【doc】桃核承气改良方对免血管内膜剥脱术后内皮素和一氧化氮及一氧化氮合酶的影响术

【doc】桃核承气改良方对免血管内膜剥脱术后内皮素和一氧化氮及一氧化氮合酶的影响术 桃核承气改良方对免血管内膜剥脱术后内 皮素和一氧化氮及一氧化氮合酶的影响术 中国组织_I一程研究与临床康复第,2眷第2D2008—05—13出版 JournalofClinicalRehabilitativeTissueEngineeringResearchMay13,2008Vo1.12,No.20跫基医学 桃核承气改良方对免血管内膜剥脱术后内皮素和一氧化氮及 一 氧化氮合酶的影响术? 时广容,寓丽鸿,徐琳,张雨 }一}々:_一,衅}#觯 EffectsofimprovedprescriptionofTaorenChengqidecoctiononendothelin,nitricoxideandnitricoxide synthaseafterballoonangioplasty ShiGuang?rong,GongLi?hong,XuLin,ZhangYu Abstract BACKGRouND:P1entyofstudieshavedemonstratedthatearlygrowthofendothelialcellstoinjuredtunicaintimacanprevent intravascularrestenosis. OJECTIVE:TbinvestigatetheeffectsofimprovedprescriptionofTaorenChengqidecoction(PeachKerneldecoctionfor strengtheningqi,onthegrowthandactivationofendothelialcellsinrabbitsafterballoonangioplasty. DESIGN.TIMEANDSETTING:RandomizedcontrolledanimaltrialwasperformedattheLiaoningUniversityofTraditional ChineseMedicineandChinaMedicalUniversityfromApriltoNovember2007. MATERIALS:FortyhealthyNewZealandWhiteRabbitsweighing2.0— 2.5kgwerefedwithhighfatdietfor4weeks,andcreated modelsofartherosclerosisbystrippingabdominalaortictunicaintima.TheimprovedprescriptionofTaorenChengqidecoctionwas productoftheFirstHospitalofLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine;Zocor(simvastatin)isproductofHangzhou MoshadongPharmaceuticalCo.,Ltd.,ZhejiangProvince;aspirinwasproductofBayer. METHODS:Fortyrabbitswererandomlydividedintomodelgroup(n=l1),Chinesemedicinegroup(n=l2),westernmedicine group(n=l1),andblankgroup(n=6).Aftermodeling,themodelgroup,Chinesemedicinegroup,westernmedicinegroupwerefed withnormaldiet.Additionally,theChinesemedicinegroupwasintragastricallyinfusedimprovedprescriptionofTaorenChengqi decoctionf13.5mL/kg)for4weeks;thewesternmedicinegroupwasinfusedwithsimvastatinandaspirinmixture(13.5rnL&g)for 4weeks;themodelgroupandblankgroupwereinfusedwithnormalsaline(13.5mL&g)for4weeks. MAINoUTCoMEMEASURES:Thelevelsofplasmaendothelin—l(ET— 1)andsertlmnitricoxide(N0)weremeasuredby