紫苏子油纳米乳的研制

紫苏子油纳米乳的研制 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第11期2007年l1月?1629? 制剂与质量 紫苏子油纳米乳的研制 吴旭锦,欧阳五庆,朱小甫,杨宝平 (西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100) 摘要:目的研制紫苏子油纳米乳剂,并对其进行质量评价.方法绘制伪三元相图优 选处方,考察制剂的形态, 黏度,电导率,折光率,乳滴粒径分布及稳定性.结果以小麦胚芽油为油相,聚氧乙烯 氢化蓖麻油(RH4O)为表面 活性剂的处方最佳,紫苏子油纳米乳在透射电镜下呈圆球形,黏度为(5.49士 0.02)/ram?S,,电导率为316/ ms,,折光率为(1.124士o.0025O),平均粒径为(50.3士1.1)nm,气相色谱法测定质 量分数的平均回收率为 98.9,RSD为0.88.结论纳米乳能提高紫苏子油的溶解度和稳定性,重现性好,是一 种很好的药用基质. 关键词:紫苏子油;伪三元相图;纳米乳 中图分类号:R286.1文献标识码:A文章编号:0253—2670(2007)l1—1629一O4 ResearchandpreparationfornanoemulsionofFructusPerillaeoil WUXu—jin,OUYANGWu—qing,ZHUXiao—fu,YANGBao—ping (CollegeofVeterinaryMedicine,NorthwestofA&FUniversity,Yangling712100,Chi na) Abstract:ObjectiveTostudythepreparationofFructusperrillaeoilnanoemulsionanditsqual ity evaluation.MethodsTheformulationsofFructusPerrillaeoilnanoemulsionwereoptimized bydrawing thepseudoternaryphasediagramsandinvestigatingtheform,viscosity,particlesizedistribut ion,stabili— ty.conductance.andrefractiratio.ResultsTheoptimalformulationwascomposedofwheatoi landcre— mophorRH40.electronmicroscopypresentedFructusPerrillaeoilnanoemulsionassmallsp hericaldrops. viscositywas(5.49?0.02)/mm?S_.,conductancewas316/ms_.,refractiratiowas(1.124士 0.00250), andmeandiameterofparticlewas(50.3? 1.1)nm.TheaveragerecoverydeterminedbyGCwas98.9, itsmeanRSDwas0.88.conclusionThesolubilityandstabilityofFructusPerrillaeoilareprom oted bynanoemulsionwithbetterproduncibility.ItiSafavorablemedicalmatrix. Keywords:FructusPerrillaeoil;pseudoternaryphasediagrams;nanoemulsion 紫苏子来源于唇形科紫苏Perillafrutescens (L.)Britton的干燥成熟果实.紫苏子油中不含胆 固醇,而富含a一亚麻酸,可降血压,降血脂,抗动脉 硬化,抗癌,预防心血管疾病,增强记忆力,预防老年 痴呆症[1],因此具有极强的食用和医用价值.目前 临床上紫苏子油只有软胶囊制剂,因其粒径大,吸收 差,造成药物生物利用度低,而且不适于吞咽困难的 病人,顺应性差,极大的限制了其应用.纳米乳是粒 径为1O,100nm的乳滴分散在另一种液体中形成 胶体分散系统,是由油相,水相和表面活性剂组成的 热力学稳定体系,能提高难溶药物的溶解度,对药物 具有缓释控释作用,其粒径小,能促进药物吸收,提 高药物生物利用度,对于易水解和挥发的药物,还有 很好的保护作用.因此本实验以聚氧乙烯氢化蓖麻 油为表面活性剂,小麦胚芽油为油相,制备紫苏子油 纳米乳,并对其进行质量评价,以期寻找紫苏子油一 种安全,高效的用药系统. 1仪器与材料 BS224S电子天平(德国Satorius公司); TGL一16B型台式高速离心机(湖南星科科学仪器 有限公司);JEM--1230型透射电子显微镜(日本电 子);NIA一1型旋转黏度计(上海天平仪器厂); DDS一11C型电导率仪(上海精科雷磁);阿贝折光 仪(石家庄光学仪器厂);Nicomp388/ZetaPALS激 光粒度测定仪(ParticleSizingSystem,USA);HP一 5890型气相色谱仪和HP一3392型色谱数据处理 机(美国惠普公司). 