3种补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸西地那非的含量测定方法研究

3种补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸西地那非的含量测定方法研究 3种补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸 西地那非的含量测定方法研究 3种补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸 西地那非的含量测定方法研究 粱丽梅 (广东省人民医院药学部,广东广州510080) 摘要目的:探讨补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸西地那非的含量测定方法.方法:采用高效液相色 谱法,色谱条件:kromasil-c(250X4.6mm,5m)为固定相,乙腈,水一冰醋酸-三乙胺(35:65:0.8:0.4v/V)为 流动相,流速0.8ml/min,紫外检测波长290nm.结果:枸橼酸西地那非的浓度在10,800ml范围内呈良好的 线性关系.结论:本法可作为补肾壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸西地那非的含量测定方法. 关键词补肾壮阳药;中药制剂;枸橼酸西地那非;含量测定 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1001_4454(2006)06-0613-02 枸橼酸西地那非(英文名称为Sildenafiltit- rate),商品名称为Viagra(译名:伟哥,威而钢),通 称"伟哥",是治疗男性勃起功能不良(erectiledys— function,简称ED,俗称"阳痿")的一种药物.具有 确切的疗效,但同时也存在某些严重的不良反应,尤 其是患者在不知情的情况下服用,如果本身患有冠 心病,高血压,脑血栓和年纪偏大者,或者同时服用 硝酸酯类或提供硝酸根的药物,很可能引起心肌梗 塞甚至死亡,导致严重的药物不良事件.目前,补肾 壮阳类中药制剂中违法添加枸橼酸西地那非的情况 甚为严重,一些违法添加了枸橼酸西地那非的"药 准字号"中药制剂也曾进入某些医院药房.现有的 高效液相色谱检测法(HPLC)存在易损坏分析柱, 采用的流动相多为0.05M磷酸三乙胺(pH=3.2)一 甲醇.乙腈?-31,该流动相组成中含有非挥发性盐缓 冲系统,不仅需要调节pH值,操作繁琐,而非挥发 性盐对色谱系统易造成影响,且实际应用中发现该 方法色谱分离条件欠佳,易受干扰,误检率高等问 题,有待改进.本文改进了HPLC法测定中药制剂 中枸橼酸西地那非含量的色谱分离条件,采用乙腈- 水.冰醋酸-三乙胺(35:65:0.8:0.4v/v)为流动相, 与现有的枸橼酸西地那非HPLC分析法比较,该流 动相不含非挥发性盐缓冲系统,避免了不挥发性盐 对色谱系统造成的影响;且该流动相配制时不需要 调节pH值,容许有较大的误差而不影响分离效果, 既简化了操作,又能使目标成分与干扰成分获得良 好的分离,提高检测率. 1仪器与试药 WATERS高效液相色谱仪,486紫外检测器, 510泵,超声波仪,旋涡混合器,离心机,天平,三锐 工作站;枸橼酸西地那非标准品(广州市药检所提 中药材第29卷第6期2006年6月 供);乙腈:色谱纯(美国FisherScientific产品);冰 醋酸;三乙胺,甲醇均为分析纯;实验用水为超纯水. 药物壮元春,壮霸三肾丸,藏精丸均为市售. 2色谱条件 色谱柱为kromasil-CI8(250X4,6mm,i.d.5 Ixm);流动相为乙腈.水.冰醋酸-三乙胺(35:65:0.8 :0.4v/v);流速为O.8ml/min;紫外检测波长为290 nm;进样量为1Ol. 3方法与结果 3.1对照品贮备液的制备精密称取枸橼酸西地 那非对照品0.1000g,置100ml量瓶中,加甲醇溶 解并稀释至刻度,得浓度为1mg/ml的对照品贮备 液. 3.2线性关系考察精密量取对照品贮备液各适 量,分别用甲醇稀释制定成浓度为0.01,0.1,0.2, 0.4,0.6,0.8mg/ml系列溶液,分别进样10I,测 定各浓度对应的峰面积值.以对照液的浓度为横坐 标,其峰面积值为纵坐标进行直线回归,得回归方程 Y=-72681.0+22307057.4X(r=0.9998,n=6),结 果表明枸橼酸西地那非浓度在10-800ml范围 内线性关系良好. 