【doc】骨髓增生异常综合征的染色体变化和病态造血

【doc】骨髓增生异常综合征的染色体变化和病态造血 骨髓增生异常综合征的染色体变化和病态 造血 第l2卷第5期 1990年l0月 V01.12,No.5 Octot~r,l990 骨髓增生异常综合征的染色体 变化和病态造血 蒋其波杨崇礼李幼升李来全 赵玉兰李孝义孙元木冯宝章 (血液学研究所,天津) . 提要本文用短期培养法,G显带技术研究51蜊骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓棱型变 化,并用记分法定量研究46例MDS的病态造血的程度.结果表明.克隆性染色体异常率为49%,最 常见的异常为+8检出染色体均染区2饲,提示癌基因扩增;橙出自发性早熟凝聚染色体6例,与 多核细胞及多倍体细胞相关.发现病态遣血严重者其核型异常率也较高 关键词骨鹫增生异常综合征染色律病态造血 骨髓增生异常综合征(MDS)的血液学特征是红,粒和巨核系统病态造血 (dyshemopoiesis)J,其主要表现为细胞核呈各种形态异常:间期细胞核在分裂中期即形成染 色体,且染色体变化反过来又在一定程度上影响细胞增殖和分化.MDS病态造血与染色体 改变的内在联系,目前尚不清楚.作者初步观察了5l例MDS患者的骨髓细胞G带核型和 其中46例病态造血的表现,为了解染色体变化的特点及其与病态造血的关系提供了依据. 与 一 ,病例选择1986年1O月,1988年2月在本院就诊患者51倒,其中难治性贫血 (RA)34例,RA伴环形铁粒幼细胞增多(RAs)4例和RA伴原始细胞增多(RAEB)13 例.MDS诊断标准参照1982年FAB建议…和全国第一次MDS讨论会(1986年,天津)关 于MDS的一些建议.全部患者除1例RAEB外,余均未接受过化疗. =,骨髓细胞染色体检查51例患者均采用24h短期培养法,G显带.每例患者镜下分 析30个以上中期相,最多达103个:显微照相每例4,10个以上中期相,按ISCN(1978) 标准组型.异常克隆的确定符合至少2个细胞有相同的多余染色体或结构重排,或至少3 个细胞丢失相同的染色体. 三,病态造血的观察对5l例患者中46倒的血和骨髓涂片标本进行观察,井以I5例原 发性血小板减少性紫癜,慢性再生障碍性贫血和自身免疫性溶血性贫血患者的血和骨髓浍片 作对照.所有患者和对照者骨髓片均分类计数1000个有核细胞,血片分类计数200个自细胞. 对病态造血采用积分方式,出现下列任一异常者记1分:?红系统:数量变化(<5%, 本文于1988年9月15日收到包头钢铁公司医院进修生 342中国医学科学院12卷 >50~/o,原始或早幼红细胞增加或外周血出现有核红细胞),核异常(类巨幼变,多核或核碎 裂?1%),胞浆异常(点彩多嗜,H—J小体和巨大红细胞).?粒系统:数量变化 (>70%或原始早幼和中幼粒细胞增加),核异常(Pelger—Hiiet样变化,多核,巨幼样变 或分叶过多?1‰),颗粒异常(无,大量增多或异常粗大?lO%).?巨核系统:巨核细胞数 量异常(>70/2×3em或<5/2×3cm玻片,外周血出现小巨核细胞),巨核细胞形态异常 (淋巴样小巨核,单圆及多圆核小巨核或大单个核巨核细胞?1‰),血小板异常(呈大 片状堆积或巨大血小板). 本实验病态造血分类标准:I级1,3分,II级4,6分,III级7,9分.同时观察 记录骨髓片中微核(micronudeus)和多核细胞比例,以探讨其与染色体变化的关系 四,统计学处理xz检验和u检验. 结果 一 ,MDS患者的染色体异常 5l例患者中25例发现克隆性异常,其中+8者7例,dup(1)(q25q44)者2例, 裹125例MDS患者初诊肘的异常核型 l'able125ca&esofMDSwithabnormalkaryotypeatiaitialdiagaosis transformedtoRAEB:II'ansformedtoANLL 5期骨髓增生异常综台征的染色体变化和病态造血343 20q者2例,其他异常1P,一2,4p,一5,8p,一12,12p,12q一,?21,?22,一X, 一 Y和+Mar等14例(表1,圉1,4).随访中发现多数患者无核型演变,仅例31初诊时为 20q,3月后发现迟发性(1ateappearing)5q一.检出多克隆异常8例,其中1例RA和1例 RAEB有染色体均染区(homogeneouslystainingregion);5例RA和1例RAEB发现 自发性早熟凝聚染色休(prematurelycondensedchromosome,PCC.