人参配伍五灵脂人参总皂苷的含量变化规律研究

人参配伍五灵脂人参总皂苷的含量变化规律研究 人参配伍五灵脂人参总皂苷的含量变化规 律研究 摘要 人参配伍五灵脂 人参总皂苷的含量变化规律研究 北京语言大学医院(100083)刘芬娣 北京市药品监督管理局海淀分局(100097)李德全 目的观察人参配伍五灵脂后人参 总皂苷含量的变化规律,探讨两种药物配 伍后五灵脂对人参抗衰老作用的影响及机 理.方法选取6组不同的人参与五灵脂的 用量配比及不同的煎煮方法,用紫外分光 光度法进行两味药配伍后的人参总皂苷含 量测定.结果二者配伍后人参总皂苷含量 下降.结论五灵脂的用量和二者的煎煮 方式是影响人参总皂苷含量的两个重要因 素. 关键词:人参;五灵脂;配伍;人参总皂 苷;含量 中药合理的配伍组合是方剂的核心, 也是复方不同于单昧药的主要奥秘所在. 我国古代对药物的配伍禁忌主要有"十八 反"和"十九畏"的记载.人参最早记 载于我国第一部药物学专着《神农本草 经》,功用为:"主补五脏,安精神,定 魂魄,止惊悸,明目,开心益智,久服轻 身延年."长期的医疗实践证实了人参补 气药之首的地位.近年来,我国医药界更 从药理,临床等方面研究了人参延缓衰老 的药理,临床作用. "人参最畏五灵脂"出自"十九 畏",人参与五灵脂一直被视为配伍禁 忌,但在临床上二者也经常有配伍应用. 陈馥馨从古今67424个方剂中统计到人 参,五灵脂合用的有31个….名老中医姜 春华等亦以人参和五灵脂配伍用于临床 .二者配伍在毒性实验,抗应激实验 (游泳耗竭时间,缺氧耐受能力,低温存 活时间)1【5都做了大量研究.而二者配 伍后对药物成分方面的影响变化尚无人研 究.人参总皂苷是人参的主要有效成分之 一 有广泛的生物活性,在抗衰老方面 , 有广泛的应用.目前研究报道的也较多, 如潘鑫鑫等研究发现,人参总皂苷有减 4OI幻10.11(下)l首部医药c.mn—-—! 少自由基对中枢神经系统的损伤 和改善衰老模型小鼠的免疫和内 分泌系统等作用,具有一定的抗 衰老作用.本实验用紫外分光光A酷 度法测定人参与五灵脂配伍后其 总皂苷的含量变化,考察五灵脂o.?o 对人参有效成分人参总皂苷的影 响,为二者配伍在临床上是否能.' 应用于抗衰老方面做初步探讨. 1实验用药材与材料 1.1实验用中药材人参为五加科 植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的 干燥根(生晒参),产地辽宁, 五灵脂(鼯鼠科橙足鼯鼠Trogop— temsXanthies的干燥粪便),产地 山西 A端 o-?0 m4oo5oo6oo7? 注:A是人参样品扫描曲线,B为人参皂苷Re扫描曲 线,c为五灵脂样品(阴性空白对照扫描图),与 基线齐平无干扰 1.2实验材料仪器:METTLERAE240电子 天平;HITACHIU2000可见紫外分光光度 计,水浴锅.试剂:香草醛,冰醋酸,高 氯酸,甲醇.对照品:中国药品生物制品 检定所Re(批号110754—200218). 2样品及有关溶液的制备与分组 2.1分组共分为6组,即A:人参20g单煎; B:五灵脂20g单煎;C:人参20g,五灵脂 20g共煎;D:人参20g,五灵脂2Og单煎后 混合;E:人参20g,五灵]~10g共煎;F: 人参20g,五灵脂40g共煎. 2.2实验溶液制备?各组加入15倍量水煎 煮两次,头煎为1小时,后倒出提取液, 再加入15倍量水再煎,第二煎半小时, 后合并提取液.将合并液抽滤后浓缩至 与原药材1:l之量.?用等量乙醚(每 次20m1)萃取4次,弃去乙醚层.再用正 丁醇萃取4次(每次20m1),合并正丁醇 层,水层弃去.?将正丁醇的萃取层用 1%氢氧化钠洗3,4次(每次20m1),弃去 氢氧化钠溶液层.后用正丁醇饱和水溶液 洗至pH值在7左右.?回收正丁醇,将剩 余物用甲醇溶解,定容在10ml容量瓶内. 检测前用活性炭脱色(1小时,60?水 浴) 2.3对照品溶液的制备精密称取人参皂苷 Re2.3mg置5ml容量瓶中,加甲醇使其溶解 后稀释至刻度,作为储备溶液备用. 3方法学研究 3.1测定波长的确定经过扫描,样品和对 照品的最大吸收波长均为543.5?0.5nm, 吸收曲线形状近似,阴性空白对照(五灵 脂)无干扰. 3.2阴性扫描对照未显色前的人参样品扫 描图,没有吸收. 3.3线性关系考察精密吸取人参皂苷Re 对照品0.0023g~5ml容量瓶中,加甲醇稀 释至刻度,摇匀.