hplc法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素和水杨酸的含量

hplc法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素和水杨酸的含量 HPLC法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素和水杨酸的含量 HPLC法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素和水杨酸的含量 【摘要】 目的 建立高效液相色谱法测定复方氯霉素洗剂中氯霉素和 水杨酸含量。方法 色谱柱为C18，流动相为磷酸盐缓冲液 (0.01M,pH3.5):甲醇(55:45)，流速为1.0ml/min，检测波长为 278nm，柱温为25?。结果 氯霉素、水杨酸分别在 4.08,40.8μg/ml (r=0.9989)、7.76,77.6μg/ml(r=0.9990)范围内呈良好的线性 关系，平均回收率分别为100.5%(RSD=0.66%)、100.1%(RSD=0.52%， n=9)。结论 本方法简便、准确、快速、重现性好，可用于该制剂的 含量测定。 【关键词】 复方氯霉素洗剂;氯霉素;水杨酸; 高效 液相色谱法 Determination of chloramphenicol and salicylic acid in chloramphenicol lotion compound by HPLC 【Abstract】 Objective To establish a HPLC method for content determination of Chloramphenicol and Salicylic acid in Chloramphenicol lotion Compound.Methods The separation was performed on C18column.The mobile phase was consisted of KH2PO4buffer (0.01M ,pH3.5): methanol(55:45) with a flow rate at 1.0ml/min and detection wavelength at 278nm.The column temperature was 25?.Results A good linear range of Chloramphenicol and Salicylic acid respectively in the range from 4.08, 40.8μg/ml9r=0.9989))and 7.76,77.6μg/ml(r=0.9990).The average recoveries were 100.5,(RSD=0.66,)and 100.1, (RSD=0.52,,n=9),respectively.Conclusion This method was convenient,accurate,rapid and reproducible and suitable for the determination. 【Key words】 chloramphenicol lotion compound;chloramphenicol; salicylic acid;HPLC 复方氯霉素洗剂 具有止痒、杀菌、消炎等作用，临床用于治疗脂溢伴毛囊炎型皮炎。 据文献报道，该制剂的含量测定多采用紫外分光光度法或中和滴定法 ,1,。本文采用HPLC法同时测定氯霉素和水杨酸的含量，方法简便、 快速、准确、重现性好，可作为该制剂的含量测定。 1 仪器与试剂 高 效液相色谱系统，包括P680A低压四元梯度泵、UVD170U检测器、 CHROMELEON色谱工作站(德国戴安公司);氯霉素对照品(北京市燕京制药厂，批号:0406)，水杨酸对照品(南京白敬宇制药有限公司，批号:050319);甲醇为色谱纯;水为重蒸馏水;复方氯霉素洗剂为本院自制。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 流动相:磷酸二氢钾缓冲液(0.01M，pH3.5):甲醇(55:45);色谱柱:Symmetry-C18(150mm×3.9mm，5μm);流速:1.0ml/min;检测波长:278nm;柱温:25?，进样量20μl。色谱详见图1(略)。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取100?干燥至恒重的氯霉素和水杨酸对照品适量，用流动相稀释成浓度分别为0.204、0.388mg/ml的贮备液。再精密吸取该溶液1ml置10ml量瓶中，加流动相定容,摇匀，即得对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备 精密量取样品溶液1ml于100ml量瓶中，加入流动相，定容，摇匀，精密吸取该溶液1ml置10ml量瓶中，加流动相定容,摇匀，即得供试品溶液。 2.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例,称取除氯霉素和水杨酸外的其余成分适量制成阴性样品,再按“2.3”项下方法制成阴性对照品溶液。 2.5 标准曲线的绘制 精密量取2.2项下贮备液1、3、5、7、10ml，分别置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得系列标准溶液。按上述条件进样测定，以峰面积(A)为纵坐标，进样浓度(C)为横坐标绘制标准曲线，分别得氯霉素、水杨酸回归方程A氯霉素=1.1870+6.8450C(r=0.9989)、A水杨酸=0.09947+3.0291C(r=0.9990)。结果明氯霉素和水杨酸在 4.08,40.8和7.76,77.6μg/ml范围内线性关系良好。 2.6 精密度试验 精取2.2项下贮备液5ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，重复进样测定5次，结果氯霉素、水杨酸峰面积的RSD分别为1.23%、0.98%。 2.7 重现性试验 取样品共5份，按“2.3”项下制备供试液，依法测定，结果氯霉素、水杨酸峰面积的RSD分别为1.53%、1.76%。 2.8 稳定性试验 取2.3项下供试品溶液室温放置0、3、6、9、h进样测定峰面积，结果氯霉素、水杨酸峰面积的RSD分别为1.54%、0.95%。表明溶液在h内稳定性良好。 2.9 回收率试验 精密量取已知含量的样品1ml，分别准确加入“2.2”项下储备液各5.0ml、6.0ml、7.0ml，并分别置于100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。按“2.5”项下方法试验，以回归方程计算各自 的回收率，结果详见表1。表1 回收率测定结果 2.10 样品含量测定 取样品3批，按“2.3”项下方法制备成供试品溶液，按上述色谱条件测定，代入标准曲线计算含量，结果见表2。表2 样品含量测定结果 3 讨论 因本制剂中水杨酸含量是氯霉素的2倍，并且在278nm波长附近也有较大的吸收度，故选择氯霉素的最大吸收波长278nm为测定波长,2,。 由于本实验中以甲醇-水二元系统为流动相时水杨酸的吸收峰拖尾较重，后改用(0.01M，pH3.5)磷酸盐缓冲液后，二者的吸收峰均很对称，且空白对测定无干扰。故本文采用以上色谱条件。 本法可同时测定复方氯霉素洗剂中两主药的含量，操作简单、快速，结果准确可靠，可作为该制剂的含量测定方法。 【参考文献】 1 中华人民共和国卫生部药政局.中国医院制剂(西药制剂),第2版.北京:中国医药科技出版社,1995,103. 2 缪春辉,冷爱国,涂飞龙.复方氯霉素醇溶液中3种成分的含量测定.东南国防医药,2003，5(2):102.