荧光共振能量转移动态检测蛋白质相互作用的研究进展

荧光共振能量转移动态检测蛋白质相互作用的研究进展 ??,,综 述 ,:,,:,,,,,,,,,,,,:::,:,:,,:,,,:,,:,:,) 荧光共振能量转移动态检测蛋白质相互作用的研究进展 ,,,,Δ王 宏 蔡 欣 白 波 陈 京 , , ,，,，,泰山医学院基础医学院 山 东 泰 安 济宁医学院神经生物学研究所 山 东 济 宁 ,:,:,,,:,:,: ,,摘 要 荧光共振能量转移 技 术 是 近 年来出现的一种新的检测蛋白质 蛋白质相互作用的技 ,,,,,: )。 “、、、”，术 它的最大优势是能从 时 间 空 间 动 态 连 续 对 活 细 胞 中 蛋 白 质之间的相互作用进行检测 该 技 术 不 ,但 可 以 与其他技术结合来研究细胞膜上蛋白质之间的相 互 作 用 而且还可用于分析细胞膜 细 胞 质 细胞核中所)) 的信号转导途径 。 资 料 显 示 ，技术所发挥作用 是最近出现的几种技术所无法企及的 ，这对于疾病发发生 ,,,, 病机 。制的研究及新的药物靶点的发现具有深远意义 ,,关 键 词 荧光共振能量转移 蛋 白 质 蛋白质相互作用 信 号 转 导 ) ,,,,,中 图 分 类 号 文 献 标 识 码 文 章 编 号 ,,:,,,:::,:,:,:,,:,:,::,))) ,,机 体 细 胞 中 种类繁多的蛋白质 各 具不同的 生 荧 光 共 振 能 量 转 移 技 术 的 原 , ,,,, 理 ，理 功 能 从 而 使 细 胞 对 胞 外 信 号 做 出 不 同 的 生 物 理 论 描 述 的 是 两 个 荧 光 团 之 间 的 能 。,,,, 学 反 应 蛋 白 质 的 功能作用经常受不 同 条件下与 ,,。，量 转 移图 在 能 量 传 输 过 程 中 其 中 的 一 个 。 不 同 配 体 间 相 互 作 用 的 调 节 蛋 白 质 之 间 的 相 , ,,，荧 光 团 作 为 能 量 供 体 另 一 荧 光 团 作 为 能 互 作 用 能 够 整 合 来 自 不同信号通路的信 号 并协, ,,,量 受 体。，调细 胞 内 部 的 调 节 机 制因 此 研 究 蛋 白 质 之 间 相 互 作 ,,。，以 适 当 的 激 发 光 照 射 将 会 产 生 振 荡 偶 ,, 。用 能 够 给 这 些 研 究 提 供 新 的 见 解 在 过 去 的 ，,:极 子 如 果 的 基 态 和 的 第 一 激 发 态 的 振 动 , , 年 ，中 已 经 开 发 了 很 多 用 于 探 测 蛋 白 质 相 互 作 用 ，能 量 差 相 当 或 者 的 发 射 光 谱 与 的 吸 收 光 , , 的 技 谱 能 有 ，，,术 和 方 法 这 些 技 术 一 般 分 为 两 部 分 体 外 方 ,，，效 重 叠 时 当 与 靠 近 时 或 者 说 与 的 偶 , , , , ， 法 ，极 子 之 间 的 距 离 足 够 近 时 即 能 产 生 共 振 通 过 、、例 如 免 疫 共 沉 淀 融 合 蛋 白 ,,,,,,,,,,,,:,,,, )偶 ,,，，沉 降 技 术 等 体 内 方 法 例 如 酵 母 双 杂 交 系 统 但 ,， 极 偶极 耦合作用将能量从 向 转 移 即 发 生 非, , ) 。，是 这 些 方 法 都 具 有 一 定 的 局 限 性 一 方 面 基 于 机 ,放 射 能 量 共 振 转 移 接 受 能 量 从 而 发 射 出 特 , 、，械 的 离 心 力 高 的 或去垢剂的细胞裂解 上 述 方 法 。，异 性 荧 光 在 此 共 振 能 量 转 移 过 程 当 中 特 异 , ，,,白 和 黄 色 荧 光 蛋 ,,,,,,:,,,,,,,,:,,,, ,,, ,,都 可 能 会 改 变 蛋 白 质 蛋白质相互作用的自然状 )性 荧 ,，,。白 具 ,,,:, ,,,:,,,,,,,,:,,,,,,,,,,, ,,,，态 另 一 方 面 上 述技术无法提供活 细 胞内的特 定 光 的 衰 减 或 者 特 异 性 荧 光 的 增 强 即 可 被 检 , ，、有 广 泛 的 应 用 前 景 在 蛋 白 质 等 复 合 物 的 ,:, ,,,。 蛋 白 间 相 互 作用的时空信息近 年 来 研 究 开 发 测,,,。用 检 研 究 方 面 发 挥 重 要 作 用 等,,,, ,,,, ,,,,的 荧 光 共 振 能 量 转 移 ,,,:,,,,,,,,,,,:,,,,,,,，。) 