多花筋骨草生药学研究(可编辑)

多花筋骨草生药学研究(可编辑) 多花筋骨草生药学研究 佳木斯大学 硕士学位论文 多花筋骨草生药学研究 姓名:王咏 申请学位级别:硕士 专业:生药学 指导教师:刘娟 20060701学术诚信承诺 本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工 作及取得研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方 外,论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,也不包含为获得 佳木斯大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的。与我一同工 作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示 了谢意。 签名:皇吐日期:丝受之 关于论文使用授权的说明 本人完全了解佳木斯大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学 校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布 论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论 文。 保密的论文在解密后应遵循此规定 导师签名: 签名:皇里卤兰 日期:丝』垂~、 中文接要 为明确多花筋骨革伸肘触咖触删蚪的资源分布、生药学特征及为多花筋骨萆 药耱建立一释全嚣、有散酶覆量译徐藩系,戳便为合瑗开发餐蘑移花簸嚣鼙药耪搀供科 学依据,本实验对多花筋骨草进行了较系统的生药学研究,用解剖学方法对熊根、茎、 时麓帮位遂纷了显辍将缝谚究,缝莱表鹗,多蓬簸夤鼙豹禳、茎、时等均鬟窍甥蒙弱嚣 微浆别特征。采用薄层艨析法对其一羟基蜕皮激素成分进行了初步定性,发现 掇、茎、叶、芘和果实部均会有羟基蜕皮激素,采耀比法测定了摄、蒸、时、筏 和聚实一蜕皮激素的岔量,研究结果表明,叶部分的含量最高,花和果安、茎中含 量其次,根含最最低。淼阅资料与实地考察多花篾骨擎的群丛类型,并采用榉方调套浃 谲森了它们的单位面较薰积量。攀位面积蓄积藿: 经冀测量与计算,株密度为 .士.株/、株平重.?.,折算成亩产量为.‖赢。 ; 关键词:多花筋骨萆;显微特征;一羟基蜕皮激素; 单位面积蓄积 量 ‰融疆 协西盯组 蕊母氆 ,甜 瑚? ,船咖姆嗽,‖嘴球础痧阳姒町哟珊蛀遮 袱矗 也船 蹦鼬嗍【卸 确?印. 糟 龄 ,执 嘶卿.? 弭【?纰妇抽, 自啪,威矗证’., 诚蜮瓣,妇越 避出蛙。?蹦珏 霉,. 沁 岫 , 曲,糊 矗堍姚吐埽删虹强 黻韬恕豫《幻呔西竭移硪嘲藏建曲酬翻强破孵 ? ?孤嗨 .黜 】 卅姆口朋训彬砒 斑糯自船 “遐譬.。 .缘。 凇卿:似脚“删白尹血 ..垡疲堑杰堂噬?:堂缱数墓 ???一 三、 前言 多花筋骨草 为唇型科筋骨草属植 物,该属植物大部分为常用中草药。其中金疮小草、痢止蒿、白苞筋骨草、紫背金 盘、多花筋骨草的全草入药,具有止咳化痰、清热?血、解毒消肿、止痢的功效,民间 用于治疗上呼吸道感染引起的急慢性咽炎、支气管炎、扁桃体炎、肺炎以及痢疾、吐 血、咳血、疗疮、痈肿、跌打损伤等。各国学者对其化学成分进行深入研究,发现了二 萜、环烯醚萜、植物淄酮、黄酮及其苷类等成分。经传统医学的医学实践和现代国内外 的科学实验,确认了它们的多种功效,实验证明有收缩血管、抗、促红细胞生成、 利胆、抑菌、抗肿瘤、降压、强心、降血糖、降脂等药理作用。尤其是一些植物如多花 筋骨草中含有的.通过肛蛋白激酶系统介导,促进糖代谢和脂类 代谢,改善和治疗高血糖症和高血脂症,调节免疫功能和中枢神经系统,预防和治疗缺 氧和缺血性脑损伤,增强生命力,具有较高的抗氧化活性,抗内皮细胞损伤,促进表皮 细胞分化,因而临床应用十分广泛。 国内外对筋骨草属植物生物活性及化学成分进行了大薰深入的研究工作,这为我们 选择药物提供了方便。另一方面,我们也看到了基础生药学研究比较少,化学定量方法 未确定,特别是主产于东北地区的多花筋骨草的质量评价标准仍不规范和先进,影响了 及其制剂的质量评价系统的建立和产品质量的提高,这些都有待加以完善。为了更好地 开发利用本植物丰富的资源,有必要对多花筋骨草进行较系统的生药学研究,建立规 范、先进的多花筋骨草质量评价体系,保证药材及其制剂的质量,也为进一步制定较完 善的质量标准提供科学、可靠的理论依据。