[其它语言学习]最终稿翻译成意大利语

[其它语言学习]最终稿翻译成意大利语 Azaindole --- La preparazione e l'uso per Indole accoppiamento derivati Tecnologia campo Questa invenzione si riferisce ad una struttura nuova classe dell'azaindole --- Indole accoppiamento derivati .Struttura molecolare di questi derivati è una caratteristica comune :Tutti da aza-indole e giunto bimolecolari indolo accoppiamento in una posizione diversa，che formazione di estesi eterociclici coniugatiπ.Tali derivati attraverso una varietà di meccanismi per inibire la crescita cellulare e la proliferazione.L'invenzione si riferisce anche alla preparazione di questi derivati，a descrtto inclusi i derivati delle composizioni farmaceutiche e gli usi. Sfondo della tecnologia Questo brevetto è "Un composti indolo molto specifiche ed i loro metodi di preparazione nel trattamento e nel prevenzione del cancro e altre malattie nell'applicazione" ( Applicazione No.02138518.1 Annuncio autorizzati 4 Maggio 2005 );"Uno per i farmaci insolubili，emulsioni medicinali e le loro modalità di preparazione" ( Applicazione No.200410052816.5 Applicazione data 14 Luglio 2004 );"Un tipo N (1) -alchil-3'-ossima indirubin derivati (I) preparazione e applicazioni mediche " ( Applicazione No.200510094482.2 Annuncio autorizzati 1 Agosto 2007 ) e "Uno per i farmaci disperdente insolubile" ( Applicazione No.200610038112.1 Applicazione data 17 Gennaio 2006 ) brevetti successivi. Composti antitumorali nello monomero impianto è stato un leader，esèmpio come camptotecin isolato dal camptothera acuminata e paclitaxel ottenuti da cephalotaxus sono rappredentivi di due noti. Con i metodi della medicina moderna contro i tradizionali piante medicinali si scopèrta che indigo contiene bisindole indirubin derivati (1，indirubin，2',3-bisindole , colore viola ) il trattamento della leucemia mieloide cronica ( CML) ha un effetto significativo，e gli effetti si sono verificati in modo tapido，piccolo dosaggio，effetti collaterali della luce，prezzo basso cosi. Successivamente，l'indigo doppio indolo composti ( compresi Indigo 2，indigo 2,2'-bisindole，colore blu;diversi indigo 3，isoindigo 3,3'-bisindole，colore marrone) piu ampia modificazione strutturale e attività biologica legate alla ricerca， scoperto che N-1-metil-iso indirubin di indigo è efficace，a bassa tossicità. Uteriori studi hanno dimostrato che indirubin e l'efficacia del maccanismo dei suoi derivati; inibendo le chinasi ciclina dipendente (cyclin-dependent kinases，denominato chinasi del ciclo cellulare，abbreviato come CDKs ) e quindi inibire la proliferazione tumotale. Le chinasi ciclina dipendente della famiglia ( CDKs ) è un tipico serina (Ser) / treonina (Thr) chinasi，La créscita delle cellule è un importante molecole di trasduzione del segnale，un ruolo importante nelle diverse fasi del ciclo cellulare ( Ciclo di lavorazione delle cellule è divisa in G、S、Ge M quattro 12 fase )，Consentendo in tal modo la créscita ordinata delle cellule e la proliferazione ( replicazione del DNA e la segregazione dei cromosomi ) e sonno ( cellule del ciclo di divisione cellulare，divisi in créscita - 1 - di riposo，chiamava fase G0 ) o di inserire l'apoptosi.CDKs è anche regolare le funzioni nervose e il ruolo del timo.Le CDKs diverso da altri chinasi，devono cicline e le loro corrispondenti formano un dimero eterozigote ruolo di catalizzatore nella regolazione.Le cellule umane in almeno nove membri della famiglia di CDKs ( CDK 1--9) e 11 cicline ( A--J ) sono stati identificati.Le diverse CDKs e cicline o combinazione ciclina diverse subunità，esempio;CDK1(cdc2) a collegare ciclina A e B-B;CDK2 a 13 collegare ciclina A e D-DeECDK4,CDK5 e CDK6 combinato al ciclina D-D;CDK5 è principalmente 13 : 13 collegato pk35;CDK7 collegato ciclina H;CDK6 connessione D- e ciclina K. Secondo il premio Nobel 2001 per la ricerca biomedica---" il rapporto tra la proliferazione cellulare e [1-2]il cancro "，quasi tutte le cellule tumorali hanno una varieta di anomalie del ciclo cellulare chinasi，e poi continueranno ad entrare nel ciclo cellulare alla fase S、Ge M proliferare all'infinito.Per sempio，fino 2 [3]al 85% dei malati di cancro al seno ciclina E / CDK4/6 anomalie.Con l'inibizione della chinasi del ciclo cellulare，bloccando la proliferazione cellulare ( ma non uccidere le cellule )，e poi o promuovere la differenziazione cellulare e la maturazione，o la promozione di apoptosi，puo raggiungere l'effetto del trattamento di molti tumori.Motivo di credere che gli