到 从 而 实 现 检 测,,,, 测 ，,，却 能 克 服 以 上 缺 点 可 以 在,,,,,,,,,,,,,,中 两 个 常 用 的 荧 光 蛋 白 为 青 色 荧 光 ,, ,,,, 出 溶 血 磷 脂 胆 碱 能够通过迅速磷酸化和内化来快 蛋活 细 胞 中 实 时 动 态 观 测蛋白质之间的相互作，,速 激 活 的 活 化 能 促 使 和 ,,,,,, ,,, ,α)α,。 用 ,, ，,和 的 释 放 和 会 使 γ,,, ,,,, ),ααβ,,,，，更 重 要 的 是 还 可 以 与 其 他 技 术 结 合,,,, ,, 浓 度 升 高 及 的 激 活 促 使 ,,,,, ,,,胞 质 内 的 ,,、如 生 物 发 光 共 振 能 量 转 移 蛋 白 互 补 ,,,,和 , ,,,)) 的 循 环 利 用 而 能 够 与 γ,,,,,,,β β技 术 ,,,。互 作 用 等,,,,,激 活 的 相 ,,,,,:,,,,:,,,,,,,基 金 项 目 国 家自然科学基金资助项目 ,:,:,:,,,:,::,,,,,, , ,,，，等 既 能 研 究 两 个 蛋 白 之 间 的 相 互 作 用 ,,,,,,,山 东 省 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目 ,,:::,,,:，构 建 了 一 对 融 合 的 锌 指 结 构 蛋 白 它 们 是 一 种 具 ,,,山东省泰山学:, :,,:,,,,:,::,,::,,:::,，还 能 用 来 研 究 个 或 更 多 蛋 白 之 间 的 相 互 作 用 ,者专 有 端 二 聚 化 序 列 和 端 突变 体的荧光传感 : , ,,, 。、甚 至 是 对 信 号 网 络 的 研 究 本 文 就 ,,,,,,,, 项 基 金 。蛋白 他 们 分 别 在 锌指结构的末端标记 的 突 ,,, ,,，,通 信 作 者 陈 京 ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,? ),,,与 其 ，。 ，性 的 双 链 作 者 观 察 到 了 现 象 随 后 显 的 改 变 这 明 了 特 异 性 的 双 链 发 生 了 ,:,,,,, ,:, 二 ，加 入 非 特 异 性 的 双 链 没 有 观 察 到 明,:,,,,, 。 聚 化 作 用 图 的 基 本 原 理 , ,,,, ,,,,。,供 体 和 受 体 的吸收和发射光谱 发射光谱区域与 吸收光谱区域重叠处引起有效的 信 号 ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,, 。的 原 理 示 意 图 ,,,,,, ，技术 与 其 他一些技 术的结合及应用 体 的 动 态 事 件 等 这些 方法可以被用来研究活 细 胞 , ,,,, 。 中 一 系 列 蛋 白 质 复 合 体 的 组 装 和 功 能 连 续 共 振 能 量 转 移 ,,,高 阶 寡 聚 体 利用这两类技术的特性 将 这 ,,,,,涉 及 不 同 发射光谱的两个荧光 蛋 白 的 ,,,, 两 种 能 量 转 移 技 术结合起来可以实时检测活细胞 ，能 量 转 移 而 是 非 辐 射 的 生 物 发 光 能 量 ,,,, ,,。 ，中 多 个 蛋 白 质 之 间 的 相 互 作 用 图 目 前 已 ,。、转 移 到 一 个 荧 光 蛋 白 上 已 经 广 ,,,,,,,, 用 技 术 实 时 检 测 到 寡 经 ,,,,,,, ,,,, ,,,,))泛 用 ,, ,, ,,。 体 和 肾 上 腺 素 寡 聚 体 这些寡聚体的聚,,α 于 检 测 活 细 胞 中 结 构 蛋 白 和 动 态 蛋 白 的 相 互 作 研 ， 用 ，究 是 非 常 重 要 的 他们 拥有独特的结构和信号 通 路 ,,:，、 这 两 种 技 术 的 自 由 组 合 即 ,,,,,,,,)，从 而 改 变 了 原 受 体 蛋 白 的 功 能 例 如 如 果 对 ,,α、,以 及 统 称 ,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,)))肾 上 腺 素 寡 聚 体 进 行突变可以发现细胞的迁移和，,等 所 ,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,发 ，，功 能 有 重 大 变 化 另 外 这些寡 聚体的独特性为新挥 的 作 用 是 最 近出现的几种技术 单 独应用所 无 。