炙淫羊藿饮片稳定性初步研究

炙淫羊藿饮片稳定性初步研究 炙淫羊藿饮片稳定性初步研究 一 266一 南京中医药大学2011年5月第27卷第3期 JOURNALOFNANJINGTCMUNIVERSITYVo1.27No.3May.2011 炙淫羊藿饮片稳定性初步研究 陈玲玲,贾晓斌,蔡宝昌 (1.南京中医药大学药学院,江苏南京210046;2.江苏省中医药研究院中药新型给药系统重点实验室,江苏南京 210028) 摘要:目的考察炙淫羊藿饮片的稳定性.方法对炙淫羊藿饮片中淫羊藿苷,宝藿苷I进行薄层色谱鉴别,水分,灰分 以及酸不溶性灰分测定;以紫外分光光度法测定炙淫羊藿饮片总黄酮含量,以HPLC测定淫羊藿苷,宝藿苷I,考察炙淫 羊藿饮片稳定性.结果室温留样和加速实验考核项目均符合要求.结论炙淫羊藿饮片稳定性良好;高效液相色谱 法测定炙淫羊藿中淫羊藿苷及宝霍苷I准确可靠,为炙淫羊藿的质量控制提供了科学依据. 关键词:炙淫羊藿;饮片;稳定性 中图号:R282.71文献标志码:A文章编号:1672—0482(2011)03—0266—03 InitialStudyontheStabilityofPrenylflav0nOidsinProcessedHerbaEpimedii CHENLing—ling,JJlAXiao—bin,",CAIBao—chang r1.SchoolofPharmacyofNanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing,210046,China; 2.KeyLaboratoryof NewDrugDeliverySystemofChineseMeteriaMedica,JiangsuProvincialAcademyofChin eseMedicine,Nanjing, 210028,China) ABSTRACT:OBJECTIVETostudythestabilityofprocessedHerbaEpimedii.METHODSTheindexesofthin—layer chromatography,watercontent,ashcontentandacid— insolubleashcontentweredeterminedandthetotalflavonoidsof processedpiecesofHerbaEpimediiwasmeasured.Meanwhile,HPLCmethodwasadoptedtOsimultaneouslydetermine icariinandbaohuosideI.RESULTSCheckiternslikecharacteristics,identification,detectio n,contentdeterminefromsta— bilitystudyinroomtemperaturestationarysampleandacceleratestationarysampleallfittheb il1.CONCLUSIONPro— cessedHerbaEpimediiiSstableandHPLCmethodwhichsimultaneouslydeterminesicariinandbaohuosideIprovidessci— entitlebasisforthequalitycontrolofprocessedHerbaEpimedii. KEYWORDS:HerbaEpimediiprocessed;decoction;stability 淫羊藿始载于《神农本草经》,具有补肝肾,强 筋骨,祛风湿之功效,经羊脂油炙后,可增强温肾 助阳的作用口],即为临床常用的炙淫羊藿.采用 室温留样和加速留样稳定性试验考察3批中试炙 淫羊藿饮片在3个月内性状,鉴别,水分,总灰分, 酸不溶灰分,总黄酮含量,淫羊藿苷和宝藿苷I含 量的变化,为炙淫羊藿饮片贮存及质量制定 提供科学依据. 1材料 1.1仪器 CG一750H杭春自控温鼓式炒药机(杭州春江 自动化研究所);SX24—10试验电阻炉(南京真空 电炉厂);DHG一9070A型电热恒温鼓风干燥箱 (上海精宏试验设备有限公司);数显恒温气浴振 荡器(丹瑞试验设备有限公司);UV一2802型紫外 可见分光光度计(上海尤尼柯仪器有限公司);美 国Waters公司高效液相色谱仪(Waters600型 泵,Waters2996紫外检测器,Waters717自动进 样器),Empower数据处理系统;KQ52oo型超声 波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);MET— TLERTOLED0分析电子天平(瑞士MET— TLERTOLEDO公司). 1.2试剂和药材 淫羊藿苷(中国药品生物制品检定所,批号: 收稿日期:2011—01—21;修稿日期:2011—04—21 基金项目:国家自然科学基金(80572872);国家药典委员会资助项目(YS-240) 作者简介:陈玲玲(1986一),女,江苏盐城人,南京中医药大学2008级硕士研究生.* 通信作者:025—85637809 陈玲玲,等:炙淫羊藿饮片稳定性初步研究第3期 110737—200312);宝藿苷I对照品(自制,纯度> 98);甲醇,乙腈为色谱纯,水为高纯水,其余试 剂均为分析纯; 3批中试炙淫羊藿饮片来源浙江中医药大学 中药饮片厂,批号:甘肃080601,辽宁080815,台 江081217,经中国医学科学院北京协和医学院药 用植物研究所郭宝林教授鉴定为心叶淫羊藿,朝 鲜淫羊藿和柔毛淫羊藿. 