木瓜中齐墩果酸的提取工艺研究

《食品工业科技》 Science and Technology of Food Industry Vo1．21，No．4．2000 7 0一f 木瓜中齐墩果酸的提取工艺研究7s } 唐春红 项昭保 石轶松 叶志义 任绍光 (渝州大学包装与食品工程系，重庆 400033) (重庆大学农业生物工程研究中心，400044) ● I～ ● I～ 一 一 一 一 一 ● ⋯ 一 一 一 一 ● I一 ● ¨ ⋯ 一 ● ⋯ I一 ● 摘 要 比较了几种不同的提取方法，通过宴验证明，采用喾漉法提取，再分别用层析柱法和碱溶酸沉法进行分 离可得到较多 的齐墩果 酸。 关t词 术瓜 齐墩果酸 提取 分离 ● — ～ - — — _ — — 一 - ● ～ — — 一 Abstract In this paper．several extraction ing method followed by base solubilization and ；季溉 泣 层车『f樘 meihods were compared．It W85 concluded that the extraction by leak acid precipitaton as well a8 column chromatography s the best Key words Chinese quincetoleanolic acid；extraction；isolation ～ ～ ～ ⋯ ⋯ ● ～ ● ● ● 木 瓜 (Chaenomeles Lagenaria (I oise1．) Koidz)，为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠的果实，术瓜 的主要药效成分为齐墩果酸。据文献报道，齐墩果酸 具有消炎抑菌、降低转氨酶的作用。还有促进肝细胞 再生、防止肝硬化、强心、利尿、降血脂、降血糖、增强 有机体免疫功能、抑制变态反应等作用 ，是当前治疗 肝炎的有效药物之一 ，近年又证明有抗癌活性。 齐墩果酸是五环三萜类化合物，分子式为c 。H ()。，结构式见图 1。人参、雪胆、女贞子等名贵药材中 均含有该有效物质。纯品齐墩果酸为白色针状结晶， 熔点为 308～310℃，比旋度[a] 一一73．3。(c一 0．15，CHCI。)，不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙 酮和氯仿 。 Me Me oH H M e M e 图 1 齐墩果酸的结构式 1 材料与方法 1．1 材料与仪器 齐墩果酸样品 西南师大生产；木瓜片 遵义市 中瓜绿色食品开发有限责任公司提供 ，使用时用粉碎 机粉碎。 752 C型紫外分光光度计 上海第三分析仪器 厂；LXJ n离心沉淀机 上海医用分析仪器， ：微量 进样器 宁渡市镇海玻璃仪器厂；硅胶连续层析柱。 · ]0· 1 2 不同提取方法的比较 1．2．1 回流提取 称取原料 1 5g，依次用 1OO、80、 70m195 乙醇回流提取 3次，时间依次为 4h、3h、2h， 合并提取液 ，置于 250ml容量瓶中 ，加人 95 乙醇稀 释至刻度，做为供试样。取供试样 5O 1，样 5O 1， 分别点于同一硅胶 G板上，以氯仿 ：丙酮(10 1)为 展开剂展开，取 出，挥去溶剂，喷以 5 磷 钼酸醇溶 液，在 105℃烘约 5rain，刮取与对照品相同位置上的 蓝色斑点，置具塞试首 中，同时刮取与供试品斑条等 面积的空白硅胶于另一具塞试管中，做对照空白，先 精密加人新制的 5 香草醛冰醋酸液 0．2ml及高氯 酸 0．8ml，在 70℃恒温水浴加热 1 5min，流水冷却至 室温，再精密加人乙酸乙酯 4ml，摇匀，离心取上清液 在 =560nm处测定，根据标准曲线换算出其中齐墩 果酸的浓度及用该法提取出木瓜中齐墩果酸的提出 率 ，结果见 1。 1．2．