inibitori della chinasi del ciclo cellulare sono una nuova classe di ampio spettro farmaci anti-cancro，inoltre l'inibizione della proliferazione delle cellule ( citostatici )，non uccide le cellule ( citotossici )，questi farmaci dovrebbero essere selettivi，efficaci e bassa tossiciàtà . Dopo studi hanno dimostrato che il ciclo cellulare inibitori della chinasi puo effettivamente inibire tumori della mammella,del colon,della prostata e del cervello e di altre malattie.Più significamente, il sistema funzione inibendo la proliferazione cellulare, questi composti non fanno nulla per non clinici ormone-dipendente cancro alla prostata (PC-3、DU-145), ormoni e molti altri chemioterapici resistente metastatico cellule tumorali della prostata hanno anche uan buona inibizione. Pertanto, per trovare gli inibitori della chinasi del ciclo cellulare è diventato uno sviluppo razionale della nuova strategia [4-6]anti-cancro garmaci. Finora , circa 10 tipi di piccola struttura chimica molecole di inibitori CDKs o modulatori attenzione [7]e la ricerca, sono principalmente rivolte inibitori di CDKs nel regione ATP.È stato utilizzato nel trattamento clinico di indirubin (indirubin) e N-1-metil-isoindaco (N-1-methylisoindigo) è un tipo.Inoltre, due composti:UCN-01 e la U. S. National Cancer Institute (NCI) ricerca e sviluppo di flavopiridol negli [10]studi clinici. In sintesi, la classe di composti bisindole indirubin è una importante classe di inibitori CDKs, gli effetti collaterali tossici, ma i tali composti liposolubili e idrosolubili quali applicazioni cliniche sono poveri colpiti.Negli ultimi anni, molte istituzioni straniere ricerca farmaceutica e le aziende farmaceutiche composti indirbin per una vasta gamma di modifiche strutturali, tuttavia, questi bisindole indirubin classe di composti è ancora lontana dall'essere soddisfcente effetto antitumorale. In sintesi, la necessità urgente di sviluppare nuove arie di presentazioni eccellenti, con inibizione della chinasi ciclina dipendente ( CDK ) attivita di inibitore. - 2 - Profilo della invenzione Lo scopo della presente invenzione è di fornire una inibitori CDKs puo essere utilizzato come aza-indolo-derivati indoloci coniugato, composti che inibiscono l'attivita descritta in alto, i vantaggio di solubilità in acqua migliorata. Un altro scopo della presente invenzione è di fornire un metodo per rendere i composti descritti, composizioni farmaceutiche e gli usi. Nel primo aspetto della presente invenzione fornisce mostrato nella seguente formula IG azaindole indolico accoppiamento un sale accettabile farmaceutico, Y,Z (IG) La formula, Y è il tipo (Y1) o (Y2) come mostrato in gruppo azaindole: (Y1) o (Y2) Z è il tipo (Z1) o (Z2) come mostrato in gruppo indolo: (Z1) o (Z2) “,”che ottenere azaindole gruppi di Y 3- posizione e di indolo tra Z 2'- e Z3'- posizione i doppi legami: 11' Nella formula precedente Y1, Y2, Z1 e Z2, Re Rindipendente rappresentano H o non sostituito o sostituita con 1-3 gruppi sostituenti del gruppo successivo: C,Calchilici, arilici, alchil aril, acil, aroyl, 16 acil-protette glicosil o due glicosilazione , glicosilazione o due glicosilazione: in cui i sostituenti selezionati da : alogeni, idrossi,C-Calchile,nitro o aminoacidi: 13 2342'3'4' 5' R、R、R、R、R、Re Rindipendente rappresentano H, alogeni, idrossi, tioli o non sostituito o sostituita con 1-3 gruppi al gruppo successivo:C,Calchil, nitro, aminoacidi, aminoacidi, amido, C,14 1 Calcossi, metiltio, fenile, fenossi, arilici, alchil aril, trifluorometil, acil, arilici acil, solfonico, 4 ammino-sulfonil, isocianato, o isocianato alchil; in cui i sostituenti selezionati da : alogeni, idrossi,C-C13 alchile, nitro o aminoacidi: 6 6 6 R è l'atomo di ossigeno, atomo di zolfo, selenio atomo: o R è una NRo NORgruppi, Rche è H, sostituire o meno o che hanno gruppi sostituenti del gruppo successivo:C,Calchilici a catena lineare o 16 ramificata, arilici, alchil aril,C,Cgrassi cicloesile, acil, aroyl, sulfonil o fosforil; in cui i sostituenti 36 selezionati da : alogeni, idrossi, C-Calchile, nitro o aminoacidi: 13 - 3 - In un altro esempio preferito, composti in cui quali il tipi (I)、(II)、(III) o (IV) che segue, una formula (I) è 5-azaindirubin derivati, una formula (II) è 5-aza diverse indigo derivati, una formula (III) è 7-aza indirubin derivati,una formula (IV) è 7-aza diverse indaco derivati: 12341'2'3'4' 5'La formula R、R R、R、R、R、R、R、Re R come definito in precedenza. 