表2,圈5),其中2 例 在复查对仍可见.由于PCC形态不同,分为G1期PCC,S期PCC及G2期PCC 表26例MDS患者的自发性PCC Talkie2SpontaneousPCCin6CAS~8ofMDS '.-, ' :?" ?'.一 :i I2345 ;毛::}-;:一 67B910Il12 : 16 ' , 19202122YX Case3146.XY,20q- 围1例31的初诊桉型:46,XY,del(20) (pter—q11:) FiglInitialkaryotypeofcase31:46,XY del(20)(pter—ql1:) 2 "' ,寸?: :1- 't,,'', . , 4 ,5 乞:: 10I】12 l-=】 16"I8 .,' 2122YX Case3146,XY,5a一-20q一 围2侧3l的棱型演变:46,XY,del(5) (pter—q13::q31一qter),de1(20) (pter011:, FjChangedkaryotypeofcase3146, XY,del(5)(pter—q13::q31~qter), de1(20)(pter—q1l:) 二,MDS患者自发性PCC和多核细胞变化的相关性 6例PCC患者的多核细胞数平均为19‰,40例无PCC患者平均为4‰,二者差异 非 ,. ??l ,0 孔? 之::??_=? 中国医学科学院l2卷 簿,llIt"; -p,;t 图3,4侧44的棱型:47,XY,+8,dup(1)(ptcr — q44::q25—qter) Figa,4Karyotypeofcase44:47,XY,+8,dup (I)(ptcr—q44::q25一citer) 图5例24的GI-PCC Fjg5G1一PCCofcase24 常显着(P<0.01):PCC患者多倍体为3.4%,无PCC患者为0.92%,差异亦非常显着 (P<0.01) 三,MDS患者微核出现率和染色体异常的相关性 ,38‰,平均4.5‰:对照组为0,8‰. 46例MDS患者有核红细胞微核出现率为0 平均2.6‰以对照组微核出现率的95%可信限的高值5.26‰为界限,将46例MDS患 者分为?6‰11例和<6‰35例,结果前者中有9例核型异常,占81.8%;后者中l4例 异常,占40%,X2=4.3,二者差异显着(P<0.05).微核率?6‰且有核型异常的9例MDS 患者中,4例为+8,2例为11号染色体异常,此外MDS患者一l6,一17和复杂异常各1 例. 四,MDS患者病态造血与染色体异常的关系 MDS患者I级病态造血占46例MDS患者的41.3%,II,III级占58.7%;对照组则均为 I级病态造血.MDSI级病态造血患者中核型异常者占21%(4/I9),II,III级中核型异常者 占70%(19/27),二者差异十分显着(P<0.0l,表3);具有2个以上异常克隆的MDS患 者均为II,lIl级病态造血. 一?I=】口!瓯]_1 l'.P??f_!p2一_—4一 5期骨髓增生异常综合征的染色体变化和病态迪血345 Compati"gn.rmalandabnormalkary.typegrouPs:X2=8967P<0.0 MDSandcontrolgronps:XJ3.345?P<Oo0J 讨论 一 ,染色体变化和MDs分类 本资料表明,49%MDS患者有克隆性染色体异常,其中以+8最常见.本研究发现的1 例lp,I例+8伴dup(1)(q25q44),l例14q和1倒迟发性5q-f在国内文献中尚未见 报道,6例自发性PCC和2例HSR在国外文献中亦甚罕见[41. FAB根据形态学特征将MDS分为5类,而随着科学研究工作的深入,根据细胞遗传学 特征对MDS进行分类显得更为必要.细胞遗传学家提出的5q一综合征已被较广泛地接受为 MDS的1个特殊细胞遗传学类型[51.Gyger等[61提出单体7综合征:pasquali等"认为单 体7患者常可见血和骨髓三系病态造血,并伴严重感染,可在数月内转为急性白血病,且预 后较差.