【word】 益气养阴活血药物对老龄鼠增龄自由基代谢变化的干预作用

【word】 益气养阴活血药物对老龄鼠增龄自由基代谢变化的干预作用 益气养阴活血药物对老龄鼠增龄自由基代 谢变化的干预作用 ? 522?CJTCMJun.2010Vo1.22No.6 益气养阴活血药物对老龄鼠增龄自由基代谢变化的干预作用 徐燕方朝晖李韬 1合肥工业大学医院安徽合肥230009 2安徽中医学院第一附属医院安徽合肥230031 摘要目的:观察益气养阴活血中药对老龄鼠增龄自由基代谢变化的干预作用.方法:动物实验通过21个月龄的自然衰老大 鼠模型,设立空白对照组(第1组),黄芪组(第2组),制黄精组(第3组),丹参组(第4组),黄芪+制黄精组(第5组),黄芪+ 丹参组(第6组),制黄精+丹参组(第7组);测定各组老龄大鼠血清丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物 酶(GSH—Px),过氧化氢酶(CAT),维生素C(Vc),维生素E(V)及总抗氧化能力(T-AOC)值.结果:?单味中药按总抗氧化能 力而言:第2组>第3组>第4组>第1组,?2组合中药按抗自由基代谢作用:第6组>第7组>第5组>第1组(酶类);第5 >第7组>第l组(非酶类);总抗氧化能力而言:第5 组>第6组 组>第6组>第7组>第1组.结论:益气,养阴,活血中药及 其组合对老年鼠增龄自由基代谢均有一定的干预进而延缓衰老的作用. 关键词大鼠衰老氧化自由基代谢益气养阴活血 衰老是生物界普遍存在的一种自然现象,是一切 多细胞生物随着时间的推移,而现出的各个细胞和 器官功能的不可逆地,全面地,逐渐地丧失.现代研究 表明,由衰老所致的功能下降或疾病,不仅可以预防而 且可以逆转.我国6o岁以上老人已逾亿,占总人口的 10%以上,国际人口老龄化趋势正在迅速增长,不少国 家已进入老龄社会,延缓衰老已成为世界性的重大医 学课.随着近年来分子遗传学,分子生物学,免疫学 等方面研究的深入,延缓衰老的重点集中在阐明其病 理机制上,现代医学提出了一系列学说,如自由基学 说,遗传程序学说,交联学说,端粒酶学说等,尤其认为 自由基学说占有重要的地位,同时开发一系列抗衰老 制剂或药物,如抗氧化剂(SOD等),免疫制剂(胸腺素 等),脂褐素清除剂(氯酯醒等),但均因其有难以克服 的副作用,而导致临床效果不佳,中医药延续衰老在整 体观念,多途径,多环节综合作用等方面表现的优势己 越来越被人们接受和重视. 材料 1实验动物 健康老年Wister大鼠70只,月龄21个月,体重 (350土100)g,雌雄不拘.由安徽医科大学动物中心和 安徽中医学院经络所动物房提供. 2药品与试剂 2.1黄芪颗粒剂每袋相当于生药10g,单味浓缩颗 粒剂,广东,方制药厂生产,批号990232.取颗粒加 水,配制成20%浓度,约每毫升药液中含生药量O.2g. 2.2丹参颗粒剂制剂及配制方法同上. 2.3制黄精为囊丝黄精的干燥根茎,产地为安徽铜 陵山区,洗净泥土,略润,切片,晒干备用,用时水煮沸 30分钟过滤,重复2次,去渣合并滤液,浓缩成20%的 水煎剂. 2.4试剂盒丙二醛试剂盒,超氧化物歧化酶试剂 盒,谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒,过氧化氢酶试剂盒, 维生素C,维生素E,总抗氧化能力试剂盒均由南京建 成生物工程研究所提供. 3仪器与设备 80-2离心沉淀器(上海手术器械厂产品),721可 见光分光光度计(上海第三分析仪器厂产品),HH. W21-600型电热恒温水温箱(北京市医疗设备厂产 品),FA2104上器电子天平(上海天平仪器厂产品). 方法 1动物处理 1.1给药方法选择21月龄Wister大鼠作为自然衰 老的动物模型n动物房温度18%?2o【=,专用动物饲料 饲养1周后,随机分为7组,各组均同时开始灌胃,第1 组予生理盐水,第2组予黄芪,第3组予制黄精,第4组 予丹参,用量均为0.1g/100g;第5组予黄芪?制黄精, 第6组予黄芪?丹参,第7组予制黄精-I-丹参,用量均 为0.2g/100g;相当于成人临床用量的6倍,疗程6周. 1.2大鼠血清标本采集造模6周末次用药24h后, 用20%乌拉坦溶液按大鼠体重以0.5ml/100g剂量,予 腹腔内注射麻醉,由腹主动脉抽取4,6ml血液,4000r ×10分钟离心,取血清,置于一70~C冰箱待测. 