、 1 1'In un altro esempio preferito, Re R indipendente rappresentano H,C,Calchilici, arilici, alchil 16 aril, acil, aroyl, acil-protette glicosil o glicosilazione: 2342'3'4' 5'La formula R、R、R、R、R、Re Rè indipendente rappresentano H, alogena, idrossile, fioli, C,Calchil, aminoacidi, aminoacidi, amido,C,Calcossi, un zolfo, fenile, fenossi, arilici, alchil aril, 14 14 trifluorometil, acil, aroyl, solfonico, isocianati; La glicosilazione è arabinosio, xilosio ,ribosio, il mannosio e glucosio: 6 6 6 R è l'atomo di ossigeno, atomo di zolfo, selenio atomo: o R è una NRo NORgruppi, Rche è H, C,C alchilici a catena lineare o ramificata, arilici, alchil aril, C,Cgrassi cicloesile, acil, aroyl, 1636 sulfonil, fosforil. In un altro esempio preferito, i composti selezionati dal gruppo descritta: 5-aza-indirubin derivati (tabella1:composto No.1-59 ), 5-aza-diverse indigo derivati (tabella2: composto No.60-89 ), 7-aza-indirubin derivati (tabella3: composto No.92-150 ), 7-aza diverse indigo derivati (tabella4: composto No151-180 ). In un altro esempio preferito, di cui sopra, inclusi sali farmaceuticamente accettabile di acidi inorganici o acidi organici con la formazione di sale, acidi inorganici includono: acido cloridrico, acido bromidrico, acido fosforico, acido nitrico, acido solforico: acidi organici includono: acido formico, acido acetico, acido propionico, acido succinico, naftalene disolfonico (1,5), acido asiatico, acido ossalico, acido tartarico, acido lattico, acido salicilico, acido benzoico, acido valerico, dietile acido acetico, acido malonico, ambra acido , acido fumarico, acido fumarato, acido adipico, acido maleico, acido malico, amminoacidi, acido acrilico, acido glucosio, acido ascorbico, acido nicotinico, acido isonicotinico, metansolfonico acido, l'acido p-toluensolfonico , acido citrico, e aminoacidi. Nel secondo aspetto della presente invenzione che fornisce una composizione farmaceutica che contiene formula (a) IG tipo composto o un sale accettabile farmaceutico, e formula (b) un vettore farmaceuticamente accettabile. In un altro esempio preferito, le composizioni farmaceutiche descritti contiene anche altri agenti terapeutici (per esempio, agenti antineoplastici, agenti dermatologici, i farmaci del sistema immunitario, i farmaci del sistema nervoso, i farmaci anti-diabetici). - 4 - In un altro esempio preferito, le composizioni delle formulazioni farmaceutiche descritto come: iniezione di piccola capacità, il volume di iniezione, iniezione di grandi volumi, polvere per iniezione, iniezione di emulsione, compresse, pillole, capsule, pomate, creme, pasta agente, linimento, polveri, confenzione spray, impianto agente, gocce, supposte, pomate, tutti i tipi di nano-preparazione; liposomi corrispondente realizzato l'iniezione principale di cui sopratutto. In un altro esempio preferito, le composizioni farmaceutiche può essere descritto utilizzando un agente singolo o in combinazione con altri farmaci (come la combinazione con la chirurgia o con una o più della medicina occidentale e medicina cinese a base di erbe usato in combinazione o in combinazione con radiazioni o terapia di combinazione o in combinazione con la terapia genica o in combinazione con bio-regolatori). Il terzo aspetto della presente invenzione fornisce un metodo di preparazione della composizione farmaceutica, caratterizzato dal fatto che compresa la procedura: Prende formula (a) tipo IG composto o un sale accettabile farmaceutico, con formula (b) un vettore farmaceutico accettabile si mescolano per formare composizioni farmaceutiche. Il quarto aspetto della presente invenzione per fornire un composto tipo IG o l'utilizzo di sale accettabile farmaceutico, sono usati per trattare le seguenti malattie: a causa della chinasi anomala del ciclo cellulare, la crescita cellulare, proliferazione disturbi o malattie causate da insulino-resistenza . In un altro esempio preferito, le malattie descritte, compreso il cancro, la psoriasi, malattie della pelle virali, HIV, malattie neurodegenerative e di altre malattie del sistema nervoso e diabete di tipo 2. Il quinto aspetto della presente invenzione fornisce una composizione che contiene tipo composto IG o un sale accettabile farmaceutico come l'inibizione della ciclina-dipendente inibitori della chinasi. In un altro esempio preferito, la composizione descritta per la composizione dei prodotti sanitari (vettore accettabile contenenti prodotti per la salute), la