【doc】 非清髓性异基因造血干细胞移植后CD45RA^＋细胞的监测及其意义

【doc】 非清髓性异基因造血干细胞移植后CD45RA^＋细胞的监测及其意义 [标签:标题] ?572?中华器官移植杂志2005年9月第26卷第9期 ChinJOrganTransplant,Sep2OO5,Vo1.26,No.9 患者在肾移植2年后生育者3例,子女均健康. 综上所述,从优生学考虑,结合国外经验,我们认为,男 性肾移植患者的授孕较佳时机为:(1)成功的肾移植2年后; (2)硫唑嘌呤用量为5()mg/d,泼尼松用量为1()mg/d,CsA 的用量在3mg?kg?d以下;(3)年龄在35周岁以下;(4) 全身状况良好;(5)肝,肾功能基本正常;(6)无高血压或轻度 高血压,且药物能控制;(7)无血尿,蛋白尿或轻微血尿,蛋白 尿;(8)B型超声波检查移植肾无排斥反应迹象,无肾积水, 结石及输尿管扩张.此外,在授孕前需做精液常规检查,其 配偶怀孕后需加强产前检查,以确保优生优育. 参考文献 1世界卫生组织编.WHO人类精液及精子一官颈粘液相互作用实 验室检查手册.第4版.北京:人民卫生出版社,2001.3-21. 2RizzoniG,EhrichJH,BroyerM,eta1.Successfulpregnanciesin womenonrenalreplacementtherapyreportfromtheEDTA Registry.Nephrola1Transplant,1992,7:279287. 3PicandJC,AudraP,PutetG,eta1.Infantsborntokidney transplantrecipients.ArchFrPediatr,1991,48:323—327. 4黄宇烽,主编.实用精液细胞学彩色图谱.南京:东南大学出版 社,1994.13,15. 5许龙根,宋启哲,戚晓平,等.肾移植患者手术前后性功能的变 化.中华国际医学杂志,2002,2:235—237. 6HabermanJ,KarvdaG,GreensteinSM,eta1.Malefertilityin cyclosporine~treatedrenaltransplantpatients.Jurol,1991,145: 294—296. (收稿日期:2005—04—26) 非清髓性异基因造血干细胞移植后 CD45RA细胞的监测及其意义 叶芳乔振华郭宏锋朱镭鹿育晋王宏伟苏丽萍 异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)已成为治疗恶性血 液病的有效手段,但移植后仍有些患者出现疾病的复发. alIo-HSCT后外周血中T淋巴细胞型和功能的恢复在免 疫监视中起着重要作用.我们监测了20例非清髓性异基因 造血t细胞移植(NST)患者移植后外周血中CD45RA细胞 的化,现报告如下. 对象与方法 一 ,研究对象 2()例均为2()()()年10月至2003年7月在本院接受 HLA相合的同胞间外周血异基因造血干细胞移植的患者, 其中男性12例,女性8例,年龄18,56岁,中位数35岁.20 例的原发病,7例为急性粒细胞白血病(AML),2例为急性 淋巴细胞白血病(ALL),11例为慢性粒细胞白血病(CML), 移植前除2例为CML加速期(AP)外,其余为完全缓解期 (CR)或CML慢性期(cP).预处理为:移植前第9,5d 给予氟达拉滨30mg?m.?d,,或移植前第4,3d给予环 磷酰胺30mg?kg?d,;移植前第8,5d给予白消安2mg ? kg?d,;移植前第7,4d给予抗胸腺细胞球蛋白10mg? kg?d,.术后采用环孢素A(CsA)预防移植物抗宿主病 (GVHD).2()例健康成人作为对照. 二,标本采集 作者单位:()3()()()11太原,山西医科大学第二医院血液t,:l-[nf芳(E-mail: yefangty@163.corn),乔振华,朱镭,鹿育晋,王宏伟,苏丽萍];山西医科大学大 同学院内科教研室(郭宏锋) ? 研究报告? 于移植后1,3,6及12个月时收集外周血标本,发生疾 病复发时,另行采集标本. 三,流式细胞仪检测淋巴细胞免疫标记 取抗凝的外周血1【)()肚l,加入抗CD3,CI)4,CD8, CD45RA抗体(Pharmingen公司产品),混匀,避光放置30 rain,加入溶血素以破坏红细胞,洗涤后,用流式细胞仪检测, 随机EIITE4.5软件分析结果. 四,淋巴细胞表面抗原及细胞因子染色 取肝素抗凝的外周血1ml,用RPMI1640培养液稀释 (1:1),加入24孔培养板,1ml/~t,在其中加入50ng/ml美 洲商陆(PMA),1/lmol/ml离子霉素(Sigma公司产品)和0.7 l蛋白转运抑制剂GolgiStop(Pharmingen公司产品),在体 积分数为5C,37?条件下孵育4h,加入溶血素破坏 红细胞,洗涤后,加入抗CD3,CD4,CD8及CD45RA抗体,避 光放置15rain,然后加入Cytofix/Cytoperm溶液(Pharmin— gen公司产品)固定破膜20rain,用Perm/Wash溶液洗涤后, 加入抗白细胞介素4(I卜4)及抗干扰素(IFN一)抗体 (Pharmingen公司产品),避光30rain,洗涤后,上机检测,随 机ELITE4.5软件分析结果. 五,统计学处理 所得数据以均数?差表示,采用成组设计的两样本 均数比较的t检验,P<(1.05为差异有统计学意义. 结果 一 ,移植后CD4及CD8细胞的恢复 器官移植杂志2O05年9月第26卷第9期ChinJOrganTransplant,Sep20O5,Vo1.26,No.9 移植后1年,ClN细胞仍低于正常水平,CD8细胞移 植后3个月即恢复正常. 