HPLC法测定尼美舒利片和胶囊的含量及溶出度

HPLC法测定尼美舒利片和胶囊的含量及溶出度 HPLC法测定尼美舒利片和胶囊的含量及 溶出度 第22卷第3期 2006年6月 广东药学院 JOURNALOFGUANGDONGCOILEGEOFPHARMACY Vo1.22No.3 Jun.2006 HPLC法测定尼美舒利片和胶囊的含量及溶出度 赵雪梅,李玮玲(广州I市药品检验所,广东广州510160) 摘要:目的建立HPI,C法测定尼关舒利片剂和胶囊剂的含量及溶出度方法采用C.柱,以甲醇-0,O04mol/I,K!HPO(磷酸调pH为 4,0?0.1)(体积比50:50)为流动相,流速为1.2ml/min,检测波长298nm:结果尼关舒利在20—150I~g/m1范围内线性关系良好, 片剂及胶囊剂的平均回收率分别为99.91%,99.83%结论本法精密度高,重现性好,可用于尼美舒利片剂和胶囊剂的含量及溶出度 测定.. 关键词:尼美舒利;HPLC;溶出度 中图分类号:R927文献标识码:A文章编号:1006—8783(2006)03—0281—03 Dissolutionandcontentdeterminationofnimesulideinnimesulidetabletsandnimesulideca psulesby HPLC ZHAOXue—mei,L1Wei—ling(GuangzhouInstituterDrugControl,Guangzhou510160,China) Abstract:ObjectiveTodeterminethedissolutionan(Jcontentofnimesulideinnimesulidetab letsandnimesulidecapsules.Methods TheanalysiswasperformedonaCl8column(5m,4.6lnnl× 250I11I11),Themobilephaseconsistedofmethanol一0.O04mol/L K2HPO4(pH4.0?0,1adjustedwithH3PO4)(50:50),andtheflowratewas1.2mL/min.Thedetectionwavelengt hwassetat298 nIn.ResultsThecalibrationcurvewaslinearintherangeof20,l50ug/mLfornimesulide.Theaveragerecoveriesforthetabletsanti capsuleswere99.9l%and99.86%.resp(c【i,ely.ConclusionThismethodisaccurate,reliableandsuitableforthequantitycontrolof nimesulidetabletsandnimesulidecapsules. Keywords:nimesulidetablets:nimesulidecapsules;HPLC 尼美舒利是非甾类解热镇痛药,是环氧化酶一2 (cyclooxygenase一2,COX一2)选择性抑制剂.由美阁 RikerLabsInc公司开发,1985年最先存意大利h: 临床验证明,尼美舒利是高选择性,强效,安全的解 热镇痛药,国内已有多家企业生产,英国药典2005年 版也已有收载.尼美舒利的含量测定方法有容量法, UV法,也有文献采用HPLC法.在尼美舒利制剂 进行标准统一的工作中,发现申报的多个厂家质量标 准其含量测定及溶出度检查均采用uV法测定,Fh于 辅料或包衣材料的不同,会对紫外测定结果造成一定 的干扰.本实验采用HPIC法测定尼美舒利片和胶囊 的含量及溶出度,避免了辅料及包衣材料对测定的干 扰,方法精密度高,重现性好,测定结果准确可靠,更适 合于尼美舒利片和胶囊的含量及溶出度测定. 1仪器和试药 Waters2695高效液相色谱仪,Waters2996二极管 阵列检测器,WatersM32数据处理工作站.甲醇和其 他试剂均为分析纯,尼美舒利对照品(广州白云山制药 股份有限公司广州白云山化学制药厂提供,质量分数 作者简介:赵雪梅(1968一),女,大学本科,副主任药师,从事 药物分析工作. 100.2%). 