composizione degli alimenti (contenenti vettore accettabile cibo) e la composizione cosmetici (con cosmetici accettabili vettore). Il sesto aspetto della presente invenzione fornisce un mammifero in vivo o in vitro l'inibizione della chinasi ciclina-dipendente o trattamento per ciclina-dipendente l'attività chinasi causati dalla malattia anche, tra i passi: per la necessità di affrontare IG applicato l'oggetto di tipo composti o di sale accettabile farmaceutico o composti contenenti IG-tipo o un sale accettabile farmaceutico della composizione. In un altro esempio preferito, descritto da ciclina-dipendente l'attività della chinasi causata da una malattia ad alta selezionati: cancro, la psoriasi, malattie della pelle virali, HIV, malattie neurodegenerative e di altre malattie del sistema nervoso. Le figure istruzioni La figura 1 si indica di 5- o 7- aza derivati di indirubin e 5- o 7-derivatidi aza formula indigo generale diverso. La Figura 2 si indica di 5- o 7-aza derivati di indirubin e 5- o 7- aza derivati di indaco diversi ormone-dipendente umano inibizione della crescita del cancro alla prostata DU145. Sarà una crescita esponenziale nel cancro alla prostata umano DU145, con diverse concentrazioni del composto No.107, No. - 5 - 108, No.112, No.115 e così via 72 ore per determinazione del tasso di créscita delle cellule con MTT. La figura 3 si indica di 5- o 7-aza derivati di indirubin e 5- o 7-aza derivati di indaco diversi ormone-dipendente umane di cancro alla prostata DU145 inibizione di CDKs Sarà una crescita esponenziale nel cancro alla prostata umano DU145, con diverse concentrazioni del composto No.124, No.126 e così via per 24 ore, per estrarre proteine totali cellulari è stato determinato mediante con Thr160Western blot phospho-CDK2 e ciclina-D1, e di ,-Actina come standard interno. Invenzione descritta L'inventore è presente ampie ricerche e approfondimenti, per la prima volta ha sviluppato una classe di inibitori CDKs come aza-indolo-coniugati derivati indolo, questi composti sono gli aza-indolo e indolo in bimolecolari diversi accoppiamento posizione è fatta, che formazione di estesi eterociclici coniugati pi, I test indicano che questi aza-indolo-indolo derivati possono essere accoppiati attività biologica prodotta da una varietà di meccanismi, tra cui l'inibizione della crescita cellulare, proliferazione, come ad esempio l'inibizione della chinasi ciclina-dipendenti (CDKs), l'induzione di endogeno inibitore della chinasi del ciclo cellulare (CDKIs), e il ripristino di insulina funzioni di conversione di segnale, e quindi la crescita delle cellule nel trattamento dei disturbi causati da varie malattie, compreso il cancro, la psoriasi, malattie della pelle virali, HIV e malattie neurodegenerative come malattie del sistema nervoso causate a seguito della resistenza all'insulina nel diabete di tipo 2. I composti dell'invenzione Nel presente documento, il termine "composti di questa invenzione", o "il azaindole presente invenzione indole accoppiamento derivati" vengono usati indifferentemente, si riferiscono tutti i composti indicato nella formula IG o un sale accettabile farmaceutico . In particolare, questa invenzione variano da composti indirubin e indigo per le principali modifiche strutturali per migliorare le proprietà dissoluzione, biodisponibilità maggiore, il trattamento farmacologico aumentato, riducendo la dose, riduzione delle reazioni avverse al farmaco. Con l'attuale rispetto ai diversi di indirubin e indigo nucleo, l'invenzione nucleo composto che formazione di estesi eterociclici coniugati pi di cui fare composti solubili in acqua di questa invenzione per migliorare. Una classe di composti preferito è la formula generale(I),(II),(III)e(IV)di composti, di cui la formula(I)è 5-aza indirubin derivati, (II)è 5-aza derivati diversi indigo, (III)è 7- aza indirubin derivati, (IV)è 7-aza derivati diversi indigo, 11' Re Rindipendente rappresentano H o non sostituito o sostituita con 1-3 gruppi sostituenti del - 6 - gruppo successivo: C,Calchilici, arilici, alchil aril, acil, aroyl, acil-protette glicosil o due 16 glicosilazione , glicosilazione o due glicosilazione: in cui i sostituenti selezionati da : alogeni, idrossi,C-Calchile, nitro o aminoacidi: 13 2342'3'4' 5' 、R、R、Re Rindipendente rappresentano H, alogeni,idrossi,tioli o non sostituito o R、R、R sostituita con 1-3 gruppi al gruppo successivo:C,Calchil, nitro, aminoacidi, aminoacidi, amido, C,14 