【精品推荐】血虚大鼠肠系膜微循环改变与四物汤干预作用研究药学论文_医药学论文_22219

【精品推荐】血虚大鼠肠系膜微循环改变与四物汤干预作用研究药学论文_医药学论文_22219 论文范文 题目:血虚大鼠肠系膜微循环改变与四物 汤干预作用研究药学论文_医药学论文 编辑:小小 作者:李伟～彭欣～郎庆龙～王冰～秦林 【摘要】 目的研究乙酰苯肼致血虚大鼠肠系膜微循环的变化特点～ 以及四物汤的干预作用。通过皮下注射乙酰苯肼(APH)制备血虚 模型大鼠～用BI2000医学分析系统观察大鼠肠系膜一般体征～重点 观察微循环动、静脉流速(BFVA、BFVV)、微动、静脉管径(DA、DV) 及其DA/DV的变化。同时进行足底微循环的相关检测。结果?血虚 大鼠肠系膜微循环血色暗淡～网点数减少～流态呈粒线流甚至聚集 流～动、静脉流速明显减慢;DV明显增大～而DA/ DV极其显著性降 低(P<0.01或P<0.005)～有明显的渗出反应。足底微循环量明显降 低。?四物汤能明显改善上述微循环的异常改变～尤其能明显提高 肠系膜DA/ DV(P<0.01或P<0.005)～明显提高肠系膜和足底血流速 度(P<0.005)～减少肠系膜微循环渗出。结论血虚大鼠存在微循环管 壁损伤、血流淤滞以及渗出反应～四物汤能修复缺血损伤、改善瘀 血和渗出～呈现补血调血功能。 【关键词】 血虚证; 四物汤; 微循环 Abstract:ObjectiveTo study the characteristics of mesenteric microcirculation and hemorrheology parameters in blood deficiency rats induced by acetylphenylhydrazine(APH)and intervention of Siwu decoction. MethodsAPH was injected subcutaneously on the back of rats to establish a blood deficiency model . The BI-2000 medical analysis system was used to study the mesenteric microcirculation and the changes of BFVA,BFVA,DV,DA,DA/DV.The general signs of animal were also investigated . Plantar microcirculation was also observed. Results?The color of mesenteric microcirculation in blood deficiency was dim, the number of capillary networks was decreased, mesenteric microcirculation blood flow showed line flow state with particle and aggregation flow state. BFVA and BFVA were decreased obviously, DV was increased obviously,but DA/ DV was decreased significantly(P<0.01or P<0.005), mesenteric microcirculation had obvious exudation. Plantar microcirculation volume was decreased obviously.?Siwu decoction could significantly improve the microcirculation of abnormal changes,especially improve DA/ DV(P<0.01 or P<0.005), and blood flow of mesenteric and plantar microcirculation(P<0.005), reduce exudation.ConclusionVessel wall injury of mesenteric microcirculation in model rats