【精品文档】HPLC法测定清咽宁喷雾剂中咖啡酸的含量药学论文_医药学论文_25870

【精品文档】HPLC法测定清咽宁喷雾剂中咖啡酸的含量药学论文_医药学论文_25870 论文范文 题目:HPLC法测定清咽宁喷雾剂中咖啡酸 的含量药学论文_医药学论文 编辑:小小 【摘要】 目的 建立测定清咽宁喷雾剂中咖啡酸含量的方法。方法 采用高效液相色谱法～用依利特BDS C18色谱柱,200 mm×5.0 mm～5 μm,～以甲醇0.013 mol/L磷酸盐缓冲液,体积比 23?77,为流动相,流速为1.0 mL/min～检测波长为320 nm。结果 在0.042 5， 0.425 μg范围内～峰面积与进样量线性关系良好,r ,0.999 9,～加样平均回收率为99.05%～RSD为2.9%。结论 该法 简便、可靠、准确～结果满意。 【关键词】 HPLC;清咽宁喷雾剂,咖啡酸,含量测定 Determination of caffeic acid in Qingyanning spray by HPLC Abstract:Objective To establish an HPLC method for determination of caffeic acid in Qingyanning spray. Methods The sample was analyzed on a BDS C18 column (200 mm×5.0 mm,5μm) using methanol0.013 mol/L phosphate salt solution (23?77) as the mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength 320 nm.Results The method exhibited good linearity from 0.042 5 to 0.425 μg (r=0.999 9). The average recovery was 99.05% and RSD 2.9%. Conclusion The method is convenient, reliable and accurate for the quality control of the spray. Key words:HPLC; Qingyanning spray; caffeic acid 清咽宁喷雾剂是主要由蒲公英、忍冬藤等组成的纯中药制剂～具有清热解毒、消炎止痛等功效～可用于治疗口腔炎、口腔溃疡、咽喉炎等症～对小儿口腔炎症有特效。咖啡酸作为蒲公英、忍冬藤两药的抗菌抗病毒的有效成分之一,1,～易于测定。因此～本制剂参照《中国药典》2000年版一部蒲公英的含量测定方法～以HPLC方法测定本品咖啡酸的含量,2,。实验表明此方法简便～结果准确～可为本品质量控制和新药研发提供科学依据。 1仪器与试药 高效液相色谱仪:岛津LC10ATvp泵～岛津SPD10ATvp紫外检测器。 咖啡酸对照品由中国药品生物制品检定所提供～批号:110885200302,清咽宁喷雾剂由本校药物研制中心提供～批号:040628、040926、041218,甲醇为色谱纯～水为超纯水～其他试剂均为纯。 2方法与结果 2.1色谱条件与系统适用性试验 依利特BDS C18,5.0 mm×200 mm～5 μm,,流动相:甲醇磷酸盐缓冲液,取磷酸二氢钠1.56 g～加水使溶解成1 000 mL～再加1%磷酸溶液调节pH值至3.8，4.0,,体积比23?77,～流速:1.0 mL/min,理论板数以咖啡酸峰计算～不得低于3 000。 2.2溶液的制备 2.2.1对照品溶液的制备 精密称取在110 ?干燥至恒重的咖啡酸对照品适量～加甲醇制成每1 mL含咖啡酸30 μg的溶液～即得。 2.2.2供试品溶液的制备 精密量取本品2 mL～加醋酸乙酯振摇提取3次～每次10 mL～ 合并提取液～蒸干～残渣加甲醇适量～使溶解～移入50 mL量瓶中～加甲醇至刻度～滤过～取续滤液～即得。 2.3测定波长的确定 取对照品,0.030 mg/mL,溶液～在500，200 nm波长范围内进行扫描～结果在320 nm波长处有最大吸收～见图,～故确定检测波长为320 nm。 ,.,色谱条件的确定 在上述色谱条件下～分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μL～注入液相色谱仪测定。结果咖啡酸在15 min内出峰～而且与前后的峰均有较好的分离～理论板数在3 000以上。见图2～图3。 图1紫外光谱图 略 按本品制剂中工艺方法制得去蒲公英和忍冬藤的空白制剂～与供试品溶液色谱和咖啡酸对照品溶液色谱比较～结果阴性样品中未见咖啡酸色谱峰～见图4。 图2,图4 略 2.,线性关系考察 精密称取在110 ?干燥至恒重的咖啡酸对照品17.0 mg,置100 mL量瓶中～加甲醇使溶解并稀释至刻度～摇匀～精密量取上述对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 mL分别置10 mL量瓶中～加甲醇稀释至刻度～摇匀。按上述色谱条件分别注入液相色谱仪5 μL～测定峰面积。以进样量,m,为横坐标～峰面积(A)为纵坐标～绘制曲线并进行回归分析～得回归方程,=,, ？,,m-,, ？,,～r=0.9999。结果表明:咖啡酸在0.0425，0.425 μg范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系。 2.,精密度试验 精密吸取上述线性关系考察中第3号对照品溶液～按上述液相 色谱条件～进样测定,次～结果峰面积的,,,值为1.2?～表明方法精密度良好。 2.,重复性试验 取本品(批号040628)5份～按“2.2.2”项方法制备～进样测定～结果咖啡酸平均质量比为0.500 mg/g～其,,,值为1.97%～表明方法重复性好。 2.,加样回收率试验 取本品(批号040628)6份～精密加入咖啡酸对照品溶液(0.3 mg/mL)～按“2.2.2”项方法制备～进样测定～结果见表,。 略) 表1咖啡酸回收率试验结果( 2.,稳定性试验 取本品,批号040628,,按“2.2.2”项方法制备～分别于0、1、2、4、8、24 h进行测定峰面积～结果,,,值为1.3,～表明本品供试品溶液在0，24 h内基本稳定。 2.10样品测定 取本品3批～照“供试品溶液”和“对照品溶液”方法制备～分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液5 μL～按上述色谱条件进行测定～按外标法计算。结果见表,。 表2咖啡酸含量测定结果 略 3讨 论 3.1咖啡酸作为蒲公英、忍冬藤两药的抗菌抗病毒的有效成分之一～因咖啡酸微溶于水～易溶于热水和冷乙醇,？,～常用5,,质量分数,甲酸的甲醇溶液、乙醚或醋酸乙酯等提取～本文采用醋酸乙酯为溶剂提取？次～能有效地提取本品的咖啡酸。实验表明该法专属性～重现性较好～结果可靠。 3.2通过实验研究～本文建立了清咽宁喷雾剂中咖啡酸含量的HPLC测定法。本法提取较为完全～方法简便可行, 咖啡酸与其他杂质峰分离效果良好～从而为该制剂质量标准的制订提供了依据。 【参考文献】 ,1, 江苏新医学院.中药大辞典,M,.上海:上海科技出版社～,,,,:,,,,. ,2, 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部,S,.北京:化学工业出版社～,,,,:,,,. ,3, 柯铬清.中草药有效成分理化与药理特性,M,.长沙:湖南科技出版社～,,,,:,,,. 转贴于