血清甲状腺素(T4)[指南]

血清甲状腺素(T4)[指南] 血清甲状腺素(T4) FITC，含牛血清蛋白，0.2% NaN。 3【试剂名称】 所有提供的试剂都是立即可用的 通用名称:血清甲状腺素(T4)测定试剂盒(化 学发光法) 此外试剂盒中不包含以下材料，需另行准备1. 用途 ?本试剂用于定量测定人血清或血浆内甲状腺素Maglumi 1000 module(反应杯) ?(T4)的含量。本方法适用标本的浓度范围为Maglumi 1000 Starter kit(激发试剂) ?0-300 ng/ml(0-386 nmol/l)。该测试必须在Maglumi 1000 Light check(光检查液) ??Maglumi 1000仪上进行。Maglumi 1000 Wash /System Liquid(洗液 2. 概述与说明 /系统液) 正常人中，甲状腺每天分泌大约80μg的甲状腺 素(T4)及5-10μg的三碘甲状腺原氨酸。在血4.2试剂的准备 液中，超过99.9%的甲状腺激素与转运蛋白相结在揭开密封纸之前，先轻轻地水平摇晃试剂盒合，只有游离T4具有代谢活性。(为了防止泡沫形成～)。揭开密封纸，来回地转 对总甲状腺素的测定通常用于对甲状腺功能异动磁颗粒区的小轮，直到悬浮液颜色变成褐色。常的诊断。在原发性疾病中，正常或者扩大了的该试剂盒放入仪器试剂区，等待30分钟。在此甲状腺自动分泌过量的甲状腺激素，而不受重叠期间，磁性微珠自动被搅拌并完全重新悬浮。 中心的控制。从而，可能导致下列异常:可能伴?不同试剂磁珠不得混用～ 随也可能不伴随甲状腺肿的甲状腺机能亢进、与4.3试剂的保存 甲状腺机能亢进有关的自发性腺瘤、由甲状腺癌- 未启封时:保存在2-8?，直到失效日期 引起的甲状腺机能亢进，或者与甲状腺炎有关的- 启封后放于仪器中:最少两星期的稳定性。在甲状腺机能亢进。 此之后，如果质控 值还在期望的范围之内，仍甲状腺机能减退时，体细胞被供给的甲状腺激素可以继续使用 不足。甲减可能为原发性(如:strumectomy， 放- 直立向上放置 射碘治疗，服用高剂量的碘，严重碘缺乏等)，- 避免阳光照射 也可能为继发性的(垂体疾病，如:总的或者部5. 定标品溯源 分腺垂体不足而导致TSH缺乏)。 该试剂盒中的定标品购自SIGMA公司，生物来对血清甲状腺素的测定可用于区分甲亢与甲减，源:人工合成，HPLC纯化，纯度?98%。经检测可用于内分泌眼疾治疗，诊断良性腺肿，自发性不含HBsAg, anti-Syphillis,anti-HCV, 腺瘤，甲状腺复发，以及用于各种甲状腺功能异anti-HIV-1, anti-HIV-2。 常的一般性治疗监测。 6. 定标 3. 测试原理 6.1两点定标 利用免疫发光竞争法的原理检测T4; 通过测量定标物，预先定义的主曲线上的每个定采用抗T4单克隆抗体标记ABEI，T4纯抗原标记标点将被调整(重新定标)为一个新的、仪器特FITC。标本、定标液、(质控液)与ABEI标记异的测量水平,即工作曲线。 的单抗，FITC标记的纯抗原，包被有羊抗FITC6.2定标的频率 抗体的纳米免疫磁性微珠置37?孵育，形成免- 每改变一次批号(指试剂盒或者激发试剂而疫复合物,外加磁场沉淀，去掉上清液，用洗液言) 循环清洗沉淀复合物1次，直接进入样品测量- 每个星期或每使用一个新的试剂盒(建议) ? 1室，仪器自动泵入发光底物1和2，自动监测3- Maglumi000分析仪的每次维护之后 秒钟内发出的相对光强度(RLU)。T4浓度与RLU- 当质控值不在期望范围之内时 成一定的比例关系，仪器自动拟合计算T4浓度。 - 房间温度改变超过5?时(建议) 4. 试剂 7. 样本的采集、原料及保存 4.1试剂组成 - 用标准程序采集样本 可供100个测试的试剂盒 - 样本原料:血清，血浆 纳米免疫磁性微珠溶液:TRIS缓- 在2-8?下可保存24小时 冲液，1.2%(W/V)，0.2% NaN，2.5 ml 3- 如需保存更长时间:冷冻至-20? 包被羊抗FITC多克隆抗体。 - 避免反复冰冻和解冻 定标物，低:8.341 ng/ml。 2.5 ml - 被保存的样本在使用之前应被彻底地混匀(使定标物，高:179.826 ng/ml。 2.5 ml 用旋涡混匀器) 发光标记物:抗T4单克隆抗体8. 干扰物质 标记ABEI，含牛血清蛋白，0.2% 6.5 ml 在胆红素< 0.06 mg/ml，血红蛋白< 16 mg/dl，NaN。 