以芦丁为对照品

以芦丁为对照品 以芦丁为对照品用吸光光度法测总酮含量 1 仪器与试剂 1. 1 仪器:紫外光谱仪，(梅特勒)电子天平，恒温水浴锅，常规玻璃仪器; 1.2 试剂:甲醇，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠试剂均为分析纯 芦丁对照品溶液的制:备精密称取120度下干燥至恒重的芦丁对 50mL容量瓶中加甲醇约30mL置水浴上微热使溶解放照品100mg置 冷加甲醇稀释至刻度摇匀精密量取10mL置100mL容量瓶中加甲醇稀释至刻度摇匀即得无水芦丁0.2mg/ml的对照品溶液置冰箱备用。 样品的制备 精密称取火棘果提取液样品0.05g精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。 2、曲线的制备 精密吸取芦丁对照品溶液0.00，1.00， 2.00， 3.00，4.00，5.00，6.00 mL( 相当于0，0.2，0.4， 0.6，0.8，1.0，1.2 mg 芦丁) 分别置25mL容量瓶中，各加水至6mL，分别加5%亚硝酸钠溶液1mL 摇匀，放置6min后，分别加1%硝酸铝溶液1mL摇匀放置6 min，再分别加4%氢氧化钠试液10mL再加水至刻度摇匀，放置15min，照分光光度法在500nm波长处测定吸收度A。以吸收度A值对浓度进行回归计算其回归方程。 待测样品的含量测定: 分别精密量取供试液5mL置25mL容量瓶中照标准曲线方法进行测定显色在500nm波长处测定吸收度A(空白对照),另分别精密量取供试液5mL(待测样品)，置25mL容量瓶中加蒸馏水至刻度摇匀在500nm波长处测定吸收度A取二次吸收度差值由回归方程计算样品中总黄酮含量。 1 2 3 4 5 6 7 空白 未知 C 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 A