease.LIUSi一. Chang—g?,DA1Dong— ling,eta1.DepartmentofPediatrics,ShenzhenChildren'sHospital,ShenzhenGuangdong518026,China. 【Abstract】 0bjectiveToexploretheeffectofligustrazineintreatmentofpatientswithhemoglobinHdiseaseanditspossiblemechaniam byinvestigationofthechangeinlevelsofhemoglobin(Hb),mal0ndialdehyde(MDA),superoxidedismutase(SOD)andtotalanti—oxidation capacity(T— AOC)inerythrocytemembraneofpatientswithHbHdiseasebeforeandaftertreatmentwithligustrazine.MethodTwentyfivepa— tientsconfirmedasHbHdiseaseinthishospitalfromJanuary2005toDecember2008weretreatedwithlignstrazinefor6months.Thelevelsof MDA,SODandT— AOCinerythmcytemembraneandhemoglobinconcentrationweredetectedbeforetreatmentwithligustrazineand1,3and6 monthsaftertreatment.PairedT— testwasappliedforstatisticalanalysisandthedifferencewassignificant(P<O.05).ResultsTherewasre— markablyhigherlevelofHb,SODactivityandT— AOCinerythrocytemembraneafterligustrazinetreatmentbesidesalowerMDAcontent.The differencewassignificantforpatientsbeforeligustrazinetreatmentcomparedwiththoseafterligustrazinetreatment(P<0.05),buttherewasno significantdifferencefoundinHbconcentration,MDA,SODandT— AOCcomparedamong1st,3rdand6thmonthafterligustrazinetreatment (P>0.05).ConclusionLigustrazinecandecreasetheseverityofanemiainpatientswithHbHdisease,onemechanismofwhichmayberelated toitsabilitytoaffecttheoxidativeandantioxidativesysteminthebodyofpatients. 【Keywords】 HemoglobinHdisease,Erythroeytemembrane,Ligustrazine,Malondialdehyde,Superoxi dedismutase.Totalanti—oxidizinga- bility 地中海贫血是人类最常见的单基因病,可分为仅一 地中海贫血,p一地中海贫血,一地中海贫血等J.血 红蛋白H(hemoglobinH,HbH)病是临床常见的中间型 ot一地中海贫血,在我国南方尤其是广西,广东等地发病 ,我们采用 率较高J.从2005年1月至2008年12月 川芎嗪(Ligustrazine)治疗HbH病25例,取得了较为肯 定的疗效.然而,川芎嗪治疗HbH病的机制尚未阐明. 本文通过检测川芎嗪治疗前后HbH病患者红细胞膜丙 二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗 氧化能力(T—AOC)的变化,初步探讨川芎嗪治疗HbH 病的可能机制. 1病例资料 1.1病例纳入和排除标准参考张之南主编的《血液 病诊断及疗效标准》制订病例纳入和排除标准. 1.1.1病例纳入标准?Hb电泳找到HbH带,有条 件者进一步行基因诊断;?末作脾切除术;?近半年未 输血或未服用任何抗贫血药物. 基金项目:广东省医学科研基金,项目编号B2007157 通讯作者:刘四喜,主治医师,E—mail:tiger647@sina.con 1.1.2病例排除标准?不符合上述纳人标准者;? 有免疫缺陷,肝,.肾及血液系统等其他原发性疾病者;? 凡未按规定服药或资料不全等影响疗效判定者. 