【doc】米格列奈钙有关物质的HPLC法测定

【doc】米格列奈钙有关物质的HPLC法测定 米格列奈钙有关物质的HPLC法测定 ? 650?中国医药工业杂志ChineseJournalofPharmaceuticals2007,38(9) 米格列奈钙有关物质的HPLC法测定 毛志英,张发成,刘汉清 (1.南京荣世医药科技有限公司,江苏南京210028;2.南京中医药大学,江苏南京 210029) 摘要:建立]'HPLC法测定米格列奈钙的反式异构体和R一异构体.前者采用C18 柱,磷酸(pH2.5)一乙腈(50:5O)为流动 相,检测波长210nm.后者采用OA.3300手性柱,流动相为正已烷.氯仿.甲醇.三氟乙 酸(25:75:1.5:O.5),检测波长 259nm.米格列奈钙反式异构体和R一异构体的检测限分别为O.08~10.51ng. 关键词:米格列奈钙;有关物质:异构体:高效液相色谱;测定 中图分类号:TQ657.72:0657.72文献标识码:A文章编 号:1001.8255(2007)09.0650.03 DeterminationofRelatedSubstancesinMitiglinideCalciumbyHPLC MAOZhi.ying,ZHANGFa.cheng,LIUHan.qing (』.NanjingRongshiPharmSci&TechCo.,Ltd.,Nanjing210028,"2.NanjingUniversityofTCM,Nanjing210029) ABSTRACT:AHPLCmethodwasestablishedforthedeterminationofthetrans.isomerandR—isomerof mitiglinidecalcium.Fortheformer,aC18columnwasusedwiththemobilephaseofphosphoricacid(pH2.5)一acetoni— trile(50:50),atthedetectionwavelengthof210nm.Forthe1atter,anOA.3300chira1columnwasusedwiththemobile phaseofnorma1hexane.chloroforlT1.methano1.trifluoroaceticacid(25:75:1.5:0.5).atthedetectionwavelengthof 259nm.The1imitdetectionofthetrans.isomerandR.isomerwere0.08and0.5lng.respective ly. KeyWords:mitiglinidecalcium;relatedsubstance;isomer;HPLC;determination 米格列奈钙(mitiglinidecalcium,1)是恢复或 替代早期相胰岛素分泌的抗高血糖新药.由日本 Kisses~l药公司研制.为检测1中是否含有微量反 收稿日期:2006.12.15 作者简介:毛志英(1977),女,主管中药师,工程师,从事新药研究. 通讯联系人:张发成(1977),男,工程师,从事新药研究. Te1:025—85550138:Fax:025.85550238 E-mail:zfc@LWpharm.corn 式异构体和R一异构体等.本研究参考文献1_61中1同 类药物那格列奈的测定,并作筛选,优化,建立了 HPLC法进行分析. 1仪器与试药 LC.10ATvp型液相色谱仪,SPD.10Avp检测器(岛津公 司);HW2000色谱工作站(大连日普利). 1原药[批号031101,031109,031117,mp分别为178, 197~C,179——198~C,178——199~C,[?]+7.7.,+7.4.,+7.5. ?0D ?s 图1动态反应曲线 参考文献: [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典临床用药须知 (2005年版)[M].北京:人民出版社.2005:641.643. [2]肖贵南,刘振龙,谢艳康.采用鲎试剂检查低分子量肝素钙 注射液中细菌内毒素的可行性研究[J].中国药房,2006, 17(1】):856.858. 中国医药工业杂志ChineseJournalofPharmaceuticals2007,38(9) V/mV14 l2 lO 8 6 4 O ,B:1及其反式异构体 A:1原药 1—1;2—1的反式异构体 图11及其反式异构体色谱图 V/mV2l 18 l5 l2 9 6 3 O 2468l0l2l4l6l82022 t/rain A:1原药,B:1及其R.异构体,C:1的R.异构体 1—1;2—1的R.异构体 图21及其R-异构体色谱图 (c1.5,甲醇)]和l对照品[含量99.5%,水5.6%,mp179, l99~C,[cc]+7.6.(c1.5,甲醇)],反式异构体和R一异构体 均由本公司提供. 2方法与结果 2.1色谱条件 取1及其反式异构体,R.异构体适量,用流动 相分别溶解后,在200~400nm波长范围内扫描. 结果显示,l及其反式异构体均有较强的紫外末端 吸收,而1及其R.异构体在259nm有最大吸收.