3甘油三酯< 12.5 mg/ml的浓度下，测试结果中没荧光素标记物: T4纯抗原标记6.5 ml 有发现干扰因素。 9. 警告与预防 以使具有生理活性的游离T4保持在正常范围本试剂仅供体外诊断用。不同批号试剂盒内试剂内。甲状腺机能正常时，遗传性TBG缺乏、肾病请勿混用。过了有 或代谢失调性肝硬化均可引起T4水平的降低。效期请停止使用。 促蛋白合成甾类、水杨酸盐、二苯乙内酰脲、睾所有在测试中用到的样本，生物试剂及原料必须酮、慢性疾病、严重系统功能紊乱或者活性肢端被视为传染性物质，因而在废弃时应该与实验室肥大症也可导致T4水平降低。 仅T4水平并不能证实有没有甲状腺疾病，必须管辖机构的盛行条例、指导方针及每个国家的相与临床症状及其它诊断方法相结合来解释。关条例一致。需废弃的材料必须被焚烧灰化;液 体废物必须以最终浓度为5%的次氯酸钠至少净熟练的技术及严格按照说明操作对获得可靠结 果是非常必要的;操作时必须严格按照.化半小时。所有可再次使用的材料必须使用过度精心操作时才能得到正确结果;对操作程序作任杀伤法(USP 24,2000,p.2143)高压灭菌，虽然何修改都可能影响结果;样本受细菌污染或反复用户最初必须常规地使用生物指示剂检查净化冰冻和解冻可能影响结果。 13.2 HAMA效应 效果，但通常在121?下高压灭菌至少一小时即 含有人抗鼠抗体(HAMA)的病人血清可能导致假可达到要求。 的升高或降低值。虽然加入了中和HAMA的介质，10. 测试步骤 ?非常高的HAMA血清浓度仍然可能影响结果。为了确保正确的测试，请严格按照Maglumi 2000分析仪的操作说明操作。每一个测试参数14. 临床意义 都由试剂盒上的条形码识别。需要进一步的信息14.1 数值升高的因素: ?请参考Maglumi 2000用户手册。生理原因:妊娠期，婴儿期，口服避孕药。 病理原因:肝炎，先天性TBG增加，Grave氏病，40μl 样本，定标物或质控 口服避孕药.雌激素补充疗法，过量给予T4。+40μl 发光标记物 +40μl 荧光素标记物 14.2 数值降低的因素: 生理病理的原因:年老，营养不良，低蛋白血症，+20μl 纳米免疫磁性微珠溶 肾病，肝病，肝衰竭，甲状腺损伤，先天性TBG液 缺损，地方性甲性腺肿，明显或亚临床甲状腺肿15分钟 温育 机能减退，给予二苯乙内酰脲，fenclofenac，400μl/次 循环清洗1次 雄激素，糖皮质激素。 3秒 测量 15. 性能特征 15.1 准确性 11. 质控 将已知浓度的标准品J作为样品，用稀释液按1: - 请遵守医学实验室的质控规则2比例稀释,测定10次稀释后的浓度，计算实测 浓度与期望浓度的回收率，回收率应在 - 请使用BIO-RAD Lyphochek? Immunoassay 90%-110%范围内。 Plus Control或其它适当的质控作为内部质控 15.2 灵敏度 灵敏度的定义为:对20次零校准品的测定，求12. 结果 其2倍的平均偏差,其从标准曲线上所对应的浓12.1 结果计算 度即是灵敏度。 ?Maglumi 1000分析仪借助于由主曲线两点定标本试剂的灵敏度为小于1 ng/ml。 而得到的一条工作曲线，自动地计算每一个样本15.3 特异性 的T4浓度，结果以 ng/ml示。需要进一步的信试剂盒对T3、RT3标准浓度的检测结果应符合以?息请参考Maglumi 1000用户手册。下的要求: 当T3=100 ng/ml时，检测结果 T4<3.0 ng/ml;转换因子: 1 ng/ml = 1.287 nmol/L。 当RT3=100 ng/ml时，检测结果 T4<3.0 ng/ml。 12.2 结果说明 正常参考值:52 ng/ml-127 ng/ml。 15.4 线性 由于不同地区、不同个体引起的正常的、合理的将标准品各点的相对光强度(RLU)、浓度(C)分别进行对数转换，按照双对数方法拟合，其线差别，以及采用不同方法进行检测，其所测得性相关性系数(R)绝对值应大于0.9900。T4水平也会有所不同，因此建议每个实验室均 应针对自己的特色人群建立自己的参考值范围。 转换因子: 1 ng/ml = 1.287 nmol/L。 13. 局限性 13.1甲状腺机能正常的情况下，怀孕、遗传性 TBG过度分泌或口 服避孕药及其它特定药物治疗(如奋乃静、 methadone、雌激素、麻醉剂、clofibrate等) 均可导致T4的升高。TBG水平因而伴随升高，