生姜抗氧化作用的研究

缟一{’j《食靠工业科技{ScienceandTechnologyofFoodIndustry生姜抗氧化作用的研究黄雪松建华路福绥(山东农业大学食科系基础部，泰安271018)^．●◆◆●⋯_．●◆H～●●．H一●◆一’●4⋯◆●I_●一◆◆·●◆一●⋯◆一◆一l摘要以硫氰酸铁(FTC)法和硫代巴比妥酸(TBA)法测定了甲醇、乙醚等有机溶剂的生’姜提取物的抗氧化作用，其抗氧化能力的大小依次为甲醇、二氰甲烷、乙醇、己烷、石油醚、丙酮、乙醚的提取物。u．2的生姜粉(含水量1O)提取物与0．01二丁基羟基甲苯(BHT)的抗氧化能力基本一致。酸度不影响生姜抗氧化物质的抗氧化能力关键词生姜抗氧化作用硫氰酸铁硫代巴比妥酸1前言生姜是常用中草药和食用调味料现代科学研究证实生姜有抗衰老、抗肿瘤和防止食品败坏的作用，这些有益作用的发挥均与其所古有的抗氧化物质有关。本文以亚油酸为氧化底物，对不同生姜提取物、不同pH值等条件下的生姜抗氧化作用进行『研究。2实验部分2．1材料购买市售莱芜生姜，洗净、切成2~3mm薄片，自然晒干，粉碎，过40目筛备用。2．2试剂FTC法0．05M磷酸缓冲{瘦，75乙醇，0．02M氯化亚铁溶液，3o硫氰酸铵溶梭。TBA法正丁醇，2O三氯乙酸，0．3硫代巴比妥酸(用0．5三氰乙酸配制)。pH值为1～10的克拉克一鲁布斯(clark一1．ubs)缓}中液配制。2，5化学纯亚油酸(无水乙醇配制)。2．3抗氧化物质的提取分别用分析纯甲醇、无水乙醇、己烷、二氯甲烷、石油醚、乙醚、丙酮、60乙醇和无离子水共九类提取剂各5ml放A具塞试管中，加入姜粉(含水10，蒸馏法{卿定)1．09og，室温下萃取8h，过滤，滤渣再加等量溶剂同法浸提，重复五次，收集滤渣；使甲醇、乙醚、二氯甲烷、己烷、石油醚、丙酮提取液中的溶剂在5o'c水溶中挥发，然后再用无水乙醇定容至100ml无水乙醇提取渣仍用无水乙醇提取。承提取液和60乙醇提取液分别用承和6o食科系九二级李秀霞同学参加r部分实验工作·16·乙醇定容至100ml。2．4样液抗氧化能力的测定2．4．1不同有机溶剂提取物抗氧化能力的测定取2．3项中的各类提取液4ml(约折台含0．2生姜粉)故A不同的具塞试管中，加入4，lml2．5亚油酸、8ml磷酸缓}中{瘦和3．9ml无离子水，放置在40℃恒温箱中，每隔24h测定一次其过氧化物生成量(FTC法)和丙二醛(TBA法)生成量，其生成量的大小均以吸光度(0D)值表示。2．4．2水和6O乙醇提取物抗氧化能力的比较取水提取物和∞％乙醇提取物各lml，放A具塞试管，加入2．5亚油酸lml，0．05M磷酸缓冲梭3ml，40℃恒温箱放置，隔3～5d后测定OD值(FTC法)。2．4．3不同pH值对提取物抗氧化能力的影响取6O乙醇提取物，2．5亚油酸、无离子水各lml、pH值1～10的Clark--Lubs缓}中液各2ml故人10支具塞试管中，40‘C恒温箱中放置．3～5d后用FTC法测OD值。2．4．4FTC法操作步骤，取40"C恒温箱中培养{瘦各0．1ml，分别加入9．7ml75乙醇、0．1ml30％硫氰酸铵，然后再加入0．1ml0．02M氰化亚铁溶液，准确反应3rain，于500rim下测OD值2．4．5TBA操作步骤¨取40℃恒温箱培养渣各lml，分别加入20三氯乙酸lml混匀静置约20min，再加入2ml0．