型 药 物 开 发 也 开 启 了 新 的 天 地 ，法 企 及 的 这 些 测 定 法 可 以 测 定 相 互 作 用 的 蛋 白 、在 亚 细 胞 定 位 中 的 作 用 实 时 观 测 影 响 多 个 蛋 白 复 合 图 技术结合的作用原理 ,,,,,, ) ,,信 号 转 导 蛋 白 偶 联 受 体 涉 及 腔 肠 素的氧化和能量 转 移到 , , ,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,))) ,，，,的 信 号 转 导 日 益 复 杂涉及腔肠素的氧化和 ,:,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,, ) ，, ，化 这 些 事 件 的 基 础 是 和 相 关 靶 分 子 例能 量 转 移 到 而 和又 是 ,,,,, ,,,,,,,,, ,,,, ,,,, ,如 蛋 白 偶 联 受 体 激 酶 和 之 间 存 在 , ,,,,,,,,)，中 的 完 美 搭 档 由 此 可 见 细 胞 中 个 不 同 蛋 白 之 ,β 。蛋 白 质 相 互 作 用 应 用 与 联 合 应 间 着 ,,,, ,,,, 可 能 存 在 的 相 互 作 用 也 可 以 被 实 时 动 态 检 ，测 因 ，用 ，者 结 合 起 来 即 此 如 果 将 的 方 法 能 够 检 测 这些蛋白质之间的 相 互作用从 ,,,,,,,:,,,)) 则 可 以 检 测 同 一 个 活 细 胞，，， 有 助 于 揭 示 的 脱 敏 内 化 运 输 合 成 和 ,,,,,,,,,::,,,),,,,,,而 ,,,,,)),, ,:。中 多 个 蛋 白 之 间 的 相 互 作 用 等 人 用 ,,,,:, 再 。 循 环 等 整 个 信 号 转 导 过 程 例 如 ,,,,,::,) 证 实 出 刺 激 ,,,,,,,,,,,,,,:,,,),::,,,),,,,,, ，)))和 ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,:,,,),,,,,,,::)))),,) ，会 使 聚 集 于 该 受 体 上 而 该 受 体 信 号 转 导 网 络 蛋 白 复 合 体 许 多 蛋 白 质 能 ,,,,,,, ,,,, α,, 仍 。 然 能 与 偶 联 激 酶 能 同 时 与 ，够 与 不 同 的 靶 分 子 相 互 作 用 这些相互作用整 合 起 ,,,,αα,,,,β、 ,γ, ，，偶 联 并 能 与 受 体 相 互 作 用 这 一 现 象 ,，γ来 形 成 了 一 个 复 杂 的 联 系 网 络 这个网络中相 互 作,, β 还 可 。用 的 蛋 白的 信 号 能 够通过 这 个网络传递下 去 。 ， 以 用 于 解 释 的 非 磷 酸 化 作 用 因 此 能 量,,,, 的 联 合 应 用 能 够 可 视 化 这 个 体 系 ,,,,,,,,)转 移 结 合 技 术 能 够 揭 示 出 信 号 转 导 中 不 ,,,, 中 可 预 期 的 动 力 学 过 程并且该技术适用 于 多个生物 ，每 个 蛋 白 质 之 间 的 相 互 作 用 从而有利于了解 特 定 系 的 蛋 白 质 间 的 相 互作用与调节其定位和信号效率 ，，统 这 有 助 于 揭 示 相关疾病发生的分 子 机 理 探 寻 。之 间 的 关 系 这 种联合技术已经被实时检测了多 。相 关 疾 病 治 疗 的 新 突 破 点 及 开 发 新 药 ，种 蛋 白 质 之 间 相 互 作 用 包括胞质中可扩散的 成 ,,, ,,,,,,,,) 分 、这 种 结 合 技 术 主 要 两 类 技 术 的 ,,,,,,,, ，以 及 膜 受 体 通过 对细 胞质和细胞核转导成分 之 间 ,,,,，、自 由 组 合 如 ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,))) 相 互 作 用 的 研 究 来追踪不同细胞器间进行的信号 ， 等 主 要的 原理是把荧光蛋白和 发 光 蛋白 的 端: 。、转 导 用 已 检 测 到 蛋 白 ,,,,,,,, ,,,, )β，或 端 融 合到目标受体上 并 且 让 这 些 受 体 表 达 , 的 亚 基 以及腺苷酸环化酶能形成一个信号,γ，，在 同 一 个 细 胞 上 如果这些受体能相 互 作 用 这 会 ,,,,。，体除 此 之 外 还 可 以 采 用 与 复合 ,,,, ,,,，。 产 生 能 量 转 移 即 发 生 ,,,,,,,,,,,,,,,))或 联 合 技 术 来 研 究 其 他 的 信 号 , ,,,, ,,,,, 运 用 中 荧 光 蛋 白 的 重 新组合可以分别作为 ,,,, 高 阶 寡 聚 体 和 蛋 白 质 复 合 体 的 亚 细 胞 定 ,,,,,转 导 、网 络 的 时 空 动 态 信号 蛋白的空间定位和调控 ,,。