四、文献综述 中药是我国传统药学的宝库,是我国人民千百年来在与疾病的斗争中亲身经历,不 断总结经验得出的宝贵财富。中药与西药相比,由于自身有效成分浓度低、吸收差、起 效慢以及无严格的质控标准等缺点,曾被西药所排斥而处于劣势地位。。但是随着现代 医药的高速发展,人们也看到了化学药物中普遍存在的毒副作用及其局限性,而对有些 久治不愈的慢性病,或是让西药也束手无策的爱滋病、癌症等,人们把目光转向了祖国 博大精深的传统中药。连世界上第一个发现爱滋病病毒的法国学者蒙太尼教授也来到中 国,对中医药防治爱滋病寄予了很高的期望“。中药迎来了前所未有的发展契机,但是 由于我国药用植物种类繁多、分布广泛,同时存在着多民族、多语言、不同文化背景等 差异,造成了许多药材同名异物、同物异名,品种混淆现象十分严 重。药材之间的替换 品、伪品也随着中药材的升值而层出不穷,使得药材市场混乱不堪,进一步影响了中药 成方制剂的质量,阻碍了中药现代化的发展步伐。因此,对中药材进行生药学研究,以 性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定、有效成分含量测定等作为研究手段鉴定药材的基源、 显微构造、有效成分等是保证药材及中药制荆质量可靠,临床用药安全的有效。 唇形科筋骨草属植物全世界约有种,广泛分布于欧,亚大陆温带地区。我国有 种,大多数分布于秦岭以南,江苏,江西,福建,安徽,浙江,湖北,湖南,四 川,西藏等地植物资源极为丰富,倪红伟等报道多花筋骨草在黑龙江省主要分布在三 江平原地区。该属植物金疮小草、痢止蒿、白苞筋骨草、紫背金盘、多花筋骨草的全 草入药,具有止咳化痰、清热?血、解毒消肿、止痢的功效、民间用于治疗上呼吸道感 染引起的急慢性咽炎、支气管炎、扁桃体炎、肺炎以及痢疾、吐血、咳血、疗疮、痈 肿、跌打损伤等。各国学者对其化学成分进行深入研究,发现了 二萜、环烯醚萜、植物 甾酮、黄酮及其苷类等成分。而且经实验证明有收缩血管、抗、促红细胞生成、利 胆、抑菌、抗肿瘤、降压、强心、降血糖、降脂等药理作用。具有十分可观的开发前 景。 本人查阅了近年的文献资料,现从本草考证、生药学研究、化学成分、药理作 用进行综述如下: 、本草考证~ ~簇杰薤蚕秘委篁缎碰窑 多花籁雷筚最早娥见于《蠹蒙吉棱甥志》,记载为多年生摹本,离,饕爨米, 莲真立,单生,密被白色面毛状长柔毛,叶椭圆形或卵圆形,长厘米,先端钝,叶 慕?。《索禳物恚》瀚,甍鸶大,下熬蠹与茎靖弱形??。《中华零擎》瞄,多年 生草本,高。厘米,旗直立,不分技,四棱形??..昧祷,性寒。清热解毒,止 瘫?。?。 、生药学鉴定 在查阕的年以内鹈黉料中,肖关筋骨草属叟蓊学研究方面未觅到文献报 道,且麴用植物的名称十分混乱。擎,褚小兰等从本草考诞方瑶先筋骨革正名。 、化学成分 各国学卷怼簸爨革属攮物证学袋势遴嚣深入弱磁究,发瑗了二旗,强媾醚藜, 植物甾酮,黄酮及其管等成分。 金疮,、草疆嘲斑制”瑚强旃. 该植物为筋骨草属檬物中应用最广也是被研究最多的植物之一,其中仑有二旗类成 分 .豫、丑拶、 啪分别报道金疮小革禽新壳罗烷型 成分的露毒姻幽 、霹咎嗽糊蛙国、鼋?潲融.,霹越嗽建娃、撼?瓤魄 、萄弼、旬面加、卸蝴咖、硒蝴、面部触、 簿;鑫越妇、奄磁;曲矗遮,簿氍露瞻融、萄疆寄斑鞋辘、盛秘,透蛹醢孚舔遗糖残 分, 松香烷二型类有两棚曲。从金疮小草中还分离出了环烯醚稿类成分 ,由嘛如 滞沁稿舐抽堇雄溉?锣强醪囊蠢羹诳越宅&丸矗燃聃妇韬 , .。另外等从金瘸小革中分离得到个苯乙醇苷类成分 融蛐每嬲、矧甜、蛐。 紫背金盘懈舾矽懒撇溉阳 从紫背金窳中分离刘新克罗烷型成分萄蝴,舒磷两釉曲, 垮糍甜 、《昏睚接遐、甓;磺弘翔国瞳纽、蔓毽鼢描汹两强昏墨 愈,萄琏薛畦臻疽 , 洳,徽姐证;环烯醚祷类成分巾,奶晤,龇煳 霉豁拇?黼;痨。蠡,玉晌瑚国鲢鑫氟??激韬晦礤。。&,蠛凌箱 酮 类成分姗啪、硝愀。 瓣,蒯酗舰积濑矧钟:???? 一缝茎疆熬篁堑墼皇载筐基乙奎 从‖嶝.溉妇龇撕 泖分离爨八秘掰夷罗烷型藕类成分:筠萨啦 娃瓣, 咖羽,锄锄 、萄】删 、萄咖 、卸南、面臼血 、《嘲蕊扛&;一耱霹燎醚旗类残分?脚如;舔狺巍,&姆琵巍? 散瘀荜觑卿埘?浙舨成.胍磁.四从散瘀革中新克罗烷 。 型二旗炎减分粥瑚?堍 太籽筋骨草 彬彤糊娜砌.川 、 磁竭从大籽筋骨草中新克梦烷型二萜类成分】叵 剃、坞“黼 、磷删、髑妇 小花筋骨草‖增日埘四班日 嘲呔缀越七壤遂从小葱菸学孳孛分离褥至《筠鹄蕾鞋魏毛冷娃 黼,; 锄?;两;;狮?; 、: 辩论。则融;参娥赫碡南姆酬珏喇魏;匈鑫?甜猡幽嘲嘴牺畦;和 弘灿喇翻等成分。 ?