【精品】HTK液对未成熟兔心肌保护作用的研究

【精品】HTK液对未成熟兔心肌保护作用的研究 HTK液对未成熟兔心肌保护作用的研究 1郑宏茹 薛玉良 中文摘要 目的:由于未成熟心肌在结构、功能等多方面不同于成熟心肌，因此一些对成熟心肌有良好保护作用的心脏停搏液在婴幼儿未成熟心肌是否适宜值得探讨。因目前国内临床上儿科心脏手术仍以传统的St.Thomas’II冷晶体停搏液为主，本实验采用离体灌注兔心模型，改良的Langendorff灌注装置，观察在25?停跳2时条件下，St.Thomas’II(STH)停搏液与Histidine- Tryptophan- Ketoglutarate (HTK)停搏液对未成熟兔心的心肌保护效果。探讨长时间停跳下适合于未成熟心肌的心肌保护，为完善婴幼儿围术期的心肌保护提供理论依据。 方法:选用24只纯种新西兰白兔，随机分为两组:A组(HTK幼兔组，n=12);B组(STH幼兔组n=12)。麻醉后取出心脏，先浸入37? KreAs-Henseleit重碳酸盐缓冲液(KH液)，主动脉略加修剪，立即连于改良Langendorff灌注装置，以37? KH液从主动脉开始灌注，灌注液通以混合气(O:BO=95%:5%)，主动脉灌注22 压为60 cmHO，剪开肺动脉根部以保证冠脉回流液通畅引流，心脏置于37?保温2 缸内。剪开左心耳，插入测压乳胶小囊至左心室，连接测压仪，调整舒张压在8,10 mmHg。稳定后观测左室收缩峰压(LVPSP)，左室舒张末压(LVEDP)，心率(HR)，并收集冠状动脉引流液(CF)分钟流量，于稳定灌注30分钟时留取冠状动脉引流液2 ml，测定心肌酶CK、CK-MB的基础值。然后，于各组随机选取2只兔心，停止KH液的灌注，快速取下心脏，滤纸吸净心脏表面水分，取左室心尖部组织(每次取材部位尽量相同)，以4?电镜保存液保存(保存液由天津医大电镜室提供)做电镜观察，作为各组观察电镜超微结构的自身对照(这两只兔心仅做单纯灌注，不观察心功能指标)。各组其余兔心在心搏稳定30分钟后，停止KH液的灌注，经主动脉根部灌注4?的STH液(B组)或HTK液(A组)，STH液剂量15 ml/kg ，以4?的STH液每30分钟重复灌注一次。HTK液的剂量为30 ml/kg,停搏液灌注压力同主动脉灌注压。心脏停搏后，各组分别浸入25?相应的停搏液中，维持25?恒温下心脏停搏120分钟，然后灌注装置复温至37?，心脏重新置于37?保温缸内，由主动脉以37?的KH液复灌30分钟，灌注压力同前。收集冠脉回流液记录分钟 1 薛玉良 天津泰达国际心血管医院 麻醉科 1 流量。分别于再灌注15、30分钟时留取冠状动脉引流液2 ml测定心肌酶CK、CK-MB值，观测心功能指标(同缺血前)。再灌注毕，快速取下心脏，滤纸吸净心脏表面水分，取左室心尖部组织，部分以4?电镜保存液保存，做电镜观察，部分置于液氮中保存，用于测定心肌丙二醛含量。剩余心肌组织用分析天平称重后，于110?烤箱中烘干24小时，测定干湿重。 结果:?血流动力学参数:停搏前血流动力学参数基础值， A组&B组的组间差异均无统计学意义(p>0.05)。复灌30分钟后，心功能恢复百分比: A组LVPSP、LVEDP恢复百分比高于B组(p<0.05)，而HR恢复百分比与B组差异无统计学意义(p>0.05)。?冠脉流出液CF:停搏前基础值组间差异无统计学意义(p>0.05)。复灌30分钟后， BF恢复百分比组间差异无统计学意义(p>0.05)。?冠脉流出液心肌酶CK、CK-MB漏出量:基础值差异无统计学意义(p>0.05)。复灌30分钟后， A组CK、CK-MB均明显低于B组(p<0.01)。?心肌含水量: A组86.59?2.58,，B组85.18?0.83, ， A组&B组的组间差异无统计学意义(p>0.05)。 ?心肌丙二醛含量(umol/g): A组433.33?6.85，B组534.00?14.90， A组明显低于B组(p<0.01)。?透射电镜结果:A组的心肌细胞损伤情况好于B组，但即使B组的细胞损伤较为严重也仍属于可逆性损伤。 结论: 对于幼兔离体兔心，单次灌注4? HTK液或多次灌注4? STH液在25?条件下停 搏2小时， ? 复灌30分钟后，LVPSP恢复百分比、LVEDP恢复百分比HTK液组好于STH液 组; ? 冠脉流出液心肌酶CK、CK-MB漏出量及心肌丙二醛含量HTK液组 低于STH液组; ? 电镜结果显示HTK液组的心肌细胞损伤较STH液组轻微。 说明在本实验条件下，对于未成熟心肌长时间停跳的心肌保护效果HTK 液优于STH液。 关键词:HTK液，未成熟心肌，心肌保护 2 3