【word】 外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长、维生素C合成和肝脏维生素C含量的影响

【word】 外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长、维生素C合成和肝脏维生素C含量的影响 外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长、维 生素C合成和肝脏维生素C含量的影响 动物54(2):3(19—316,2008 ActaZoologicaSinica 外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长,维生 素C合成和肝脏维生素C含量的影响* 钱美亚牛翠娟”井润贞钱亚群张左兵 北京师范大学生命科学学院生物多样性与生态工程教育部重点实验室,北京100875 摘要本文研究了饲料中维生素c(Vc)对中华鳖稚鳖冬眠前后vc合成能力及肝脏中vc含量的影响.将体重 为29.41g?5.44g的稚鳖180只,按其饲料中vc含量(0,500,2500mgVc/kg饲料)分为vc0,Ve500和Vc2500 共3组,每组6个平行,每平行l0只鳖.实验开始前称重得各组初始平均体重.25~C?l?下用实验饲料饲喂4 周后,缓慢降温至7?,人工诱导其进入冬眠,此时为冬眠期开始,每组取6只鳖,称重后快速处死,取其肝脏 和肾脏.其余鳖全部称重.冬眠8周末取样,处理同上.用高效液相色谱(HPLC)法测定肝脏vc含量和肝脏, 肾脏古洛糖酸内酯氧化酶(GLO)活力.结果发现中华鳖自身能够合 成vc,且合成部位在肾脏.饲喂4周不同 Vc水平的饲料后,各组间特定生长率差异不显着.冬眠8周后,各组体 重均有所降低,组间冬眠期间特定生长 率无显着性差异.冬眠开始时,稚鳖肝脏Vc蓄积量有随外源Vc浓度 升高而递增的趋势,但差异未达到显着性 水平;经历冬眠后各组稚鳖肝脏Vc含量降低,Ve500组下降不显着, 而VcO与Vc2500组显着下降;肾脏GLO活 力在不同vc梯度组间及冬眠前后均无显着差异.以上结果表明:中华 鳖冬眠过程中要消耗较多的肝脏vc,外源 vc和冬眠对肾脏vc合成能力影响不显着[动物54(2):309—316,20o8]. 关键词中华鳖稚鳖饲料维生素c冬眠肝脏维生素c古洛糖酸内酯氧 化酶 EffectofdietaryVcandhibernationonbiosynthesisofVcandliver Vcconcentrationinjuvenilesoft-shelledturtlesPelodiscus ??* stnensts QIANMei.Ya,NIUCui.Juan,JINGRun.Zhen,QIANYa—Qun’,ZHANG Zuo-Bing MinistryofEducationKeylaboratoryforBiodiversityScienceandEcologicalEngineering,CollegeofLifeScience,BeijingNormal University,Beijing100875,China AbstractThisworkinvestigatedtheeffectofdietaryvitaminC(Vc)suppleme ntationontheturtles’biosynthesisofVcandliver Vcc0ncentrationduringhibemation.Juvenilesoft—shelledturtlesPelodisc ussinensiswithaninitialbodyweightof29.4lg?5.44 gwererandomlydividedintothreegroups:Vc0,Vc50oandVc2500groups,sixparallelsforeachgroup,andtenturtlesineach