升降胶囊对化疗致呕家鸽体内5-羟色胺水平的影响

第 13卷第 4期 2007年 4月 中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vo1．13．No．4 Apr．，2007 升降胶囊对化疗致呕家鸽体内5一羟色胺水平的影响 徐 伟 ，孙维峰，陈志煌，韦 嵩，李 丽 (广州军区广州总医院，广 东 广州 510010) [摘要] 目的：观察升降胶囊对顺铂所致家鸽呕吐的作用，探讨其防治呕吐的机制。：采用家鸽腹腔注射顺铂制造呕 吐模型，观察家鸽呕吐频率及呕吐潜伏期；用高效液相色谱．电化学检测法(HPIA2．ED)检测家鸽血清、十二指肠组织中5一羟色胺 (5．HT)的含量。结果：升降胶囊对化疗致呕家鸽有明确的止呕作用。升降胶囊组家鸽血清和十二指肠组织中 5．HT的含量显 著减少(P<0．05)。结论：升降胶囊止呕的机制与降低 5．HT水平有关。 [关键词] 升降胶囊；家鸽；化疗呕吐；5．羟色胺 [中图分类号] R285．5 [文献标识码] B [文章编号] 1005．9903(2007)04—0045．03 The Effect of Sheng—Jiang Capsule on 5一HT in Vomiting Pigeon due to Chemotherapy XU Wei ，SUN Wei-feng，CHEN Zhi—huang，WEI song，LI Li (Guangzhou General Hospital of PLA Guangzhou Military Region，Guangzhou，Guangdong 510010，China) [Abstract] Objective：To observe the effect of Sheng—Jiang Capsule on treating cisplatin—induced pigeon’S vomiting，and explore the functional mechanism in preventing and treating vomiting．Me~od：The test was designed to [收稿日期] 2006．08．28 [通讯作者] *徐伟，Tel：(020)36653518；E-mail：zykxwei@126．corn 组、清肝泻火组的 AT1R蛋 白表达水平与模型对照 组相比明显降低(P<0．05)。 4 讨论 肾素．血管紧张素系统(RAS)在血压调节机制中 起重要的作用，在引起高血压的诸多因素中占重要 地位。因此，抑制 RAS系统活性，降低血浆和组织 血管紧张素Ⅱ的水平，成为治疗高血压及逆转靶器 官损害的正确选择。血管紧张素(Ang)，尤其是血管 紧张素11(Ang 11)对心脏、血管、肾脏、肾上腺和神 经系统具有广泛的作用。这些作用是通过血管紧张 素受 体 (Ang受 体 )介 导的。国际 药理 学联 盟 (IUPHAR)在对受体的分类依据中强调⋯：AT1受体 是 Ang 11的主要作用部位，存在于血管壁，心脏、’肾 脏、脑、肺和肾上腺皮质。Ang 11的主要生理药理作 用是通过 AT1受体亚型起作用，包括心血管、肾脏及 中枢神经的作用，其中心血管活动包括升压效应，促 进平滑肌细胞(SMC)收缩，醛固酮释放，体液调节以 及左心室肌和动脉壁细胞的生长和繁殖 。本研究表 明，清肝益气降压方有降压作用。连续给药 45 d后 与模型对照组比较，清肝益气组大鼠血浆 Ang 11浓 度水平明显下降，清肝益气组大鼠的 AT1R蛋白表 达水平与模型对照组相比明显降低，提示通过抑制 AT1R蛋白的表达，干预对 Ang 11的介导作用，降低 Ang 11水平，可能是本方降压作用的重要机制。 [参考文献] [1] 陈修，陈维洲，曾贵云，等．心血管药理学[M]．北京：人 民卫生 出版社 ，1997．7．8，239．265． · 45 · 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 13卷第 4期 2007年4月 中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae V01．13．No．4 Apr．，2007 make animal models by injecting the chemical medicine cisplatin in pigeon’S abdomen，observing the vomiting times and delitescence，and measuring the levels of 5-hydroxytryptamine(5-HT)in pigeon’S blood and duodenum tissue by hish performance liquid chromatography with electrochemical detection(HPLC-ED)．Result：Sheng-Jiang Capsule CflJl obviously decrease the vomi ting times and delay the vomiting deliteseence of the pigeons，the 5-HT contents of blood and duodenum tissue in the groups of Sheng-Jiang Capsule are markedly lower than that of model group(P<0．