因 此,分别选择210nm*[]259nm为l反式异构体,hiR. 异构体的检测波长. l反式异构体:色谱柱ShimadzuC8柱(4.6mmx 150mm,5gm);流动相水(磷酸调至DH2.5).乙腈(50: 50);流速lml/min;检测波长210nm;进样量20ul. 在此条件下的典型色谱分离图,见图1.柱效以1峰计为 12500,l峰与相邻峰的分离度为3.0. R.异构体:色谱柱OA.3300手性柱(4.6mmx V/mV21 l8 l5 12 9 6 O 150mm,5gm);流动相正已烷.氯仿.甲醇.三氟乙 酸(25:75:1.5:0.5);流速1ml/min;检测波长 259nm.在此条件下1及其R.异构体的典型色谱图 见图2.柱效以1峰计为2500,l及其R.异构体的分 离度为2.26. 2.2专属性试验 精密称取1原药10mg,共5份,其中3份分别 加1mol/L盐酸10ml,1mol/L氢氧化钠溶液10ml, 30%双氧水10ml,室温放置2h,用流动相定容至 100ml;1份用流动相溶解并定容至100ml后沸水浴 加热2h;另l份用流动相溶解并定容至100ml后在强 光下照射2h.按上述色谱条件测定,结果显示各种 条件下的降解产物和l峰均能达到完全分离. 2.3检测限及定量限 取1对照品用流动相溶解后逐步稀释,以S/N= 2,3,计算得1及其R.异构体和反式异构体的检测 限分别为0.041,0.51,Do.08ng. ?加4O 2086420864 3322222lll V m ? 652? 2.4样品检测 2.4.11的反式异构体检查 取1原药适量,加流动相溶解并稀释制成 0.1mg/ml的溶液,作为供试品溶液1.精密吸取供 试品1液适量,加流动相稀释制成l~g/ml的对照 溶液.精密量取对照溶液20~tl进样,调节灵敏度, 使1峰为满量程的20,25%.取供试品溶液1进 样,记录色谱图至1峰保留时间的2倍.图中各杂质 峰面积总和不大于对照溶液的1峰面积(即1.0%); 与对照品溶液中反式异构体相应位置的杂质峰,其 峰面积不大于对照溶液1峰面积的1/2(即0.5).结 果见表l. 2.4.21的R.异构体检查 取1原药适量,用适量甲醇溶解后,加流动相 制成4mg/ml的溶液,作为供试品溶液11.精密量取 供试品溶液11适量,加流动相稀释制成0.04mg/ml 的对照溶液.精密量取对照溶液20gl进样,调节灵 敏度,使1峰为满量程的20%,25,取供试品溶 液11进样,记录色谱图至1峰保留时间的2倍,如有 R.异构体峰,其峰面积不得大于对照溶液1峰面积 的1/2(即0.5%).结果见表1. 表1样品测定结果 中国医药工业杂志ChineseJournalofPharmaceuticals2007,38(9) 3讨论 文献方法无法检测1及其R.异构体,因此在 预试验时,参考文献流动相配比正已烷.氯仿.甲 醇.三氟乙酸(80:l8:2:0.2),并调节流动相,当 三氟乙酸为0.5,甲醇为1.5时峰形达最佳,分离度 较好,故最终选择上述所用流动相. 参考文献: [1]周欣,王庆彪,曾昭全,等.HPLC法测定那格列奈胶囊含 量及溶出度[J].海峡药学,2002,14(2):22—24. [2]孟勤,尹建元,王恩思,等.反相高效液相色谱法测定那 格列奈含量[J].药物分析杂志,2003,23(5):370—373. [3]何笑荣,胡欣,闫小燕,等.那格列奈片的溶出度考察 [J].中国医院药学杂志,2003,23(2):82-84. [4]顾萍,李语如,蒋素梅,等.那格列奈及其片剂中L一异 构体的HPLC测定[J].中国医药工业杂志,2004,35(8): 486—488. [5]顾萍.李语如.那格列奈中顺反式异构体的HPLC法测 定[J].江苏药学与临床研究,2004,12(4):12-l3. [6]张哲峰,杨更亮,周宇,等.高效液相色谱法用于那格 列奈质量控制的研究[J].药物分析杂志,2004,24(2): l29.133. [7]YamaguchiT,YanagiT,HokariH,eta1.Preparationof opticallyactivesuccinicacidderivatives.II.E伍cientand practicalsynthesisofKAD—l229[J].ChemPharmBull, l998,46(2):337—340. $38.53醇用?-溴(碘)代糖精制备溴(碘)代烷FirouzabadiH等 [TetrahedronLett,2006,47:1771] 醇羟基于二氯甲烷中,可与?.溴(碘)代糖精和三苯膦,室 温反应瞬时至5h,制得相应卤代烷.ll例收率80%,93%. [蔡正艳摘] $38.54亚砜或砜的合成BahramiK[TetrahedronLett,2006,47: 2009] 硫醚或环硫醚于甲醇中,加30%H:O:/ZrCI,室温反应l, 4min,可氧化为亚砜或砜,当三者比例为2:14:4时得亚砜类;比例 为2:20:5时得砜类.烯基或酮基不反应.36例收率93%~99%. [蔡正艳摘] 更正:我刊2007年第38卷第8期569页左栏"2.2.4"项下休止角和堆密度应为(32.4+0.78).和(0.48+0.01)g/ml.