中 的 受 体 和 供 体 图 ,,,, ,位 的 结 合 应 用 能 够 同 时 识 别 多 个 ,,,,,,,, ),,。 ，的 机 制 图 资 料 显 示 不 仅 能 以 体 系 ,,,,,, ，， 形 成 的 寡 聚 体 有 资 料 显 示 ,,,,,,,,,,,,,)单 体 ，的 形 式 存 在 还可 以以 二聚体甚至是高阶寡聚 实 验 表 明 出 蛋 白 复 合 体 的 存 ,,,:,,,,, ))),,,, ,,,,，体 的 形 式 存 在 这 些寡 聚体 有不同于单体的特异功 ,,，等 本实验室将用 该 结 合 技 术 来 研 究 :,,:)Κ，、在也 证 实 出 多 巴 胺 受 体 腺 苷 ,,,,,,,, ,, ) ,，、、、、能 特 征 包 括 配 体 识 别 脱 敏 内 化 再 循 环 合 成 及 、异 源 二 聚 体 与 细 胞 内 蛋 白 和 , ,,,,,,,,,,,)受 体 以 及 亲 代 谢 型 谷 氨 酸 受 体 能 形 成 三 聚 β,,, , 运 输 。体 ,,,,， 之 间 的 相 互 作 用这 些 相 互 作 用 有 助 于 探 寻 相，，众 所 周 知 蛋 白 质 在内质网上进行生 物 合 成 经 高 。关 疾 病 治 疗 的 新 突 破 点 及 新 药 开 发 ，尔 基 体修饰并运输至质 膜 上 表达 因 为 可,,,, ，以 成 像 所 以 在 实 时 观 测 复 合 体 形 ,,,,,,,, ) 成 的 同 时 还 可 以 对 蛋 白 质 复 合 体 进 行 亚 细 胞 定 位 ,,,,,、、,，如 细 胞 膜 内 质 网 高 尔 基 体 等 从 而 有 助 于 ，我 们 研 究 蛋 白 质 甚 至 是 高 阶 寡 聚 体 的 生 物 合 成 。过 程 、图 蛋白偶联受体的脱敏 内化和再循环的过程 , , ,,,激 动 剂 与 受 体 结 合 介 导 发 生 磷 ,,,,,,,,,, ，，酸 化 抑 制 蛋 白 与 磷 酸 化 的 受 体 结 合 受 体 与 蛋 ) , β图 技术结合的作用原理 , ,,,,,,,,,,,, ))，,,白 异 聚 体 解 耦 联 即发生了脱敏反应 通过网格蛋白有，,两个荧光蛋白被分成 个非荧光片段片段 这 个 , , ，片 段 分别依次标记与 个不同的蛋白质上 如 果 第 个 , , ,,,,被 小窝而发生受体内化和内吞 受 体 重 返 胞 膜 复 ,，蛋 白 与 第 个蛋白有相互作用 那 么 个 非 荧 光 片 段 结 , , ,。敏 ，,合 形 成 个 发 光 复 合 体 即 发 生 如 果 第 个 蛋 白 与 , ,,,,, ，第 个蛋白有相互作用 那么两个非荧光片段 结 合 形 成 , , 展 望 ,，,个 荧 光 复 合 体 即 发 生 如 果 这 个蛋白之间存在相 ,,,,, ，，互 作 用 当加入催化底物后 酶反应提供的能 量 会 转 移 给 基 于 荧 光 和 发 光 新 型 技 术 的 相 互 结 合 已 被 ，荧光蛋白使其发出荧光 即 发 生 ,,,, 成 功 的 应 用 于 活 细 胞 高 阶 寡 聚 体 以 及 信 ,,,,, ,, ，， :,,,,:,,,,,,é ,,:,,,,,,,,:,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,。 转 导 网 络 中 蛋白复合体的研究 虽 然 这 些 技 术 仍 ,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,)) ,,,,，存 在 缺 陷 不 能 在 原 生 环 境 中 直 接 进 行 检 测 但 ,,，，,,,, :, ,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,。 