紫苏子油(含a一亚麻酸7O.2,江西省吉水县 收稿日期:2006—12—21 基金项目:西北农林科技大学校长基金资助(130709) 作者简分:.吴旭镘(199一),女,陕西西安人,博士研究生,主要从事纳米药物学研 究.E—mail:yaoyuanwxj@163.com *通讯作者欧阳五庆E—mail:oywq506@sina.corn. ?1630?中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第11期2007年11月 水南威霸药用油提炼厂);a一亚麻酸甲酯对照品(质 量分数为999/5,美国Sigma公司);液体石蜡油,小 麦胚芽油,杏仁油,橄榄油(均为药用级,陕西省医药 公司);Tween80,Span80(均为化学纯,天津市登峰 化学试剂厂);聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH40,德国 BASF公司);氢氧化钾,甲醇,三氟化硼,正辛烷,氯 化钠(均为分析纯,西安化学试剂厂);蒸馏水(本实 验室自制). 2方法与结果 2.1纳米乳的制备 7'( 2.1.1处方的考察:通过溶解性试验,发现紫苏子 油在Tween80,Span80和RH40中的溶解度分别为 0.43,0.26,0.58g/g,故选择RH40为表面活性剂. 通过绘制伪三元相图口确定处方,将紫苏子油用于 RH40与液体石蜡,小麦胚芽油,杏仁油,橄榄油分 别按照以上确定的处方时,液体石蜡只能形成乳液, 而无澄清的区域,不能形成纳米乳,试验发现其他3 种油中只有小麦胚芽油形成的纳米乳区域最大,最 终选择RH40和小麦胚芽油制备纳米乳液,而且在 紫苏子油为10时最佳.见图1. 水水 一一表面活性剂A油表面活性剂B油表面活性剂C油 图1小麦胚芽油(A),杏仁油(B)和橄榄油(C)与RH40形成纳米乳的区域 Fig.1Nanoemulsionformativeregionofwheatoil(A),almondoil(B),oliveoil(C)withcremo phorRH40 2.1.2紫苏子油纳米乳的制备:精确称取RH40电子显微镜观察,结果显示形态为圆 球形,分布均 3.6g,小麦胚芽油0.4g,放入烧杯,在24?室温条匀,见图3. 件下,手动搅拌将其充分混合均匀,将1.0g紫苏子 油直接加入,搅拌直至全部溶解,然后向其中缓慢加 入蒸馏水,边加蒸馏水边手动搅拌,开始时体系黏度 较小,随着蒸馏水量的增加,体系会变黏稠,此时体 系可能会出现液晶态或油包水型纳米乳,继续滴加 并不断搅拌,当体系突然变稀时,此时产生的即是稳 定的无色透明水包油型紫苏子油纳米乳,称其总质 量为10.00g. 2.2纳米乳粒径测定:取紫苏子油纳米乳20mL, 用蒸馏水稀释5倍,用激光粒度测定仪测定其粒径 大小分布.紫苏子油纳米乳为澄清,透明,均一的无 色分散体系,其粒径为(50.3-!-1.1)am,粒度分布 见图2. 砷,52O4O6o80100 直径/nm 图2紫苏子油纳米乳的粒径分布图 Fig.2ParticlediameterdistributionofFructus Perrillaeoilnanoemulsion 2.3纳米乳形态观察:取紫苏子油纳米乳适量滴在 铜网上,用2的磷钨酸负染色,自然晾干后用透射 图3透射电镜下的紫苏子油纳米乳颗粒 Fig.3Transmissionelectronmicroscopephotograph ofFructusperrillaeoilnanoemulsion 2.4纳米乳稳定性研究:取纳米乳适量,于相对湿 度在75,温度分别为一4,25,40,60?及光照 (4500-!-500)lx的条件下保存,分别于5,10d后, 测定纳米乳的径粒(纳米乳的平均粒径一检测的纳 米乳粒径总和/纳米乳粒子数总和).结果见表1.结 果表明紫苏子油纳米乳受环境影响较小.取纳米乳 适量于离心试管中,15000r/min离心20min,考察 其外观.结果发现紫苏子油纳米乳未见分层现象,仍 为无色,透明,稳定,均一的体系. 2.5纳米乳的黏度,电导率,折光率的测定:分别考 察空白纳米乳和紫苏子油纳米乳的黏度,电导率和 折光率,结果见表2.结果表明,紫苏子油的加入使 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第11期2007年11月?1631? 表1稳定性试验结果(,l=5) Table1Resultsofstabilitytests(,l=5) 纳米乳的电导率增加,Zeta电位显着减小,而黏度 和折光率无明显变化(P>0.05),这些指标仅仅是 纳米乳本身的物理性质,对于纳米乳本身的稳定性 几乎没有影响. 