人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂防腐效力测定

人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂防腐效力测定 人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂防腐效力 测定 【摘要】 目的 测定人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂羟苯 乙酯对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色 念珠菌和黑曲霉菌的抑菌作用。方法 采用微生物学方法和 各时间间隔菌落计数明防腐剂抑菌效果。结果 人工泪液 氯霉素滴眼液中防腐剂羟苯乙酯对霉菌的作用较强,对其他 各菌作用符合标准。结论 该方法可有效控制产品内在质量。 【关键词】 人工泪液氯霉素滴眼液;羟苯乙酯;防腐效力 Test on the Antiseptic Effects of preservative in Artificial Lochrymal Eye Drops WANG Wei-ping.The First Municipal People’s hospital of GuangZhou,Guangzhou 510180,China 【Abstract】 Objective The antiseptic effects of preservative in Artificial Lochrymal Eye Drops on escherichia coli,staphylococcus,pseudomonas aeruginosa candida albicans and aspergillus niger were tested.Methods Using the microbiology method and various time-gap colony counting indicated the antiseptic 1 bacteriostasis effect.Results In Artificial LochrymalEye Drops the antiseptic was strong to aspergillus niger, conforms to the standard to other various bacteria.Conclusion This method may the active control product intrinsic quality. 【Key words】 Artificial Lochrymal;Eye Drops;Ethyparabenantiseptic effect 作者单位:510180广州市第一人民医院 目前,药品制剂中应用的防腐剂种类较多,防腐效力亦不 相同。而滴眼液特别是多效量滴眼液,如果其自身没有足够的 抗菌作用,必须加入防腐剂以杀灭滴眼液在正常贮藏和使用 过程中沾染的微生物,同时防止和限制微生物生长繁殖。英美 药典中均有对制剂中防腐剂其防腐效力进行测定,并有规定, 而我国药典这方面未作要求。本文人工泪液氯霉素滴眼液为 本院自制制剂,主要用于治疗无泪液患者及干燥性角膜炎、结 膜炎;处方中防腐剂为羟苯乙酯,是医院制剂中常用的防腐 剂。本文参照文献对人工泪液氯霉素滴眼液所加防腐剂羟苯 乙酯进行效力测定,有助于医院制剂的质量提高。 1 材料 1.1 菌种 大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、金黄色葡萄球 菌[CMCC(B)26003]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]、白色 念珠菌[CMCC(F)98001]和黑曲霉菌[CMCC(F)98003],均由 2 中国医学细菌保藏中心提供。 1.2 培养基及稀释剂 改良马丁培养基,营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、蛋白胨,以上培养基均购于中国药品生物制品检定所,并参考文献[1]进行制备,采用高压蒸气灭菌法进行灭菌。 1.3 供试品 人工泪液氯霉素滴眼液(批号20090123),由本院制剂室生产,批准文号:粤H20070836。 2 方法与结果 2.1 菌液的制备 2.1.1 取经35?培养18,24 h的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌肉汤液体培养1 ml,用0.1%灭菌蛋白胨水稀释到每毫升含菌数约为1×108个的菌悬液。 2.1.2 取经25?培养48 h的白色念珠菌改良马丁液体培养物1 ml,用0.1%灭菌蛋白胨水稀释到每毫升含菌数约为1×108个的菌悬液。 2.1.3 取经25?培养7 d的黑曲霉菌斜面培养物,用0.1%灭菌蛋白胨水洗下孢子,再稀释至每毫升含孢子数约为1×108个的孢子菌悬液。 2.2 测定方法[1,2] 2.2.1 取供试品5份,每份20 ml放于灭菌试管中,另取0.1%灭菌蛋白胨水20 ml一份作空白对照。 2.2.2 以上各菌悬液各取1 ml分别加入上述供试品和对 3 照管中,使其各含菌数控制在106 ,107之间,摇匀,置于20?,25?避光贮存。 2.2.3 在0 h、7 d、14 d、28 d分别按下述方法测定细菌和霉菌的存活数:取上述接种供试液和对照液各1 ml用0.1%灭菌蛋白胨水10倍系数稀释至适宜浓度,取适宜浓度的供试液和对照液各1 ml于平皿中,每份3个平皿,分别加入培养基15 ml,大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌用营养琼脂培养基30?,37?培养48 h,白色念珠菌用马丁改良琼脂培养基20?,25?培养72 h,黑曲霉菌用马丁改良琼脂培养基20?,25?培养5 d,然后计算菌落数,将每个浓度数据换算为标准对数值,计算各时间间隔下的浓度对数下降值,结果见表1(表中每个试验数据为3次试验结果的平均数)。 表1 人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂效力测定结果 菌种 各时间菌数(个/ml)浓度对数下降值 0 h7 d 14 d28 d7 d14 d28 d 大肠埃希菌35×10640×104 3×102 3×1021.93 3.12 0 金黄色葡萄球菌20×10610×104 75 702.30 3.12-0.02 铜绿假单胞20×10615×1031083.13 3.400.15 白色念珠菌15×106 8×1035×1035×103--0.210 黑曲霉菌 5×106 382828--0.130 4 注:对照液7 d、14 d、28 d菌落数均大于0 h菌落数 3 讨论 3.1 滴眼液常易感染绿脓杆菌,人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂为羟苯乙酯,其稳定性好,在酸碱介质中均有效,对霉菌抑制作用较强,并对绿脓杆菌也有很好的抑菌防腐作用,有效地保证人工泪液氯霉素滴眼液的质量。 3.2 《美国药典》[3]规定眼科制剂中防腐剂防腐效力合格标准为:细菌检查7 d微生物浓度的对数下降值?1.0,14 d微生物浓度的对数下降值?3.0,28 d微生物浓度的对数值与前次检测结果的对数值之差不得超过0.5个对数单位,酵母菌、霉菌7 d、14 d、28 d微生物浓度的对数值与前次检测结果的对数值之差不得超过0.5个对数单位。从表1结果可知,人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂羟苯乙酯对霉菌抑制作用最强,对铜绿假单胞菌也有很好的抑菌作用,各测定时间含菌数均低于零时浓度,并符合标准。 3.3 医院制剂中常含有规定量的防腐剂,而我国对药品中所含防腐剂的检测项目开展较少,《中国药典》至今未收载防腐剂防腐效力测定方法。本文参照文献资料对人工泪液氯霉素滴眼液中防腐剂羟苯乙酯防腐效力进行测定,有利于更好地控制医院制剂质量。 参 考 文 献 [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部).化学工 5 业出版社,2005:(附录)93. [2] 马绪荣,等.药品微生物学检验手册.科学出版社,2000:272. [3] USP29-NF24,2499. 6