病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子中主要成分含量分析

病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子中主要成分含量分析 病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子中主要成分含量分析 【摘要】 目的:探讨病毒灭活新鲜冰冻血浆(ffp)提取的冷沉淀凝血因子中主要成分含量的改变。方法:采集45袋400 ml全血，然后用cr-7型大容量低温血液成分离心机(3800 r/min，10 min)分离出血浆(200ml/袋)，每袋再平均分为100 ml两袋，分别作为对照组液体血浆和试验组液体血浆。对照组(ffp组)立即置于低温血浆速冻机中速冻保存备用;实验组(病毒灭活ffp组)用亚甲蓝/光化学法进行病毒灭活后，再速冻保存备用。将两组ffp分别提取两组冷沉淀凝血因子速冻保存备用，而后分批用start-4全自动血液凝固检测仪，快速测定凝血因子?(f?)和纤维蛋白原(fg)的含量。结果:经两组对比可见，用亚甲蓝/光化学法进行病毒灭活后ffp制备的冷沉淀凝血因子中，凝血因子?(f?)和纤维蛋白原(fg)含量都有一定幅度的减少，但仍然符合国家标准。结论:以病毒灭活ffp提取冷沉淀凝血因子，对f?和fg的含量无显著影响，因此病毒灭活ffp提取冷沉淀凝血因子是可行的。 【关键词】 病毒灭活; 冷沉淀; 成分分析 中图分类号 r446.11 文献标识码 b 文章编号 1674-6805(2013)23-0151-02 冷沉淀凝血因子是ffp在4 ?条件下水浴中解冻，收集到的不溶冷沉淀物，其主要成分为凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)等，是局部止血药纤维蛋白胶的主要成分。广泛应用于f?和fg等凝血因子缺乏的疾病，如因f?缺乏或活性下降的甲型血友病、vwf缺 乏或分子结构异常的血管性血友病、凝血因子i(fg)缺乏症等。对于以上患者，输注的冷沉淀凝血因子中凝血因子?、纤维蛋白原的活性对治疗效果产生重要影响[1]。在亚甲蓝/光化学法病毒灭活血浆广泛应用于临床以来，它的效果与安全已被验证。所以用亚甲蓝/光化学法病毒灭活ffp为原料提取冷沉淀凝血因子，对进一步减少因输血传播疾病的发生率有积极作用。为发现病毒灭活ffp提取的冷沉淀凝血因子中主要成分含量的改变，笔者分别对实验组ffp和对照组ffp提取的冷沉淀凝血因子中凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)进行了含量分析比较，现将结果报道如下。 1 与方法 1.1 一般资料 imago-500型低温血浆速冻机，卢森堡dometic公司生产;cr-7型大容量低温血液成分离心机，日本hitachi公司生产;kjx-?型血浆恒温解冻箱，苏州医用仪器厂生产;dkb-2型电热恒温水浴箱，上海精宏医疗仪器厂生产;hdme-1a型病毒灭活仪，上海输血技术有限公司生产;start-4型血凝仪，日本倍肯公司生产;测定凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)试剂盒，法国stago公司生产;一次性使用病毒灭活耗材，上海输血技术有限公司生产。全部耗材与试剂均在有效期内使用。 1.2 方法 ffp及病毒灭活ffp的制备:使用四联袋按标准操作规程采集45袋400 ml全血，然后用cr-7型大容量低温血液成分离心机(3800 r/min，10 min)分离出血浆(200 ml/袋)，每袋再平均分为100 ml两袋，分别作为对照组液体血浆和试验组液体血浆。对照组(ffp组)液体血浆立刻放入血浆速冻机速冻保存备用;实验组(病毒灭活ffp组)液体血浆用亚甲蓝/光化学法进行病毒灭活后，再放进低温血浆速冻机速冻保存备用。全过程在采血后尽快6 h内完成。将对照组和实验组ffp取出，按4 ?水浴虹吸法提取冷沉淀凝血因子，立刻放进血浆速冻机冷冻保存备用。 1.3 测定 把对照组和实验组的冷沉淀凝血因子按5袋为一批取出，整批完全放入37 ?恒温循环水浴箱中解冻，然后分别留样5 ml，使用start-4型血凝仪按标准操作规程快速测定凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)的含量。 1.4 统计学处理 所得数据采用spss 13.0统计学软件进行处理，计量资料以均数?标准差(x?s)示，采用t检验，计数资料采用x2检验，p<0.05为差异有统计学意义。见表1。 2 结果 实验组中凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)的含量略低于对照组，但两组间比较差异无统计学意义。见表1。 3 讨论 随着经济不断的发展，人际交流日趋广泛和深入以及血型检测技术的不断提高，输血不安全主要因素由以前的血型问题转变为病毒 传播问题。虽然自愿无偿献血的建立和有效运行，使得经血液输注感染病毒的危险性大幅度降低，但因为血液病毒检测存在“窗口期”的问题，即使使用高度灵敏的方法检测，目前最先进的核酸检测，窗口期大大缩短，也仍然不能解决“窗口期”问题;再者由于不断发现可通过输血传播的新病毒，而国家并未要求对其进行检测，也是造成血液传播疾病的风险。然而在众多血液制品中，输注冷沉淀凝血因子传染病毒的风险高于血浆及红细胞和血小板[2]。而且由于需要输注冷沉淀的患者，反复输注，用量大，感染风险会进一步增加。因此采用病毒灭活ffp制备冷沉淀就显得尤为重要，它已成为保证血液安全的必要措施。 在亚甲蓝/光化学法病毒灭活血浆广泛应用于临床以来，它的效果与安全已被验证。从对比结果能发现，用病毒灭活ffp提取的冷沉淀凝血因子主要成分符合标准，这样的冷沉淀凝血因子既有临床效果，又能降低输血不安全性。病毒灭活ffp提取的冷沉淀凝血因子中，凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)的含量会有-定幅度的减少。分析可能因素如下:(1)病毒灭活操作导致ffp在非适宜保存温度下停留时间增长，不稳定的凝血因子?(f?)会有一定幅度减少;(2)亚甲蓝/化学法病毒灭活使用的活性炭过滤器吸附少部分凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)，导致其含量减少。虽然如此，凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)的含量变化与ffp组的含量相比均无显著性，仍然符合国家标准，输注这样的制品能保证临床疗效[3]。因此使用亚甲蓝/化学法病毒灭活ffp提取冷沉 淀凝血因子，会导致凝血因子?(f?)、纤维蛋白原(fg)的含量有一定幅度的减少，但对比使用冷沉淀凝血因子可能发生的输血不安全性是有积极意义的。 参考文献 [1]黄虹，陆典瑞，胡继征.冷沉淀制备工艺改良[j].临床输血与检验，2007，9(2):144. [2]曹锁春，张力超，刘息平，等.病毒灭活冷沉淀的制备及初步评价[j].临床输血与检验，2006，8(3):223-224. [3]中华人民共和国卫生部和中国国际标准化委员 会.gb18469-2012中华人民共和国国家标准:全血及成分血质量要求[s].北京:中国标准出版社，2012. (收稿日期:2013-04-10) (编辑:韩珊珊)