苦参提取物对大鼠胸主动脉环张力的影响及其机制探讨

苦参提取物对大鼠胸主动脉环张力的影响及其机制探讨 苦参提取物对大鼠胸主动脉环张力的影响及其机制探讨 苦参提取物对大鼠胸主动脉环张力的影响及其机制探讨 作者:邱灿华 陈健文 李晓君 蓝秀健 余剑平 林明栋【摘要】 目的:观察苦参提取物对离体大鼠胸主动脉环舒缩的影响。方法:采用测定离体血管环张力的实验方法，观 察苦参提取物对大鼠胸主动脉环静息张力的影响以及对去甲肾上腺素或 KCl 引起胸主动脉环收缩的影响。结果:各种浓度的苦参提取物对大鼠胸主动脉环静息张力无明显的舒张作用;10 g/mL、50 g/mL、250 g/mL浓度的苦参提取物对KCl 或去甲肾上腺素引起的胸主动脉环收缩有一定的抑制作用，抑制率对 KCl 分别为: 8.59%、13.59% 和 18.79% ，对去甲肾腺素分别为 .03%、16.56% 和 21.03%。结论:一定浓度苦参提取物对去甲肾上腺素以及 KCl 引起的大鼠胸主动脉血管环的收缩有一定的抑制作用，其作用机制可能与其能够促进细胞 Ca2+ 释放有关。 【关键词】 苦参提取物;血管环张力;KCl;去甲肾上腺素它主要应用于治疗热病烦渴、发斑、齿龈炎、扁桃体炎、咽喉炎、痈肿、急性淋巴结炎、淋巴结结核等。中医主要从以下两个方面来利用苦参:凉血解毒，即用于血热及疮毒，如高热神昏、红肿热痛等;滋阴降火，主治阴虚内热，咽肿咯血、心烦不眠。目前实验研究证明苦参具有降血压、降血糖、抗菌、抑菌、影响血小板聚集和心血管系统的作用[1，2]，同时还有镇静止痛的中枢神经抑制作用。苦参提取物为苦参的有效提取物，主要为 A 、B 两种形式。苦参提取物被用作于多种药物的配方中，是苦参药效的主要体现。 但目前对苦参提取物舒张血管的作用机制缺乏研究，关于苦参提取物通过何种途径影响血管环的舒张作用有不同的说法。本实验通过大鼠离体胸主动脉环灌流，观察苦参提取物对去甲肾上腺素(NE)、KCl 收缩血管的舒张作用，并探讨其作用机制，为进一步开发苦参提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 药品、试剂以及器材 受试药物:苦参提取物，由本实验室制备，20 mg 苦参苷 / mL。重酒石酸去甲肾上腺素注射液(NE)，由天津金耀氨基酸有限公司提供，规格:1 mL:2 mg，生产批号:0403311;其它实验试剂:NaCl、KCl、MgCl2、NaH2PO4?2H2O、NaHCO3、Glucose 等试剂由中山大学基础医学实验教学中心机能学实验室提供。RM6240 多道 生理信号采集处理系统以及离体血管环系统(成都仪器厂产品)。 1.2 动物 SD 大鼠， 雄性，体重 240~280 g，由中山大学实验动物中心提供，粤监证字:2006A064。 饲养条件:普通级动物房，大鼠每笼 5~6 只，饲养 3 d 后启用，由专人饲养管理。动物室灯光 h 照明，通风和空调设备良好，室温控制在(25?4)?，相对湿度为 50%~70%。动物房按常期消毒。 1.3 药物稀释方法、给药途径及体积 取同一批号的各实验所用药品，用生理盐水配制，每日现配制现用。 1.4 方法 在进行正式实验前先做预实验摸索最适宜的实验浓度和给药体积。确定 KCl 最佳实验浓度 100 mol/L;NE 最佳实验浓度 100 mol/L;苦参提取物选取 10 g/mL、50 g/mL、250 g/mL 3 个浓度(终浓度)。 取成年雄性 SD 大鼠(体重 250~ 300 g)，脱胸主椎处死，迅速分离胸主动脉。血管置于改良 KH 营养液(营养液预先通入混合氧气预饱和)的培养皿内，小心去掉血管外部脂肪、结缔组织和细小分支，避免过度牵拉以防损伤内皮。分离完全后将血管剪成约 3 mm 长的血管环。将血管环穿入折成直角的钢丝中。在两个三角形钢丝环的顶部各系一根细线，线的另一端分别固定于张力换能器和置于盛有 5 mL 营养液的浴槽的标本板底部的小钩上，使动脉环浸泡于营养液中，持续通入混合气(95% O2 和 5% CO2)，内槽恒温 37?。开始加 1.5 g 张力负荷，不断调整张力水平，使之维持在 1.5 g 左右(低于1.35 g 或高于 1.65 g 开始调整)，稳定 60 min(每 15 min 沿浴槽壁换 38? KH 液，5 mL/ 次)。标本平衡 60 min 后，用 KCl( 60 mmol/L)检验血管活性，记录动脉环的收缩，在其收缩达到高峰后，用 HK 营养液洗标本 4 次。10 min 后再加入 KCl(60 mmol/L)，记录动脉环的收缩，在两次加 KCl 后动脉环收缩最大幅度小于 10% 者可用于实验，大于 10% 者弃去不用。动脉环收缩张力信号通过 RM6240 多道生理信号采集处理系统(成都仪器厂)的四通道接头传输到计算机相应处理软件上进行数据记录和分析。最终所有实验数据均以 x?s 表示。 1.5 数据处理 所有实验数据以 x?s 表示。计量数据由 SPSS 13.0 统计软件进行方差分析及组间检验。