1 Calcossi, metiltio, fenile, fenossi, arilici, alchil aril, trifluorometil, acil, arilici acil, solfonico, 4 ammino-sulfonil, isocianato, o isocianato alchil; in cui i sostituenti selezionati da : alogeni, idrossi, C-C13 alchile, nitro o aminoacidi: 6 6 6 R è l'atomo di ossigeno, atomo di zolfo, selenio atomo: o R è una NRo NORgruppi, Rche è H, sostituire o meno o che hanno gruppi sostituenti del gruppo successivo:C,Calchilici a catena lineare o 16 ramificata, arilici, alchil aril,C,Cgrassi cicloesile, acil, aroyl, sulfonil o fosforil; in cui i sostituenti 36 selezionati da : alogeni, idrossi,C-Calchile, nitro o aminoacidi: 13 La formula precednte generali (I),(II),(III)e(IV)composti, che sono migliori: 1 1'In cui Re R indipendente rappresentano H,C,Calchilici, arilici, alchil aril, acil, aroyl, 16 acil-protette glicosil o glicosilazione: 2342'3'4' 5'R、R、R、R、R、Re Rè indipendente rappresentano H,alogena,idrossile,fioli,C,Calchil, 14 aminoacidi, aminoacidi, amido,C,Calcossi, un zolfo, fenile, fenossi, arilici, alchil aril, trifluorometil, 14 acil, aroyl, solfonico, isocianati; La glicosilazione è arabinosio,xilosio,ribosio,il mannosio e glucosio: 6 6 6 R è l'atomo di ossigeno, atomo di zolfo, selenio atomo: o R è una NRo NORgruppi, Rche è H, C,C alchilici a catena lineare o ramificata, arilici, alchil aril, C,Cgrassi cicloesile, acil, aroyl, 1636 sulfonil, fosforil. Una classe di composti piu preferito è redatto in varie incarnazioni azaindole-indole accoppiamento derivati, come segue tabella: No. Composto Categoria 1-59 5-aza-indirubin derivati 60-89 5-aza-diverse indigo derivati 92-150 7-aza-indirubin derivati 151-180 7-aza diverse indigo derivati Sale accettabile farmaceutico L'invenzione comprende anche i composti di questa invenzione e acidi farmaceutico accettabile inorganici e acidi organici formati da sale, acidi inorganici includono: acido cloridrico, acido bromidrico, acido fosforico, acido nitrico, acido solforico: acidi organici includono: acido formico, acido acetico, acido propionico, acido succinico, naftalene disolfonico (1,5), acido asiatico, acido ossalico, acido tartarico, acido lattico, acido salicilico, acido benzoico, acido valerico, dietile acido acetico, acido malonico, ambra acido , acido fumarico, acido fumarato, acido adipico, acido maleico, acido malico, - 7 - amminoacidi, acido acrilico, acido glucosio, acido ascorbico, acido nicotinico, acido isonicotinico, metansolfonico acido, l'acido p-toluensolfonico , acido citrico, e aminoacidi. La presente invenzione per migliorare le proprietà fisiche e chimiche di sale, aumento della permeabilità cellulare, facile accesso alla cella, aumentando così l'efficacia L'attivita dei composti dell'invenzione I composti invenzione e loro sali sono ciclina-dipendente inibitori della chinasi, e induzione di inibitori del ciclo cellulare delle chinasi endogene (endogenous cyclin-dependent inhibitors，CDKIs), In tal modo la crescita delle cellule inibendo, la proliferazione, promuovere l'apoptosi delle cellule tumorali. I composti invenzione e loro sali, ripristinando la conversione del segnale dell'insulina, completamente a parte la sensibilità dei tessuti periferici di usare l'insulina, insulino-resistenza ridotta. Pertanto, i composti presente invenzione e loro sali in preparazione per il trattamento di CDK risultato anormale, la crescita delle cellule, disturbi proliferazione e l'insulino-resistenza causata dalla malattia di applicazione della droga, queste malattie sono il cancro, la psoriasi, virale malattie della pelle, HIV e malattie neurodegenerative e le malattie neurologiche come il diabete di tipo 2. Al fine di facilitare la comprensione della presente invenzione, Inventatore prevedere i seguenti composti dell'invenzione descritto meccanismo di azione. Tuttavia, dovrebbe essere chiaro che l'invenzione descritta nell'ambito dei meccanismi di protezione non sono soggetti alle restrizioni: Nella presente invenzione, per esempio, il aza-indirubin è essenzialmente una molecola indolo Azaindole e una molecola in 3，2’- po-coupled prodotto; a aza diversi indigo è un aza-indolo molecola indolo e una molecola in 3，3’- prodotto accoppiamento bit. Atomo di azoto mediante la sostituzione di uno dei benzenico indolico su un singolo atomo di carbonio, possono essere i seguenti quattro isomeri: 43N5N2N6NNNN1NHHHH7 4-azaindole 5-azaindole 6-azaindole 7-azaindole Purina (esempio specifico la figura ) è la