这 些 技 术 在 不 断 得 到 改 善 和 拓 展 例 如 为 了 ，，,,,,:,,,) ,,,,:,:,:,,,,,:,, ,, ，，，，,, ,,,,,,,, :,,,,,:, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,:, ,,,,,:,寡聚 体在原生环境中 的 存在 已 经 ) 证 实 ,,,,, ,,,,,,,:,:, ,:,, ,,,, ,,:,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,) ,,开 发 出 ,,，，,,,:,,,) ,,:,:,,,,,,:,,,::,, ,:,:，一 种 新 型 方 法 该 方 法 的 核 心 是 被 荧 光 ,,,,,, ,, ，，，),,:,,,,,,,,,:,,,,,,, ,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,)) ,, ,:,,,,:,,:,,,,,,,,,,,,:,,:),), ,,,,:,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,。 配 体 标 记 的 受 体 该方法已被成功 运 用到原生 组 ，,,,,) ,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,:,,,,,,:, ,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,织 中 并 成 功 地 展 示出乳腺中催产素 受 体寡聚体 的 ，,,，，,,,) ,,,,,,,,,,:,:,,:,,,,,,,,:,,::::,,,:,,,,,,:。存 在等 人 在 此 基 础 上 以 人 类 受 ,, ,, ,,, ,:,,, ,,，，,:,,,,,:,, ,,,,,, ,:,,,,,,,:,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,), 体 为 模 型 开 发 出 一 种 研 究 配 体 之 间 连 接 的 ,,,,),,,,,,,,,,, ,,,,:,, ,,,,,,,, ,:,,,, ,,,,,,,,,, ,), ,，新 型 方 法 以 为 基 础 的 方 法 ,,,,,, ,,,,,, ))，，,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,) ,,,,,,,、， 是 一 种 非 放 射 性 更 快 速 并 且 具 有 较 高 的 灵 敏 性 ,,，，,,,,:,,,:,,,,,,:,:,:,,,,,:,,) ,,，，,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,:,,,,,,,,:,,,) ,,,这 种 测 定 法 能 够 被简单地应用于高 通 量的药物 筛 ,,,,,,,,,,,,,,,:,:,, ,),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,。选经 过 改 善 以 后 的 技 术 的 结 合 可 用 于 更 深 层 ，，,,,,::,,) ,:,:,,::,,,,,,,,，，次 的 研 究 如 将 结 合 起 来 发 现 ,,,,,,,,,, ),,，，,,,:,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,:,:,,, :,,,,,))) ,,, ,,,,, ,,,),,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,、蛋 白 酶 激 活 受 体 能 与 而 , ,,, ,,,,,,,,, α)β,,,，，,, ,,,::,,:, ,,,,,,,,) ,:,,,:,:,,,,,,,,,,,,,,,非 。 ，因 此 随 着 技 术 形 成 预 组 装 复 合 物,,,α,,，，，,,,, ,,,:,,, ,:,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,:,,,, ,, ,,:,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,: ，,,,,的 拓 展 和 开 发 他 们 将 是 很 多 研 究 领 域 中 强 有 力 的 ,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,:,,,, ,:,,,,,,,, ,,,,,,,,,,:, ,,,,, ，，、、、生 物 技 术 例 如 用 于 药 物 发 现 这 为 癌 症 糖 尿 病 ,,,，， ,,,,,,,,) ,,:,,,::,,,。