3硫代巴比妥酸溶液，混匀后沸水浴15min，室温下冷却，然后再加入4ml正丁醇，充分摇匀，于3000r／min离心15rain，取上清波于532nm下测0D值．3结集与讨论3．1不同有机溶剂提取物抗氧化能力的比较楚调一维普资讯http://www.cqvip.com由图1可以看出，所试有机溶剂的提取物的OD值均比未添加提取物的低。这表明生姜有机溶剂提取物均具有抗氧化能力，其中以甲醇提取物抗氧化效果最好。其它依次是二氯甲烷、乙醇、己烷、石油醚、丙酮、乙醚。其差异可能是因为有机溶剂的极性不同，其对生姜中抗氧化物质的溶解度不同．所提取的抗氧化物质的总量和种类也就不同，导致了不同有机溶剂提取液的抗氧化能力不同。从OD值看，各类0．2生姜有机溶剂提取物的抗氧化效果与0．0lBHT基本一致*t无t图10．OlBHT和不同有机溶剂生姜提取物的抗氧化能力(FTC法)剐)列h图20．01BHT和不同有机溶剂的生姜提取物的抗氧化能力的比较(TBA法)由图2可以看出，用TBA测定结果与FTC法相同，都说明生姜抗氧化物质可有效地防止脂质过氧化作用。3．2水和60乙醇提取物抗氧化能力的比较(结果见表1)表1水与60乙醇提取特抗氧化能力比较提取剂水60乙醇pH竺I!：!!：!!培养3天OD值l00700．0460．036002600360．026l培养5天OD值l0．07600600．036j0．0360．0弘0．030注FTC法测定，b不添加提取物时，培养第三天OD值为0．3”。培养第五天OD值为0．750。由表1可以看出，6O乙醇提取物比水提取物抗氧化效果好。这说明生姜中的抗氧化物质水溶性鞍差但水提物仍显示出相当强的抗氧化能力，这与文献E4]所述干姜水提物无抗氧化作用的结论是不一致的。另外，水提物在酸性条件下抗氧化能力较低，可能与水中含有的少量金属离子有关金属离子有促进脂肪酸自动氧化的作用这有待进一步研究。3．3酸度对摄取物抗氧化能力的影响(结果见表2)。由表2可知，不同pH值对生姜中抗氧化物质的抗氧化能力影响不大，降低pH值对生姜中抗氧化物质的抗氧化能力无增效作用。这与文献r-53的结果是不一致的。这可能是由于采用不同氧化底物造成的。本实验以化学纯亚油酸为氧化底物，而文献r-52是以食用猪油为氧化底物的．其所舍杂质，尤其是矿物质杂质可能影响酸度对抗氧化物质的抗氧化能力。表2不同pH值对60乙醇生姜提取物拭氧化能力的影响注：A：第三天OD值B-第五天OD值d结语其余同表1注a'b．C生姜含有高效的抗氧化物质．其0．2生姜粉的有机溶剂提取物的抗氧化效果与0．。1BHT基本一致．生姜中的抗氧化物质具有鞍强的脂溶性，但其水提物仍具有很强的抗氧化作用。pH值的改变对生姜中抗氧化物质的抗氧化能力影响不大。参考文献1常文保等编．简明分析化学手册．北京大学出板社，19812HhoeKikuzakieta1．AntioxidantEffectsofSomeGingerConst~tuents．J．FoodSci，1993，68(6)：l407～l4103李仪奎主编．中草药理实验方法学．上海科学技术出版社，1991：2022054吴伟康等．四逆汤清除自由基及抑制心肌脂质过氧化反应的体外试验．中国中药杂志，1995，20(11)690～691．7015李爱华．生姜抗氧化作用的研究．食品科学．1995．16(2)：35～38·17·曼维普资讯http://www.cqvip.com