exists, as well as blood stasis and exudation. Siwu decoction can significantly renovate ischemic injury, improve blood stasis and exudation and show, blood-tonifying and blood-regulating function. Key words: Blood deficiency; Siwu decoction; Microcirculation 血虚证～是血液亏虚～脏腑百脉失养～以体肌肤黏膜组织呈 现淡白色～以及全身虚弱为特征的证候群。作者以往研究初步表 明～四物汤作为中医补血调血的基本方剂～在改善血虚同时～对改 善血虚大鼠的血流变和凝血功能方面也有良好作用。本研究在此基 础上～进一步观察血虚大鼠肠系膜微循环变化以及四物汤的影响作 用～为深入探讨四物汤“补血调血”的作用本质提供进一步的客观 依据。 1 材料与方法 1.1 药物 四物汤药材均购自山东中医药大学门诊部～由本校中 药鉴定教研室鉴定。全方用量按照《太平惠民合剂局方》的质 量比(熟地?当归?白芍?川芎为15?10?10?6)称取～经过水煎、过滤、浓缩、配制成100%药液(高浓度药～即生药含量1g/ml);同时～制得稀释两倍的低浓度药(生药含量0.5 g/ml)。 1.2 试剂乙酰苯肼(APH)～上海试剂三厂生产～批号950224;肝素钠注射液(2 ml,12 500 U)～上海第一生化有限公司产品,批号030901;戊巴比妥钠～上海化学试剂采购供应站分装厂产品～批号 01-22。 86- 1.3 仪器 LD4-2A(2003098400)低速离心机～(中国)北京医用离心机厂产品;GB303电子天平, (上海)股份有限公司生产;BI-2000医学图像分析系统及BL-410生物机能实验系统～成都泰盟科技有限公司生产;JI-200激光微循环动态分析仪～天津津科电子有限公司产品。 1.4 动物与分组处理Wistar雌性大鼠～40只, 10月龄～体质量(350?20 )g～山东大学实验动物中心提供～许可证号SCXK(鲁)20030004。购臵后喂以饲料～自由饮水～室温20，26?～湿度65%，75%～通风光照良好条件下～适应饲养1周～大鼠一般体征状况正常后～按体重随机分为4组:正常组(A组)～血虚模型组(B组)～四物汤大剂量组(C组)～四物汤小剂量组(D组)～每组10只。 2 方法 2.1 血虚模型的制备按文献制备血虚模型～其中～C组灌胃量为高浓度药6 ml/kg体质量～D组灌胃量为低浓度药6 ml/kg体质量～A、B两组灌以等容量蒸馏水。B、C、D各组均于灌胃第6天开始皮下注射1%APH?NS～隔日1次～共5次～剂量分别为100～50～50～30～30 mg/kg～A组皮下注射等容量的生理盐水。每次灌胃后对大鼠进行称重～并对动物一般体征进行观察。 2.2 肠系膜微循环检测第15天晚动物禁食～第16天进行动物实验。按文献[3～4]报道方法行动物麻醉～打开腹腔后～将回盲部肠系膜轻轻拉出～并臵于盛有台式液恒温灌流槽上。通过微循环显微镜和BI-2000医学图象分析系统～直接观察肠系膜微循环变化～录制保存实验全过程～待作进一步分析。?流速测定:取毛细血管前细动脉(直径10 μm左右)以及与之对应的静脉为观察对象～进行流速测量～每只大鼠选取两个部位～每个部位测量3次取平均值。 ?微血管管径测定:对?中的血管管径(DA1、DV1)进行测定～同时测定第三级分支动脉(直径25 μm左右)及与之相对应的微静脉管径(DA2、DV2)。两个级别血管各测定两个部位～每个部位测量3次取平均值～最后求其动静脉管径比值。?毛细血管网交点记数:计算面积为1 mm2的固定区域中毛细血管与边界(血管)的交点数。 2.3 足底微循环检测参照JI-200激光微循环动态分析仪检测方法略加改进。采用紧压手法～即将探头用力下压大鼠足底～直至压不动～然后自然松手～检测松手后的微循环数据～避免了由于探头摆放不当而造成的数据误差。 2.4 统计学处理实验数据?s表示～采用SAS 8.1统计学软件～组间用t检验方法进行处理。 3 结果 3.1 大鼠体征一般状况 注射APH?NS后第3天～B组大鼠逐渐开始出现体质量减轻～食欲下降～蜷卧少动～拱背消瘦～竖毛～毛色无光～毛发脱落～唇、爪、尾色苍白～双目无神～眼睑变窄甚至出现闭目等现象。