高效液相色谱法测定小儿惊风七厘散中黄芩苷的含量

高效液相色谱法测定小儿惊风七厘散中黄芩苷的含量 高效液相色谱法测定小儿惊风七厘散中黄芩苷的含量 【摘要】 目的: 建立高效液相色谱法测定小儿惊风七厘散中黄芩苷的含量。: 采用shim pack CLC ODS色谱柱(6 mm×150 mm)，流动相: 甲醇 水 冰醋酸(45?55?0.5)，流速 1.0 mL/min，柱温40 ?，进样量10 μL，检测波长277 nm。结果: 黄芩苷在进样量0.01,0.07 mg/mL范围内浓度与峰面积线性关系良好，回归方程为Y=1486379X 3748(r=0.9999，n=7)，平均加样回收率为103.12%，RSD为 1.76%。结论: 本方法快速、简便、结果准确，可用于控制该制剂的质量。 【关键词】 高效液相色谱法 小儿惊风七厘散 黄芩苷 ,Abstract, Objective:To establish an high performance chromatography (HPLC) method to assay the concentration of baicalin in Xiao er Jingfeng Qili San. Methods: Shim pack CLC ODS (6 mm×150 mm) column and a mobile phase of methanol, water and glacial acetic acid (45?55?0.5) was used with the flow rate of 1.0 mL/min and the column temperature of 40 ?. The detection wavelength was 277 nm. Results: There was a linear relationship within the range of 0.01,0.07 mg/mL and the regression equation was Y=1486379X 3748 (r=0.9999, n=7). The recovery rate was 103.12% and RSD was 1.76%. Conclusions: This method is simple and accurate and able to control the quality of the preparation. ,Key words, High performance liquid chromatography; Xiao er Jingfeng Qili San; Baicalin 小儿惊风七厘散收载于卫生部药品中药成方制剂第十一册，由牛黄、麝香、天麻、黄芩、黄连等33味中药组成，具有祛风化痰、解热镇惊的功效。临床上用于小儿外感风邪、惊风抽搐、咳吐痰涎、食滞呕吐、腹痛泄泻等症。其中黄芩苷是黄芩的有效成分，在现行质量标准中无含量测定指标,1,。目前为止，用高效液相色谱法测定小儿惊风七厘散中黄芩苷含量尚无报道。为了更好地控制该制剂的质量，本实验建立了高效液相色谱法测定小儿惊风七厘散中黄芩苷的含量，并经方法学考察，认为本法简便快速，结果准确，可用于该制剂质量控制。 1 仪器与试药 LC 10AD 高效液相色谱仪，SPD 10A紫外可见光检测器，CTO 10A柱温箱，C R6A数据处理机(日本岛津公司);CQ 250 超声波清洗器(中船总公司七二六研究所)。黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号为110715 201714);小儿惊风七厘散(腾冲县东方红制药厂，规格: 0.2 g/瓶，批号: 2017070 6、2017070 3、20171105);甲醇为色谱纯，冰醋酸为分析纯，水为纯化水。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱: shim pack CLC ODS色谱柱(6 mm×150 mm);流动相: 甲醇 水 冰醋酸(45?55?0.5),2,，流速 1.0 mL/min;检测波长: 277 nm;柱温: 40 ?;进样量: 10 μL。理论塔板数按黄芩苷峰计算为4 156，拖尾因子为 1.03。此条件下主峰与杂质峰达到基线分离。 2.2 对照品储备液的配制 精密称取真空减压干燥至恒重的黄芩苷对照品10.0 mg，置100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.1 mg/mL的对照品储备液，备用。 2.3 供试品溶液的制备 取本品0.1 g，精密称定，置25 mL容量瓶中，加50%的甲醇溶液适量，超声处理30 min，放冷，用50%的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液备用。 2.4 阴性对照溶液的制备 按小儿惊风七厘散处方量和工艺制备方法制成不含黄芩的阴性样品。取阴性样品0.1 g，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。 2.5 阴性对照试验 按照上述色谱条件，吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，结果见图1。阴性对照溶液中的组分不干扰供试品溶液中黄芩苷的测定。黄芩苷的保留时间为15.8 min。 图1 高效液相色谱图(1 黄芩苷)(略) 2.6 标准曲线 分别精密量取0.1 mg/mL的对照品储备液 1、 2、 3、 4、 5、 6、7 mL，置10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，分别精密吸取上述溶液10 μL进样，测定峰面积，以色谱峰面积(Y)为纵坐标，对照品溶液浓度(X)为横坐标，外标法得黄芩苷标准溶液的线性回归方程为: Y=1486379X 3748(r=0.9999，n=7)，结果明黄芩苷浓度在0.01,0.07 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好。 2.7 精密度试验 精密量取浓度为0.1 mg/mL的对照品储备液3 mL置10 mL容量瓶中，用甲醇稀释‎‎至刻度，得浓度为0.03 mg/mL对照品溶液，取上述溶液10 μL，一天内重复进样5次，测得各次峰面积分别为404 10、4043 7、4050 4、4089 2、40632，以峰面积计算精密度，结果日内RSD为0.49%。