struttura chimica dei 10 tipi conosciuti uno di inibitori [7]CDKs, è il primo studio di inibitori CDKs. Da un punto di vista strutturale, aza-indolo e purina hanno molte somiglianze, i due sono tutti 6 yuan di eterociclici aromatici conbinato 5 anello eterociclici membri NMePhPh2HNHN NNNNNNHONHONNNNNNNHH HMe I risultati del testimoniare che la presente invenzione, i composti hanno attività simile invenzione di inibitori CDKs. Non insulino-dipendente diabete mellito(diabete di tipo 2) è il mondo pericolose per la salute umana e la morte di una grave malattia, la sua patogenesi è prevalentemente insulino-resistenza.Gli studi hanno dimostrato che i derivati indirubin hanno un impatto sulla via di segnalazione dell'insulina PI3K (fosfoinositide-3-chinasi) attività nel ruolo di ingredienti, è possibile attivare Akt (proteina chinasi) e l'inibizione di mTOR (target della rapamicina nei mammiferi ), per ripristinare i segnali dell'insulina, - 8 - completamente a parte la sensibilità dei tessuti periferici all'insulina, riduzione effetto insulino-resistenza. Così, un derivato della presente invenzione sono anti-cancro, la psoriasi, malattie della pelle virali, HIV, malattie neurodegenerative e di altre malattie neurologiche e il ruolo del diabete di tipo 2. Composizione e modalita d'applicazione La presente invenzione fornisce anche un composto contenente la composizione di questa invenzione. Composizione descritta inibizione dell'attività CDKs può essere utilizzato per indurre CDKIs, ripristinare i segnali dell'insulina. La composizione di questa invenzione può essere composizioni farmaceutiche (che contiene un vettore farmaceuticamente accettabile), l'assistenza sanitaria dei prodotti di composizione (con un vettore accettabile per prodotti per la cura della salute), la composizione degli alimenti (contenenti vettore accettabile alimentare) e composizioni cosmetiche (con supporto cosmetici accettabile). Modo migliore che la composizione dell'invenzione è composizioni farmaceutiche che contengono composti dell'invenzione (o sali farmaceuticamente accettabile), e una varietà di vettori farmaceutico accettabile o eccipiente. Le composizioni farmaceutiche di questa invenzione della forma di dosaggio non è particolarmente limitato, può essere forma di dosaggio sia clinicamente accettabile. Le composizioni di questo formulazioni farmaceutiche invenzione includono: iniezione di piccola capacità, il volume di iniezione, iniezione di grandi volumi, polvere per iniezione, iniezione di emulsione, compresse, pillole, capsule, pomate, creme, cerotti, linimento, polvere , aerosol, impianti, gocce, supposte, pomate, vari tipi di nano-preparazione; liposomi corrispondente realizzato l'iniezione principale di cui sopra. Tipicamente, una varietà di formulazioni e modalità di consegna della droga deve essere abbinato. Modo migliore che la composizioni farmaceutiche di questa invenzione può essere fatto di iniezione, preparati liquidi, le forme solide. Tipo di forme farmaceutiche solide come composizioni farmaceutiche possono essere preparati con metodi tradizionali. Composizioni farmaceutiche, come le iniezioni, formulati liquidi, le forme solide dovrebbe essere in condizioni sterili o pulire con il produttore appropriato. In un altro esempio preferito, l'invenzione fornisce composti di questa invenzione (o sali farmaceuticamente accettabile) di iniezione, che l'uso di tensioattivi e / o solventi e / o la composizione di olio e / o altri materiali preparati da emulsione , sub-micro-emulsioni, nano-emulsione. In un altro esempio preferito, l'invenzione fornisce composti di questa invenzione (o sali farmaceuticamente accettabile) della preparazione dispersione solida, i farmaci sono altamente disperso nel solubile in acqua, insolubile in acqua, rivestimento enterico in un supporto inerte a formare una sorta di sotto forma di solido sistema di dispersione, e il metodo convenzionale per la produzione di capsule, - 9 - compresse, pillole, pomate, supposte e formulazioni agente di iniezione. I risultati non solo di risparmiare i composti altamente dispersi Stato, ma anche migliorare la stabilità di stoccaggio. Modo di somministrazione Quando si utilizza la composizione farmaceutica, si somma sicuro ed efficace dei composti di questa invenzione applicata ai mammiferi, compreso l'importo sicura ed efficace di solito almeno 1 mg / giorno, e in molti casi non più di circa 10 mg / kg di peso corporeo. Modo