05)．Conclusion： Possible mechanism of Sheng-Jiang Capsule is to decrease the level of 5-HT： [Key words] Sheng-Jiang Capsule；pigeon；vomiting due to chemotherapy；5-hydroxytryptamine(5-HT) 肿瘤化疗中呕吐的发生率高达 65～85％，症状 常严重且持续时间长，目前认为呕吐机制主要是各 种疾病或刺激引起的胃肠粘膜损伤、胃肠动力紊乱 以及神经递质(多巴胺、5．HT等)的释放，作用于不 同受体，兴奋呕吐中枢引起。其中5．HT的大量释 放，5．羟色胺3受体的激动尤为重要。 升降胶囊是由黄芪、柴胡、代赭石、枳壳、竹茹、 酒大黄等组成，具有疏肝健脾、和胃降逆的功用，临 床对肝郁脾虚、或脾虚湿阻之呕吐具有较好疗效。 为了进一步证实该药的疗效及探讨其可能的作用机 理进行了实验研究。 1 实验材料 1．1 药物 升降胶囊，广州军区总医院制药厂 自 制，组方：黄芪 15 g，柴胡 10 g，代赭石 20 g，枳壳 15 g，白术 15 g，竹茹 10 g，干姜3 g，酒大黄 10 g，焦槟榔 10 g，甘草 5 g。部分打粉过 100目筛，部分提取浸 膏、干燥，两者混匀，入胶囊。每颗胶囊 0．5 g含原生 药3．67 g。利用显微鉴别法和薄层层析法对方中代 赭石，枳壳，白术，大黄等有效成份进行定性鉴别，方 法简单易行，重现性良好。临床成人 5粒，次，2次， d。胃复安，10 mg／片，江苏鹏鹞药业有限公司，批 号：0506031，顺铂注射剂，齐鲁制药有限公司，批号： 511040CF。 1．2 动物 家鸽，体重(450～55O)g，雌雄不拘，购于 养殖基地。实验前适应性饲养 1w。饲养期间正常 饮食饮水，室温保持 22～24℃，保持清洁，通风 良好 。 1．3 仪器及试剂 DIONEX Summit高效液相色谱仪 (美国 DIONEX公司)，ch受体 omeleon色谱工作站 (美国 DIONEX公 司)，HP1049A电化学检测器 (美国 安捷伦公司)，RC5C低温高速离心机(美国杜邦公 司)，PHS．2C精密酸度计(上海理达仪器厂)。5．羟色 胺购 自美 国 Sigma，批 号 114K7028。乙腈购 自德 国 Merck公司。其余试剂均为市售纯。 · 46 · 2 方法与结果 2．1 对顺铂所致家鸽呕吐的影响 参考文献⋯取 健康家鸽60只，随机分为6组，分别为空白对照组、 模型对照组，升降胶囊 1．0g生药／kg、0．5 g生药／kg 和0．25g生药／kg组，(分别为临床剂量的 20、10、5 倍)及阳性药胃复安对照组(0．O04 g／ks)。各给药组 灌胃给药，容量为 10 mL／kg、连续 3 d，每 d早晚各 1 次。模型对照组给予等量生理盐水。各组末次给药 前禁食 12 h，给药 45 min后，除空白对照组外，其它 各组给予顺铂 8 mg／kg腹腔注射。空白组腹腔注射 等量生理盐水。立即记时，每只家鸽出现第 1 次呕吐的时间(呕吐潜伏期)和给予顺铂 3 h内呕吐 次数。结果见表 1。 表1 升降胶囊对顺铂所致家鸽呕吐的影响 (；±s，n=10) 注：与模型对照组比， P<0．05；与胃复安组比， P<0．05。 表 1结果显示升降胶囊、胃复安组能延长家鸽 呕吐潜伏期和减少呕吐次数，与模型对照组比较有 显著性差异(P<0．05)。而升降胶囊高剂量组优于 胃复安组(P<0．05)。 2．2 对家鸽血清、十二指肠组织 5．HT含量的影响 2．2．1 标本制备 上述各组家鸽观察 3 h后，断头 取血6 mL、低温高速离心后冷冻备测。取血后立即 开腹取距 幽门 10 cm处 十二指 肠全层组织 1 g，用 0．9％NS洗净后，置一70℃冰箱冷冻备测。 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 l3卷第 4期 2007年 4月 中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vo1．13．No．4 Apr．，2007 2．2．2 5．HT样品处理和测定 参考文献 进行样 本处理，用高效液相色谱．电化学检测法测定 5．HT 含量。 血清：吸取 300 ttL血清置离心管中，加入 2％三 氯乙酸溶液(预冷至4 oC)300 ttL，涡旋 30 s，静置 20 min，低温高速离心(4℃，15 000 r／min，10 min)，取上 清液50 进样测定。 组织：十二指肠组织称重，置玻璃匀浆器中，按 一 定比例加入 2％三氯乙酸溶液 (预冷至 4℃) 500 L，混合匀浆，匀浆液用吸管小心转移入离心管 中，用 200 NaH：PO4溶液(0．33 mol／L，pH6，内含 0．5 mmol／L Na2EDTA)荡洗匀浆器，洗液并入离心管， 混旋均匀，低温高速 离心 (4℃，15 000 r／min，10 min)，取上清液 50 直接进样测定。含量计算方 法 ：十二指肠组织 5．I-IT含量 (ttg／g湿组织)=CV／W， 式中c为十二指肠组织样品测定浓度(gg／mL)，V为 样品预处理过程中加入液体体积总量(mL)，W为十 二指肠组织湿重(g)。各组数据进行 t检验比较。 结果见表 2、表 3。 表 2 升降胶囊对家鸽血清 5．14~1"浓度的影响(；±s，n：10) 注：与模型对照组比， P