丸踩一技蔫蠢惩静橼辫妇 【从九味一枝蒿中分离到筠蜘?:二十六烷醇;二十四烷酸;二十 二 统酸三卡酯;茹一谷甾醇一一葡萄糖箭:西蕊;吲麴漱?,?锄啪; 到。 鼹筋骨荜辨蛔搠唧建烬鼬妇时司从贾筋骨翠分离出棚? 瓣掣幽娃奴?粥媾跌?趣弦拶翰彩妇分凑褥裂帕.母. 嫩 曩内琵麓蛋摹瓣秽绺潮磷如酝蕊霉获镏拶耀燃爵分离塞 、州、铡;积.出侧印如; 酶蠹骧?一酶颤蠲硅蛀;舔唧垃;馥喇窑池 柳叶筋骨草,增蹿期加归砌: &钯一喝飘秭盼筋骨荜分离掇岱函姆彻妒蛐萄;姝垮.; 两。 ?;越娃删研分离得到阻码硪馘,碟袖鼢垂.阻姐兮伽争》 菩删啪豳;沁 ;旬蜘随畔螨池;硝,唧;旬 曲 。吲 母‰嗡; 【搬道得到 如喇颤;啪嘶岫;?;?; 抛掰瓣艇罐括; ..??筐丕疆蜀淡墅匠雠毫?窑 &妇刚觚母强静嘏鲥融分离篷阻翠玉.骟渣蛹嘴硒矗;舔礓即溉 东方筋骨草彬即。啦”枷缸。 辔。鼙’’飙姆瓣硪积分离出内静喇泌】??;蠲该植物中含 有;?;僻?等成公。 痢止蓠 具戚竭擞遄癍止麓中含有瘌止蔫肇素;痢止莲己豢;洋艿豢;金会 欢素;哭臻藤己 素?:哪西;萄删蹰;”阗删粥;鼬 蠢趣磐矗醢主要成分为辑黪矮& 仰弦?瑚如主要成分为卵如;雠删; 母裙罐翮矗搿主要袋分为琢跨&;哟翡竭蜀涵; 坳衲蹴们黼珊括主要成分为强;融辩哆砸; 匍萄筋骨草恕弘吲砌坩王爱国掰撤道从简咖分离出戳洳; 西;一?啦哟萄;鹣灏 陶搬遵从蝴瓿季导到琏喧。; 面;也×罐’ ;町触;?;知伽翠嘲皑 ?澈钯?; 国产搬道内碹孽潮她含露 采砖溅 呱 哟弘醅‰一吐讹剞喇., 蕊伯戚越妞捌精州越虹嘈拄峨馘?.一 吣...,删 ;习瑚分离得到 则豳一麟妒?峨孵嘟茧融啪豳叫搿黼幽;删嫩哥《渊鞠蝌 叩卜.州西;一讲一醇;删一删. 誊巍。 ,删煺咖御嗍御印? 艚艇飘嘲勰搠、鑫粒鹾。】摄逶了萄搿?妇嘴嚣搬蹿噼,嘲懿往学 成分墙却伊””蜘;批咖;胁 玛碚‘。酵.辩劓拶鑫凹暖撼;螂斑争氆函阉豫争?争窝印整嗽搿 印重矗芏蛔鼬;器嘈西 蝴培慨;出喇础;也蛐嘲越 伊嚣簏蕾擎季琏掰鑫谊 四报道了从 、,中分离到.;?; 黔?鼎钯?;默妇;、呶? ;、一 ,?辩弘啦。~~一垡型渤煞堂鳗兰:裁熊趁窑 白苞筋骨草 骼蛳?捌、嘲报道从白苞筋骨草中分离出忽布素、、, 四分离得到香草酸;一谷甾醇;苛伊利素;香叶木素;山柰酚、.甲 醚;槲皮素; 钒?坳“眦懈 吼删卯如抽 王明安?报道从齿苞筋骨草分离出?嘟坷? ?, 哪;? ?《釜赳舢一召?戚如 ,侣口心配船盘。 李波等口从劁 捌蹴分离到瑚呦..咖,. 曲似,。。,‰,’?枇咖’时锄.,. 匈印‰,.?萄蜊,醅睡,锄 吨 多花筋骨草母弘蝴口: 报道从简 山廿中分离出.; 婶等阕 分离得到印血;. ; 岫等四分离得到.捌一 瑚?记?;啪?掣:脚? ;蹴黼;掰蕊醅。商 掣 。 近年来,植物蜕皮激素的开发和利用成为一个热点,邱明华,聂瑞 麟【柏】系统地综 述了援甥蠖皮激素数开发秘毒麓。逶遥檀镑簿遥发瑾整物蜣皮激豢菠分广泛存在予器形 科,筋骨草属中。在当今其对鼯虫的应用,作化装品特殊添加剂,医药的潜在应用价 菹,农药鹣潜在徐餐帮融弓超人们的充分认识。 邱志国、遐德福’】对东北的两种筋骨革中蜕皮激豢类物质进行了分析,并确立了其 舫病鱼寄方蔼的价值,虽然多花筋骨革中共含肖具蜕皮活性的物质翻种,总量为 幢;线叶筋骨革中共含有疆秘具蜕皮活性物质,总爨为目瞻,此蹙为云囊露农 草中该物质含量约%的/左右怒国内目前使用的筋骨革.%的/~ 忍。。瞧从箕生物活往物质测寇中表瑰瓣莛鲟摭蜕皮活瞧来看,戴亵类麓蜃萃曼爨极褰 价值的提取蜕皮激素物质的植物柬源。 蜕痰躐酮含量测定方法: 对该属植物蜕皮激素的含量测定在年腐棣等“”用紫外分光光度法测定筋骨草 蜕菠液中一蜕皮激素的含萤,瑰方法所得数据与文献记载静理论数据稻近,由予所需 仪器较便宣可为一些中小药厂所用,但域在所使用的主流方法是 勰效液楣法。年 刘斌等””用?法测定自毛夏枯草中杯苋甾酮的含爨色谱条件,流动相;乙降水 :豫,濂遮:.向,控滠:室基,检测波长黼,灵敏菠;。憨。 年邱志国等采用高散液相法对多花筋骨革,线叶筋骨草进行分离鉴定,色谱条件 为:霾定相 ;滚动穰;罕黪:零;;流漤速度:。掰/瑶;检测器:掰,桂藉 温度:?,进样量:。刘姣,周溉球,彭超报道高效液捆法测定牛膝中蜕皮甾 聚含鬟简霞、莰速、准确,可作为禽牛膝话《裁震爨控翱静标准。之静文献中,多采蠲将年 膝粉术鼹于索氏提取器中,乙醇阐流。通过实验发现,该方法不能将牛膝中的蜕皮掰酮提 取完全,造成含擞测定的结果偏低。通邋实验发现,用/甲醇越声能将蜕皮甾酮较完 全的提取出来,色谱条牛?校.蛇,滚动相:甲酵拳娃,检测波长:,柱 ..~?蓬盔颤表堂醒垂鼗鲢自越 湿:室漫,流速:。向。