radio—immunityandcolorimetry;vascularET— landnitricoxidesynthasefN0S)proteinexpressionsweredeterminedusing immunohistochemicalmethod. RESULTS:Thirty.tworabbitswereincludedinthefinalanalysis.Comparedwiththeblankgroup,theplasmaET?1was significantlyincreasedandsertlmN0wassignificantlydecreasedintheothergroupsonedayaftermodeling(P<0.05).Theplasma ET— 1wassignificantlydecreasedbutsertlmNOwassignificantlyincreasedintheChinesemedicinegroupandwesternmedicine group28daysaftermodelingfP<0.05).TheexpressionlevelofvascularET?1wassignificantlyhigherthantheothergroups(P< 0.05):theexpressionlevelofvascularET— lsignificantlydecreasedintheChinesemedicinegroupandwesternmedicinegroup(P< 0.05).NOSexpressioninthemodelgroupwassignificantlylowerthantheothergroups(P<0.05),andNOSsignificantlyincreased intheChinesemedicinegroupandwesternmedicinegroup(P<0.05). CoNCLUS10N:TheimprovedprescriptionofTaorenChengqidecoctioncanimproveendothelinandNObalanceinsertlmand injuredvessels.andaidnormalgrowthofvascularendothelialcells. ShiGR,GongLH,XuL,ZhangY.EffectsofimprovedprescriptionofTaorenChengqidecoctiononendothelin,nitricoxideand nitricoxidesynthaseafterballoonangioplasty.ZhongguoZuzhiGongchengYanjiuyuLinchuangKangfu2008;12(20):3837?3840 【WWW.zglckf.corrdzglckf/ejoumal/upfiles/08—20/20k?3837(ps).pdf] 摘要 背景:大量的研究结果已证实,内皮细胞如能够早期覆盖受损的血管内膜层,则可 避免血管内再狭窄的发生. 目的:通过与西药作用对比,观察中药桃核承气改良方对兔血管损伤后内皮细胞生 长及功能的影响. 设计,时间及地点:随机对照动物实验,于2007—04/1l在辽宁中医药大学和中国医 科大学完成. 材料:健康新西兰大耳白兔40只,体质量2.0,2.5kg,高酯饲料喂养4周行腹主动脉 内膜剥脱造模,制备动脉粥样硬化模 型.桃核承气改良方为辽宁中医药大学附属第一医院制剂产品;舒降之为杭州默沙 东制药有限公司产品;阿司匹林为拜尔 药业集团有限公司产品. 方法:40只兔随机数字法分为4组.造模后模型组,中药组,西药组正常饲料喂养, 中药组予桃核承气改良方l3.5mL/kg 灌胃4周,西药组予舒降之,阿司匹林混合液13.5mL/kg灌胃4周,模型组,空白组予 生理盐水13.5mL/kg灌胃4周. 主要观察指标:?造模后l,28d采用硝酸还原法法和比色法测定血浆内皮素l,血清一氧化氮含量.?免疫组织化学法测 定血管中内皮素l,内皮型一氧化氮合酶蛋白表达. 结果:32只新西兰大耳白兔进入结果分析,模型组(n=8),中药组(n=l0),两药组(n=8)和空白组(n=6).?与空白组相比,其 他3组造模后ld血浆内皮素l升高,血清一氧化氮含量下降(P<0.05).造模后28d兔中药组,西药组血浆内皮素l 较模型组明显降低,血清一氧化氮明显升高(P<0.05).?血管中内皮素l表达模 (P<0.05):中药 型组明显高于其他3组 组,西药组较模型组显着减弱(P<0.05).模型组内皮型一氧化氮合酶表达明显低于其他3组(P<0.05):中药组,西药组较 模型组显着增强(P<0.05). 