2.6a一亚麻酸的GC法测定 2.6.1对照品溶液的制备:精密称取亚麻酸甲酯对 表2纳米乳的黏度,电导率和折光率 Table2Viscosity,conductance,andrefractiratioofnanoemulsion 照品168.72mg,置20mL量瓶中,加正辛烷溶解并 稀释至刻度,摇匀,即得. 2.6.2供试品溶液的制备:取紫苏子油纳米乳100 mg,精密称定,置20mL量瓶中,加0.5mol/L氢 氧化钾甲醇溶液3mL,充氮气,在60?水浴中放置 20min.待油珠溶解,放冷,加15Vo三氟化硼甲醇溶 液4mL,充氮气,在60?水浴放置2min,放冷,精 密加入正辛烷溶液10mL,振摇,加饱和氯化钠溶液 3mL,取上层溶液,即得. 2.6.3色谱分析条件:以OV一225为固定相,涂布 浓度为3.担体为ChromosorbWHP100,120 目,柱长2m,内径2mm,柱温185C,氢焰离子化 检测器(F1D),检测器温度220?,汽化室温度220 ?,氮气流量22mL/min,氢气流量20mL/min,空 气流量300mL/min,在此色谱条件下对照品与供 试品的色谱图见图4. 05101520250510152O25 t/min 1亚麻酸甲酯 1-linolenicacidmethylester (A)和供试品(B)的气相色谱图 图4对照品 Fig.4GasChromatogramofreferencesubstance(A) andsample(B) 2.6.4曲线的制备:精密吸取0.1,0.2,0.4, 0.6,0.8mI对照品溶液,分别置于1mL量瓶中, 依次加入正辛烷溶液稀释至刻度,摇匀,各取1L 注入气相色谱仪.以进样量对峰面积进行线性回归, 得回归方程A一2×10.C+1.971×10,r一0.9996, 线性范围为0.84,6.72g. 2.6.5测定:精密称取紫苏子油纳米乳20mg,制 备供试品溶液,吸取上层液11L,注入气相色谱仪 测定.用外标两点法计算,测定结果乘以0.952,即 得.结果见表3. 表3紫苏子油纳米乳中a一亚麻酸(=3) Table3a—Linolenicacidinnanoemulsion(=3) 3讨论 本研究所选择的模型药物为中药挥发油,对温 度较为敏感,不稳定,故制备时选择在室温下进行, 以减少油的损耗. 紫苏子油中的a一亚麻酸有3个不饱和键,烃链 基上相邻于双键的亚甲基较为活跃,因而紫苏子油 在常温下易挥发,易酸败,难以保存,制约了紫苏子 油的广泛应用,本实验制备的紫苏子油纳米乳克服 了以上问题,为紫苏油的临床应用开拓了新的领域. 纳米乳制备工艺质量评价指标是由纳米乳的微 观结构和特有的理化性质决定的,与乳滴大小,油的 性质,表面活性剂类型及药物的油水分配系数等因 素有关.从载药角度看,表面活性剂用量影响最显 着,表面活性剂用量越高,载药量越大;粒径及其分 布也主要受表面活性剂的影响.在表面活性剂的选 择上,本实验选用无毒性和生物相容性好的非离子 型表面活性剂.它在溶液中比较稳定,不易受强电解 质,无机盐类的影响,也不易受酸碱的影响,溶血作 用较小,刺激性小,无过敏反应. References: [1]GuoY,CaiXC.LiHJ,eta1.EffectofPerillaoilandpinon oilonlipidandlipidperoxidationinrats[J].ActaNutrim, 1996,18(3):268. r2]ShimokawaT,MoriuchiA,HoriT,eta1.Efleetofdietarva一 315 342 士士+ 192 211 555 O52 223 士士+ 1O2 889 444 1O1 222 士士+ 281 99O 445 333 Z41士士+ 3O1 ; 555 332 414士士+ 691 OOO 555 O5O 1 ?1632?中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第11期2007年11月 hnolenate/linoleatebalanceonmeansurvivaltime,incidence ofstrokeandbloodpressureofspontaneouslybypertensive rats[J].LSci,1998,43(25):2067. E3]HiranoJ,IsodaY,NishizawaY.Utilizationofn-3plant oils.perillaandflaxseedoilsEJ].Ynkagaku,1991,40(1O): 942. E4] E5] HoriT.MoriuchiA,0kuyamaH,eta1.Effectofdietaryes— sentialfattyacidonpulmonarymetastasisofascitesrumor ceilsinratsI-J],ChemPharmBull,1987,35(9):3925. ShahDO.HamlinRM.Structureofwaterinmicroemul— sion:electricical,birefringenceandnuclearmagneticreso- nancestudiesLJ].Science,1971,171(2):483—485. 