分别精密吸取0.05ml, 附1线性关系考察 附表3稳定性考察 编号吸收度平均吸收度RSD 编号吸收度含量(mg/g)RSD 0.1ml,0.2ml,0.3ml,0.4ml置12ml具塞试 管中100oC水浴挥干剂,加入5%香草醛一 冰醋酸溶液0.2ml,高氯酸0.8ml,60?水 浴显色15min,冰浴冷却至常温,加入5ml 冰醋酸稀释摇匀.在543.5nm处测定吸收 度,以吸收度为纵坐标,以品体积 为横坐标计算工作曲线的回归方程为: y=3.323x一0.0196(r=0.9994). 由附表1,附表2的实验结果可见,人 参皂苷对照品在0.023,0.184mg范围内质量 与吸收度呈良好线性关系. 3.4稳定性考察在0,4,8,12,16/]~时 每个时间点精密量取样品0.04ml,置lOml 具塞试管中100~(2水浴挥干溶剂,加入5% 香草醛一冰醋酸溶液0.2ml,高氯酸0.8ml, 60?水浴显色15min,冰浴冷却至常温, 加入5ml冰醋酸稀释摇匀.在543.5nm处 测定吸收度,由附表I的数据计算RSD= 1.65%,样品溶液稳定性良好.实验数据 见附表3. 3.5精密度考察分别精密吸取同一份人参 样品5份0.04ml,同上法显色后测定吸收 度,实验数据见附表4,由附表4的数据计 算RSD=I.26%,本实验精密度良好. 3.6重现性考察人参平行做5份样品,取 0.04ml,显色同3.5,在543.5nm处测定吸收 度.由附表5的数据计算RSD=3.2%,本实 验重现性良好. 3.7回收率实验精密称取已知量样品,准 确加入一定量的标准品0.1ml,按前述方法 处理,显色进行含量测定,实验数据见附表 6.平均回收率98.96%.本法具有良好的 回收率. 4有效部位样品总皂苷元含量测定 量取按上述方法制备的样品各0.04ml 同上显色方法,随行空白,在543.5nm处测 定吸收度,并由工作曲线计算含量,见附 表7. 5结果与讨论 测定结果表明,二者配伍后人参总皂 苷含量下降,人参五灵脂混合煎煮后皂苷 含量下降尤其明显,且随着五灵脂用量的 增大,人参总皂苷含量下降明显,成正比 关系,即人参:五灵脂用量为2:1时含量下 降16%,人参:五灵脂用量为1:l时含量下降 31%,人参:五灵脂用量为1:2时含量下降 51.74%. 二者1:1用量单独煎煮后再混合组的 人参皂苷含量变化不大,仅下降1.7%,而 1:l用量混合煎煮则下降约31%,二者相 差很大,显示混合煎煮的方式使人参总皂 苷含量显着下降. 上述数据表明五灵脂的用量和二者的 附表6加样回收率 煎煮方式是影响人参总皂苷含量的两个重 要因素. 人参五灵脂配伍后使人参的皂苷类有 效成分含量下降,这些变化必然对人参的 药理作用产生影响,由于皂苷类成分在抗 衰老和对中枢神经系统影响突出,因此在 临床应用人参益智和抗衰老的作用时,应 避免与五灵脂一同使用.本实验表明人参 和五灵脂在益智和抗衰老的范围内的配伍 使用应属于七情中的"相恶"范畴,"人 参最畏五灵脂"的说法是有一定科学依据 的. 参考文献 1陈馥馨.782个含十八反,十九畏内服 成药方组成与主治分析【J】.中药通报, 1986,中药理论增刊(1):169 2姜春华.诊余随笔[J].上海中医杂 志,1965,(3):9 3郭国华,鲁耀邦.人参与五灵脂配伍对 实验动物毒性的影响[J].中国中药杂 志,199'1,l9(4):247—250 4常敏毅.人参,五灵脂并用抗应激, 抗肿瘤的实验研究[J].中国中药杂志, 696 1997,22(11):694, 5鲁耀邦,郭国华,张鹤鸣.人参与五 灵脂配伍对小鼠抗应激性损伤能力的 影响[J].湖南中医学院,1994,14 (4):35,38 6潘鑫鑫,郑卫红,傅万玉.人参总皂苷 抗衰老作用的实验研究[J].中国中药杂 志,1995,15(5):288,29 (20100901收稿) 样品第一份样品含量(mg/g)第二份样品含量(rag/g)平均含量下降百分率 A:人参单煎;B:五灵脂;O:1:1混合煎煮;D:1:1单煎后混合; E:人参:五灵115=2:1混合煎煮;F:人参:五灵脂=1:2混合煎煮 203011(下)I首都医药...L,4f