结论:桃核承气改良方能够促进内皮素与一氧化氮之间的平衡协调,有利于血管内皮细胞的修复. 关键词:桃核承改良方:血管内膜剥脱术;内皮素I:一氧化氮;内皮型一氧化氮合酶 Liaoning of Chinese Shenyang Liaoning China University tional Medicine, IIo032. Province, ShiGuang—rong?. Studyingformaster's degree,Liaoning Universityof tionalChinese Medicine,Shenyang 110032,Liaoning Province,China ShiguangrongO701@ l63com Correspondenceto: GongLi—hong, Doctor,Associate chiefphysician, Associateprofessor, Tutorofmaste LiaoningUniversity ofTraditional ChineseMedicine, Shenyang110032, LiaoningProvince, China Lindal795@sina Supportedby:agrant fromtlleEducation Commissionof LiaoningProvince, No.05L246* Received:2007一l1—20 Accepted:2008-04-27 辽宁中医药大学, 辽宁省沈阳市 l10032 时广容?,l981 年生,女,辽宁省 丹东市人,辽宁中 医药大学在读硕 士,主要从事冠心 病的临床与实验 研究. Shiguangrong @】63.com 070】 通讯作者:宫丽 鸿,博士,副主任 医师,副教授,硕 士生导师,辽宁中 医药大学,辽宁省 沈阳市l10032 Lindal795@sina ComCn 辽宁省教委资助 课题(05L246)} 中图分类号:R329 文献标识码:A 文章编号:1673—8225 (2008)20-03837-04 时广容,宫丽鸿,徐琳,张雨.桃核承气改良方对兔血管内膜剥脱术后内皮素和一氧 化氮及一氧化氮合酶的影响lJ1.中国组些稿El:2007?II一20 织研究与临床康复,2008,12(20):3837— 3840[www.zglckcorn/zg1ckf,ejoumapfiles/08.20/20k.3837(ps).pdf]'2. 7 JssNJ673.8225cN2J.J539/RCODEN:zLKHAH3837 Ilj….瞳广容.等桃核承气改建方对兔血管内摸韵酲术磊内皮素和一氧化氯及一一氧化氯合酶的影响 >>本文导读<< 梁厚景:课题受辽宁省教应用要篇:实验结果提示,桃核乘气改良同缈:实验通过建立动 委资助(05L246).项目名称:方能有效地降低冠心痛介入治疗技术术后兔脉粥样硬化模型,对比分析各 桃核乘气改良方对家兔血管球血中内皮素的含量,升高一氧化氮含量,对组内皮素和一氧化氮含量差 囊损伤术后血浆脑利钠肽和信内皮素,一氧化氮分泌具有调整治疗作用,异,为中药桃核乘气改良方促 号转导及转录激活因子3影响促进两者之间的平衡协调;抑制血管内皮增进血管内皮细胞正常生长增生 的实验研究.生,促进损伤内膜修复.提供实验依据. 0引言 冠状动脉由内膜,中膜,外膜组成.内膜是管壁的 最内层,由内皮和内皮下层组成.血管内皮细胞具有复 杂的酶系统,能合成与分泌多种生物活性物质如内皮 素,前列环素以及具有舒张血管作用的内皮细胞舒张因 子.血管内皮的完整性决定着内皮细胞的功能.冠状动 脉单纯球囊扩张后血管再狭窄发生率30%,50%…;冠状 动脉金属裸支架置入术(Percutaneouscoronary intervention,PCI)后血管再狭窄发生率10%,40%t2】;药 物洗脱支架如雷帕霉素洗脱支架置入后发生率仍有 8.9%.研究表明,血栓形成,炎症反应,血管平滑肌增 殖,细胞外基质及胶原纤维过量增生,血管重塑等环节 互相影响,最终导致血管再狭窄.再狭窄的形成为血管 内膜损伤后的过度修复反应,同皮肤创伤后瘢痕形成类 似.而始动环节为血管内膜剥脱,内皮细胞损伤.内皮细 胞不仅是血液和组织之间物质交换的选择性通透屏障,而 且还是多种血管活性质,细胞因子及生长因子的来源和靶 器官,在调节血管舒缩状态,凝血和纤溶,防止有害脂蛋 白浸润及氧自由基损伤等方面起着重要作用.研究表明, 内皮细胞早期得以覆盖于受损的血管内膜,则可避免再狭 窄发生.故早期促使内膜的修复,使内皮细胞迅速生长覆 盖于损伤的血管内膜为血管再狭窄防治的关键J. 1材料和方法 设计:随机对照动物实验. 时间及地点:实验于2007—04/11在辽宁中医药大学 和中国医科大学完成. 