张夔,韦嚣,粟晖四投遭袋耀趣声援淑法,露捩速毒效遮提 取牛膝中活性成分蜕皮甾酮.以甲醇:水:/,%为流动相.采用柱可 有效 遮分凑活牲残分蜣疫警翳在波长戈《蕊遴雩予溺定。繇建立熬超声捷敬弦留.溺定 牛膝中蜕皮甾酮的方法为牛膝中有效成分的开发利用提供了实验依据。陈莉莉等四报道 垂不鬻方法摄取漏芦中蜕皮毯凝,结栗采焉超黟提取法,搡作简便,提取时闯短,但蜕 皮甾酮提取得不是很究全;使甩乙醇回流提取,提取效紧受溶壳浓度的影响很大:冷浸 法设备简单,成本低廉,但提取不完全,时间长,效率低;采用甲醇热提取法对蜕皮甾 酮的提取是最宠全蛇,豆瞬需设备篱蠖。因此,三秘方法相鞍,选用带释热提取慰潺 芦样晶进行处耀最佳。 马英,车镇涛等“”报道用反相高效液相德谱法测定怀牛腺中羟 基促蜕皮滏黎黪含量,惫谱条镣必色落控:强一??隧×。豳魏强 流动棚:乙睛一水.:.:检测波长::柱温:筑温:流速:.【一:灵敏 度:.携。宋鬻翠,满醛敏湖投滚用薄瑟扫搐法溯定争骚及三势丸孛蜕受酾翳岔 量方法简便,快捷,于同一块张胶一肥薄层板上,用乙酸乙酯展开,薄层扫 接条彳牛,双波长反射法锯齿扫播。 ,萨:狭缝. .,。 脚用高效液相色谱法考察了流动棚组成对蜕皮甾酗及甾酮类化合物分离条 件的彰响:嘲以和液滴逆流色谱分离测定了植物中的甾酮类化含物:文 献。“采用薄鼷层拆法测定了濑芦中蜕皮缁酮懿客量。麴琴等鲫袋用反糖离效滚糖色谱 法卜,旷?柱,甲醇一水:流动相,在 【波长处测定中成 蕊金拳瀵孛蜕痰篷酮静食垂。杰。’羽影融魏圈量绒毪关羲穗关系数蠢。鹑:方 法的检出限为.嗍一,为.%,.舯。采用活性氯化 锫柱强分离,潋豫去主鞭子撬组分静彩嗡。方法篱便,重糯性好,闱于实际弹晶分析,分祈 结果满意。 、药理作用: 针对簸骨荦属植物的疗效犀内步学者作道多方匿的。浅分秘莼瑾研究。 .收缩皿管 嬲等辫羧遘鹱攘氡蒺蠢摹孛分藤褥裂静释拜燎醚藜裁分殛警礤趣及移 熙有体外收缩血管活性,且后者的活性相当显著。坷等】报道 了霉峭珏承捷穆辩,、鬣动繇翡结莱表鞠,其巾只有蹦八‰有律溺。 .抗麒【 ..蕉蕉窥悫鼗醒妻鼗笸既窑 ‰等嘲掇遵金痰小摹审瓣黄酸类成分霹以裁割瓣礤葶翼马终豢赘盘病凑逆转 录酶。 。蹙缎缍膣生戎 该属植物中的一戡植物蜕皮甾酮类化合物可增加正常鼠血液中红细胞和血红骚自含 量,对苯麓掰敬贫盘韵红细胞褥生有嚣藩的影响,其键红细胞垒成的侔麓类似予溪固醇 同化药去氢甲然睾丸素?。 .利服 ?等堋掇道该属接物孛靛援物蜕皮激豢逶酮其蠢显著斡键避疆汁分泌嚣麓,并 且增加胆汁中的胆酸及胆红素含量,降低胆固醇含量。 。挣蘩 等报道白苞筋骨草中的忽布素,及的水解产物,对金黄色葡萄球菌, 绿藏释麓其有较强蠹冬撩藩活挂。扬愚籁簿圆统诗了铡金疮小革治疗麓潍俸炎病历, 证明此草药疗效好、治搬率高。王初等精川报道念疮小草鲜汁对烫伤的疗效进行了实验研 的石 究,缡果表明鑫疮小苹具有抗胬、消炎等作用明显。硝瑚嗍对苒 油醚、二氯甲烷、甲酵提取物的抗菌效果进行 较,发现石油醚提取物效果最健。 .抗肿瘤 呔麟蜮等瓣】擐道麸鑫瘴,、擎孛玲囊褥到熬凝焚甾戮鼗‰掰唧鞘露囊瓣瘩 细胞生长促进剂,诱导产生的病簿早期抗原具有强烈的抑制作用,表现出潜在的 莸黪癣活瞧。翳茂责等簪麓经骄究证臻金疮夺莘永撵滚杏俸岁对小鬣鹣。岗瘤有一定鹣 抑制作用。 .降舔、强各 呔.鹏等嘲报道九味一技蓠魁取物对大鼠实验性高血压有降臌作用。蕊 等从植物中还分离得到~种新的强心剂。举张昆照等州进彳于了卿虎例”施煅 治疗离巍压瘸铡糁疼双察,怼照维淹剥盘警缀褥出瓣办侧幻魏 ,海毒~定的 降压效果。两缎疗效光鼹蓍性麓异,,但如删附对改善黼舡匪悫糟的头 疼,头犟,失眠,视力模寮等痰狡翡效莱凌手糕巍平,蠢戮爱应穗 对较少。王实强等隧 经药理学实验证明,盒疮小草确有一定的降压作用,其降压的主要化学成分为二糨化合 秘,与对照锺?豁痛定稳沈,起效较馒俸瘸强度较弱,僵维持降嚣散采嚣寸简较长。 。降糖??璧纛驻耄謦垂箩毯酝麓 黼等【删报道该属械物中的植物蜕皮酬酮类成分可降低高觚糖素或四氧嘧啶所 致小鼠离斑糖,具有潜在的胰岛素样活性。 旧报道劬蜒蹿榭植物全草的水 提物怼猿艨瘸大鼠毒硬曼的降压终瘸。 .降疆 该聪植物所含的植物蜕皮甾酮类成分可抑制?.引越的小鼠高胆圃醇和 高脂血绽的发展,并具有抗兔动脉粥样硬化的作用。 。止瘫 蛰痨畦等网豢遂了谚塔踞蹦粉颤懿零捷物、乙醇提取秘毒麴臻署减轻疼癌夔终 用。 。其它 通过对例临床病例的观察凌立君嘲报道了囱琵爱枯草可用于治疗慢性骨髓炎。 