08厦门-乙型肝炎病毒表面抗原( HBsAg )

东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-01-08 乙型肝炎病毒面抗原( HBsAg ) 版序：2005-1 页码：第1 页，共2 页 [前言] HBsAg是乙型肝炎病毒（HBV）颗粒（Dane氏颗粒）的外壳部分，由蛋白质所组成。 [原理] 本试剂盒采用一步夹心法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强及可多次使用等优点。 [试剂厂家] 厦门英科新创科技有限公司 [试剂盒组成] 1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液 9. 浓缩洗涤液 （用蒸馏水1：19稀释后使用） [试剂的稳定性与贮存] 试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。 [标本的收集与处理] 标本为无溶血血清。 [操作步骤] 1、编号：拆取所需用量微孔，固定于板架，按序编号。设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。 2、加样：分别加阴、阳性对照1滴（50ul）和50ul待测样本于相应孔内。 3、加酶：除空白对照孔外，每孔加1滴（50ul）酶标记物溶液，轻拍混匀后封板。 4、温育：置37℃水浴箱温育60分钟。 5、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次，最后一次在吸水纸上拍干。 6、显色：每孔加底物液A1滴（50ul）、底物液B 1滴（50ul），轻拍混匀，置37℃水浴15分钟。 7、终止：每孔加终止液1滴（50ul），轻拍混匀。 8、测定：用酶标仪（450nm波长）测定各孔吸光度OD值（先用空白孔校零）。 东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-01-08 乙型肝炎病毒表面抗原( HBsAg ) 版序：2005-1 页码：第2 页，共2 页 [结果判定] 1、临界值（C.O.）：本室界值室内标准品平均OD值。（界值室内标准品平均OD值/部检验中心2ng/ml质控品OD值应小于2.5且大于1.5 。 2、样本OD值S/C.O.≥1者为HBsAg阳性。（即S≥临界值） 样本OD值S/C.O.＜1者为HBsAg阴性。（即S＜临界值） 注：阴性对照孔OD值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际值计算。 [试剂盒灵敏度] ≤0.5ng/ml [质量控制] 每批检测同步进行标准和质控品测定，绘制室内质控图 。其它按室内质量控制管理规定进行。 [参考范围] 酶联免疫吸附试验（ELISA）：阴性 [临床意义]: （1）HBsAg阳性，常为慢性HBsAg携带者、急性乙型肝炎潜伏期、慢性迁延性肝炎与慢性活动性肝炎、肝硬化。 （2）HBsAg阳性还可见于输血后肝炎病人的血中，有少数急性黄疸性肝炎的病人血中HBsAg呈阳性反应，随着病情的好转HBsAg消失。 [注意事项] 1、试剂盒2-8℃贮存，有效期6个月。 2、试剂盒用前先平衡至室温。 3、未用完的包被板条应及时封存于密封塑料袋中。包被板起封使用后，与4周内用完。 4、含血球的标本易出现假阳性结果，应尽量避免使用。 5、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。 6、洗涤必须充分，洗涤时各孔均须加满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。 7、若浓缩洗涤液出现结晶时，可于37℃放置至溶解。