migliore, la dose è di circa 1 mg / giorno - circa 3 mg / kg di peso corporeo. Naturalmente, la dose specifiche dovrebbero anche considerare le vie di somministrazione, stato di salute del paziente e altri fattori, questi sono i medici specializzati all'interno della gamma di competenze. I composti dell'invenzione (o sale farmacologicamente accettabile) è possibile utilizzando un singolo farmaco può essere utilizzato anche in combinazione con altri farmaci. Combinazione preferita includono: l'uso in combinazione con la chirurgia, ed associata di uno o più della medicina occidentale, medicina di erbe cinese combinato con l'uso, in combinazione con radioterapia, in combinazione con la terapia genica, in combinazione con bio-regolatori. Le composizioni farmaceutiche dell'invenzione non è particolarmente ristretta via di somministrazione, compresi ma non limitati a: somministrazione per via orale, iniezione, la somministrazione intratumorale, la dose impianto, cavità amministrato, l'amministrazione anale, transdermica amministrazione, interno e di attualità; Preferiti di iniezione sono: endovenosa, intramuscolare, sottocutanea, l'iniezione intra-articolari. Preparazione L'invenzione di composti rappresentata da formula IG secondo la seguente formula con riferimento al campo di flusso del metodo nota sintetica di preparazione. In generale, nel processo di preparazione, la reazione alla temperatura di riflusso a -10?, di solito a temperatura ambiente (circa 25 ?) alla temperatura di riflusso. Modo migliore, la reazione di temperatura 5-100 ?, meglio è per il 20-80 ?. Il tempo di reazione è di solito senza particolari restrizioni, per 1 minuto-- 24 ore, meglio per 1-20 ore. Tra questi, il solvente viene di solito usato in solventi polari come l'acqua, DMF, alcoli (come il metanolo, etanolo, isopropanolo, ecc.) Composti disponibili metodi fisici e chimici di sintesi, come ad esempio NMR (1H-NMR), spettrometria di massa (MS) e analisi elementare, identificazione strutturale. 一(5-aza intermedi indirubin e obiettivo composti ( la formula I ) (1)Intermedio 1-alchil-5-aza-indolo-2，3-dione (A) sintesi: 1La formula : R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CH、acil-protette glicosil ecc. 32537492 - 10 - Con 5-aza indolo come materia prima, primi N-1 alchilazione, e poi, nel CrO e CHCOOH, la 33[11].comparsa di reazione di ossidazione, era il prodotto di A è 1-alchil -5-aza-indolo-2, 3-dione (2)Intermedio 1-acetil-3-idrossi indolo derivati (B) sintesi: 3'La formula : R=H、Cl、Br、F、CH、OCH、SCHe Ph ecc. 333 Con 2-derivatidi aminoacidi come materie prime, utilizzando acido tricloroacetico sostituito anidride [12]acetica e acetato di sodio in presenza di ciclizzazione acilazione, riduzione, era il prodotto di B. (3)L'obiettivo composto 5-aza indirubin derivati (I) sintesi: 13'La formula : R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CH、acil-protette glicosil ecc, R=H、Cl、Br、32537492 F、CH、OCH、SCHe Ph ecc. 333 I composti1-alchil-5-aza-indolo-2,3-dione, rispettivamente con 1-acetil-3-idrossi indolo e 5-alogenati-1-acetil-3-idrossi indolo protezione in N reflusso in condizioni acide, disponibile 1-alchil 2 -5-aza indirubin derivati (I). (4)L'obiettivo composto3’-ossima-5-aza indirubin derivati sintesi: 3'3'RROHONHNOH2NNNNHHPyOONN1R1R 13'La formula : R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CH、acil-protette glicosil ecc, R=H、Cl、Br、32537492 F、CH、OCH、SCHe Ph ecc. 333 (5)L'obiettivo composto 5-aza indirubin-3′-etere ossima sintesi ecc: 3'3'RRHONR CHI,etc.3NNNNHHKOHOONN11RR 13'La formula: R=CHON、EtON，R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CHecc，R=H、Cl、Br e 332537492 F ecc. - 11 - 二(5-aza diversi indigo obiettivo composti (la formula II) 13'La formula:R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CH、acil-protette glicosil ecc，R=H、Cl、Br 、32537492 F 、OH e OCHecc. 3 I composti 1-alchil-5-aza-indolo-2, 3-dione(A), rispettivamente con5- sostituito2-idrossi indolo reazione in ambiente alcalino, ottenere 1-alchil-5- invece di -5-aza diversi indigo (II). 