涂片查找抗酸杆菌的方法改进

涂片查找抗酸杆菌的方法改进 涂片查找抗酸杆菌的方法改进 右江医学2002年第30卷第6期 文章编号:1003—1383(2oo2)o6—0537—01中图分类号:R446.5文献标识码:B 涂片查找抗酸杆菌的方法改进 江苏省南京医科大学附属淮安市第一人民医院检验科(223001) 张金华杨淮明刘小宁 ? 537? 摘要对涂片直接镜检查找抗酸杆菌的方法,进行了改进.在痰标本中加,,k--定量的20%的85消毒液,振荡混均,室温下放 置2O分钟,3000转Imin离心20分钟,弃上清液,留一滴混匀涂片,干燥后,作抗酸 此方法消毒效果可靠,操作简便,灵敏度 染色. 比传统方法提高. 关键词痰涂片I,型菌 传统的涂片查找抗酸杆菌的方法,对于基层医院,高温 高压消毒很不方便,很多基层医院省略了这一步,检验人员 直接带活菌操作,感染的机会大大增加.由于没有浓缩,阳 性检出率明显降低.针对以上不足,我们对此方法进行了改 进,建立了一种市售的85消毒液进行消毒,用离心浓缩的方 法.经过了长时间的对比观察,我们认为本方法结果满意, 可以推广. 材料与方法 1.材料?标本:病人留取24小时痰(5m1左右),于带 盖的玻璃瓶内.?试剂:85消毒液(市售,江苏金湖有机化工 厂生产,成分为有效氯>5%,表面活性剂等). 2.方法?直接涂片法:痰标本直接涂片,室温阴干后, 进行抗酸染色,油镜镜检,为了减少人为误差,采用两人确定 法.?消毒离心浓缩法:在留取痰的玻璃瓶中加入20%的 nl,瓶口压玻璃纸加塞,85消毒液10r放置振荡仪上振荡5分 钟(或手工剧烈振荡10分钟)混匀,室温下放置20分钟,摇 匀,倒入12X15cm试管,3000转/min离心20分钟.弃去上 清液,混匀沉渣,涂片,置室温阴干.进行抗酸染色,涂片杂 质多,染色过深,加一次盐酸,酒精脱色.俩人确定检测结 果.?结核杆菌培养"):直接吸取沉渣0.1ml接种于培养基 斜面上,轻轻转动试管,使接种物均匀附着于培养基表面,置 35?,5%,10%CO2的恒温箱中孵育;结果判断:阴性结果 为4周内培养管内元细小颗粒菌落和菌膜的产生. 结果 1.两种方法的比较共检测186份标本,其中直接镜检 法阳性率为4.30%(8/186),消毒离心浓缩法阳性率为 15.59%(29/186),两组比较以检验,后者非常显着高于前 者(Y2=13.23,P<0.01),说明消毒离心浓缩法更敏感,提 高了检测的准确性. 2.消毒效果的观察取经常规生化方法鉴定的培养纯 化的纯抗酸杆菌菌株制成20份模拟阳性标本,按消毒离心 浓缩法前后进行结核杆菌培养.结果:未消毒前,20份均有 结核杆菌生长,消毒离心后,20份标本均无结核杆菌生长. 此结果可以说明采用20%的85消毒液,消毒20分钟效果完 全可靠. 3.消毒液浓度和时间的确定消毒液浓度参照85消毒 液的使用说明书,没有对其它浓度进行实验比较.消毒时间 越长,效果越好,我们考虑,基层医院检验科人员少,20分钟 可以完成工作,所以选择20分钟进行实验比较,结果可行. 不足20分钟消毒结果如何,我们未作实验,作者认为意义不 大,故选用20分钟. 4.消毒时间对染色结果的观察从消毒开始到制片完 成,我们选择40分钟,1小时,4小时,14小时,24小时进行 观察,结果14小时以内抗菌染色细菌形态完整,典型,着色 效果佳,24小时以上细菌形态不典型,着色效果差,不易辨 认.因此,消毒后的标本宜当班完成检验工作. 讨论 1.由本地区卫生防疫部门的疫情报告得知,近年来结核 病呈上升趋势.作为医学检验人员,接触结核病人机会增 多,那么感染机会比社会感染机会要高得多.因此,迫切需 要寻找一种免受感染的检测方法,目前,国内最常见的是高 压消毒法和紫外线照射法.高压消毒法虽安全可靠,但烦琐 而且费时,对基层医院检验科不适用.紫外法消毒效果差, 而且需时较长.我们采用了85消毒液消毒,离心浓缩,阳性 率显着提高. 2.新方法消毒效果可靠,操作简单,灵敏度提高,有利于 医检人员的安全.作者认为本法不仅可以在大的医院实验 室进行,而且也适用于基层医院实验室,是一种值得推广的 理想的抗酸杆菌检测方法. 参考文献 1.李仲兴,郑家齐,李家宏.临床细菌学[M].北京:人民卫生出版社, 1986.147,155, (收稿:2002—10一I5修回:2002—11—22) (编辑:宋卓孙) 作者简介:张金华(1965一),男,江苏省淮安市人,主管检验技 师,医学学士.