材料:健康新西兰大耳白兔40只,由辽宁中医药大 学动物实验中心提供(合格证号:辽实动质字[2000]028 号),清洁级,兔龄4个月,体质量2.0,2.5,雌雄不拘. 家兔普通饲料,家兔高脂饲料(基础饲料79%,15%蛋黄粉, 猪油5%,胆固醇1%)均由辽宁中医药大学动物实验中心加 工.桃核承气改良方:大黄30g,芒硝15g,甘草15g, 肉桂15g,桃仁15g,水蛭25g,金银花20g,由辽宁省中 医院提供.药物用水浸泡半小时,先武火再文火煎1h, 3838 倒出药汁,共煎3次,将药汁合并,纱布过滤后100?水 浴浓缩至100mL,4.C冰箱保存. 主要试剂,仪器及药物来源 ET-1,eNOS免疫组织化学一抗 _二抗生物素标记羊抗兔IgG,辣根 酶标记链霉卵白素工作液,显色 剂3,3.二氨基苯甲胺(DBA) SN.695型智能放免r测量仪 SANYOMDF.382E超低温冰箱, 恒温水浴箱 SmartView2001生物电泳图像分 析软件等 舒降之,40mg/片,批号:国药准 字J20040032 阿司匹林,100mg/片,批号: BTA6015,研磨后,双蒸水溶解, 13.5mL相当含舒降支1.5mg, 阿司匹林3.7mg,4?冰箱保存 武汉博士德生物工程有限公司 中国北京中山生物技术有限 公司 上海原子核研究所日环仪器一厂 日本三洋公司 上海复日科技有限公司 杭州默沙东制药有限公司 拜尔药业集团有限公司 干预分组:40只白兔随机数字表法将兔分为模型组 (n=l1),中药组(,z=12),西药组(,z=11)~ll空白组(,2=6).除 空白组外其他3组高酯饲料喂养4周后行腹主动脉内膜 剥脱术造模,造模后3组正常饲料喂养,中药组,西药 组,空白组分别予桃核承气改良方,舒降之和阿司匹林 混合液,生理盐水13.5mL/kg灌胃4周. 模型制备:模型组,中药组,西药组高酯饲料喂养 4周造成动脉粥样硬化模型【4J,然后行腹主动脉内膜剥脱 术造模:250g,L乌拉坦4mL/l(g腹腔麻醉,右侧腹股 沟部进行脱毛消毒后利多卡因少量局麻,切皮拨肉分离 股动脉,经导丝导入直径1.5,2.0mm球囊导管至肾动脉 下方,盐水充盈球囊(压力为4,6kPa),缓慢回拉导管 至切口处抽空球囊内液体,重复上述过程3次,达到剥 落腹主动脉内皮的目的.撤出导管,结扎股动脉,缝合, 术后3d肌注青霉素80万U/(d?只),预防感染. 实验取材:腹主动脉内膜剥脱术后4周麻醉并处死 兔,切开腹壁,将肠管翻至一侧,见腹主动脉与下腔静 脉并行,分离腹主动脉,截取2cm长腹主动脉生理盐水 冲洗后放于体积分数为0.1的中性甲醛溶液中一20?贮 存.术后1,28d耳缘静脉采血,检测ET.1,NO的含量. 观测指标:血浆ET.1的测定:取2mL血置预冷的 含10g/LEDTA~钠30uL5~I]40uL抑肽酶的试管 P.O.Box1200,Shenyang110004kf23385083@sina.com 时广容等.桃核承气改瞧方对兔血管内膜税术后内攻素_和一氧化氮技一氧化氯 合晦的话响… 中,4?3000r/min离心10min,取血浆置,30?冰 箱中待钡0ET一1. 血清NO的测定:抽血2mL1500r/min离心10min, 分离血清,一30?冰箱冻存.采用比色法,在酶标仪 570nm测定样品吸光度(A)值,以亚硝酸钠为品, 按标准曲线,可以间接测定一氧化氮浓度. 损伤血管中ET一1,eNOS分布测定:免疫组织化学法 将标本经乙醇脱水,二甲苯透明,常规石蜡包埋;5um连 续切片;体积分数为0.03的H2O2室温孵育5,10min;蒸馏 水冲洗,PBS浸泡5minx2;抗原修复;50,100g/L『F常 山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10min,倾去血清勿 洗.滴加一抗,37?孵育1.0,2.0h;PBS冲洗,5rain× 3次;滴加适量生物素标记二抗工作液,37?孵育10, 30min;PBS冲洗,5min×3次;滴加适量的辣根酶标 记的链霉卵白素工作液,37?孵育10,30min;PBS冲 洗,5min×3次;DAB显色3,15min;自来水冲洗,复 染,脱水,透明,封固.PBS代替一抗作为阴性对照. 阳性判断标准:细胞浆呈棕黄色为阳性.经Smart View2001生物电泳图像分析软件进行处理,分析测定 ET一1,eNOS在内皮和平滑肌细胞中的阳性表达. 主要观察指标:?血浆ET一1,血清NO水平.?血 管中ET一1,eNOS蛋白表达. 设计,实施,评估者:实验设计为通讯作者,干预 实施及评估为第一作者.经过正规,采用盲法评估. 统计学分析:第一作者采用SPSS11.5软件统计,均 数间经方差齐性检验后以X?表示,以单因素方差分析 统计结果;相关分析采用直线回归分析法.