paralle1.TheywerefedwithVcsupplementationatdosagesof0,500and250omgVc/kgdiets,respectively.AUtheturtleswere weighedtogettheinitialaverageweightofeachgroupatthebeginningoftheexperiment,andthenfedwithexperimentaldiets under25? ?l?.After4weeks,thewatertemperaturewasslowlyreducedto7andallturtleswereinducedintohibemation. Sixturtlespergroupwereweighedandsampledwithliverandkidneyinstantly.1’herestturtleswerealsoweighed.After8weeks hibemati0n,allthetreatmentswereconductedasabeve.TheliverVcconcentration,L-galono一7一lactoneoxidase(GLO)activity 0fliverandkidnevweredeterminedbyhighpressureliquidchmmatogram(HPLC).1’heresultsshowedthatVccouldbe svnthesizedinthesoft-shelledturtle’skidney.ThespecificgrowthratewerenotclearlyinfluencedbydietaryVcsupplementation. 2007—10-23收稿,200801—2O接受 *国家自然科学基金(No.30671598,No.30271014)资助 【ThisresearchwasfumedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina (No.30671598,No.30271014)] **通讯作者(Correspondingauthor).E—mail:cjniu@bnu.edu.cn ?2008动物ActaZoologlcaSinica 31O动物54卷 After8weekshibernation,bodyweightofallgroupsdecreased,butthespecificgrowthratewithinhibernati0ndidn0tvarywithVc supplementation.Atthebeginningofhibernation,liverVcconcentrationincreasedwithincreasingdietaryVclevels.butwithno significantdifferencesamongallgroups.Afterthehibernation,liverVcconcentrationinVc0.Vc2500groupsdecreased significantlywhilethatinVc500groupdidnotreducemuch.GLOactivityofthekidneyvariedlittleafter8weekshibernati0n.and therewasnoobviousdifferenceamongalltreatmentgroups. TheresultssuggestedthatliverVcconsumedduringhibernation. NeitherVcsupplementationnorhibernationaffectedGLOactivitysignificantly[ActaZoologicaSinica54(2):309—316. 2008]. KeywordsSoft—shelledturtle,Pelodiscussinensis,DietaryVc,Hibernation,LiverVcconcentration,L广lono-7-1act0ne 0Xidase 维生素C(Vc),又名抗坏血酸(Ascorbicacid, AA),作为羟化酶辅基参与动物结缔组织,骨骼, 血管细胞间质等的形成,作为还原剂可提高动物体 的抗氧化能力,是一种动物体必需的,具有多重生 物学功能的营养素.