本资料7例+8MDS患者中2例为单纯+8,5例伴其他异常,男:女=6:1,平均33 岁:I-fb5.5,7.7g/d1,平均6.1g/dl:WBC2.1,9.5×10/L,平均4.5×1O几:PLT50, 205×109几,平均113X10几,骨髓涂片可见显着的三系病态造血:经1年多随访均未转化 为自血病,提示+8较单体7预后好+8亦为急性非淋巴细胞自血病(ANLL)的最常见异 常之一,故将+8归为MDS的1个特殊细胞遗传学类型进行深入研究,将有助于探讨MDS 和自血病的关系. 二,MDS染色体变化和病态造血的关系 用细胞融合法诱发PCC国内外均有报道,但自发性PCC却较少见.本文51例MDS 患者中6例检出自发性PCC,且均以G.或S期细胞多见,其中某些患者PCC细胞占中期细 胞的3J.3%.KovacstsI认为PCC是人类肿瘤细胞在体内相互融合的证据,但PCC也可能 是肿瘤细胞和正常细胞融合的结果本文6例PCC患者骨髓多核细胞远比无PCC者多,多 倍体亦较无PCC者高,提示MDS的部分多核细胞可能由细胞融合形成,但f起体内细胞融 合的原因尚有待进一步探讨. 微核指源于细胞核并含有DNA的小,染色体断片或整条染色体在细胞分裂末期丢失 于胞浆中是形成微核的主要原因.用药物及理化法诱导淋巴细胞或骨髓细胞形成微核已被广泛 应用于致癌,致畸和致突变(三致)检溺,微核率升高主要反映三致物质对染色体的损伤. Teerenhovi等认为微核率升高与一7或7q一及MAKA有关.本文发现MDS微核率高者 346中国医学科学院I2卷 多有核型异常,且多为+8,提示+8也与潜在接触致突变物质有关. Matsuo等…用积分法研究慢性粒细胞自血病(CML)在慢性期和急变期出现的某 些病态造血异常Varelat"也设计了一种积分系统分析研究MDg粒系和巨核系的某些形态 学表现和血小板,白细胞下降的程度,指出积分对MDS的预后具有指导意义.本研究参照 Matsuo和Varela方法,提出包括三系统病态造血形态学表现的积分方法,将病态造血分为 三级,以探讨其与染色体变化的关系.本研究结果表明,MDSI级病态造血患者中核型异常 者较少见(占2%),而II,III圾中则较多见(占70%):8例具有多克隆性染色体异常者 均为 II,III级病态造血,提示病态造血程度越重核型异常检出率越高. 三,染色体变化和MDS本质的探讨 到目前为止对MDS本质的看法尚有争议,克隆性染色体异常的检出有助于佐证 该病的恶 性或前恶性特征本研究发现HSR对揭示MDS本质亦具有重要意义,HSR见于恶 性细胞 染色体上,且其与癌基因扩增有关[12l本文1例RA和1例RAEB检出HSR,提示 某些 MDs早在RA阶段即开始恶性造血,与自血病的差别仅在于恶性程度高低的不同 参考文献 1.BennettJM,eta1.Proposalsfortheclassificationofthemyelodysplasticsyndromes.BrJHaematol1982; 51:189, 2.ISCN.Aninternationalsystemforhumancytogeneticnomenclature.CytogenetCellGenet1978;21:309 3.HeimS,eta1.Lateappearing5q— markerinrefractoryanemia.CancerGenetCytogenet1987;24:159 4.BorgstromGH.Cytogeneticsofthemyelodysplasticsyndromes.StandJHaematol1986;36(sup#45): 74 5.VandenBetgheH.5q—syndrome.StandJHaematol1986;36(snppl45):78 6.GygerM,eta1.Monosomy7syndrome.NEngiJMed1981:305(19):1155 7.PasqualiF,eta1.Pathogeneticsignificanceof"puremonosomy7inmyeloproliferativedisorders.Analy' s0r14cases.HRl~anGenet1982;62:40 8.Kovac$G.Prematurechromosomecondensation:Evidenceforinvivocel1fusioninhumanmali~umt tumors.IntJCancer1985;36:637 9.TeerenhoviL,eta1.Correlationbetweenbonemarrowkaryotypeandtheoccurrenceoferyt hroblast