穗天帮嘲摄遵了簸夤摹与当魁、惩胡索、蘩金、猿滏、自莲、雷碎於、翻黉、藩受、痰 桂、悔牛膝配伍可夏胃予治疗藏鸯头曾骺无菌瞧环死 蝴懈作为一种调节肠胃功能紊乱、驱除肠道寄生虫的特效药被收入摩洛哥药 典, 等对他鲫埘进行了毒理学研究,发现其对脑、肝脏、肾脏的正常结构 无形态学上的影响。掇遵从劝幻鼢鼢獭璐口玉选上部分分离出耨毽合秘 舔譬氇嚣墒璃疆酷越感阳,缍戆毒靛实羧表臻这三释纯含秘熬骞挠强避 ,的作用。埘从产于肯尼亚的劝彬琳棚船分离出的一? 雌,并由实验诳明有明显的细胞毒性。 筋骨萆属广泛含有植物蜕皮激素类物质。 蘩黉攀震禳麓资源卡分警塞,著显蓦瑾终震鞠燕,瀑受疰菱赛豹费骧,经多年寒该 璃植物静证明还十分混乱,爨有入作进本草考证,却未曾扶生药学角发对其避行鉴 别。对于雾花筋骨草这种生产于东北的筋骨革属樾物,只有 等对其地方部 分的化学成分进行了研究,东北林大的邱志国等也从抗病虫害角度研究了其植物蜕皮激 素。这就造成了瓷源的极大浚赞,重其遴行系绕的生药礤究藏使这耱塞赍魏中药资源囊 懿诖入】受益霹多花麓曹鼙能举戒分静动态势辑为今后认涯打下蒺确。 。蜕皮甾酮的研究滋展; 羟撼蜕皮甾酮药理作用: ..???? ?鬃盔蕴焘鬟缓美釜筐麓窑 『等报道对心肌梗塞有预防作用。晋举等和吴旭等通过研究大鼠,认 卷怒减轻了皇由基援绕及稳定心腿细髅鳇逶透瞧,减少缺?整飘酶瀵豹释赦,减 轻缺血心肌的损伤,降低心肌缺觚再灌注诱发室性早博和心律失常的发生率。该实验添 食的小藏瞧血球数爨显著高于对照,这可能是小鼠耐缺氧、耐高漫能力提裹秘体力 增强的生理錾础之~。疑旭等给肺再灌注损伤模型大鼠颈静脉滴注 .一 ,发现能通过减轻脂质过载化,减轻肺水肿和肺再灌注损伤。徐世清””能够 有效诞避礴巍动物静多种组织和器官酶孩酸苟蛋自质的合成及糖代谢和腊炎代谢、改善 搿觑糖症和高衄脂症,调节免疫功能和中枢神经系统,改善和治疗缺氧和缺觚性脑损 锈。怒其蠢较高豹撬裁健活淫,绳使红盘稼孬生,抗痰瘦缩稔攒饶,键逡袈皮细稳分 化,增强生命力。袁秀荣吲经报道蜕皮激素商抗衰老作用,其机制与促进细胞增殖、分化, 撬舞缓照溅台残憝力,增遴缨熬线粒终霞谢存关。 赵惠等渊攘遂了孙糕凌激素 使心肌酶谱减少;蜕皮激素使缺廊心肌的梗厩面积减少,从形态上提示可减轻心肌的缺 血瞧损伤瑚是 旨质避氧化终产冁可闻接及映再灌淀损伤豹严黧酸黟蜕皮激素馒 础减少,?增加,故我们认为.蜕皮激索的作用机制可能在于.蜕皮激索是一种抗 氧化剂吴煅【”等报道蜕皮甾酮熊够减轻再灌注时肺搬管内皮细胞损伤,对脯再灌注损 伤肖一定的防治作用,其机制可能与其抗啻交蒺损伤有蔻并且蜕皮淄酮豹效用还可能伉 于氯化可的松。吴旭目蜕皮甾酮确实能减轻肺再灌注质的脂质过氧化损伤,糍一定的保 护佟用。 吴旭、姚一、卓豫渊报道在攮击所致的脑损伤早期,可能作用于 脑戚管内皮,通 过途娩减轻龟痿翡援发鬏骞;遴:蓬羹凄遥襞位途径,减轻到痿静缝发褴援寤,获瑟减轻 创伤所致的脑水肿,对急性脑损伤产生保护效应的这种作用及机制。吴旭、林水 金、蒋耀则搬遵了蜕皮籀醮骞德遴鞭嬲增殖的侈惩及影噙鞭舰的纛管嚣张物 质的活性。黑旭、王武军【”报道了塔剂擞依赖地诱导内皮细胞凋亡;能剂量依 赖地影响诱导魄内皮缀胞凋亡:?能减少内皮细臆的凋亡细腿数和细胞阍糙黠分 子袭达量,从而表现出对内皮细胞凋亡的保护作用。受旭、石富黻、蒋耀光”报道了蜕 皮甾酮可降低肺水肿参数,减少肺组织的?,升高肺组织的?,改善肺组织水肿。 ..五、材料与方法 第一部分显微鉴别特征研究 实验材料、仪器与试剂 .实验材料 多花筋骨草原植物 年月采于辽宁省沈阳市东陵公园、棋盘山,经本校生药 学教研室刘娟教授鉴定。 .实验仪器 微型高速万能试样粉碎机河北省黄骅市新兴电器厂 ~生物制片快速处理仪航空航天部兰州飞控仪器总厂 光学显微镜 日本『】公司 轮转式切片机 浙江金华益迪医疗设备厂 显微照相机 日本公司 .实验试剂 番红染色剂、固绿染色剂、加拿大树胶、明胶粘贴剂、二甲苯、 乙醇均为分析醇 实验方法 .取洗净的多花筋骨草根、根茎、茎、叶,应用生药学显微鉴定方 法,采用石蜡切片 法制片,即: ..固定液固定,番红一固绿染色,切片厚度为 ?, 数码成像系统取像并绘制其结构简图。 ..石蜡切片的 染色剂的配制: 番红:番红溶于 %乙醇或%乙醇。 固绿:.固绿加无水乙醇。 染色流程: 二甲苯一二甲苯一%乙醇一%乙醇一%乙醇一番红 %乙醇中之小时一%乙醇一%乙醇一%乙醇一无水乙醇 一【司绿一无水乙醇:二甲苯:证一二甲苯一二甲苯一中性树胶 封片 ..壁杰酝查堂驻妻堂鲢筮窑 走梯发流嚣; 样品处理一脱气一%乙醇一%乙醇一%乙醇一%乙醛一蠢水乙醇一无水乙 醇一%二甲苯一%二甲苯一%二甲苯一二甲苯一二甲苯一%石蜡? 一哆石蹭?一%石蜡?一%石蜡?一纯石蜡?