2 索氏提取 称取原料 1Og，置索氏提取器滤 纸套筒中，用 100m195 乙醇进行索氏提取至虹吸下 的溶剂近无色(约 8h)，将提取液置于 100ml的容量 瓶中，用 95 乙醇稀释至刻度，做为供试样，其余操 作 同回流提取，结果见表 1。 1．2．3 渗漉提取 称取原料 25g，用适量 95％乙醇 在 200ml烧瓶中浸泡约 10h，然后装人漉筒中(用玻 璃柱代替)，开始渗漉，渗漉至滤液几无色．将渗漉液 置于 250ml容量瓶中，用 95 乙醇稀释至刻度 ，做为 供试样，其余操作同回流提取，结果见表 1。 1 2．4 冷浸提取 称取原料 20g，用 150ml95 乙醇 浸提一周，再用 l00m195 乙醇浸提 5d，合并浸提液 置于 250ml的容量瓶中，用 95％乙醇稀释至刻度，做 维普资讯 http://www.cqvip.com 《食品工业科技》 Science and Technology of Food Industry Vo1．21，No．4，2000 为供试样，其余操作 同回流提取，结果见表 1 1 3 齐墩果酸的提取分离工艺 采用渗漉法提取齐墩果酸后，再用两种分离方法 对其进行分离，比较分离效果的不同 1．3．1 碱溶酸沉法 按下面工艺流程进行．结果见 表 2 禾瓜樱 “m。g) 嚣一渗漉液 一浸膏状物警一水不溶物篡 一 ⋯ 雌 液 < ⋯ ⋯ 嚣 一乙醇溶液 一结晶 表 1 不 同提取 方法时比较<Ⅱ==3) 1．3．2 层析拄分离法 按下面工艺流程进行 ，结果 见表 2。 木瓜粗提特霉誓襄 一渗漉液罢篆一浸膏状物 警一水不溶特±竖一干燥物 一 一 妾甓一乙醚溶液罢簧一粗品齐墩果酸 警一滤液 壹里一白 色结晶 一产品 裹 2 不同提取工艺救率之比较 (Ⅱ一3) 2 讨论 粗品齐墩果酸骂 产品 2．1 可与齐墩果酸发生显色反应的试剂有十余种， 资料表明用这些试剂显色，都可进行齐墩果酸比色测 定。Hiai等比较了各种比色方法后，推荐用香草醛 硫酸试剂显色．但经过本实验发现除王慕邹等报道的 用 比显色试剂空 白颜色较探外，更主要 的是稳定性 差，同时做的平行试样，甚至同一试样测量时间稍有 不同，吸光度值就有变化。虽然吸光度值较大 但变化 幅度大，重现性差，所以不能用该法比色测定 2．2 用香草醛一高氯酸试剂为显色剂已有文献报 道，但其测定条件差别 较大。如陈 明珠认为在 = 540nm 处有最大吸光度 ，而黄秉廉则得出 60C显色 30rain效果为佳，章观德等剐认为冰醋酸做稀释剂效 果好 针对这种情况 ，本人对显色时间、显色温度 、试 剂用量、测定波长、稀释溶剂、显色稳定性等实验条件 均做了仔细详尽的试验，结果发现用香草醛一高氯酸 试剂显色 ，最佳实验条件为：加入待测样后，加热挥去 溶剂 ，再加入 0．2ml新制 的 5 香草醛冰醋酸液及 0．8ml高氯酸，在 70C恒温水浴加热 1 5rain，流水冷 至室 温，再 加入 4m r乙酸 乙酯 稀释，摇 匀，在 一 560nm处测定 2．3 用香草醛 高氯酸试剂显色要注意以下问： a．若有水分存在 ，对测定有干扰，因此容器必须充分 干燥 lb．齐墩果酸标准液在挥去溶剂时不能过热，否 则齐墩果酸结构会被破坏，这样会极大地影响测定结 果_c．5 香草醛冰醋酸溶{袭必须在临用前新鲜配制， 于当日使用 ，放置时间太久，显色灵敏度下降，这可能 与香草醛易被空气中氧氧化有关；d．冰醋酸易挥发， 刺激性气味很浓，且香草醛也易挥发(其本身即为一 种香料)，因此加样时速度要尽可能快些。 2．4 在这 四种提取方法中，索氏提取法中齐墩果酸 的提 出率较其它三种方法高 ，且溶剂用量也较少 ，但 难于大量提取。在其它三种方法中，提出率相差很小， 但实验条件有较大差异，从时间上考虑 ，回流法最佳 、 依次为渗漉法、冷浸法；从节省溶剂、能源看．渗漉法 · 11· 维普资讯 http://www.cqvip.com 《食品工业科技》 Science and Technology of Food Industry Vo1．