机体Vc合成的关键酶是L一 古洛糖酸7一内酯氧化酶(L-gulono.7.1actone oxidase,GI,Ec.1.1.3.8),它可利用动物体内 的葡萄糖,通过下列反应:D一葡萄糖一D一葡萄 糖醛酸一L一古洛糖酸内酯一2一酮一L一古洛糖酸 内酯一L一抗坏血酸合成Vc.RoyandGula(1958) 报道,脊椎动物中仅人类和其他灵长类,豚鼠,真 骨鱼类,果蝙蝠和一些鸟类不能合成vc,因为这 些生物体内缺少GLO,它们必须从食物中获得vc. 鱼类中某些鲨鱼,鳐等软骨鱼类(Touhataeta1., 1995)和肺鱼,鲟等原始硬骨鱼类(Dykhuizenet a1.,1980;Dabrowski,1994)能自身合成vc.其中 鱼类,两栖类和爬行类动物的vc合成在肾脏完成, 鸟类也主要在肾脏中合成vc,但有一部分的鸟类 可以在肝脏中合成vc.哺乳类的vc是在肝脏中合 成的(Stone,1972).目前,有关爬行动物vc需求 及其内源vc合成的研究还很少.Chatterjeeeta1. (1975)报道印度缘板鳖(Lissemyspunctata),美丽 陆龟(Testudoelegans)肾脏能够合成Vc.Nandiet a1.(1997)比较了几类两栖,爬行和哺乳动物的 vc合成能力,结果显示GLO活力平均水平有随动 物进化而下降的趋势,两栖动物最高,爬行类次 之,哺乳动物最低. 影响动物内源vc合成能力或GLO活力的因素 有很多.亲缘关系较近的物种之间GLO活力可能 有较大差异(Nandieta1.,1997),同种动物的不 同生长阶段GLO活力也会有变化(Chingeta1., 2001).关于外源vc对动物自身vc合成能力的影 响报道不一致.家禽在应激状态下自身Vc合成能 力受到抑制,而在日粮中添加Vc可以提高其在应 激状态下的GLO活力(文杰,林济华,2000);但 在某些哺乳动物体内,饲料中Vc会抑制内源Vc的 合成(Jennesseta1.,1978;TsaoandYoung,1989). 外源Vc对鲟鱼的GLO活力没有显着影响(Moreau eta1.,1999;Xieeta1.,2006). 中华鳖(Pelodiscussinensis)是我国重要的特种 经济动物,有较高的食用价值和药用价值.作为变 温动物,中华鳖对外界温度变化十分敏感,温度的 高低会直接影响其运动与摄食.当外界温度低于约 12~C时,中华鳖开始进入冬眠状态,在此期间动物 不摄食,代谢率降低,仅靠体内积累的营养物质维 持较低的代谢过程(张廷军等,1996).周显青等 (2003a,2004,2005)研究了饲料Vc对中华鳖免疫 功能和抗应激能力的影响,饲料Vc对中华鳖生长, 肝脏Vc含量的影响也有所探讨(Zhoueta1., 2003b).然而,有关中华鳖自身vc合成能力及其 影响因素,尚无文献报道. 本研究旨在探讨中华鳖内源vc合成能力以及 饲料中vc与冬眠对其GLO活力的影响,并观测了 冬眠期间中华鳖肝脏vc含量的变化,以期为中华 鳖生理生态学研究及其养殖生产提供基础数据. 1材料与方法 1.1实验动物和饲料 实验用鳖来自北京顺原养殖场,是当年孵化的 稚鳖,体重为29.41g?5.44g(Mean?SD).驯养在 70cm×48cm×38cm(长×宽×高)的塑料鱼箱中, 每箱10只鳖,水深约15cm,水温25?,自然光照. 养殖用水为曝过气的自来水,pH7.9,溶氧大于 5mg/L.每天下午15:00投喂一次使鳖达到饱足,饲 喂期间每天换水为全部水体积的1/3—2/3,换上等 温的新鲜曝过气的自来水.一周全部换水一次.所 用基础饲料的生化组成及能值见表1(不加Vc).本 实验所用的Vc源是Vc多聚磷酸酯(含35%Vc), 由帝斯曼(中国)有限公司生产.在基础料中添加 Vc多聚磷酸酯,配制成500mg/kg与2500mg/kgVc 含量的实验饲料,黑暗,低温贮存.