一纯石 媾过夜一题壤 从%乙醇野始水浴控滠超声,脱水、透明瀑嶷控告《在霉遗,不越过粥?。每一撵 度时间大概在~】,但纯二甲苯时间不要超过 ,否则组织容易破碎。 .取上述药材,用粉碎机分别粉碎,过融筛,用水台氯醛制成临时粉束装片,于 既礴翔光学显徽镜下观察备部分粉末特征并绘图。 .第二部分理化鉴别特征研究 实验材料、仪器与试剂 .实验材料 多花筋骨草原植物年月采于辽宁省沈阳市东陵公园、棋盘山,经 本校生药学 教研室刘娟教授鉴定。 .实验仪器 旋转蒸发器一 上海亚荣生化仪器厂 电子分析天平 公司 .实验试剂 薄层层析用硅胶 青岛海洋化工厂 .羟基蜕皮激素对照品中科院昆明植物所 其他试剂均为分析纯 实验方法 .薄层层析定性鉴别: ..供试品溶液的制备: 将洗净的多花筋骨草分为根、茎、叶、花与果实四部分,分别用 粉碎机粉碎并过 号筛。精密称取根、茎、叶、花与果实部分粉末各约放入索氏提 取器中,以甲醇在 索氏提取器提取后,回收甲醇并蒸干,用色谱甲醇溶解,作为供试 品溶液备用。 ..对照品溶液的制备: 精密称取一羟基蜕皮激素对照品,用无水乙醇定容到容量瓶中,作为对照 品溶液。 ..条件及方法: 分别取多花筋骨草根、茎、叶、花与果实部分供试品溶液及对照品溶液点于同一硅 胶薄层板上,以乙酸乙酯一乙醇: 为展开剂展开晾干后,喷以 硫酸溶 液,于?加热至显红色斑点。 ..第三部分有效成分含量测定 实验材料、仪器与试剂 实验材料 多花筋骨草原植物 年月采于辽宁省沈阳市东陵公园、棋盘山,经本校生药 学教研室刘娟教授鉴定。 .实验仪器 电子分析天平 公司 型高效液相色谱仪 安捷伦公司 .实验试剂 对照品中科院昆明植物所 甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯 实验方法 .供试品溶液 按照第二部分..项进行提取,分别得到多花筋骨草根、茎、叶、 花与果实部分 的一羟基蜕皮激素供试品溶液备用。 .对照品溶液的制备: 精密称取一羟基蜕皮激素对照品,用无水甲醇定容到容量瓶中, 作为对照 品溶液。 .色谱条件: 色谱柱分析柱,.?×, 流动相:甲醇:水:酸水:: 流速:./ 检测波长:册 柱温:? 进样量:. .系统适用性实验 在选定的条件下,注入多花筋骨草茎部分供试品溶液,理论塔板 数为,柱效 较高羟基蜕皮甾酮与最晒近峰分离度.,可以满足实验需要。 .,????筵杰堑羹麴垂雠蕴窑 。檬准曲线的绘制 精密称取一羟基蜕皮激素对照品,用觅水甲醇定容于容量瓶中, 制成“ /婪豹溶滚磐经擞琴滤璇过滤,俸为瓣鼹鑫溶滚。按怒上述鬣谱条俘分别取霹照鼓 、.扯、. 、. 溶液. 、. ,进样,按上述色谱条件 测定,黻一羟鏊蜕皮激素簿瑟襁为鳜黛标 ,:邀徉耋为横坐标绘镄工 作曲线,得回鼍方程.盹线性范围为.”一. ,毡. ,标准在。驻一.壮范围肉与峰面积呈良好线性关系。其标准曲线觅下 图。 标嘏曲线 舞 唾 黼 躺 王 《 对照晶 .方法学考查 ,。仪器精密度试验: 取网一对照品溶液连续进样次,繇次. 测冀蜂面积,计算根站际准偏夔 为.%小于%。表明仪器精密度良好。 。。溶渡稳定性试验; 精密吸取同~供试晶溶液叶. ,在小时内重复进样次,测定峰霜积,算得 黔耻.蓠,表圈该撵熬港滚鑫瘫基本稳定。 ..方法重现性实验: 取多花麓髯革时部分耪末赞,各约.,按餐斌晶溶液的嘉备方法撬戢薜测 定峰面积,结祭.%,袭明所选择的测定方法重现性较好。 ..溺收率蜜验: ..精密称取份已知一蜕皮激素含量的多花筋骨草叶部分粉末,每份约,分别精 密加入羟基蜕皮甾酮标准品,按第二部分..项下的提取方法提取并测定羟 基蜕皮甾酮含量,按下列公式计算回收率。 加样回收率%测出量搓昌量× 加入量 平均回收率为.%, 为.%,表明本测定方法可靠性强。结果见后。 表回收率实验结果 ..碰霾堑羹缒銎莹激蘸富 第隈甥分多花荔骨鼙的资潞学硪究 .地理分布: 调裘方法:逶过查隳瓷鞋及实建考察疆究多麓簸嚣肇瓣努蠢。查耀翁文献毒《中蓬 植物志》、 《东北药用植物》、 《辽宁植物志》。实地考察时间 《东北植物检索寝》、 为羽唾霉胃、?冬罐月?月。 ,植物形态、擞态环境和单位黼积蓄积摄; 调焱地点和方法:调查地煮为黑龙巍省佳术斯市四睾山、辽宁省沈阳市东陵公园、 北陵。在调查样地×内记录多花筋骨革的生态环境、植物群辫类型,在调 查样地×内随机抽椒个 的样方,在每个样方内统计植物株数并 挖取一定量静榉椽,称鳞菱靼弱予詹热予重。按公式? ,单袋嚣积薷积壁 ?样方内平均株数,, ,, .单株药材的平均重疑 ..六实验结果 第一部分显微鉴别特征研究 根显微特征; .组织横切面: ?