2观察指标 丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽 过氧化物酶(GSH.Px),抗坏血酸(Vc),维生素E(V), 总抗氧化能力(T.AOC)测定.具体操作步骤按试剂盒 说明书进行. 3统计方法 计量资料,以(?s)统计,样本例数相同的组间比 较用F检验. 中医药临床杂志2010年12月第22卷第6期 结果 13种单昧中药对衰老大鼠自由基代谢的影响 见表1. ?三用药组血清MDA含量均低于第1组(P<0. 05).?三用药组血清SOD均显着高于第1组(P<0. 01,P<0.001).?第2组血清V高于第1组(P<0. 05).?第3组与第1组其余各项指标无明显差异(P ? 523- >0.05).?第4组血清CAT高于第1组(P<0.05). ?第3组血清V低于第2组(P<0.05).?第4组血 清GSH.Px,Vc,V均低于第2组(P<0.05).?第4 组血清CAT高于第3组(P<0.05),但GSH-Px低于第 3组(尸<0.05). 上述结果提示:按总抗氧化能力而言:第2组>第 3组>第4组>第1组. 表13种单昧中药对衰老大鼠自由基代谢的影响(4-s) 注:与第l组(空白对熙组)比较:’P<O.05,一P<O.01,…P<O.001; 与第2组(黄芪组)比较:P<O.05;与第3组(制黄精组) 比较:P<0.05;第4组为丹参组. 22组合中药对衰老大鼠自由基代谢的影响 见表2. ?三用药组血清MDA均低于第1组(P<0.05). ?第5组血清VE,T—AOC高于第1组(P<0.05),但 GSH—Px低于第1组(P<0.05).?第6组血清SOD 较第1组有明显升高(P<0.001),CAT,V高于第1组 (P<0.05),但Vc低于第l组(P<0.05).?第7组 较第1组血清SOD,GSH—Px,CAT,Vc,VE,T-AOC均无 差异(P>0.05).?第6组血清SOD,GSH.Px,CAT均 高于第5组(P<0.01,P<0.05,P<0.05),但Vc,T- AOC均低于第5组(P<0.05).?第7组血清GSH—Px 高于第5组(P<0.05),但VT-AOC均低于第5组(P <0.05).?第7组血清SOD,V均明显低于第6组 (P<0.01),但Vc高于第6组(P<0.05). 上述结果提示:按抗自由基代谢作用:第6组>第 7组>第5组>第1组(酶类);第5组>第6组>第7 组>第1组(非酶类);总抗氧化能力而言:第5组>第 6组>第7组>第1组. 表22组合中药对衰老大鼠自由基代谢的影响(?s) 注:与第1组(空白对照组)比较:’P<O.05,一P<0.01,…P<0.001; 与第5组(黄芪+制黄精组)比较:P<0.05,”P<O.01, ??P<0. 001;与第6组(黄芪+丹参组)比较:P<O.05,”P<0.01;第7组为制黄精+丹参组. 讨论 衰老是生命过程中的一种固有现象,任何个体随 着时间的推移,其细胞组织和脏器在形态和功能方面 都将出现进行性衰退,这种生命活动全面下降的总和 称衰老.衰老具有积累性,普遍性,渐进性,内因性和 有害性五个特征.1956年,Hannah正式向科学界提出 了自由基衰老理论,从分子水平揭开了随机性衰老 理念的序幕,此后,该理论又进一步发展为氧化应激衰 老理论,该系列的理论很好地回答了需氧生化副反 应的随机伤害,并一跃成为最受关注的衰老理论. 现代对衰老的研究表明,衰老与气虚,阴亏,血 瘀密切相关,同时,衰老的自由基理论己较为成熟,认 为自由基对细胞组织损害是衰老的重要原因,并且自 由基与气虚证,血虚证,血瘀证,痰证等均有密切关系. 从能量代谢方面而论,细胞内ATP合成不足是产生气 虚证的内在物质基础,而ATP合成率降低又与自由基 代谢有密切联系,主要是由于致病因素引起机体清除 自由基的能力下降,积累过剩的自由基首先与线粒体 ? 524? 内膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化,破坏膜脂层结构, 导致膜脂层排列松散,内膜嵴减少,其合成ATP的效率 降低,形成由自由基反应诱发的细胞结构与功能交替 损伤的恶性循环,以致维持正常生命活动的能源(气 力)不足,产生各种气虚证候.故自由基代谢失衡可能 是气虚证产生的机制之一. 因此,可以认为益气养阴活血中药对老龄鼠增龄 自由基代谢变化有确切的干预作用,益气养阴活血中 药清除自由基的酶类和非酶类物质的活性或含量以及 CJTCMJun.2010Vo1.22No.6 影响自由基代谢的链级反应,是其发挥的部分机理. 