1.2一般资料全部病例均为2005年1月至2008年12 月就诊于我院的门诊病例,共计25例,均按本研究条件 签署知情同意,自愿接受治疗.其中男性14例,女性 11例.年龄8个月至15岁,其中,?1岁4例,1,3岁2 例,3,6岁1O例,?6岁9例,平均年龄(5.93?3.45)岁. 民族均为汉族,均未切脾.血液学特点方面,重度贫血0 例,中度贫血17例,轻度贫血8例;Hb浓度63.0—108.0 g/L,平均(84.76?9.41)g/L;HbH含量9.77%,21.53% ,平均14.51%?2.54%.19例做了基因诊断,其中一 or3.7/or13例,一.2/or姒3例,otCSodct2例,胁 CS纯合子1例. 1.3治疗方法及时间25例患者采用治疗前后自身 对照方法进行观察,疗程为6个月.川芎嗪片,剂量4 ms/(kg?d),2次/d,温开水冲服.药物每月发放一 次,要求纳入病例在观察期间不输血,坚持服药. 1.4观察指标分别观察患者治疗前,服药1个月,服 临床和实验医学杂志2010年6月第9卷第11期?805? 药3个月及服药6个月时Hb浓度和红细胞MDA含量, SOD活性及T—AOC的改变. 2实验材料及方法 2.1实验材料川芎嗪片:河南天方药业股份有限公司. MDA,SOD及T—AOC测定试剂盒:南京建成生物研究 所.冰乙酸:上海申博化工有限公司.无水乙醇:上海实意 化学试剂有限公司.100,1000微量可调移液器:德 国Gilson公司.752分光光度计:上海第三仪器厂. 800型高速离心沉淀器:上海手术器械十厂.DK一8D型电 热匣温水槽:上海医尉叵温设备厂. 2.2红细胞膜的抽提与保存采空腹外周静脉血3 ml,置于肝素抗凝管中,以1500,2000g/min离心5 min,去血浆层,以1:2体积比加10mmol/L的Tris— tIC1,混匀器混匀后i500,2000min离心5min,吸弃 上清液及白细胞层,反复洗涤2—3次,弃上清,留压积 红细胞;以体积比1:10加预冷的双蒸水充分溶血至完 全暗红透明;10000min4?低温离心20min,弃上清, 以1:10体积比加pH7.4的10mmol/LTris—HC1,反 复混匀洗涤2—3次至沉淀部分为乳白色,弃上清及纤 维蛋白样沉淀,收集红细胞膜,以生理盐水稀释并分装, 一 70?保存备用. 2.3红细胞膜MDA含量,SOD活性及T—AOC的测定 MDA含量测定:旋涡混匀器充分混匀,试管口用保鲜 薄膜扎紧,刺一小孔,95?水浴40min,取出后用冷流水 速降至室温,加入抽提液萃取,振摇1min,3000rpm离 心10min,取上层液,用532nm处,1cm光径,蒸馏水调 零,比色测各管吸光度值.SOD活性测定:用旋涡混匀 器充分混匀,置37?恒温水浴40min,加入显色剂,混 匀,10min后倒人1cm光径比色杯中,蒸馏水调零,波 长550nm比色.T—AOC测定:旋涡混匀器充分混匀, 放置10min,蒸馏水调零,1cm光径,520nm处测各管 吸光度. 2.4统计学处理采用SPSS16.0软件,以原始数据 建立数据库,计量资料以均数?标准差(?s)表示, 采用治疗前后配对t检验,P<0.05为差异有显着性. 3结果 3.1一般情况25例患者服药1个月后Hb平均上升 (18.48?4.58)g/L,最高者Hb上升至28g/L,总有效 率达100%.患者中有3例失访,其中1例在服药1个 月后,2例在服药3个月后.在6个月的观察期中,有7 例患者出现11例次感染,其中8例次为上呼吸道感染, 2例次为支气管肺炎,1例次为急性腹泻病.11例次感 染中,7例次在服药3个月内,4例次发生在服药6个月 内,患者在感染时均有不同程度的Hb浓度下降. 3.2川芎嗪治疗前,服药1个月,服药3个月及服药6 个月时患者Hb浓度的改变治疗前,HbH病患者的 Hb浓度为(84.764-9.41)g/L.在给予川芎嗪治疗1个 月,3个月及6个月后,患者的Hb浓度均升高,与治疗 前比较,P值均<0.001,差异有统计学意义.而治疗1 个月,3个月及6个月后患者的Hb浓度相互进行比较, P值均>0.05,差异无统计学意义.见表1. s) 表1治疗前后患者Hh浓度(g/L,? 注:与治疗前比较,与服药1个月比较,与服药3个月服药比较. 3.3川芎嗪治疗前,服药1个月,服药3个月及服药6与治疗前比较,P值均<0.001, 差异有统计学意义.而 个月时患者MDA含量的改变治疗前,HbH病患者的治疗1个月,3个月及6个月 后患者的MDA含量相互进 MDA含量为(5.384-1.09)nmol/ml.在给予川芎嗪治行比较,P值均>0.05,差异无 统计学意义.见表2. 疗1个月,3个月及6个月后,患者的MDA含量均下降; 表2治疗前后患者MDA含量fnmol/ml.?) 注:与治疗前比较,与服药1个月比较,与服药3个月服药比较. ? 806.JournalofClinicaland脚e脓以MediciwVo1. 