最外层为数列木栓细胞,常脱落,细胞长方形,切向延长,排列紧密,无细胞间 隙,细胞壁木栓化增厚。?皮层宽广,由薄壁细胞组成。?维管束 外韧型,不发达,木 质部导管粗大,韧皮部列细胞,形成层不明显。见图. .粉末特征: ?木栓细胞:黄棕色,表面观类多角形、类方形或类长方形,排列紧密,垂周壁微 波状弯曲。?石细胞:常单个散在,少数连成一片,类长椭圆形或长梭形。细胞壁木化 增厚,可达~ ,层纹数列,纹孔及孔沟非常明显。?革酸钙柱晶:散在。? 导管:主要为网纹导管,少见螺纹导管。?纤维长梭型壁极厚。见图. .根茎显微特征: .组织横切面特征: 减圆形,有褶皱。?表皮卜列细胞,细胞较小,矩形排列紧密。?皮层由? 列细胞组成,由薄壁细胞组成,细胞较大,排列疏松,细胞间隙大。?形成层颜色为深 绿色,?层细胞,明显。?维管束成?束,射线不明显,木质部占整个维管束大部 分,导管大型,?髓部由薄壁细胞组成,未见后含物。见图. 茎显微特征: .组织横切面: ..????一蹩度敷鳐凝殛釜丝堂窖 ?成方形。?表皮细胞列,细胞较小,类方形,排列紧密,无细胞间隙。?棱脊 处有厚角缀织,但不鼹显。皮鼷较狭窄,由排列硫松的薄壁组成。?大维错柬成四束, 各棱脊裁又宥争《个小维瞽慕,成三燕形,无隈乡镶霆。?髓邦常簸簿或鼷失。受匿。 。耢寒特征; ?术烀维:大量存在,成柬溅散在,细长,抛鹰曲,细胞壁木化增蜉,细胞腔呈狭 长裂缝状,孔沟明显,断端妆甲嶷。?针晶成束散程。?导管:螺纹姆臀瘳见,常成人 字形。?纡绻单令散在,嚣分争隰。?毒藏亳大鹫,多套令绥藏缒戚。冕圈。 升照微特征: .组纵横切面; ?上袋皮由歹绠脆缀成,妻瓣腿呈留向延长,炎长方形,大小不一,摊烈紧密,无 气孑存在。?下表皮缨照较,、,禽骞大量蔑魏,上下表皮甥青夫薰?繇奄,骧毛。?撵 栏组级捌,鲴藐类长方形,较短,海绵噩雾~别,内含大量奸缣豢。?主脉?蟊 凹陷,下黼突出,在上、下袭腋的内侧均有厚角组织存在,但较少,由?层细胞组 成,细胞髓微木化。?主脉维臀康外韧型,木质部姆管发达,韧皮部细胞较小,排列紧 密,维镣寒上下:蓐厚受缨魏钰圈。觅匿 龟龄寒萼謦堑: ?上激皮:细胞表面观璺擞长方形或类多角影,露周壁较平直,嶷腺毛。?下表 皮:细胞液丽观呈不规则形。细胞壁波状弯曲,气孔、非腺毛较多,气礼长圆形,平轴 式。??艨强:较褪太,~个缨施组成,顶端耥键,完整者全长~ 瑶。罨謦:主要为臻绞导管。嚣蚕; .花及粜寓粉末特征: ?粱成表皮细胞;表磷溅灏多角形,细胞间排梦紧密?胚巍细胞炭多角形。?花粉 粒萌发孑三个。固莛耩囊内黧缱稳稼黄色。?豫毫璧较厚,争细。?荜酸锈酚鑫, 三煮形,存在于薄辇缨飚孛。蕊臻. 。.第二部分理化骧别特征研究 .薄层层析定憔鉴别: 在糖疆的薄层条件下,可见多筏篾骨草的根、茎、叶、芘与巢实部分均禽有一羟 基蜕皮激素成分.见图. 第纛部分含量测定 .样品含量测定结果见图一 表样瑟含麓测定结莱 。.?垄磊薤查堂惩矬筮窭 第嚣部分多慈麓骨摹麴炎滚学研究 、地理分布: 调查结果为: 多花筋骨章分布干我国的长岛山地区、内蒙古、大强安砖、小兴安岭等地区。 、攘甥形态、燕态环境弱肇盥藤程蓄积羹: .观察结果 多花筋骨革且埘馏删 棚糟,高铲,根状茎很短,须根发达。蒸直立,单 一或筮玺,不分枝,被灰自色绵稳狭长柔毛。基生时通常无柄,但有时茎下部时藏近基 邦时骞橇;时片撩嚣形至遂长函形,骞辩为糕嚣状:莲菱形或郛状拨锌形,长。瑶, 宽一哪,两西被贴伏的蛛丝状授柔毛,脉基基部三出或玉出。伦伞兹譬予茎璜郏遮鬻 排列紧密而呈穗状,每轮具花或有时最下方者花较少,下部的苞叶为叶状,与篓生叶 同形,向上渐狭而小;萼钟形,长??,外简被绵毛状长柔毛,萼齿,长约为萼的 届鼙/,边缘有长缘毛:花嚣蘸紫色线蓝截,筒袄雨下部稍狭或为漏斗,长.~ .秘,夕嚣拔鬃毛,墨囊近基郝毒毛蓼,嚣麓二瓣影,上震矮,妻立,裂,下器枣 长,宽大,裂,中裂片大,略呈扇形,顶端常浅裂,侧裂片较小;雄暮敬,伸如芯冠 外,前雄躲较长;花柱先端浅裂,裂片细尖。小坚果倒卵状三棱形,背部疑网纹,散 生短毛,槊脐约占腹筒的/。花期?周。觅图。 .整态繇凌; 生态垮境为拜阉瓣山坡藏摹熬或浮迭草地藏灌然中。 主要伴生植物有融皂角姒酗?朋删咖删。亩、弹刀予菜 肠删船抬咖例如』』蝴、狼把草”、烟管蓟岫、 蒲公荚豫唧。、风花菜、水棘针 蚋、璃殴孳罐蕊瓣 .单位瑟积蓄积量: 经过测量与计算, 株密度为.?.株/、株千重.?.,折算成亩产 量为 .‖亩。 ..七、讨论 、多花筋骨草药材在性状方面具有明显的鉴别特征:根里圆柱形,分支技少,表顾黄 臼色,波面平涝,皮较薄;根薹外形为缩节状不勰剐圆校形,有分技,袭面灰褐傀,有 纵皱,弯曲处常有密集的横皱。