3.3精密度试验精密量取浓度为0.01mg/ml 的对照品溶液10l,重复进样6次,以峰面积值考 察精密度,结果为212050.2,218652.8,211638.2, 218026.5,214477.2.214820.3,RSD为1.5%. 3.4对照品溶液稳定性考察量取浓度为0.4 ml/min的对照品溶液配置后分别于0,2,4,6,8,10 h依法测定,测定结果的RSD为1.67%(n=6),表 明对照品溶液配置后10h内保持稳定. 3.5供试品溶液的制备与测定取样品壮元春, 壮霸三肾丸,藏精丸各约0,5g精密称定,分别用5 ? 613? ml水溶解,再加15ml甲醇于旋涡混合器上旋涡1 min,然后于超声仪上超声萃取30min,冷却后用甲 醇定容至25m1,最后用0.45m微孔滤膜过滤,取 续滤液进样.每一样品取样5份平衡测定,结果见 表1. 表1样品测定结果(n=5) 3.6加样回收率试验精密称取样品壮元春0.1 g置具塞烧瓶中,精密加入对照品贮备液1ml,然后 加入5ml水溶解,再加入l5ml甲醇于旋涡混合器 上旋涡1rain,最后于超声仪上超声萃取30min,溶 液冷却后转至100ml量瓶中,加甲醇至刻度,用 0.45m微孑L滤膜过滤,取续滤液进样.同批样品 取样5份,同法试验,平均回收率为96.1%,RSD= 1.81%. 4讨论 4.1色谱条件的选择在本文确定的色谱条件下 试验以不同流动相的比例考察色谱条件的分离效 果,发现当流动相中乙腈与水的体积比为40:60时, 保留时间T一8min,虽然能将目标成份与干扰成分 分离,但目标成份临近的成份峰较近,当流动相中乙 腈与水的体积比为35:65时,分离度R为6.346,保 留时间T=12.962rain,理论塔板数为3532.为了 确保目标成份与其他成份能够完全分离,流动相中 乙腈与水的体积比以低于40:60为合适. 4.2样品前处理方法本文采用的样品前处理方 法先用少量的水溶解样品,然后用甲醇提取,由表2 可见,本文设计的样品前处理方法已能达到了有效 的提取率,且操作简便,从整体回收率看,实测值比 理论添加值均略低,欲进一步提高提取率,尚待进一 步研究. 5小结 本法具有操作简便,分离效果满意,结果准确可 靠的特点,可作为补肾壮阳类中药制剂蜜丸中违法 添加枸橼酸西地那非的含量测定方法.本文只讨论 了蜜丸,其他剂型有待进一步的研究. 参考文献 [1]鲁琳,高燕红,李少霞,等.高效液相色谱-二极管阵列 检测法测定保健食品中枸橼酸西地那非的研究.中国 卫生检验杂志,2005,l15(9):1052?1054. [2]雷灼雨,罗萍,周渝南.补肾壮阳药中枸橼酸西地那非 的含量测定.中国药业,2005,14(3):4041. [3]张启明,尹华,黄海伟,等.检查中药中非法掺入枸橼酸 西地那非的方法研究.药物分析杂志,2002,122(4); 315.317. (2005—12—20收稿) HPLC法测定藿香正气方SFE—CO2提取物 中厚朴酚,和厚朴酚的含量 蔡庆群',黄耀海,席萍',江滨,曾元儿 (1.广州中医药大学第一附属医院,广东广州510405;2.广州中医药大学,广东广州510405) 摘要目的:用HPLC法测定藿香正气方挥发性药材SFE.CO提取物中的厚朴酚,和厚朴酚的含量.方法:色 谱柱为250/4.6Nucleodurcl8Gravity5m;流动相为甲醇?1%冰醋酸(69:31);流速1ml/min;柱温是室温(22~C); 检测波长294am.结果:厚朴酚线性回归方程为Y=23.8061+1284.3727X,r=0.9998, 在0.30800—1.54000g呈 良好线性关系;和厚朴酚线性回归方程为Y=2.1191+1381.9012X,r=0.9995,在0.02288—0.11440g呈良好线 性关系.结论:本法稳定,灵敏,可行. 关键词藿香正气方;SFE—CO;厚朴酚;和厚朴酚;含量测定 中国分类号:R286.2文献标识码:A文章编号:1001.4454(2006)06-0614-02 藿香正气方具宣化湿浊,疏畅气机,调理胃肠功 能,是中医治疗外感风寒,内伤湿滞所致的恶寒发 热,头重胀痛,胸膈痞闷,呕吐泄泻首选方剂.原方 作者简介:蔡庆群,从事中药制剂研究.电话36591243. 614? 共有广藿香,白芷,紫苏叶,白术(炒),陈皮,厚 朴(姜制),生姜,大腹皮,茯苓,桔梗,半夏(姜制),甘草, 大枣十三味药材.据药理研究,该方有效成分之 中药材第29卷第6期2006年6月