动物驯化期间 投喂基础料,驯化1个月后开始实验. 2期钱美亚等:外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长,维生素c合 成和肝脏维生素C含量的影响311 表1基础料生化组成及能值 Table1Thechemicalcompositionoftheexperimentaldiet (Mean?SD) 水分(%)粗蛋白(%)粗脂肪(%)粗灰分(%)能值(J/wg) MoistureCrudeproteinCrudelipidCrudeashEnergycontent 6.33?0.0742.41?0.919.05?0.2313.42?0.1318.06?0.15 1.2实验过程 挑选健康的中华鳖稚鳖,随机分成3组:Vc0 (对照组),Vc500(500mg/kg),Vc2500(2500mg/kg) 三组,每组6个平行.每个平行10只鳖.实验开始 (11D时刻)后,先在水温25oC?1oC下用不同vc含 量的饲料投喂4周,然后停止投喂并缓慢降温至7? (每天降3~C),各组鳖开始进入冬眠(T1时刻).8 周后冬眠结束(T2时刻).冬眠期间温度保持在7? ?2.5oC.在实验开始(TO时刻),进入冬眠(T1时 刻),冬眠8周(T2时刻)分别取样,每组取6只 鳖,快速处死并取血后,冰上立即解剖,取出肝脏, 肾脏组织,用冻存管分装后放入液氮中,最后转入 一 80~C冷冻保存备测.实验开始,进入冬眠和冬眠8 周末时将鳖饥饿48h后,用电子天平称体重(精确 到0.1g),计算特定生长率SGR. 1.3测定方法 1.3.1特定生长率(Specificgrowthrate:%/d, SGR) SGR=(1nW.一lnW0)/T×100%.W0,W.和 T分别代表初始体重,终末体重和养殖周期. 1.3.2肝脏中Vc含量的测定 参考Zhoueta1.(2003b),有所改进.准确称 取肝脏0.1g,将15%偏磷酸2ml加入称取的肝脏 样品中,玻璃匀浆器冰上手动匀浆,匀浆液在 4~C,20000g离心20min.取上清,弃沉淀,取 上清进行液相色谱分析,其它分析条件与Zhouet a1.(2003b)一致.在机体内,大部分vc通常以 还原态(Ascorbicacid,AA)的形式存在,仅有极 小部分是以氧化态(Dehydroascorbicacid)的形式存 在,本实验中测定的是还原态和氧化态抗坏血酸的 总和(Totalascorbicacid,TAA). 1.3.3GLO活力测定方法 本实验同时测定稚鳖肝脏,肾脏的GLO活力, 两种组织的处理方法相同.在Dabrowskiand Hinterleither(1989),MselandandWaagb~(1998)和 ChingetaI.(2003)的基础上有所改进.准确称取 肾脏和肝脏0.125g,按肝脏和匀浆液1:4(W:v) 的比例加入冰冷匀浆液50mmol/LpH7.4的磷酸缓 冲液(含1mmol/LEDTA,0.2%脱氧胆酸钠 Sodiumdeoxycholate),玻璃匀浆器于冰上手动匀浆. 4~C条件下15000×g离心10min,收集上清.取 200『』l上清加入650ttl磷酸缓冲液,再加入50l 50mmol/L谷胱甘肽(Glutathioe,Sigma公司)溶 液,样品组加入100l底物100mmol/LL- gulonolactone(Sigma公司),对照组将底物换成100 l磷酸缓冲液,25?孵育3h.加入1ml一30%偏磷 酸终止反应,冰上放置5min,20000×g离心20 min,取上清,然后按照测定vc的步骤进行.以组 织中的GLO将底物在单位时间内转化成的新生成 的Vc量为GLO活力单位,即MgTAA/h?gtissue. 1.4数据分析 实验结果均以平均值?标准误(Mean?SE) 表示,用统计软件包SPSS11.5对数据进行统计分 析,对于同一vc水平下冬眠始末的比较,用 Independent—SamplestTest检验;同一时刻的不同 vc水平问的比较用One—WayANOVA检验,并进行 LSD多重比较,显着性水平为P<0.05. 