9,No.11Jun.2010 3.4川芎嗪治疗前,服药1个月,服药3个月及服药6 个月时患者血清SOD活性的改变治疗前,HbH病患 者的SOD活性为(9417.45?758.03)U/(g?Hb).在 给予川芎嗪治疗1个月,3个月及6个月后,患者的SOD 活性均升高,与治疗前比较,P值均<0.001,差异有统 计学意义.而治疗1个月,3个月及6个月后患者的 SOD活性相互进行比较,P值均>0.05,差异无统计学 意义.见表3. 表3治疗前后患者SOD活性[(U/(g?Hb).x?] 注:与治疗前比较,与服药1个月比较,与服药3个月服药比较. 3.5川芎嗪治疗前,服药1个月,服药3个月及服药6高,与治疗前比较,P值均 <0.001,差异有统计学意义. 个月时患者T—AOC水平的改变治疗前,HbH病患者而治疗1个月,3个月及6个 月后患者的T—AOC相互 的T—AOC为(140.12?22.33)U/mg.在给予川芎嗪进行比较,P值均>0.05,差异 无统计学意义.见表4. 治疗1个月,3个月及6个月后,患者的T—AOC均升 表4治疗前后患者T—AOC水平(U/mg,x?) 注:与治疗前比较,与服药1个月比较,与服药3个月服药比较. 4讨论 HbH病是因为4个一基因缺少了3个所引起,其 临床症状轻重程度取决于其基因型的不同.由于患者 经济条件限制,本文中有6例未行基因检测,在19例检 i贝0的患者中,缺失型HbH病高达84.21%(16/19)占明 显优势,这与国内的资料基本一致,而非缺失型仅为5. 26%(1/19),缺失型复合非缺失型HbH病为10.53% (2/19).因为例数较少,本文未对不同基因型与治疗的 关系做统计学分析. 生理状态下,红细胞内及血浆中存在着一整套清除 自由基的酶类和非酶类抗氧化剂,使体内自由基产生和 清除处于动态平衡.SOD是红细胞和机体内重要的抗 氧化酶和自由基清除剂,能够有效地清除体内自由基, 保护红细胞及机体免受损伤,对红细胞和机体的氧化与 抗氧化平衡起着至关重要的作用.MDA是氧自由基与 红细胞膜多聚不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的继发性 产物,是自由基对生物细胞膜损伤的最终产物,具有很 强的生物毒性,其产生量与氧自由基的量相平行,MDA f增多,可造成膜损伤,影响红细胞变形性.T—AOC 测定能客观反映机体内抗氧化酶类的浓度.HbH病患 者红细胞内有大量过剩的游离的B链,较正常Hb更易 自身氧化,产生并释放出大量氧自由基.已经证明,由 自由基介导的红细胞膜脂质过氧化是慢性溶血的主要 原因.所以,一旦患者过氧化损伤能被减轻或预防,则 病情有可能获得改善.本文观察发现,HbH病患儿并发 感染时其SOD活力下降,MDA水平增高,而Hb浓度均 有不同程度的下降,这也再次验证了上述观点.由于例 数较少,本文未对感染前后患者Hb,SOD,MDA等的改 变情况做统计学分析. 近年来,我国学者采用祖国传统医学治疗HbH病 取得了一定的疗效-4J.川芎嗪(Ligustrazine),别名四 甲基吡嗪(Tetramethylpyrazine),是从川芎生物碱中分离 得到的,具有补血,活血的单体,具有促进造血,扩张血 管,改善微循环,抗血小板凝集,抗血栓形成和溶血栓作 用,口服可从胃肠道迅速吸收【5j.从2005年起,我们应 使用口H~Jrl芎嗪片剂治疗25例HbH病患儿,治疗1个 月时患者Hb平均上升(20.98士5.05)g/L,最高者Hb 上升至29.2g/L,总有效率达100%,取得了较好的临床 疗效;川芎嗪治疗后患者红细胞膜SOD活性,T—AOC 均显着升高,而MDA含量明显降低,与治疗前相比,其 临床和实验医学杂志2010年6月第9卷第11期?807? 内科胸腔镜对恶性胸腔积液的诊断和治疗 何卫国赵子文曾军钟维农黄侃张梅春(广州市第一人民医院呼吸科广东广州 510180) 【摘要】目的探讨内科胸腔镜技术在恶性胸腔积液中诊断和治疗的临床应用.方 法通过内科胸腔镜病理活 检诊断为恶性胸腔积液,镜下进行滑石粉喷洒胸膜固定术,观察其疗效和并发症. 结果69例恶性胸腔积液病人被确 诊,其中肺癌58例(腺癌41例,鳞癌8例,小细胞癌5例,腺鳞癌4例),胸膜间皮瘤3 例,直(结)肠腺癌胸膜转移3例, 乳腺癌2例,胸腺瘤1例,平滑肌肉瘤1例,淋巴细胞性淋巴瘤1例.诊断阳性率 88.5%(69/78).36例恶性胸腔积液 患者行滑石粉喷洒胸膜固定术,有效率为91.7%(33/36),平均拔管时间为5.6d(2, 13d).主要并发症:胸痛29例 (80.6%),发热16例(44.4%).结论内科胸腔镜对恶性胸腔积液的诊断有重要价值, 对恶性胸腔积液进行滑石粉喷 洒胸膜固定术是一种安全,有效的治疗方法. 