图像经Smart View2001生物电泳图像分析软件进行处理,分析. 2结果 2.1实验动物数量分析纳入健康新西兰大耳白兔4O 只,32只进入结果分析. 2.2桃核承气改良方对家兔血浆ET一1及血清NO含量的 影响术后1d模型组和中,西药组统称造模组,见表1. 表1造模术后不同时间点血浆ET-I及NO含量的变化 , 蕾西lChangesoftheendothelin—l(ET-I1andserumnitricoxide (NO)afterballoonangioplastyatdifferenttimepoints_ ?S) ld28d ,uu?'P Er.1NOFr.1No (ng/L)(umol/L)(rig/L)(umol/L) Model145.86?14.O9a81.69?9.14 C艏螂el32.45?13.83曲l3O.76?9.6O曲 '妯甜ici171.78士9.90"76.97?9.161 确栅l129.29?l1.43"129.71?9.53 medicine Blank96.81?5.86137.41?12.6097,32?9.15141.67?l1.60 '<0.05w.blankgroup;b/,<0.05w.modelgroup lssN1673.8225cN2|.|53RCODEN."zLKHAH 2_3桃核承气改良方对家兔损伤血管中内皮素1及内皮 型一氧化氮合酶含量的影响 免疫组织化学染色图像分析结果显示: 阳性颗粒主要表达部位在腹主动脉内膜内皮细胞胞浆,动脉中膜及 内皮下的平滑肌细胞胞浆. ET.1抗原表达: 模型组明显高于其他3组(尸<0.05).中,西药组较模型组显着减弱 (P<0.05),中,西药组抗原表达差异无显着性意义(P>0.05). 内皮细胞生长状态: 模型组内皮不光滑,有增生,中药组,西药组内皮连续,增生减低, 空白组内皮光滑,未见增生,见图l,说明桃核承气改良方能抑制 ET-l抗原阳性表达. eNOS抗原表达: 模型组明显低于其他3组(尸<0.05).中药组,西药组较模型组显着 增强(P<0.05),中药组,西药组之间相比,差异无显着性意义 (P>O.05).模型组血管内皮不光滑,有增生和不连续.中药组, 西药组血管内皮较连续,增生减低.空白组血管内皮光滑,未见增 生,见图2,说明桃核承气改良方能促进eNOS抗原阳性表达. 3839 一裾?时广容,等.桃核最气改良方对兔血管内骥韵脱术舌内皮素和一氧化氯及一氧化氯合酶的影响 2.4ET一1与NO含量的相关性分析术后28dET一1与 NO含量的相关分析示两者呈负相关(r=一0.684,P< 0.05). 3讨论 ET是1988年由日本学者Yanagisawa等从猪的主动脉 内皮细胞中分离和纯化的一种21个氨基酸组成的,作用强 烈的缩血管多肽l5];主要由血管内皮细胞产生和分泌l6], 有强大的收缩血管,促进血管平滑肌细胞增殖,迁移和 促进细胞外基质积聚,加速生长因子,黏附分子等合成 与释放,及其调节其他基因表达等多种生物学作用],是 目前所知的最强血管收缩因子.在内皮素的4种异构肽 中,以ET一1生物活性最强【8J.ET一1由各种细胞合成,包括 内皮细胞,平滑肌细胞,心肌细胞,在心血管系统的自 分泌/旁分泌方式中扮演角色,通过有成对的球蛋白受体 信号细胞调节局部血管紧张度.ET一1通过不同的受体发 挥不同的作用,根据受体的不同分成两种亚型即ETA, ETB.两种蛋白都是成对的跨膜球蛋白,根据不同的区 域有不同的分子组成上的,药理上的特性和功能[9-10]. ETB受体主要分布在内皮细胞起舒张作用的ETB1受体和 分布在平滑肌细胞起收缩作用的ETB2受体…J. NO是由完整血管内皮细胞内N0S催化L一精氨酸而 合成,释放的内皮依赖性舒张因子.内皮NO调整血管舒 张;阻止血小板聚集和平滑肌增生;通过增强超氧化物 歧化酶的表达有抗氧化的作用;能阻止脂链反应,在对 抗动脉粥样硬化方面作为内源性保护因素扮演了重要角 色".NO是体内重要的生理递质和细胞间,细胞内的 化学信使,它参与机体生理过程的调节和宿主防御以及 免疫反应,同时在炎症反应中也发挥着重要作用. 一 氧化氮在平滑肌舒张,神经传导,抑制血小板聚集等 生理过程中是关键的调节因素. NO和ET之间的平衡是体循环调节和局部血流灌注 的主要决定因素.研究提示,心血管支架置入后血循环 中ET浓度明显增高,而NO的基础释放水平和活性减低, 本实验结果亦证实了这一点NO与ET问平衡的破坏,是 动脉内皮受损的显着特征,PCI术后血管再狭窄的发生, 发展过程中起重要作用.同时有观察表明NOS的基因多 态性以及ET活性均与NO的含量有关[16-17l. 