2结果 2.1饲料Vc水平与冬眠对中华鳖稚鳖生长的影响 在经历了4周不同水平vc饲料的饲喂后, Vc0,Vc500,Vc2500组的SGR分别为0.58%, 0.62%,0.62%/d,无显着差异(F.=0.090, P>0.05).在经历8周的冬眠后,三组稚鳖体重 均减轻,但各组冬眠前后体重变化均不显着(P> 0.05),冬眠期问的SGR分别为一0.12%, 一 0.10%,一0.10%d,组间亦无显着差异(F,: 0.568,P>0.05,表2). 2.2饲料Vc与冬眠对中华鳖稚鳖肝脏组织Vc含 量的影响 如图1.在冬眠开始时,随外源Vc浓度的提 高,稚鳖肝脏vc含量有递增的趋势,但未达到显着 水平(F,=1.938,P>0.05).中华鳖稚鳖在经历 冬眠后各vc梯度组肝脏vc含量均降低,其中Vc0 和Vc2500组冬眠末肝脏vc降低极显着(P<0.01), Vc500组降低不显着(P>0.05).此时Vc500和 Vc2500组肝脏vc含量均高于Vc0组,但不同Vc梯 度组问无显着性差异(F2.:2.763,P>0.05).将 冬眠前各组数据与冬眠后各组数据分别合并,结果 显示冬眠显着影响中华鳖稚鳖肝脏vc含量,肝脏 Vc含量在冬眠8周末显着降低(P<0.01). 3l2动物54卷 表2饲料Vc水平与冬眠对中华鳖稚鳖生长的影响(平均值?标准误) Table2EffectsofdietaryVcongrowthofjuvenilesoft-shelledturtle(Mean?S E) TO:实验开始;TI:饲喂四周后,进入冬眠时刻;:冬眠8周末. TO:Beginningoftheexperiment;TI:After4weeksfeeding,beginningofhibe rnation;1”2:End0f8weekshibemati0n _, 宣 ? 邑 捌 缸 斟 宣 0 Vc0Vc5ooVc2500 不同Vc添加水平组 (DifferentdietaryVcsupplementationgroups) 图1饲料Vc与冬眠对中华鳖稚鳖肝脏Vc含量的影响 Tl:冬眠开始;1”2:冬眠8周末.VcO和Vc2500组肝脏vc含 量在经历冬眠后显着降低,**表示差异极显着(P<0.O1). Fig.1EffectofDietaryVcandHibernationonliverVc concentrationinjuvenilesoft-shelledturtles(Mean?舾) TI:Beginningofhibernation;T2:Endof8weekshibernation.Liver VcconcentrationinVc0,Vc2500groupsdecreasedsignificantlyafterthe hibemation,**me孤ssignificantdifference(P<0.O1). 2.3中华鳖肾脏Vc合成能力的判定 稚鳖肾脏样品和肝脏样品的HPLC结果如图2 所示.图2A与图2B为肾脏提取物的HPLC检测结 果,其中图B的反应体系中加有底物,而A中未 加底物.检测结果:上样约4.5min时出峰,B峰 比A高出很多,说明肾脏中的GLO将底物【广 gulono1.actone转化成了新的Vc;图2C与图2D为肝 脏提取物的HPLC检测结果,C中加有底物而D中 未加底物.结果显示:两图在4.5min时的峰高无 差异,说明肝脏中没有合成Vc的酶.该检测结果 表明GLO存在于中华鳖肾脏.即中华鳖具有自身 合成vc的能力,且vc合成部位在肾脏. 2.4饲料Vc与冬眠对中华鳖稚鳖GLO活力的影响 冬眠始末不同梯度的外源vc对中华鳖GLO活 力的影响结果见表3.冬眠开始Tl时Vc500组GLO 稍高于Vc0组,而Vc2500组略低于Vc0组,各组 间无显着差异(F..:1.395,P>0.05).冬眠前 后各组GLO活力没有显着变化(P>0.05).冬眠8 周时刻,进行组间比较,三个vc水平组之间 GLO活力也无显着差异(F..