【关键词】胸腔积液胸腔镜诊断胸膜固定术 Medicalthoracoscopyinthediagnosisandtreatmentofmalignantpleuraleffusion.HEWei—guo,ZHAOZi—wen,ZENGJun,eta1.De- paamemofRespiratoryMedwine,TheFirstMuniciplePeople'sHospitalofGuangzhou,GuangzhouGuangdong510180,China. 【Abstract】 0bjectiveTostudytheclinicalapplicationofmedicalthoracoscopytothediagnosisandtreatmentofmalignantpleuraleffu— sions.MethodsMedicalthoracoseopyandpathologicalbiopsywereusedtodiagnosethepatientswithmalignantpleuraleffusions.Talcpoudrage pleurodesisWasperformedundermedicalthoracoscopyandefficacyandcomplicationsofthetreatmentwereevaluated.ResultsOfthe69patients withmalignantpleuraleffusions,58werediagnosedaslungcancer(41adenocarcinoma,8squamouscellcarcinoma,5smallcellcarcinoma,4 adenosquamousceilcarcinoma),3mesothelioma,3adenocarcinomaofcolonandrectum,2breastcancer,1thymoma,1leiomyosarcomaand1 lymphocyticlymphoma.Thediagnosticyieldwas88.5%(69/78).Thi~y— sixpatientswithmalignantpleuraleffusionunderwentmedicalthora— coscopictalcpoudragepleumdesis.Theaveragedurationofthoracictubingwas5.6(2—13)days.Thetotaleffectiveratewas91.7%(33/36). Themajorcomplicationswerechestpain80.6%(29/36)andfever44.4%(16/36).Conclusion Medicalthoraeoscopyisauimpo~antdiagno— sismethodformalignantpleuraleffusions,talcpoudragepleumdesisisasafeandeffectivetre atmentofmalignantpleuraleffusions. 【Keywords】Pleuraleffusion;Thoracoscopy;Diagnosis;Pleurodesis 恶性胸腔积液的诊断和治疗在临床实践中都较为 棘手.经胸部影像学,支气管镜,胸水,微生物,病理细 胞学,胸膜活检检查,仍有相当一部分患者难以明确病 理类型,对于部分已经确诊的恶性胸腔积液,采取反复 胸腔抽液或向胸膜腔内注人药物等方法的治疗疗效欠 佳,内科胸腔镜的应用为其病理学诊断提供了有力的手 段,镜下滑石粉喷洒胸膜固定术不仅解决了上述疗效欠 佳问题,也避免了外科胸腔镜创伤和风险大,操作复杂, 费用高等缺点.我院呼吸科近5年共69例恶性胸腔积 液经内科胸腔镜确诊,36例恶性胸腔积液患者行镜下 滑石粉喷洒胸膜固定术,现将其结果及应用体会总结如 F. 1资料与方法 1.1一般资料我院呼吸科自2004年6月至2010年 1月共有经内科胸腔镜确诊的恶性胸腔积液69例,其中 男性46例,女性23例,年龄42,83岁,平均年龄(61.7 - 4-18.4)岁,病程3—42d,单侧胸腔积液66例,双侧胸 腔积液3例.36例恶性胸腔积液患者行镜下滑石粉喷 洒胸膜固定术,男性22例,女性14例,年龄45,78岁, 平均年龄(56.1?13.2)岁.病程9,56d.单侧胸腔积 液35例,双侧胸腔积液1例. 差异均有统计学意义;治疗1个月,3个月及6个月后的 SOD活性,T—AOC,MDA含量进行相互比较,其差异均 无统计学意义.以上结果提示,川芎嗪治疗能够提高 HbH病患者红细胞膜SOD的活力,降低MDA含量,提 高总抗氧化能力,以此清除病人体内过多的氧自由基, 防止脂质过氧化,保护红细胞不受损害,从而延长红细 胞寿命.治疗开始的一个月患者各项指标变化明显,随 着治疗时间延长,治疗3个月后各项指标趋于稳定.本 研究为川芎嗪片剂治疗HbH病的临床应用提供了一定 的理论依据. 参考文献 [1]张之南,沈悌.血液病诊断及疗效标准[s].3版.北京:科学出版 社,2007:29—35. 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