因PCI系为外源性创伤,导致血脉受损,瘀血内停, 毒邪壅于局部,与外科的创伤过程类似,并根据病变局 部的感染因素和炎症反应,提出PCI术后再狭窄的中医 发病机制不单纯是痰瘀和虚,局部特点应为瘀毒互结, 兼以正气亏虚.由于新旧病因的综合作用,再次心脉闭 阻的可能增加,这可能是RS形成的另一主要机制.本实 验运用伤寒方《桃核承气汤》为基础的改良方中大黄,芒 3840 硝为软坚散结要药防治毒邪壅于局部,防止增生,预防再 狭窄共为君药;桃仁为活血祛瘀之药,水蛭为破血逐瘀之 药,金银花为清热解毒之药共为臣药;肉桂补元阳,暖脾 胃,除积冷,通血脉为佐药;炙甘草入心经,能补益气血 以鼓动血脉,又有调和诸药之功效为使药.该方的组成特 点是具有活血化瘀,通下瘀毒兼扶正气. 本实结果提示桃核承气改良方能有效地降低PCI术 ,升高NO含量,抑制血管内皮增生, 后兔血中ET的含量 促进损伤内膜修复.显示桃核承气改良方对PCI术后兔 内皮细胞的ET,NO分泌具有调整治疗作用,促进ET, NO之间的平衡协调,从而防止损伤内皮细胞增生预防 PCI术后再狭窄. 4参考文献 lBautersC.MeuriceHalnonM.eta1.Mechanismsandpreventionof restenosis:fromexperimentalmodelstoclinicalpractice.Cardiovasc Resl996;3l(6):835.846 2RensingBJ.VosJ,SmitsPC.eta1.CoronaryrestenosiseliminationwitIla sirolimuselutingstent:firstEuropeanhumanexperiencewitIl6.month angiographicandintravascularultrasonicfollow.up.EnrHealtJ 2o0l;22(22):2l25.2l30 3JiangCW.ZhanHM,WangWH.eta1.ZhonghuaErbiYanhoukeZazhi 2OO4:39(4:2l1.2l5 江超武,展鸿谋,王文惠,等.转化生长因子Bl和即刻早期基因及p27在 中耳胆脂瘤上皮中的表达『J1.中华耳鼻咽喉科杂志,2004,39(4): 2Il一2l5 4ZhangLouGQianMZ,eta1.ZunyiYixueyuanXuebao2o0l:24(4): 234—236 张勇,娄桂予.钱民章,等.建立兔高脂血症模型及动脉粥样硬化斑块的 方法『J1.遵义医学院,2001,24(4):234—236 5RubanyiGM.PolokoffMA.EndotIlelins:molecularbiology,biochemistr, pharmacology,physiology,andpathophysiology.PharmacolRevl994; 46(3):325—4l5 6LiuB.HuDYZhonghuaXinxueguanbingZazh.1995;23(6):460.462 刘勃,胡大一.内皮素抗血清对大鼠主动脉球囊损伤后内膜增生的影 响『J1.中华心血管病杂志,1995,23(6):460—462 7MasakiThediscoveryofendotIlelins.CardiovascResl998;39(3): 530—533 8XuXN.HuangJM.LinGJ.eta1.ZhonghuaErbihouTouiingWikeZazhi 2o05;40(7):509.5l2 徐香娜,黄建民,林国经,等.内皮素在噪声性内耳损伤过程中的作用 【J].中华耳鼻喉头颈外科杂志,2005,40(7):509.512 9AttinaCamidgeRNewbyDE.eta1.Endothelinantagonisminpulmonary hypertension.heartfailure,andbeyond.Heart2005;9l(6):825.83l l0Bras—SilvaC.Leite-MoreiraAE0bligatoryroleoftIleendocardial endotIleliumintheincreaseofmyocardialdistensibilityinducedby endotIlelin.1.ExpBiolMed(Maywood)2oo6;23l(6):876—88l IlTsuruokaS.WatanabeS.PurkersonJM.eta1.EndotIlelinandnitricoxide mediateadaptationoftIlecorticalcollectingducttometabolicacidosis. 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