注射APH?NS后第7，8天开始～大鼠粪便减少。C、D两组大鼠的大部分体征比B组略好。B、D两组大鼠各死亡1只。 3.2 各实验组血色素检测情况结果见表1。表1 四物汤对血虚大鼠血色素的影响表1结果显示～ 模型组的Hb值明显低于正常组。四物汤大小剂量组均能明显提高模型大鼠Hb值(P<0.01或P<0.005)。 3.3 肠系膜微循环检测 3.3.1 血虚大鼠肠系膜微循环变化见表2，4及图1，2。与正常组比较～模型组肠系膜微循环改变主要有3方面。第一～微循环血色变暗、变淡～红细胞数大量减少～管壁受损～内壁不光滑～血管欠饱满～毛细血管网交点数减少～微静脉管径尤其是DA/ DV发生明显变化～与正常组相比均有极其显著性差异(P<0.005)～以上均属于明显的血虚以及因缺血引起的血管损伤表现;第二～模型大鼠肠系膜微循环血流态主要以粒线流和粒流为主～并可见摆流与聚集流～血细胞聚集～大量白细胞附壁～动静脉血流速度明显减慢(P<0.005)～足底微循环流量明显降低(P<0.005)～微循环呈现瘀血 反应;第三～多数模型微循环血管～尤其是微静脉血管周围有渗出甚至出血反应～推测为血管壁损伤所致。 3.3.2 四物汤对血虚大鼠肠系膜微循环的影响作用见表2，4及图3，4。与模型组比较～四物汤组能明显改善血虚大鼠微循环改变。首先～四物汤组血管血色红润～血管较饱满～充盈度明显提高～明显缩小微静脉管径～尤其是明显提高DA/ DV～改善血虚和血 见表2～3);第二～明显提高血虚大鼠的微动、静脉血管损伤状态( 液流速～四物汤大、小剂量组BFVA、BFVV与模型组均有高度显著性 第三～渗出出差异(P<0.005)(见表4)～明显改善微循环血液流态; 血反应也明显减轻。表2 各组微血管血液血色、流态、毛细血管网点数以及渗出状况比较表3 四物汤对DA、DV的影响表4 四物汤对微血管BFVA、BFVV的影响 (N)表示测定部位的样本量～即每只大鼠的同一指标取两个部位进行测量;与B组比较～***P<0.005;与A组比较～###P<0.005 3.4 足底微循环检测见表5。 本研究在检测肠系膜微循环同时～采用JI-200激光微循环动态分析仪检测大鼠足底微循环。结果显示～与正常组比较～模型组足底微循环流量明显降低(P<0.005)～ 四物汤大、小剂量组能明显提高血虚大鼠足底微循环流量～改善足底微循环(P<0.005)。表5 各组大鼠足底微循环比较 4 讨论 微循环是维持组织正常代谢和功能的重要保证。本实验中～模型组肠系膜微循环有严重缺血损伤～表现为毛细血管交叉网点明显减少～血管欠饱满～内壁不光滑;DA/DV值变小～而静脉管径相对增大～提示管壁受损和静脉回流不畅。同时～微循环还有血瘀反应～表现为肠系膜微循环血液流态发生明显变化～主要以粒流和粒线流为主～并可见摆流与聚集流～血细胞聚集～大量白细胞附壁～动静脉血流速度明显减慢;足底微循环流量也明显降低;而全血检测也有血色素含量和红细胞数量减少。另外～实验中发现模型组肠系膜微循环存在渗出现象～表现为管壁清晰度欠佳～多数血管周围有渗出甚至有出血点～可能与血虚导致的血管损伤以及血瘀导致的压力性渗出有关。以上结果与传统中医所讲的“若血虚不足～运行缓慢～易形成瘀血～血虚不足～血脉失养～也易虚损出血”[5]相一致。 本实验证实～四物汤可以改善血虚大鼠肠系膜微循环以及血流变的浓、黏、聚状态。能提高血管充盈度～改善血管损伤～调节血管微动静脉的管径变化～提高血虚大鼠肠系膜微动静脉流速～明显减少血管渗出～提高血虚大鼠足底微循环流量。此结果不仅验证本方的补血作用～而且与古人认识的本方“行血用归、芎以行春夏之令～止血用地、芍以行秋冬之令”的组方配伍特点相吻合。本研究为揭示四物汤“补血调血”的作用本质提供了微循环依据。 【参考文献】 彭 欣～秦 林～邓华亮～等. 四物汤对血虚模型大鼠血流变和凝血功能的影响[J].山东中医药大学学报,2008,32(2):163. 彭 欣～宋月芹～张增敏～等.贫血大鼠模型瘀血出血改变与其临床意义的研究[J].山东中医药大学学报,2006,30(3):236. 田 牛～李向红～刘育英.微循环方法学[M].北京:原子能出版 社,1993:230. [4] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993:554. [5] 李海燕～王 倩.浅析《血证论》对血瘀证之论述[J].中医药学报～2007～26(2):245. 转贴于