micronucleiandnuclearbuddinginpatientswithmyelodysplasticsyndromes.EnrJHaematol1987; 39:237 10.MatsnoT,eta1.Prognosticsignificanceofthemorphologicaldysplasticchangesinchronicmyelogenoas lenkemia.LeuRes1986;10(3):33l II.VarelaBL,eta1.Modificationsintheclassificationofprimarymyelodysplasticsyndromes:ne additionofascoringsystem.HematologicalOncology1985;3:55 12.BrieuxdeSalumys,eta1.Homogeneouslystainingregion(HSR)inahumanmalignantmelanoma CancerGenetCytogenet1984:l1:53 5期骨髓增生异常综合征的染色体变化和病志造血347 StudiesOilChromosomeAberr~itionsand DyshemopoiesisinMyelodysplasti~S~ndromes JiangQibo,etal (InstituteofHerna~logy,Tianjin) Gbandingebromosomeanalysisofbonemarrowcellsfrom51casesofMDS, including34cas~sofRA,4casesofRAS,andl3casesofRAEB,wascarriedoutusinga shorttermculturemethod.Themorphologicalabnormalitiesofdyspoiesisof46patients werestudiedandcorrelatedwithchromosomalchanges.Theresultswereasfollowsr Forty—ninepercentofthecaseshadabnormalkaryotypes.Thefrequencyofclonal abnormalitieswas36.8percentinRAandRAS,and84.6percentinBAEB.Themost importantaberrationswere+8in7,HSRin2,andspontaneousPCCin6caSeS. The 1atter2abnormalitieshadrarelybeenreportedintheliteratule.Otherfindingsincluded lp+,dup(1)【q25q44),一2,4p+,一5,5q一,+8p,一l2,12p+,l2q一,一l4,14q+, t(1;l4),一15,?l6,?17,一18,+l9,+20,20q一,?21,?22,一X,一Y,+Mar.etc. Thestudyalsoshowedacloserelationbetweenchromosomeaberrationsand dyspoiesis.+8patientstendedtohaveahighpercentageofmi~onuddinthdr erythroblasts,andtheirdyspoiesisusuallyinvolvedthreecelllineages.PatientswithPCC werefoundtohavemolepolyploidmetaphases(incytogeneticstudies)andmoremultinuclear cells【inbonemarrowaspirateslides).Theresultsofourstudyrevealedthatthemolese- veledyspoiesisis,thehigherthefrequencyofchromosomeaberrations.Weconsider chromosomeabnormalitiestoplayanimportantroleinthepathogenesisofMDS,with cellfusionbeinginvolvedaswel1. Keywordsmyelodysplasticsyndromeschromosomedyshemopoiesis