=O.098,P>O.05). 表3饲料Vc与冬眠对中华鳖稚鳖肾脏GLO活力的影响 (平均值?标准误) Table3EffectsofdietaryVcandhibernationonGLOactivity ofjuvenilesoft-shelledturtle(Mean?SE) Tl:冬眠开始;T2:冬眠8周末. TI:Beginningofhibernation.T2:Endof8weekshibernation 3讨论 3.1饲料Vc水平对中华鳖稚鳖生长的影响 多项研究表明,Vc对生长具有促进作用,这 可能与vc促进胶原蛋白的合成,促进细胞代谢有 关.在对禽类的研究中,有报道在饲料中添加vc 可以提高仔鸡的生产性能(夏东,李如治,1999), 但文杰和林济华(2000)的研究表明vc对仔鸡的 生长并无显着影响.在鲤鱼(Cyprinuscarpio) (Gouillou.Coustnsaeta1.,1998),银鲫(Carassius auratusgibelio)(宋学宏等,2002)和中国对虾 (Penaeuschinensis)(王安利等,1996)的研究中发 现,饲料中添加vc可以明显提高其生长率.Xie andNiu(2006)发现香鱼(Plecoglossusaltivelis)的 增重率在低Vc水平下随饲料中Vc添加量的增加而 加?舳?柏加 o【1—II一一口0口矗.—Iuo0—000>.Io一一 2期钱美亚等:外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长,维生素C合成和肝脏维生素C含量的影响313 警 整 罟 吕 口 警 整 罟 量 雩 S { 蓍 意 .2 善 量 S 一 { 看 意 .星 善 量 S 图2中华鳖稚鳖肾脏和肝脏GLO活性的HPLC检测图 A,B为肾脏提取物的检测图;c,D为肝脏提取物的检测图.B,D中加有 底物L-gulonolaetone;A,c中未加底物.v的出峰时间在4.5 rain处,即图中箭头所指峰. Fig.2HPLCresultsofGLOactivityinkidneyandfiverofjuvenilesoft-shelled turtles A,B.HPLCresultsofkidneyextraction;C,D.HPLCresultsofliverextraction. B,DcontainsL-gulonolactone:A,CcontainsnoL-gulonolactone.Vc apexat243lmappearsat4.5min. 增加,当添加量高于160nc/kg时,生长率不再提 高.Henriqueeta1.(1998)发现饲料中vc不影响 金头鲷(.兀岱aurata)的生长.可见不同动物种 类对vc的需求不同.邵庆均等(2004)在中华鳖 幼鳖饲料中添加vc多聚磷酸酯,发现200mg/kgVc 可显着提高幼鳖的生长率,高于此添加量对生长率 无显着影响.而Zhoueta1.(2003b)的研究表明, 500mg/kgVc可显着提高幼鳖增重率.在本研究 中,各Vc处理组间未发现显着的生长差异.这些 研究结果不一致的原因可能是:(1)Vc剂型不同, Zhoueta1.(2003b)用的是包膜Vc,而邵庆均等 (2004)和本实验中以vc多聚磷酸酯为vc源,不 同动物对不同剂型的vc的需求和利用率是不同的 (辛建杰等,1996;冷向军等,2002);(2)中华鳖 生长发育阶段不同,Zhoueta1.(2003b)实验中的 动物初始体重范围为103g一214g,而邵庆均等 (2004)和本实验的研究对象分别为约55g和30g, 处在不同的生长时期可能是导致对vc需求不同的 原因.仲维仁和张淑华(2001)研究Vc对不同大 小鲈鱼(Lateclabruxjaponicus)生长的影响,发现 一 龄鱼和二龄鱼获得最高增重率的Vc添加量分别 为1000和1500mg/kg.随着中国对虾体长的增加, 在生长发育过程中所需要的vc也越多(王安利 等,1992).