参考文献 1赵彩红,王钦富.小鼠自然衰老模型的评价.中国行为医学科学, 20o3,12(5):33 2HarmanD.Freeradicaltheoryofaging:anupdate:increasingthefune- tionallifespan.AnnNYAcodSei,2006,1067:10 3SohalRS,WeindmehR.Oxidativestrss,calorierestrictionandaging. Science,1996,273:59 4薛雨芳.中医衰老学说研究的再思考.北京中医药大学, 1997,20(3):l1收稿日期:2010—07—25责任编校:杨永晖 ? 临床报道? 柴葛解肌汤合银翘散加减治疗低热66例 关键词低热柴葛解肌汤银翘散 理萍 河南省西华县中医院466600 在门诊常遇见这样一类病例,因各种原因引起的高热 (器质性病变除外),在治疗几天后,往往转为低热,持续不 退,究其原因,往往是因为大剂量应用抗生素和激素的结 果,笔者应用柴葛解肌汤合银翘散加减治疗此类低热,屡获 奇效,现将2001--2007年在案的66例总结如下. 临床资料 1一般资料 66例均为本院门诊或住院病人,男34例,女32例;年 龄最小2岁,最大7O岁,其中2,16岁36例,l6,30岁16 例,4O岁以上14例;体温在37.3?,38.5?之间;病程4, 3O天;66例中有56例初始体温39?以上,抗生素治疗后持 续低热2,3周.66例中上呼吸道感染46例,急性化脓性 扁桃体炎6例,腮腺炎8例,肺炎4例,细菌性痢疾2例. 2诊断 西医诊断依据参照《内科疾病鉴别诊断学》…拟定:发 热,体温较正常人升高约0.3?,0.5~C,一般不超过38~C. 经反复体检,病理学和实验室检查,除体温升高外未见其他 异常者. 3治疗方法 根据中医辨证分型多属少阳证,邪在半表半里,枢机不 利.治宜和解少阳,疏透枢机.药物组成:柴胡,黄芩,葛 根,金银花,连翘,薄荷,桔梗,半夏,杏仁,甘草.儿童用量 酌减,成人用量稍增.夹湿者,加香薷,佩兰;夹暑者加知 母,石膏,纳差者加鸡内金,焦三仙.本方不宜久煎,每日1 剂,每剂煎3次混合,分3次服,每次约200mL. 4治疗结果 治愈:热退,伴随症状消失,精神体力恢复正常,2周内 无复发.无效:经治2周以上发热不退,或体温未降至正 常,或2周内复发,或自行终止治疗. 66例中,服2剂有效者42例,3剂有效者14例,6剂有 效者8例,无效者2例. 5病案举例 某女,34岁,2007年4月6日初诊,患者因发热(39. 2~C),咳嗽,在本院应用抗生素及对症治疗7天,转为低热 (37.4?,37.8?),持续不退,邀余会诊,诊见:发热(37. 8~C),咳嗽,乏力,纳差,13干,舌质红,苔稍厚,脉弦.小便 正常,大便干,肺部听诊未闻及干,湿哕音,血,尿,粪常规正 常,胸透无异常,诊为:低热,邪在少阳.处以柴葛解肌汤合 银翘散加减,柴胡15g,黄芩12g,金银花15g,连翘12g,葛根 12g,桔梗12g,炒杏仁12g,法半夏12g,甘草lOg,每日1剂, 煎3次,取汁600ml,分3次服.4月10日二诊,服3剂后热 退,咳嗽明显好转,上方加鸡内金15g,焦三仙各15g,陈皮 12g,调理脾胃,又服3剂,咳嗽症状消失,食欲增加,13干, 乏力症状减轻,病告痊愈.2周后随访未复发. 体会 66例病例中,因各种原因引起的高热,经抗生素输液治 疗后,转为低热,持续不退.细究其因,其中有一部分是人 为因素,无论是儿童或是成人,只要一见发热,尤其是高热, 患者家属要求医生给予抗生素治疗,部分医生为了迎合患 者的心理,减少医疗纠纷,在没有抗生素应用指征的情况 下,滥用抗生素.更有甚者,为了追求速效,滥用激素,这种 现象在基层很普遍,尤其是个体诊所更为严重. 低热可见于各种疾病中,疾病的初始阶段邪气盛而正 未衰,邪,正交争激烈,此时大剂量应用抗生素(一般抗生素 偏寒凉),致使邪入里,邪在半表半里,枢机不利,易致低热 持续,此时汗,吐,下皆非所宜,唯当和解,以柴胡疏透半表 半里,黄芩清泻里热,葛根解肌退热,金银花,连翘清热解 毒,辛凉透表,薄荷辛凉宣散透热外出,桔梗,杏仁开宣肺 气,甘草调合诸药,共凑辛凉宣散,解肌清热之效,全方切中 病机,屡获佳效. 参考文献 1邝贺龄,胡品津主编.内科疾病鉴别诊断学.第5版.北京:人民卫 生出版社.2006.35 收稿日期:2010—07—26责任编校:杨永晖