2方法与结果 2.1薄层色谱鉴别 参照2010版《中华人民共和国药典》附录? B薄层色谱法.结果表明3个批次经室温留样 及加速留样3个月,均能检出淫羊藿苷及宝霍苷 I. 2.2检查方法 水分测定法,总灰分和酸不溶性测定法分别 按2010版《中华人民共和国药典》一部附录?H 之"烘干法",附录?K之"总灰分测定法"和"酸 不溶性灰分"测定法,结果见表l,表2. 2.3含量测定方法 2.3.1总黄酮含量测定方法 2.3.1.1对照品溶液的制备 精密称定淫羊藿苷1.00mg,置于1OmL容 量瓶中,加甲醇定容至刻度,得100.4p.g/mL淫 羊藿苷储备液. 2.3.1.2供试品溶液的制备 精密量取2.3.2含量测定项下供试品溶液 0.5mL,置50mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀, 作为供试品溶液. 2.3.1.3方法学考察 精密吸取适量淫羊藿苷储备液,分别加入甲 醇稀释成不同浓度的对照品溶液.以吸光度值为 纵坐标(y),对照品浓度(p.g/mL)为横坐标(X), 绘制淫羊藿苷回归曲线:y一0.0403X+0.0122, r一0.9999,线性范围为2.01,20.08ptg/mL,平 均加样回收率为99.81,RSD为2.33. 2.3.1.4样品测定 精密量取2.3.2测定项下供试品溶液0.5 mL,置5OmL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,以相 应试剂为空白,照分光光度法(2010版《中华人民 共和国药典》附录VA),在270nm波长处测定 一 267一 吸光度,计算总黄酮的百分含量.结果见表1,表 2. 2.3.2淫羊藿苷及宝霍苷I含量测定方法 2.3.2.1色谱条件 参照2010版药典淫羊藿"含量测定"项. 2.3.2.2对照品溶液制备 精密称定对照品淫羊藿苷8.52mg,宝藿苷I 5.16mg置于10mL容量瓶中,甲醇定容至刻度, 得0.852mg/mL淫羊藿苷,0.516mg/mL宝藿 苷I混合标准品储备液. 2.3.2.3供试品溶液的制备 取炙淫羊藿饮片叶丝粉末(过3号筛)约0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50乙 醇2OmL,称定质量,超声处理60min,再称定质 量,用50乙醇补足减失的质量,摇匀,用0.45 肚m微孔滤膜过滤,取续滤液,即为供试品溶液. 2.3.2.4方法学考察 精密吸取2.3.2.2项下对照品溶液适量分别 置于10mL容量瓶中,得一系列标准品溶液,精 密吸取各标准品溶液10L注入液相色谱仪,测 定峰面积,以峰面积为纵坐标(y),对照品浓度 (p.g/mL)为横坐标(X),得淫羊藿苷线性方程:y 一 2476068X一140772,r一0.9999,宝藿苷I线 性方程:y一911738X一32080,r一0.9998,平均 加样回收率分别为100.94,99.03. 2.4室温留样稳定性试验 取3批中试样品按原包装在自然条件下避光 保存,留样考察.按0,1,2,3月时问间隔,进行稳 定性考察,按质量标准草案中的项目和方法检验, 测定,考察结果见表1. 2.5加速留样稳定性试验 取3批中试样品按原包装在温度为40.C,相 对湿度为759/6条件下保存,留样考察.按0,1,2, 3月时间间隔,进行稳定性考察,按质量标准草案 中的项目和方法检验,测定,考察结果见表2. 3讨论 3批中试炙淫羊藿饮片在3个月的室温留样 稳定性研究和加速稳定性研究中,性状,鉴别,水 ,酸不溶性灰分,总黄酮含量,淫羊藿苷 分,总灰分 和宝藿苷I都没有发生显着的变化,表明炙淫羊 藿饮片稳定性良好. 一 268一南京中医药大学2011年5月第27卷第3期 表1炙淫羊藿饮片室温留样试验结果() 文献报道淫羊藿苷,宝藿苷I等具有8位异 戊烯基的淫羊藿黄酮类成分具有较强的生理活 性_3],淫羊藿饮片炮制后淫羊藿苷及宝藿苷I大 量增加],且低糖苷(如淫羊藿苷和宝藿苷I)渗 透性要好于多糖苷(如朝藿定A,朝藿定B和朝 藿定C)[53,2010版药典已将淫羊藿苷及宝霍苷I 作为炙淫羊藿饮片中质量考察指标,本文采用反 相高效液相色谱法测定饮片中淫羊苷及宝霍苷I 的含量,考察了3个月内炙淫羊藿饮片中淫羊藿 苷和宝藿苷I的含量变化,旨在为炙淫羊藿饮片 的质量标准的制定提供科学依据. 参考文献: [1]徐世明,王远清,朱朝德.中药淫羊藿的质量研究—— 羊脂油炮制前,后淫羊藿苷的含量比较[J].中成药,1985, (2):16—17. [2]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典: 一 部Es].北京:中国医药科技出版社,2010:306—308. [3]陈彦,赵艳红,贾晓斌,等.RP-HPLC法同时测定不同 品种淫羊藿药材中5种主要黄酮类成分的含量E3].中国 药房,2008,19(6):431—432. [4]王亚乐.淫羊藿黄酮苷类物理一生物转化及其机理研 究[D].江苏:江苏大学,2008. E5-]ChenY,ZhaoYH,JiaXB,eta1.Absorptionmecha— nismsofprenylatedflavonoidsandeffectsofheatprocess— ingontheirstabilityandintestinal[J].PharmaceuticalRe— search,2008,25(9):2190—2199. (编辑:李伟东)