心 血 管 疾 病 的 治 疗 带 来 新 的 曙 光 ,,，，,,,,,,,,,,:,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,:,,:,,,,,, ,,,,,参 考 文 献 ,,， ,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,:,,,:,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ，,:,,,,,,,,,，，，,, ) ,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,:,,,,,:,,,,,,,,,,,),),，，,, ，，，,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,:,,,,,,, ,蔡 欣 陈 京 张 敬 美 等 蛋白偶联受体激酶在细胞迁移和 ,,,,,,,, ，，,,, ,,,:,,,,,,,,,) ,,,,,,,:,,,,,:,,:,:,,,,,,,,,,,，，,细 胞 信 号 转 导 中 的 作 用 中 国 病 理 生 理 杂 志 :, ,:,,,: ,,,, ,,,,,,,,,) ,, ，，李 雅 林 白 波 陈 京 生 物 发 光 共 振 能 量 转 移 技 术 及 其 应 用,, ,,，，，,,, ,,,,,,, ,:,,,,, ,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,, ),,，，,,,中国生物化学与分子生物学报 ,:,,,:,,::,,,,,::::,,,,, ,,,,,,,) ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,:,,,,,, ,,, ,,，，,,,,, ，，蔡 欣 陈 京 白 波 蛋 白 偶 联受体高阶聚化 和 信 号转导 中 蛋 :,:,,,,,, ,,:,,:,:,,,,:,,,,,,, ) ,,，，，,:,, ,,,:,:,,, ,,,,,,,,,,,, ,:,:,,,:,,, ,,:,,,) ,,，，,,白复合体的时空动态检测 中 国 药 理 学 通 报 :, ,:,,,,,,:,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,)) ,,,,,,,,,,,,) ,,:,,,,,,,:,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,, ，,，,, ,,,,,, ,,,,,,:,,,,,,,:,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,::,),, ,,, ,,:,,,,,) ，，,,,,,,,,:,,::,,,,,，，,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,:,,,, ,,,,:::,,, ,,，,, ，，,,,, ,:,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,) ,,::,,,,) ， ,,:, ,:,,,:,,,,,,,:,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ，，，,,, ,,,,:: ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,:,:,,,,,,,) ,,,,,，，,,,，,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,:,:,:,,,,) ,,,,,,,,,,,,,)) ,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,) ,,,,,，,,,, ,,, ,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,)) , ,,,，,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,,:,,,, :,:)),,,, ，,,,,,,) ,:,,,,,, ,, ，，,,:,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,:,:,,)) , :) ,:,,,,,:,:,,,,:,,:,,,,,,:,,,,,,,,,,,:,:,,,,,,,,,,,,,,,,,，，,,,,:,:,,,,,, ,,,,,,,,,, :,,,:::,,,::,, ) ,,收 稿 日 期 ,:,,:,:,,:,, ))