2方法和结果 2.1色谱条件 采用C.8柱(5Ixm,4.6mm×250mil1),以甲醇一 0.004mol/LK,HPO(磷酸调pH为4.0士0.1)(体积比 50:50)为流动相,流速为1.2mL/min. 从色谱图中取得光谱图,可见尼美舒利对照品约 在波长298nm附近有最大吸收,见图1.在此条件下, 尼美舒利的理论塔板数为2000,拖尾因子为1.01.尼 美舒利对照品和供试品色谱图见图2. 0.3 0.2 0.1 0.oo 300350 A/nm 图1尼美舒利紫外光谱图 Fig.1Ultravioletspectrumofnimesulide 281 广东药学院,2006,22(3) O2 图2 Fig.2 2.3标准曲线的建立和线性范围 b t/mint/min a对照品b片剂c胶囊剂 高效液相色谱图 HPLCchromatogramsofthesampleandcontrol 取尼美舒利对照品250mg,精密称定,置50mL量 瓶中,加甲醇30mL,摇匀,超声处理20min,放冷,加甲 醇至刻度,摇匀,精密量取10mL置100mI量瓶中,加流 动相至刻度,摇匀,作为对照品贮备液.精密量取此贮 备液2,4,5,7,10,15mL置50mL量瓶中,加流动相至刻 度,摇匀,配制成浓度为20,40,50,70,100,150g/mL的 溶液,精密量取20,注入液相色谱仪,记录色谱图,以 浓度(p)为横坐标,峰面积()为纵坐标绘制标准曲线, 得回归方程:A=2.42×104p+8.98×10,r=0.9999,n = 6,线性范围为20,150mL. 2.4回收率试验 按照尼美舒利片和胶囊的处方,分别制备空白辅 料,取相当于0.5片(和0.5粒胶囊)的空白辅料置100 mL量瓶,精密称取尼美舒利对照品40,50,60mg加入 量瓶中,加甲醇70mL,摇匀,超声处理20rain,放冷,加 甲醇至刻度,摇匀,精密吸取5mL置50mL量瓶中,加 流动相至刻度,摇匀,作为回收实验溶液.每个浓度配 制3份,照"2.8"项方法测定,测得平均回收率分别为 片剂99.9l%(RSD为0.29%,n=9);胶囊剂99.86% (RSD为0.3l%,n:9). 2.5精密度试验 精密吸取线性试验项下的备液5mL置50mL 量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,精密量取20gL, 注入液相色谱仪,重复进样6次,测得尼美舒利峰面积 的RSD为0.25%. 2.6重复性试验 取同一批样品(片剂和胶囊剂)按样品测定方法 配制供试品溶液6份,测定尼美舒利含量,RSD分别为 0.42%,0.46%,表明本法重现性良好. 2.7稳定性试验 取样品测定项下的供试品溶液,分别在0,2,4,6,8 h进样测定,样品峰面积基本保持不变,RSD分别为 0.47%,0.50%. 2.8样品含量测定 取本品20片(胶囊剂取20粒内容物),精密称定, 研细,取细粉适量(约相当于尼美舒利50mg),精密称 定,置100mL量瓶中,加甲醇适量,置超声浴中,超声 282 6 处理20rain,使溶解,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀, 滤过,精密量取续滤液5mL,置50mL量瓶中,加流动 相稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液.精密吸取标准 曲线项下的尼美舒利对照品贮备液5mL,置50mL量 瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液. 分别取供试品溶液和对照品溶液各20L注入液相色 谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计算.测定多个 厂家的多批样品,结果见表l,表2. 表1片剂含量测定结果 Tab.1Contentsofnimesulideinthetablets 表2胶囊剂含量测定结果 Tab.2C0ntentsofnimesulideinthecapsules 3溶出度测定 取尼美舒利片(胶囊)按中国药典2005年版二部 一 . 