纳氏试剂分光光度法

纳氏试剂分光光度法 纳氏试剂分光光度法 1.原理 空气中氨吸收在稀硫酸中，与纳氏试剂作用生成黄色化合物，根据着色深浅，比色定量。 2.试剂和 本法所用的试剂均为纯，水为无氨蒸馏水。制备见附录A。 2.1 吸收液[C(H2SO4=0.005mol/L)]:量取2.8ml浓硫酸加入水中，并稀释至1L。临用时再稀释10倍。 2.2 酒石酸钾钠溶液(500g/L):称取50g酒石酸钾钠(KnaC4H4O6?4H2O)溶于100ml水中，煮沸，使约减少20ml为止，冷却后，再用水稀释至100ml。 2.3 纳氏试剂:称取17g二氯化汞(HgCl2)溶解300ml水中，另称取35g碘化钾(KI)溶解在100ml水中，然后将二氯化汞溶液缓慢加入到碘化钾溶液中，直至形成红色沉淀不溶为止。再加入600ml氢氧化钠溶液(200g/L)及剩余的二氯化汞溶液。将此溶液静置1,2天，使红色混浊物下沉，将上清液移入棕色瓶中，(或用 5#玻璃砂芯漏斗过滤)，用橡皮塞塞紧保存备用。此试剂几乎无色。(纳氏试剂毒性较大，取用时必须十分小习，接触到皮肤时，应立即用水冲洗;含纳氏试剂的废液，应集中处理，处理方法见附录B)。 2.4 氨标准溶液 2.4.1 标准贮备液:称取0.3142g经105?干燥1h的氯化铵(NH4Cl)，用少量水溶解，移入100ml容量瓶中，用吸收液(见2.1)稀释至刻度。此溶液1.00ml含1.00μg氨。 2.4.2 标准工作液:临用时，将标准贮备液(见2.4.1)用吸收液稀释成1.00ml含2.00μg氨。 3.仪器设备 3.1 大型气泡吸收管:有10ml刻度线，见靛酚蓝分光光度法图1。 3.2 空气采样器:流蛳范围0,2L/min，流量稳定。使用前后，用皂膜流量计校准采样系统的流量，误差应小于?5%。 3.3 具塞比色管:10ml。 3.4 分光光度计:可测波长为45nm，狭缝小于20nm。 4.采样 用一个内装10ml吸收液的大型气泡吸收管，以0.5L/min流量，采气5L，及时记录采样点的温度及大气压力。采样后，样品在室温下保存，于24h内分析。 5.分析步骤 5.1 标准曲线的绘制 取10ml具塞比色管7支，按1制备标准系列管。 表1 氨标准系列 管号 0 1 2 3 4 5 6 标准工作液(3.4.2)，ml吸收液(3.1)，ml氨含量μg 1.0010.000 1.009.002.00 2.008.004.00 4.006.008.00 6.004.0012.00 8.002.0016.00 10.00020.00 在各管中加入0.1ml酒石酸钾钠溶液，再加入0.5ml纳氏试剂，混匀，室温下放置10min。用1cm比色皿，于波长425nm处，以水作参比，测定吸光度。以氨含量(μg)作横座标，吸光度为纵座标，绘制标准曲线，并用最小二乘法计算标准曲线的斜率、截距及回归方程(1)。 Y=bX+a…………………………………………(1) 式中:Y――标准溶液的吸光度; X――氨含量，μg; a――回归方程式的截距; b――回归方程式斜率，吸光度/μg。 标准曲线斜率b应为0.014?0.002吸光度/μg氨。以斜率的倒数作为样品测定时的计算因子(Bs)。 5.2样品测定 将样品溶液转入具塞比色管中，用少量的水洗吸收管，合并，使总体积为10ml。再按制备校准曲线的操作步骤测定样品的吸光度。在每批样品测定的同时，用10ml未采样的吸收液作试剂空白测定。如果样品溶液吸光度超过标准曲线范围，则可用试剂空白稀释样品显色液后再分析。计算样品浓度时，要考虑样品溶液的稀释倍数。 6.结果计算 6.1 将采样体积按公式(2)换算成标准状态下的采样体积: V0=Vt×T0/(273+t)×P/P0………………………………(2) 式中:V0――标准状态下的采样体积，L; Vt――采样体积，由采样流量乘以采样时间而得，L; T0――标准状态下的绝对温度，273K; P0――标准状态下的大气压力，101.3kPa; P――采样时的大气压力，kPa; t――采样时的空气温度，?。 6.2 空气中氨浓度按公式(3)计算: C(NH3)=(A-A0)Bs/V0……………………………………(3) 式中:C――空气中氨浓度，mg/m3; A――样品溶液的吸光度; A0――空白溶液的吸光度; Bs――计算因子，μg/吸光度; V0――标准状态下的采样体积，L。 7.测定范围、精密度和准确度 7.1 测定范围 测定范围为10ml样品溶液中含2,20μg氨。按本法规定的条件采样10min，样品可测浓度范围为0.4,4mg/m3。 7.2 灵敏度 10ml吸收液中含有2μg的氨应有0.027?0.002吸光度。 7.3 检测下限 检则下限为2μg/10ml，若采样体积为5L时，最低检出浓度为0.4mg/m3。 7.4 干扰和排除 对已知的各种干扰物，本法已采取有效措施进行排除，常见的Ca2+、Mg2+、Fe3+、Mn2+、Al3+等多种离子低于10μg不干扰。H2S的允许量为5μg，甲醛为2μg，丙酮和芳香 胺也有干扰，但样品中少见。 7.5 方法的精密度 当样品中氨含量为6.5，10.0，15.0μg时，其变异系数分别为8.4%，5.9%，3.9%，平均相对偏差为6.3%。 7.6 方法的准确度 样品溶液加入2.0，5.0，10.0μg的氨时，其回收率为95.2,111.8%,平均回收率为101.8%。 附录A 无氨蒸馏水的制备 于普通蒸馏水中，加少量的高锰酸钾至浅紫红色，再加少量氢氧化钠至呈碱性。蒸馏，取其中间蒸馏部分的水，加少量硫酸溶液呈微酸性，再蒸馏一次。 附录B 含汞废液的处理方法 为了避免含汞废液造成对环境的污染，应将废液中的汞进行处理。方法是:将废液收集在塑料桶中，当废水容量达到20L左右时，以曝气方式混匀废液，同时加入50ml4氢氧化钠(400g/L)溶液，再加入50g硫化钠(Na2S?9H2O)，10min后，慢慢加入200ml市售过氧化氢，静置24h后，抽取上清液弃去。