葛根素固体分散体的分散状态及其体外评价 王曙宾,黄兰芷 (1.北京大学药学院北京100085;2.重庆邮电大学生物信息学院重庆400065) 摘要:目的制备葛根素缓释固体分散体,考察其分散状态.方法以乙基纤维素为载 体,制备葛根素缓释固体 分散体,利用x射线衍射试验,差示扫描量热法对葛根素在其中的分散状态进行研 究.并对该胶囊进行体外溶出度 研究.结果x射线衍射图表明葛根素在固体分散体中有一部分葛根是以分子状态 分散,而另一部分可能以微晶 体状态分散.差示扫描量热法试验结果表明,所制备的缓释固体分散体中不存在药 物结晶.溶出度试验结果表明, 该缓释胶囊具有良好的缓释效果.结论采用固体分散技术制备的葛根素缓释固体 分散体完全可以使药物达到高 度分散状态,制备的葛根素缓释固体分散体具有较好的缓释效果. 关键词:葛根素;固体分散体;X射线衍射法;差示扫描量法 中图分类号:R286.1文献标识码:A文章编号:0253—2670(2007)11—1632一O3 Dispersingformofpuerarinsoliddispersionanditsevaluationinvitro WANGShu—bin.HUANGLan—zhi (1?SchoolofPharmaceuticalSciences'PeikingUniversity,Beijing100085,China;2.CollegeofBio—information, ChongqingUniversityofPostsandTelecomunications,Chongqing400065,China) Abstract:ObjectiveInordertoobservethedispersingform,thesustainedreleasesoliddispersion wasprepared.MethodsSustained— releasesoliddispersionwaspreparedbytakingethylcelluloseascarri— er.AndtheX-raydiffraction,differentialscanningcalotimetery(DSC)wereusedtoevaluatethedispers— ingformofpuerarininthepreparationandtostudythesolubilityinvitro.ResultsTheX— raydiffraction experimentshowedthatthepuerarinwasexistedinmolecuarandminicrystalform.DSCExperiment showedthatthereisnopuerarincrystalinthesoliddispersion.Thetestforstrippingshowedthatthare wasabetterreleasingresultsinthesustained—releasecapsula.ConclusionThesustained— releasesolid dispersioncandispersethepuerarinhighlytoincreaseitsbioavailability.Thepreparedcapsul ahasa markedsustained—releaseeffect. Keywords:puerarin;sustained—releasesoliddispersion;X— raydiffraction;differentialscanning calorimetry(DSC) 葛根素口服生物利用度较差,其原因最主要是 水溶性差,在水中的溶解度只有0.011mol/L[1],口 服后难以在胃肠道溶解吸收.因此,如何解决葛根素 溶解性差且尽可能提高其生物利用度,成为含葛根 素制剂成型研究过程中主要考虑的问题.固体分散 体系指药物以微粒,微晶或分子状态等形式均匀分 散在固态载体物质中的体系[2].其主要目的是利用 载体使药物达到高度分散状态,从而提高其生物利 用度,缓释型固体分散体可以使药物在高度分散状 态下延缓释放速率,既提高生物利用度,又达到长效 目的.因此,评价固体分散体的一个主要方面就是研 究药物在其中的分散状态,固体分散体中药物分散 状态一般有分子状态,亚稳定态以及无定型态,胶体 状态,微晶或微粉状态.本实验利用固体分散体的特 点选乙基纤维素为基本载体材料,制备了葛根素缓 释固体分散体,采用了X射线衍射试验,差示扫描 收稿13期:2007—02—25 作者简介:王曙宾(1976一),男,甘肃会宁人,北京大学药学院博士后流动站博士后, 研究方向:中药,天然药物新剂型,新技术研究. E—mail:shubinwang@126.am