质硬,断面黄白色,纤维性,有褥气;茎的外形黧方 形,常中空,表丽淡绿饿,表皮被白色腺毛,常襁曲;时为单叶对生,长?,被白 色腺惫。基坐时深绿彀,无被毛,长一疆,蠢香气,警最的时片夔蜜状铡奥形,先 端渐尖,边缘具锯齿:德序成轮玲状,蘸紫色,托冠唇形。 、芯耱嚣莩各部分兹显擞特蒌,在鞋径鹣文藏书璃未凳壤遂,笔嚣薄其滋行了麓步疆 究,发现: ?在多花翁臂革穰麓豹横韵菏中,袭皮赉~列组成,稚歹《繁密,串徒羚有一剜细 胞,排列紧密细胞壁明擞增厚,经砼末装片显微特征鉴别,确认为是纤维柬,并相应的 将这一细胞带确定为纤维柬鞘,而多花筋骨草根不发达,根茎起了支撑作用,主要是因 为纡维寒鞘达到了支撑、稳固及保护的俸用,导蛰发达主要由网 纹导管组成。 ?多花筋骨草茎方溅,不发达,茎常中空,嘲个棱脊处有发迭维管束,棱脊间又有 ?令小维篝泰,均为乡锯型,霹俸为鉴剐多慈簸嚣莩兹姆薤。 ?多花筋骨草叶中的维管束构造也较为特殊,成新月形,木质部与韧皮部的排列方 式为终锈形。鑫穗栏缓缀串有多数导管,臻纹,瓣予多蕊簸费荤磷究檀裙解蘩学磷究据 供了参考信息。在制作材蜡切片过程中,从%己酵开始水浴控濑超声,脱水、透明温 度控镧猩常温,不超过?。超声可班很好的缩短各步梯度流程的时间,每一梯魔辩 问大概猩,可以达警最佳效果,《壁纯二甲苯对闯不蒙超过,番贝维织容易 破碎。 、理健搽定结祭表明薄屡层掇:在楣慰篷处,多葱蕊嚣摹辗、藿、跨、莛与巢爽蚕 部分有问标准品~致的红色斑点,可以确定多花筋骨草根、茎、叶、花与果实均含有 一羟蒸蜕痰激素。 、高效液相含爨测定结聚表明,在相同的保留时间下,多花筋骨萆根、鉴、叶、花与 /、 聚实各鄢分有蜂褥积分壤,弗撵应禳褥平筠禽羹分剐为. /、. .肛唐、,?危。其中叶中含量最高,丽根中含量最低,可以确定采收的最 ..瑾杰笼筮超爱查巍照蕴塞 佳季节为多芯簸嚣革咛生长最鹱簸豹夏擘,露羹多兹簸羹摹为一趸多年玺捷魏,瘦予建 下根的~羟基蜕皮激豢含量极低,在采收是可以只要地上部分,这样利于资源的 僳整,提取避簇孛簿逸了不两溶裁积方法,最嚣褥裂索式提毅,簸滚超声黼 合并提取液,所得羧基蜕皮激素量最多。 、本实验试用了多静溶籍系统,最后确定潋永:甲醇:黢永::为流动相, 一羟基蜕皮激素分离效果最好,保留时间也较适宜。 、选取羟基蜕皮甾酮对照品溶液进行紫外扫摘,发现,其在她有较大吸收, 故选撵检测波长为。 、通遘对多花筋骨草的资源调焱发现:雾花筋骨草的资源丰富,单位面积蓄积薰分别 为: 。痦,开发瓣最广蠲,毽要注意霹持续发展;虽然多菇麓鸯擎一羟 基蜕疫 激素没肖筋骨革含量高,但资源丰富仍作为筋骨革的代用品。 .。熊划翱美攒鎏堂燃 八结论 、彩花筋骨革的主要鍪别特征为: 根维管束排列类型 撮鏊中石细胞带豹存在部位,中挫炎型,维臀柬的排列方式及类激,草酸锈 沙晶殿大量的淀粉粒。 茎巾纤维束鞘的存在郝像,雏管絮的嚣轮簿萝方式,棱脊闯维管聚数西。 叶主脉维管束搬型,及岛一般外韧烈维管束的区别,气孔类型,腺毛及非腺 毛黪形态将薤镰等。陵上备部分嚣徽特征鸷谣作为多藏麓嚣荤豹箍剐僚撵,瞧为建立全 面系统的生药学体系及质量标准提供了基础性资料。咒蕤茎和叶的显微构造椰较为复杂 耱特殊。霹墩穆必檀物鼷测学方嚣瓣参考资粒。 、理化鉴定缩果表明薄联层析:襁相同瞄触,多花筋骨草根、蒸、叶、张与果实各 部分商同标准熬~致的聪点,可以确定多花簸雷草根、蒸、时、椽每果安均食有一羟 基蜕皮激素。 、离效液楣含爨测定结果表明,狂相同的保留时间下,多花筋骨革根、茎、叶、花与 栗舞各部分有蜂面积积分值,并檬寝溯褥平蚜岔羹分剽为.?危、.蚌屈、 . . /、 /。 、瓷繇学研究表馥:多筏簸夤鼙燕态环境菇殍阚豹由缓蘸摹基蠛灏透葶遮藏灌筮串 株密度为.?.榭、株干重. 单饺面积蓄积缀:经过澜量与计算, ?蛰.钳,辑黪残害产量海疆惯。 ..丸参考文敲 。薮建海。中药现钱佳两种不慰慧薅靛努季厅。事攀芬。?, .诸国本.让中医药更好的走向世界.中网中医药年鉴.。 .饶经佟。黑茈涎省檀被豹区系缀威特馐.翟主与巍然资澈轿究,裙:?~。 .内蒙吉植物志.第卷:?。 . 京檬物志.修订敝下:。 ,中华本草.第卷:一。 .褚小兰.筋骨革的本辇考证.中药材,,:?。 。暑妇姒硅轨奄酿融舛,穆:。 .抽’ 珊,,:。 ,燃嚣珏醢黪堍穗雠癣戳器穗,第?:。 .嘶蝴. 硼,,:。 .蹴弹鹣蛐藤霹,,鞠:。 .”.她删扛,,:。 .灯,:。 .谤 。缸 奠融班。?;酗:.。 ., .“础盯,,: .疆纛 壤磁.? 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