实验六影响酶促反应速度的因素

实验六影响酶促反应速度的因素 实验六 影响酶促反应速度的因素 【目的】 观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。 【原理】 唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。 在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。 淀粉酶淀粉酶淀粉 麦芽糖+葡萄糖 糊精 II22I2 呈蓝色 无色 蓝色、紫色、红色 【器材】 试管(10mm×100mm)、试管架、电热恒温水浴箱、沸水浴、冰浴、多孔白瓷板、滴管。 【试剂】 1.1%淀粉溶液 同实验五 2. 稀碘溶液 称取碘2g，碘化钾4g，溶于1 000蒸馏水中，置棕色试剂瓶中。 3.缓冲液 (1)pH3.0缓冲液 取0.2mol/LNaHPO溶液205ml，0.1mol/L柠檬酸溶液795ml，24 混合后即成。 (2)pH6.8缓冲液 同实验五 (3)pH8.0缓冲液 取0.2mol/LNaHPO溶液972ml，0.1mol/L柠檬酸溶液28ml，混24 合后即成。 4.1%NaCl溶液 称取氯化钠1g，加蒸馏水至100ml即成。 5.1%CuSO溶液 4 称取结晶硫酸铜1g，加蒸馏水至100ml。 6.1%NaSO溶液 24 称取硫酸钠1g，加蒸馏水至100ml即成。 7.稀释唾液 同实验五。 【操作】 1.温度对酶促反应速度的影响 取3支试管，编号，按下操作: 表3-8 温度对酶促反应的影响 加入物(滴) 1 2 3 pH6.8缓冲液 20 20 20 1%淀粉溶液 10 10 10 置37?水浴5分钟 置沸水浴5分钟 置冰水浴5分钟 稀释唾液 5 5 5 置37?水浴10分钟 置沸水浴10分钟 置冰水浴10分钟 取出，各管加入碘液1滴，摇匀，观察并颜色变化。 2.PH对酶促反应速度的影响 取3支试管，编号，按下表操作: 表3-9 pH对酶促反应的影响 加入物(滴) 1 2 3 pH3.0缓冲液 20 , , pH6.8缓冲液 , 20 , pH8.0缓冲液 , , 20 1%淀粉溶液 10 10 10 稀释唾液 5 5 5 摇匀，置37?水浴保温，每隔1分钟从2号管中吸取1滴反应液于白瓷板上，加碘液 1滴检查反应进行情况，直至反应液不与碘液反应时，向各管各加入1滴碘液，摇匀，观 察并记录颜色变化。 3(激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响 取4支试管，编号，按下表操作: 表3-10 激活剂和抑制剂对酶活性的影响 加入物(滴) 1 2 3 4 1%淀粉溶液 10 10 10 10 pH6.8缓冲液 20 20 20 20 1% NaCl溶液 , 10 , 1% CuSO溶液 , , 10 4 1%NaSO , , , 10 24 蒸馏水 10 稀释唾液 5 5 5 5 混匀，置37?水浴中保温10分钟 取出，各管加入碘液各1滴，观察并记录颜色变化。 【结果及分析】 观察各管颜色变化，说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。 【思考题】 1. 何谓最适温度,温度对酶促反应有何影响,激活剂和抑制剂, PH对酶促反应有何影响 2. 何谓最适pH, 3(何谓激活剂、抑制剂,激活剂、抑制剂对酶促反应速度有何影响,