有关西红柿转基因成分的检测方法

有关西红柿转基因成分的检测方法 symbol森博检测服务中心 有关西红柿转基因成分的检测方法 都知道，西红柿是一种非常有营养的食物，具有减肥瘦身、消除疲劳、增进食欲、提高对蛋白质的消化、减少胃胀食积等功效。深受大家喜爱。 但是随着农作物的不断发展，逐渐的技术上加以不断的改良，乃至进入转基因技术。 那么问题来了——转基因的西红柿能吃吗,对身体有没有害呢, 转基因的食物一般都是经过严格测试的,对大多数人无毒.转基因的基因来源也一般是高等动物的激素基因,我们吃转基因西红柿时相当于是多吃了点动物蛋白.另外,西红柿被我们吃过后,经过我们的消化系统,DNA已经被消化成脱氧核苷酸,是不会对我们造成危害的.转基因食品分为不同安全级别,一般来说作为食品的西红柿是无毒的.因为虽然西红柿是转基因的,但是这只是向某个西红柿的受精卵细胞核内注入了少量外来基因.严格来说转基因西红柿还是西红柿,所以还是能吃. 那么大家还会想知道怎样区分转基因的西红柿呢,实际上单纯从外观上是看不出来的，需要用仪器检测方可知道。 下面我们来看一下有关这方面的检测方法: CTAB法 称取充分混匀的待测样品100mg，加至1.5mL的微量离心管中，加入65?预热的600ЧL CTAB裂解液，震荡混匀，置于65?水浴中处理30min，期间每隔10min混匀一次;取出冷却至室温后，加入等体积的三氯甲烷/异戊醇(24:1)，充分混匀，室温15000g离心15min;小心吸取上清液(约600чL)至一新的1.5mL离心管，加入2.5倍体积的预冷的无水乙醇或0.8倍体积的异丙醇，再加入1/10体积的3mol/L 乙酸钠(ph4.8)，充分混匀，-20?(加入无水乙醇时)或4?(加入异丙醇时)放置30min以上;4?，15000g离心15min，弃去上清液;加入70%的乙醇500чL，洗涤沉淀两次，室温15000g离心5min弃上清液(注意不要把沉淀倒出)，晒干沉淀，至乙醇挥发尽后，加入50чL去离子水或TE缓冲液溶解沉淀，-20?保存待用。 下面来看一下检测西红柿内外源基因常规的PCR反应体系和反应参数: 试剂名称 储备液浓度 加样体积/чL 10×PCR缓冲液 - 2.5 MgCl 25 m mol/L 2.5 2 dNTP 2.5 m mol/L 2.0 Taq酶 5U/чL 0.2 引物 20pmol/чL 0.5 0.5 DNA模版 50ng/Чl~100ng/чL 1~2 双蒸水 补至25 - 注:反应体系中各试剂的量可根据具体情况或不同的反应总体积进行适当调整。 symbol森博检测服务中心 西红柿内外源基因的常规PCR反应参数: 被检测基因 预变性 扩增 循环次数 终延伸 rbcL(内源基因) 94? 3min 94? 30s，54? 72? 5min 30 30s，72? 30s PG(内源基因) 94? 3min 94? 30s，60? 72? 5min 30 30s,72? 30S NPT ?(外源基94? 5min 94? 30s,55? 72? 5min 30 因) 30s,72? 30s CaMV35S(外源94? 5min 94? 30s，55? 72? 5min 30 基因的启动子) 30s，72? 30s NOC(外源基因94? 5min 94? 30s，55? 72? 5min 30 的终止子) 30s,72? 30s symbol森博检测服务中心 FMV35S(外源基95? 10min 94? 15s，60? 72? 5min 40 因的启动子) 40s，72? 60s