一 — 第3期赵雪梅,等.HPLC法测定尼美舒利片和胶囊的含量及溶出度 附录Xc第一法,以三羟甲基氨基甲烷缓冲液(取三 羟甲基氨基甲烷12.1g,加水900mL使溶解,用稀盐 酸调节pH值至9.0?0.1,加水稀释至1000mL,即得) 1000mL为溶剂,转速为100/min,依法操作,经40min 时,取溶液10mL,滤过,取续滤液作为供试品溶液;精 密吸取标准曲线项下的尼美舒利对照品贮备液5mL, 置25mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为对 照品溶液.分别取供试品溶液和对照品溶液各20L 注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计 算.结果见表3,表4. 表3片剂溶出度测定结果 Tab.3Dissolutionofnimesulideinthetablets 批号方法溶出度/%平均值/% 表4胶囊剂溶出度测定结果 Tab.4Dissolutionofnimesulideinthecapsules 批号方法溶Hj度/%平均值/% 4讨论 4.1流动相中加入一定浓度的KHPO,并用磷酸调 pH4.0?0.1,可使尼美舒利峰形对称,减少前吐和拖尾 现象,重现性好. 4.2从色谱图中取得尼美舒利的紫外光谱图,可见尼 美舒利约在298nm的波长处有最大吸收,且在230— 210riITl的波长范围有较强的末端吸收,本文拟订298 ,100g/mL, nm波长为检测波长,供试品浓度为50 测定结果准确. 4.3本实验共测定l2个批号的片剂和9.个批号的胶 囊剂的含量,两种含量测定方法的结果比较表明,uV 法的结果偏高,而本文建立的HPLC法避免了辅料和 包衣材料的影响,结果可靠. 4.4片剂的薄膜衣和胶囊剂的囊壳对溶出度的影响 较大,溶出液常有乳光,不利于紫外光谱法测定,易造 成结果偏高.对比溶出度测定结果,uV法结果都比 HPLC法高,特别是胶囊剂,说明囊壳对紫外测定干扰 比较明显,HPLC法则结果更适合测定尼美舒利片剂 和胶囊剂的溶出度. 参考文献: [1]陈新梅,张新江,高晓黎.高效液相色谱法测定家兔血浆中 尼美舒利的含量[J].中国现代应用药学杂志,2004,8,2I (4):311. [2]潘细贵,马福旺,鲁建武,高效液相色谱法测定尼美舒利凝 胶的含量[J].中国医院药学杂志,1999,19(4):207. (收稿日期:2006—04—14:修回日期:2006—05—24) (上接第280页) 3讨论 3.1检测波长的确定 对苯二酚水溶液和羟苯磺酸钙的最大吸收峰分别 在288riIri和300nm,最小吸收均在250rim附近,在专 属性考察试验中各条件下产生的降解物质的DAD光 谱图显示,各降解产物在约245,260rim的波长范围 有较强的吸光度,该波长在对苯二酚和羟苯磺酸钙的 最小吸收附近,但鉴于对苯二酚可用对照品控制,为保 证其他未知杂质的有效检测,同时又兼顾对苯二酚和 羟苯磺酸钙的吸光强度,故选用260rim作为检测波 长,经实验证明,在该波长下,对苯二酚的检测限可达 5ng,完全可满足检测灵敏度的要求.选择杂质的最大 吸收波长作为检测波长,可使杂质的控制限度严于其 真实含量.由于杂质为未知物,无法测定其校正因子, 因此用自身对照法控制其他杂质的限量. 3.2在本文中,对照品图,酸,碱降解图,及氧化,光照 等图显示,主成分及对苯二酚保留时间不一致,这是由 于试验是非同一时间,在不同的色谱柱上进行所致. 虽保留时间不一致,但主成分与对苯二酚的相对保留 时间基本一致,均是约1:1.5,两者的保留时间比例合 适,克服了英国药典方法中两者值相差较大的不 足,不但可控制合成中引入的杂质对苯二酚,还可有效 检测在储放过程中羟苯磺酸钙的其他降解产物.经试 验,发现在本文的试验条件下,在对苯二酚峰保留时间 之后,还可检出多个降解产物. 3.3从图6和图7的图谱可看出,本品配制成溶液 后,光降解速度和程度会大大增加,提示本品配制成溶 液后宜避光并尽快测定. 3.4本方法能有效分离各条件下的降解物质,可为羟 苯磺酸钙制剂的含量测定和有关物质检查提供参考. 参考文献: [1]杨晓梅,王海燕.羟苯磺酸钙市场浅析[J].中国新医药, 2004,3(8):113. [2]英国药典[S]2004:231 (收稿日期:2006—04—06:修回日期:2006—06—02) 283