以此推测本实验中华鳖稚鳖最佳生长 的Vc添加量可能在0—500mg/kg之间,我们没发 现差异很可能与低剂量组设置过少有关.不过,南 美白对虾(Penaeusvannamei)对Vc的需求量随体 重的增加而减少,研究者推测这可能是较大个体自 身的vc合成能力较强的缘故(周光正,牟绍敦, 1995).另外,饲育时间长短和养殖环境也可能是 造成这些分歧的原因.有关中华鳖伴随生长发育对 外源vc需求的变化尚需进一步深入研究. 中华鳖冬眠期间不摄食,依靠体内积累的营养 物质维持机体代谢,导致其在经历冬眠后体重减轻 (杨振才等,1999),与其他冬眠动物中情况类似 (邹寿昌,1992;周化民,1996).本实验中各组在 经历8周的冬眠的SGR无显着差异,说明Vc对冬 眠期间中华鳖稚鳖的体重变化无显着影响. 3.2饲料Vc与冬眠对中华鳖稚鳖肝脏组织Vc含 量的影响 肝脏是vc的贮存器官.对依赖外源Vc的动物 来说,肝组织vc含量可在很大程度上反映饲料Vc 000000 如加?0 如?如?如??0 3l4动物54卷 水平.MzelandandWaagb~(1998)在冷水硬骨鱼饲 料中添加vc,结果显示实验组鱼体肝脏中的vc含 量明显高于对照组.金头鲷肝脏vc含量随饲料vc 添加水平的增加而上升(Henriqueeta1.,1996). 幼鳖肝脏vc含量有随饲料vc浓度增加而升高的趋 势,提示中华鳖肝脏亦具有一定的vc储存能力 (Zhoueta1.,2003b;邵庆均等,2004).但与某些 硬骨鱼相比,中华鳖的肝脏Vc蓄积有所不同.一 些硬骨鱼肝脏对饲料vc的蓄积作用很强,在相对 较低的饲料vc水平下,肝脏vc可很快积累达到饱 和.金头鲷摄食含vc50mg/kg的饲料,实验组肝 脏vc含量即显着高于对照组(Henriqueeta1., 1996).香鱼在Vc添加量为320mg/kg以下的各梯 度组间,肝脏Vc含量随饲料Vc添加量增加而成比 例增加.Vc添加量大于320mg/kg时,肝脏内Vc 含量达到饱和状态(XieandNiu,2006).摄食Vc 添加量为25mg/kg饲料的翘嘴鲔(Culteralburnu), 其肝脏vc含量即显着高于对照组,Vc添加量小于 100mg/kg时,肝脏Vc含量随饲料中vc添加量加大 而快速上升,高于此添加量时,组织Vc积累无显 着变化(陈建明等,2007).然而,具有内源vc合 成能力的湖鲟(Acipenserfulvescens)在饲料vc为 250mg/kg时,肝脏Vc含量变化很小,只有在 1250mg/kg的高Vc饲料水平下,肝脏Vc含量才显 着提高(Moreaueta1.,1999).Zhoueta1.(2003b) 关于包膜vc对中华鳖幼鳖的结果显示,在低于 500mg/kg的添加量时,随饲料vc水平提高,幼鳖 肝脏vc有增加的趋势,但无显着性差异;当添加 量大于2500mg/kg时,中华鳖肝脏vc含量显着高 于对照组.此种变化规律与湖鲟类似.本实验中华 鳖肝脏Vc随饲料Vc水平的增加有递增的趋势,而 且在添加量为2500mg/kg时,肝脏Vc蓄积量的提 高仍未达到显着水平,这可能与Vc的剂型不同或 实验鳖的大小差异有关.鲟鱼和中华鳖自身能够合 成Vc,其肝脏Vc的积累具有相似的特点,当饲料 中添加相对较低的vc时,肝脏Vc的积累缓慢;而 如金头鲷,香鱼等无vc合成能力的硬骨鱼,相对 较低的vc水平即可使得其Vc在肝脏中快速积累. 有关不同动物肝脏中vc的积累模式及其调节机理, 尚有待进一步深入研究. 文杰和林济华(2000)报道肉仔鸡在应激状态 下血浆和肝脏vc均受到影响.血浆vc含量降低, 日粮补充200mg/kgVc可明显提高血浆Vc含量, 缓解肝脏vc含量的下降.周显青等(2004)发现 酸应激使得中华鳖肝脏Vc有下降的趋势,但变化 不显着.经历酸应激后,Vc添加组的肝脏Vc含量 显着高于对照组.有关冬眠对动物体内vc含量影 响的相关报道很少.本实验中华鳖稚鳖在冬眠8周 末肝脏vc含量显着降低,与Dreweta1.(2002)和 Maeta1.