第15章_甾体激素类药物的分析

null第十五章第十五章甾体激素类药物的null基本结构：环戊烷骈多氢菲null分类：甾体激素肾上腺皮质激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素null肾上腺皮质激素氢化可的松null肾上腺皮质激素醋酸地塞米松null雄性激素丙酸睾酮null蛋白同化激素苯丙酸诺龙null孕激素黄体酮null雌激素炔雌醇null一、结构与性质1. 肾上腺皮质激素 常见药物有氢化可的松、醋酸泼尼松、醋酸氟轻松、倍他米松等。null2. 雄性激素及蛋白同化激素 常见药物有丙酸睾酮、甲睾酮、苯丙酸诺龙等。null3. 孕激素 常见药物有黄体酮、炔孕酮、炔诺酮、炔诺孕酮等。null4. 雌激素 常见药物有炔雌醇、炔雌醚、雌二醇、苯甲酸雌二醇等。null二、鉴别试验（一）呈色反应1. 与强酸的呈色反应nullnull2. 官能团的呈色反应甾酮激素类药物呈色羰基试剂（1）C3–酮基和C20–酮基常用的羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼null睾酮null肾上腺皮质激素药物呈色四氮唑盐 OHˉ（2） C17 – α – 醇酮基null具有甲酮基或活泼亚甲基的甾体激素类药物呈色 亚硝基铁氰化纳 间二硝基酚、芳香醛（3）甲酮基null黄体酮蓝紫色亚硝基铁 氰化纳其他甾体淡橙色 不显色null黄体酮null蓝紫色null有机氟Fˉ有机破坏有机氯Clˉ（4）有机卤素茜素氟蓝 硝酸亚铈硝酸-硝酸银AgCl↓ 呈蓝紫色 null茜素氟蓝蓝紫色F-null雌激素类药物红色偶氮染料重氮苯磺酸（5）酚羟基null肾上腺皮质激素药物Cu2O↓橙红色碱性酒石酸铜（二） 沉淀反应Ag↓黑色氨制硝酸银1. C17 – α – 醇酮基null含炔基的甾体激素银盐沉淀硝酸银2. 炔基null炔雌醇null3. 与硝酸-硝酸银的沉淀反应含有氯取代的甾体激素类药物。null (三) 制备衍生物测定m.p.nullnull香（四）水解产物的反应null特臭特臭null△４-3-酮 240nm苯环 280nm（五） UV法nullnullnull（六） IR法3750～3300cm-1null醋酸可的松结构特征：△4–3–酮、C17 –OH C20 –酮基、 C11 –酮基、醋酸酯null1630cm-1ν3420cm-1亚甲基、角甲基吸收带1750cm-11232cm-11052cm-1null（七） TLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别 方法：对照品法 要求供试品溶液所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同。null炔诺酮 TLC图null（八） HPLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏） 方法：对照品法 要求在含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的tR与对照品峰的tR一致。null三、 杂质检查（一）游离磷酸（对照品法）地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠 氢化泼尼松磷酸钠null原理：方法：null（二）甲醇和丙酮甲醇 不得出峰（灵敏度法） 检测限= 3.1ng丙酮 ≤5.0% 内标法 + 校正因子GC法null（三）雌酮原理：Zimmermann反应高纯度null来源：合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢剧毒原理：S（四）硒null（五）其他甾体定义 与标示药物结构不同的甾体化合物都称为“其他甾体”2. 来源 原料、中间体、异构体、降解产物null3. 特点 （1）可能存在多个甾体杂质 （2）结构类似4. 方法（具有一定分离能力） TLC法（高低浓度对比法） HPLC法（类似高低浓度对比法）null四、含量测定（一）UV法△４-3-酮：240nm（±）肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素 苯环：280nm（±）雌激素null（二）反应分光光度法1. 适用于非分光光度活性药物 2. 使待测组分光谱位移，避免干扰 3. 增加测定灵敏度 4. 增加选择性弱、非分光光度活性药物强分光光度活性药物化学反应null 肾上腺皮质激素类C17 -α－醇酮基强还原性1. 四氮唑比色法（1）原理null三苯甲臜↓深红null蓝四氮唑（BT）null双甲臜（暗蓝）nullChP TTC（RT） BP TTC（RT） USP BT（2） 操作方法（对照品法）null 基团对反应速度的影响C11= O＞ C11－OHC21－OH＞ C21-酯C16无论何种取代基ν↓（3）讨论null 溶剂、水分的影响含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10% 含水30%→几无反应—— 无水乙醇null O2与光线的影响反应过程 反应产物怕光→避光、快速O2影响颜色强度和稳定性→隔绝空气、 快速、充N2null 碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行，以氢氧化四甲基铵的结果最佳。加入顺序：null 温度与时间t、℃↑→ν↑→甲臜分解↑→%↓ChP 25℃ 40～45′BP 30℃ 1hnull（4）特点： 缺点 影响因素太多 优点 测定结果能指示药品的稳定性（氧化及降解产物无此反应）null2. 其他比色法 异烟肼比色法 Kober反应比色法nullChP（2005）、USP、BP、JP均采用RP-HPLC（大多内标法）特点：用样量少，灵敏度高，分离效果好，测定速度快（三）HPLC法复 习复 习1．甾体激素类药物的结构中能和四氮唑盐发生显色反应的基团 A. 酚羟基 B. 活泼次甲基 C. 甲酮基 D. C17 -α-醇酮基 E. 酮基null2. 用异烟肼比色法测定甾体激素药物含量时，其溶液的环境是 A．强酸性 B．中性 C．强碱性 D．弱碱性 E．以上都不对null3.问（1）～（5） A．维生素B1 B．醋酸地塞米松 C．两者皆是 D．两者皆不是 （1） 异烟肼比色法 （2）硫色素反应 （3）紫外分光光度法 （4）羟肟酸铁反应 （5）绿奎宁（Thaciaquin）反应BACDDnull4. 可用于氢化可的松鉴别的试剂有 A．氨制硝酸银 B．异烟肼 C．红四氮唑 D．硫酸 E．重氮苯磺酸null5. 可用于甾体激体类药物的测定方法有 A．高效液相色谱法 B．四氮唑盐法 C．紫外分光光度法 D．异烟肼比色法 E．Kober反应比色法null6. 能与亚硝基铁氰化钠反应生成蓝紫色的药物是 A．雌二醇 B．黄体酮 C．醋酸可的松 D．苯丙酸诺龙 E．以上都不对null7. 各国药典对甾体激素类药物常用HPLC或GC法测定其含量，主要原因是 A.它们没有特征紫外吸收，不能用 紫外分光光度法 B. 不能用滴定分析法进行测定 C. 由于“其它甾体”的存在，色谱法可消除它们的干扰 D. 色谱法比较简单，精密度好 E. 色谱法准确度优于滴定分析法null8．异烟肼比色法测定甾体激素类药物时，药物的呈色基团是 A. 酮基 B. 酚羟基 C. 活泼次甲基 D. 炔基 E. 甾体母核null9. 四氮唑比色法可用于下列哪个药物的含量测定 A. 可的松 B. 睾丸素 C. 雌二醇 D. 炔雌醇 E. 黄体酮null10. 黄体酮在酸性溶液中可与下列哪些试剂反应呈色 A. 2,4-二硝基苯肼 B. 三氯化铁 C. 硫酸苯肼 D. 异烟肼 E. 四氮唑盐