2014-2015学年高二生物学案：第四部分《乳酸脱氢酶同工酶的分离》浙教版选修1

2014-2015学年高二生物学案：第四部分《乳酸脱氢酶同工酶的分离》浙教版选修1 《乳酸脱氢酶同工酶的分离》学案 导学诱思 一、乳酸脱氢酶 1(简称:____ 2(作用:在____________存在下，乳酸脱氢酶能使______产生________，具体反应式见下: ________________________________________________________________________。 答案:1.LDH 2(氧化型辅酶NAD， 乳酸 丙酮酸 CH3,CHOH,COOH，NAD，LDH,CH3,CO,COOH，NADH，H， (乳酸) (丙酮酸) 二、同工酶 1(概念:指能____________，但其________________的一组酶。 2(实例:LDH有____种同工酶。 3(LDH同工酶: 结构特点:由____种亚基____和____以不同比例组成的________。 具体类型:______、______、______、______和M4。 存在特点:在动物的________________中，LDH各种同工酶的______不同。 答案:1.催化同一化学反应 酶蛋白的分子组成不同 2(5 3(2 L M 四聚体 H4 H3M H2M2 HM3 细胞分化及胚胎发育过程 比例 三、乳酸脱氢酶同工酶的分离实验 1(实验方法:____________法。 2(染色: (1)方法:________法 (2)染色原理:在LDH的作用下，NAD，被还原为NADH，NADH将______和______传递给甲硫吩嗪(PMS)，还原的甲硫吩嗪再将______和______传递给氯化氮蓝四唑(NBT)，还原的氮蓝四唑呈____色，展现在电泳凝胶上。 3(实验材料:牛的______，其余略。 4(实验步骤: 制备________ ? 加样 ? ________ ________ 答案:1.聚丙烯酰胺电泳2((1)活性染色 (2)电子 H， 电子 H， 蓝 3(血清 4(电泳凝胶板 电泳 染色 核心解读HEXINJIEDU 1(除了LDH还有哪些酶具有同工酶, (1)哺乳动物的肝脏中，己糖激酶有?、?、?、?4种同工酶; (2)碱性磷酸酯酶(AKP)有4种同工酶; (3)微生物中也有同工酶，大肠杆菌中天冬氨酸磷酸液酶，共有3种同工酶。 2(LDH同工酶有什么用途,同工酶又有什么应用, LDH同工酶的分布有明显的组织特异性，所以可以根据其组织特异性来协助诊断疾病。正常人血清中LDH2>LDH1。如有心肌酶释放入血清中，则LDH1>LDH2，利用此指标可以观察诊断心肌疾病。临床意义: (1)急性心肌梗塞发作后，早期血清中LDH1和LDH2活性均升高，但LDH1增高更早，更明显，导致LDH1与LDH2的比值升高。 (2)肝炎、急性肝细胞损伤及骨骼肌损伤时LDH5都会升高。 (3)患活动性风心肌湿性炎、急性病素性心肌炎、溶血性贫血、肾坏死等病LDH1也可升高。 (4)恶性病变时LDH3常增高。 同工酶是基因表达的产物，生物发育过程中基因的表达受时间和空间的控制，所以同工酶的研究在生理或病理变化、分子进化、育种等方面都有意义。近年来，同工酶检测在有些方面已被DNA标记所取代。但由于同工酶的检测在操作上比检测DNA简便，所以在一定程度上还可发挥作用。 3(LDH活性染色法能否用于定量测定，能否用于比色法测定其他生化反应, LDH活性染色法可用于溶液的比色定量测定。此法也可用于其他生化的氧化还原反应。但由于NBTH2不溶于水，在琥珀酸脱氢酶测定中，可使PMSH2与溶于水的2,6二氯酚靛酚相偶联而进行比色测定。 4(同工酶能否用SDS聚丙烯酰胺电泳分离,为什么, SDS是解离剂，而许多同工酶是由2种亚基以不同比例组成的全酶，被解离后进行电泳，获得的是亚基的条带，无法显示同工酶的条带。所以同工酶不能用SDS聚丙烯酰胺电泳分离。 题例领悟TILILINGWU 【例题1】 乳酸脱氢酶能使乳酸发生下列的哪一变化 … ( ) A(乳酸脱氢产生丙酮酸 B(使氧化型辅酶NAD，分解 C(使乳酸氧化生成CO2、H2O D(使乳酸分解成乙醇 解析:本题考查乳酸脱氢酶的作用。根据教材中对其的描述，乳酸脱氢酶(LDH)可以发生以下变化 CH3,CHOH,COOH，NAD， (乳酸) (氧化型辅酶NAD，) CH3,CO,COOH，NADH，H， (丙酮酸) 所以，正确的答案是A。 答案:A 将乳酸脱氢酶的反应式搞清楚，尤其是各物质的分子简式。