(2004)关于北极地松鼠(Spermophilus parryii)的研究相符合,在冬眠期间的肝脏vc显着 下降,可能与vc参与体内抗氧化过程有关,机体 大量消耗vc以缓解冬眠过程中氧化应激造成的伤 害. 3.3饲料Vc与冬眠对中华鳖稚鳖肾脏GLO活力 的影响 以往有关外源Vc对动物体本身vc合成的影响 的报道存在很多分歧.在兔(Jennesseta1.,1978) 和鼠(TsaoandYoung,1989)的研究中,外源Vc 的摄入可以抑制内源Vc的合成;文杰和林济华 (2000)研究表明,外源Vc可以提高家禽在应激状 态下的GtD活力,但对非应激状态下家禽的GLO 活力无显着影响;而Moreaueta1.(1999)和Xieet a1.(2006)关于鲟鱼的研究结果均表明,外源Vc 对鲟鱼的GIJ0活力影响不显着.在两爬类尚无类 似研究报道.本实验结果显示中华鳖稚鳖GLO活 力无论是在冬眠开始还是在冬眠8周末,各水平外 源vc处理组间均无显着差异.说明在本实验所采 用的饲料vc添加水平条件下,外源vc对中华鳖稚 鳖GLO活力没有显着影响,但由于我们采用的vc 梯度不够细致,尚不能确定外源vc与中华鳖GLO 活力的关系,是否存在促进作用或负反馈,需进一 步深入研究. 关于应激对动物体自身vc合成能力影响的研 究也甚少.文杰和林济华(2000)在对肉仔鸡的实 验中发现,热应激会导致实验动物肝脏vc合成能 力下降,推测在应激状态下动物体的GLO活力会 受到抑制,而在日粮中添加Vc可以提高家禽应激 状态下GIg)活力;本研究中中华鳖稚鳖在冬眠始 末的GLO活力无显着变化,说明冬眠对机体的Vc 合成能力无显着影响. 动物种类,动物所处的生长发育阶段及其所处 的环境等因素都可能影响动物体GLO活性.Nandi eta1.(1997)比较研究了几类陆地脊椎动物体内 的vc合成情况,两栖类,爬行类,哺乳类GLO总 体水平呈现降低趋势.有些亲缘关系很近的物种间 GIg)活力差异也很大.如棱鳞南蜥(Mabuya carinata)和变色树蜥(Calotesversicolor)的GLO活 2期钱美亚等:外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长,维生素C合 成和肝脏维生素C含量的影响315 力分别为25,50/.tgAA/mg?kidneyprotein/h.印度缘 板鳖(Lissemyspunctata)和美丽陆龟(Testudo elegans)的GLO活力分别约98,14ugAA/mg? kidneyprotein/h.同种动物不同生长阶段的GLO活 力存在差异.Chingeta1.(2001)发现仔猪肝脏 GLO活力在刚出生时最高,在接下来两周的哺乳时 间里GLO活力降至一个较低水平,仔猪断奶后 GLO活力又有回升.文杰和林济华(2000)发现肉 仔鸡肝脏GLO活力随日龄的增高有相应升高的趋 势.Dabrowski(1994)报道,25.5g西伯利亚鲟 (Acipenserbaer)的GLO活力为9.6MgAA/h?gtissue, 而Xieeta1.(2006)报道的300g的西伯利亚鲟的 GLO活力为37.2/.tgAA/h?gtissue.不过,性成熟的 雄性雀鳝(Lepisosteuso33eu3)和其幼体的GLO活力 相差无几(MoreauandDabrowski,2000).本实验数 据表明体重30g左右的中华鳖稚鳖(在经历冬眠 前的对照组)的GLO活力约为763/.tgAA/h?gtissue, 或6.83/.tgAA/mg?kidneyprotein/h,低于印度缘板鳖 和美丽陆龟.不过,不同生长阶段的中华鳖的肾脏 GLO活力是不是存在差异,还有待进一步研究. 参考文献(References) ChatterjeeIB,MajumderAK,NandiBK,SubramanianN,l975.svnthesis andsomemaiorfunctionsofvitaminCinanimals.Ann.NYAcad.Sci. 258(1):24—47. 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