21，No．4，2000 7 2 影响煮熟后面条表 面硬度的因素 周显青 张玉荣 (郑州粮食学院，郑州 450052) ● ⋯ -● I一 ⋯ ～ ⋯ ● ‘-● I～ ～ 一 ● ●w● ● ●-● ～ ● ● 一 ● 一 ～ ● I～ ● I一 z／厂 、 雌 煮 在 溺 巍略旧，主曼 墅 Sur c efirmnes o U'6"o oked no 目 od les refe 舅 rs t 啕 o as 。 。 。 time，cooking~vatQr，dough sheeting，resting time，reduction percentage in roll—gap，number of sheeting steps and so ⋯ ～ ● 一 ● 一 ● 一 ⋯ 一 一 ． 1一 面条的食用品质很大程度上取决于其硬度、弹性 和表面特性等。人们已经研究并开发出几种用仪器来 测量熟面条的硬度及弹性的方法 。当然煮熟后通 心粉表面粘性也可用仪器进行测量 。众所周知．通 心粉食用时含汤很少，通常是放在一个只含少量水的 盘子里食用的，而东方面条食用时常含大量面汤。因 此，与煮后通心粉相比，煮后面条表面粘性显得不太 重要，而其表面硬度和光滑度却显得非常重要 因此， 本文就煮熟后面条表面硬度的测定方法及影响因素 进行综合分析，旨在为挂面的工业化生产及相关研究 提供一些指导和帮助。 1 面条衰面硬度的测定方法 1．1 仪器测定法 这种 Instron通用测试仪器配以 200Og压力室 和一钝叶片。先把煮熟 的面条放在 自来水上 冲洗 lrnin，然后沥干，再将一根面条放人样品盒 中，再用 聚乙烯薄膜盖上，2rain后用于测定 样品盒配以刻度 表(最小捌度为 0．5ram)用来确定面条的宽度。另外 也可将煮熟的面条封人聚乙烯袋中，储藏备用(温度 25℃)。在测试前约 3rain时，将一根面条从袋中取出 放在样 品盒 中．然后和前述实验一样，测试之前先用 薄膜盖 上，2rain后进行测定。 将一个逐渐增加的压力施加到面条样品上，此时 刀片压入面条的深度应不超过面条厚度 的 10 。施 加在面条表面的压力虽可通过计算得到，但通常是用 压力一距离曲线上的最初压缩斜率作为面条 的表面 硬度指标。 1．2 癌官法 面条样品随机进行编号，面条要求煮到最佳烹煮 时间，煮熟的面条用凉水冲洗，然后分放在小玻璃杯 中，在室温下进行评价。品尝员应告知面条表面硬度 的概念，即表面光滑、硬和无粘感 ，按要求进行打分， 最后经数据处理得到面条表面硬度的评分值。 2 影响煮熟后面条衰面硬度的因素 2．1 面筋形成程度 面条表面硬度的差异不是 由烹煮损失引起的，而 最好 ，冷浸法次之 ，回流法最差；从收集提 出液的难易 程度考虑，渗漉法最佳，冷浸法较回流法稍好些。综上 所述 ，选用渗渣法进行提取效果较好。 参考 文献 J 袁珂 ．冬 凄草叶中齐墩果酸的提取分离及含量测定 中 草药，1998，29(1)}23l～236 2 林少琴，朱苏闽．仙草中的一十五环节三萜酸分离提取与 鉴定 ．天然产物研究 与开发 ，1995，6(4)：52～57 3 李曼玲，刘美兰等 ．女贞予果之不同部位的齐墩果酸测 定 ．中国中药杂志 ，1995，2O(4)：216～21 7 ·12 · 4 唐蟑柏，余克健等 ．齐墩果酸提取工艺改进 ．中草药- 1989，20(3)：17～ 18 5 姜华 ．薄层一比色法测定贞芪挟正 1：3服液中齐墩果酸的 古量 ．西北药学杂志 ，1996，1](3)：103~104 6 饶伟 文 从鸟 不企 中提取 齐墩果 酸 中草药 ，1986，17 (9)：46 7 章林牌，脒云生荨．从云南椿术提取齐墩果酸的工艺研究 ． 中国中药杂志，1989，4(1) 42～43 8 李开 泉，棘晓清等 ．正交法优选 椿术齐墩果酸的提取工艺 ． 中成药 1992，14(1)；9～10 维普资讯 http://www.cqvip.com