二,CIN5RA细胞与疾病复发的关系 移植后,4例患者出现疾病复发.该4例患者的CIN CIN5RA细胞和CD8CIN5RA细胞分别为9.63和 1{5.1,明显低于未复发者的27.86和30.09(P< 0.()1). 三,淋巴细胞内IFN一-/及IL『4的表达 复发的患者,其表达IFN一-/的ClN细胞和CD8细胞 分别占(8.28?2.26)和(12.7?4.{55),未复发患者分别 为(17.08?3.67)和(25.24?5.49),正常对照组为 (19.2?4.59)和(28.37?4.49),复发者明显低于正常 对照组和未复发者.而II,4的水平,3组问的差异无统计学 意义. 讨论 NST后T淋巴细胞的再生需要通过两条途径,胸腺依 赖途径和非胸腺依赖途径.一方面依赖胸腺产生大量的 CIN5RA细胞(初始),维持T淋巴细胞抗原受体的多样性; 另一方面依赖移植物中供者T淋巴细胞的扩展,形成具有识 别抗原特异性的群体_1.T淋巴细胞抗原受体的多样性在 高效免疫,特别是根除残存的肿瘤细胞中发挥着重要的作 用. 我们的研究显示,NST后ClN,CD8细胞数显着下 降,随着移植后时间的延长而逐渐恢复,CD8细胞的恢复较 ClN细胞快,移植后3个月恢复正常,而CD4细胞移植后 1年仍略低于正常水平.这表明CIN细胞的发生依赖于胸 腺的功能,移植后CD8细胞的重建没有受到相关因素的显 着影响,非胸腺依赖途径在其免疫再生中起着十分重要的作 用.同样,NST后CIN5RA细胞也显着降低,随着时间的 延长而逐渐恢复,与文献报道相似_2.一.2(】例接受NST的 ?573? 患者有4例复发,复发患者和对照组相比,CIN5RA细胞水 平显着下降,而没有复发的患者,其CIN5RA细胞水平高于 对照组.结果提示,移植后疾病的高复发和CD45RA细胞 的低重建相关,这可能是胸腺功能受损造成的,也可能是残 存肿瘤细胞通过其它机制抑制了T淋巴细胞的恢复. T淋巴细胞根据其分泌细胞因子的不同分为I型和? 型.我们用流式细胞术检测了T淋巴细胞内细胞因子的表 达,结果显示,在疾病复发的患者,CIN,CD8细胞内IFN一 的表达明显降低,和对照组相比,差异有统计学意义,但我 们没有观察到ID4的显着改变.IFN一可促进细胞毒T淋 巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)的分化增殖,并增强它们 的抗肿瘤作用;IFN一-/还可诱导肿瘤细胞表达HLA分子, 以利于细胞毒T淋巴细胞发挥作用H].本研究的结果提示 我们,T淋巴细胞抗原受体多样性的完整和产生I型细胞因 子的能力,在NST后阻止或延迟疾病复发中占重要地位,在 放,化疗时保护CIN5RA细胞池和移植后T淋巴细胞的再 输入,将成为我们今后研究的一个课题. 参考文献 1ParkmanR,WeinbergKI.Immunologicalreconstitution followingbonemarrowtransplantation.ImmunolRev,1997, 157:73—78. 2SavageWJ,BleesingJJH.Lymphocytereconstitutionfollowing non—myeloablativehematopoieticstemcelltransDlantationfollows tWOpatternsdependingonageanddonor/recipientchimerism. BoneMarrowTransplant,2001,28:463—471. 3郭宏锋,乔振华,苏丽萍,等.非清髓性异基因外周血干细胞移 植后免疫重建的初步研究.中华血液学杂志,2OO3.24:433—434. 4LeePP,ZengD,McCaulyAE,eta1.Thelper2-dominantanti— lymphomaimmuneresponseisassociatedwithfatalouteome. Blood,1997.90:1611—1617. (收稿日期:2004—11—09) 中华医学会外科学分会第三届器官移植研讨会征文通知 ? 消息,? 为了总结近年来我国肾外大器官移植工作的经验,规范器官移植操作,建立器官移植分配网络,进一步提升我国器官移 植水平,使我国的器官移植工作上一个新的台阶,由中华医学会外科学分会器官移植学组主办,昆明医学院附属第二医院承 办的中华医学会外科学分会第三届器官移植研讨会拟定于2006年5月在云南省昆明市召开,现将会议征文事项通知如下. 征文内容:(1)肝移植,胰腺移植,小肠移植,多器官联合移植等方面的基础与临床研究;(2)有关器官与细胞移植的基础研 究;(3)器官移植的相关学科研究,如麻醉,护理,心理学,术后生存质量评估,器官移植的中长期管理软科学问题等;(4)肝癌患 者肝移植,活体肝移植,劈裂式肝移植等特殊问题;(5)肝移植后的胆道,血管并发症以及原发病复发,新生肿瘤等问题;(6)供 者器官的获取,分配,保存及运输问题;(7)组织工程及其它方面的研究. 征文要求:稿件应是尚未在国内学术期刊上公开发表的文章,请寄全文及中文摘要一份,并附软盘(Word文档),盖有单 位公章,并请在信封左下角注明”会议征文”字样(无中文摘要者,恕不能收入汇编,文责自负).收稿人姓名及地址:梁廷波,邵 浙新,杭州市庆春路79号浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科, 邮政编码:31()I)()3;联系电话:0571—87236884,0571— 87236567;传真:{5571—87236884;网上投稿E-mail:liangtingbo@zju.edu.cn;zxshao@zju.edu.cn;征稿截止日期:2{5{56年2月 15日