三(7-aza indirubin intermedio obiettivo composti ( la formula III ) (1)Intermedio 1-alchil-7-aza-indolo-2，3-dione (C) sintesi: 1La formula:R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CH、acil-protette glicosil ecc. 32537492 Con 7-aza indolo come materia prima, primi N-1 alchilazione, e poi, nel CrO e CHCOOH, la 33[11].comparsa di reazione di ossidazione, era il prodotto di C è 1-alchil -7-aza-indolo-2, 3 - dione (2)L'obiettivo composto 7-aza indirubin derivati (III) sintesi: 13'La formula:R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CH、acil-protette glicosil ecc，R=H、Cl、Br 、32537492 F 、CH、OCH、SCHe Ph ecc. 333 I composti1-alchil-7-aza-indolo-2,3-dione, rispettivamente con 1-acetil-3-idrossi indolo e 5-alogenati-1-acetil-3-idrossi indolo protezione in N reflusso in condizioni acide, disponibile 1-alchil 2 -7-aza indirubin derivati (III). (3)L'obiettivo composto 3’-ossima-7-aza indirubin derivati sintesi: 3'3'RROHONNOHH2 NNHHPyNOONNN11RR 13'La formula: R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CH、acil-protette glicosil ecc，R=H、Cl、32537492 - 12 - Br 、F 、CH、OCH、SCHe Ph ecc. 333 (4)L'obiettivo composto 7-aza indirubin-3′-etere ossima ecc sintesi: 3'3'RRHONR CHI, etc.3NNHHKOHONNONN11RR 13'La formula:R=CHON、EtON，R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CHecc，R=H、Cl、Br e 332537492 F ecc. 四(7-aza diversi indigo obiettivo composti ( la formula IV) 13'La formula:R=CH、CH、n-CH、n-CH、Ph-CH、acil-protette glicosil ecc，R=H、Cl、Br 、32537492 F 、OH e OCHecc. 3 I composti 1-alchil-7-aza-indolo-2, 3-dione(C), rispettivamente con5-sostituito2-idrossi indolo reazione in ambiente alcalino, ottenere 1-alchil-5- invece di -7-aza diversi indigo (IV). I principali vantaggi di questa invenzione: 1) Questa invenzione ha rivoluzionato il indirubin e indigo molecole diverse nucleo degli atomi, formando una nuova classe di composti strutturale, si aprono spazi per nuovi composti, anche di migliorare le proprietà elettriche della molecola originale. Secondo piridina solubile in acqua, benzene, quasi insolubile in acqua e la natura della presente invenzione per migliorare composti solubili in acqua, aumentando così la biodisponibilità. 2)I composti invenzione sono gli inibitori di chinasi ciclina-dipendente, e l'induzione di endogeno inibitore della chinasi del ciclo cellulare, inibendo così la crescita cellulare, proliferazione, promuovere l'apoptosi delle cellule tumorali. 3)I composti invenzione ripristinando conversione segnalazione dell'insulina, completamente a parte la sensibilità dei tessuti periferici di usare l'insulina, ridotto la resistenza all'insulina. 4)I composti di questa invenzione per migliorare le proprietà fisiche e chimiche, aumento della permeabilità cellulare, un facile accesso alla cella, aumentando così l'efficacia. Modalita di implementazione specifiche La seguente combinazione di incarnazioni specifiche, la presente invenzione ulteriormente sviluppato. Deve essere chiaro che queste incarnazioni illustrare l'invenzione e non anche per limitare la - 13 - portata della presente invenzione. L'incarnazione seguenti non indica le condizioni specifiche dei metodi sperimentali, di solito a condizioni convenzionali, o in conformità con le condizioni consigliate dal produttore. Se non diversamente specificato, il numero di quota e la percentuale in peso e percentuale di peso. Esempio 1 Preparazione di composti Ottenuto in questa incarnazione del 5- o 7-aza indirubin e 5- o 7-aza diversi indigo derivati con Mel-TEMP punto di fusione misurato la temperatura senza correzione. Spettrometria di massa (MS) utilizzao spettrometro con HP1100LC/MSD.Cromatografia su strato sottile piastra uso gel di silice GF254 ( Qingdao Ocean Chemical Plant ) con una concentrazione di 0.8% di CMC-Na acqua di stillata viene soluzione mescolare lastricato e poi attivato da 100-110? 1 ora per salvare nel nuovamente dentro l'essiccatore sotto lampada da luce UV ( lunghezza d'onda di 254mm e 365mm); cromagrafia colonna si utilizzando 100-200 e 200-300 gel di silice in rete ( Qingdao Chemical Factory Marine ), secco colonna imballato.NMRè stata misurata con Bruck AV-300, interno TMS standard.Analisi elementare con strumenti Elementar Vario EL ? da misurare. I reagenti sono stati prodotti di qualità chimicamente puro o analitico disponibile in commercio, Se non diversamente indicato, Non trattate direttamente da usare. Esempio 1-1 intermedio nella preparazione ?Intermedio1-metil-5-aza-2,3-dione indolo Prende 2.0g,15mmol di 1-metile-5-aza a disciogliere con 70ml di AcOH, 3.2g di CrOsospensione in 3 20ml d'acqua, abbinato alla soluzione di acido acetato, in reazione 0.5 ora a temperatura ambiente, miscela diluita con acqua, estratto tre volte con cloroformio, combinato fase organica è stata lavata, disidratati concentrato, ottenere intermedio arancione a 1.5g di 1-metile-5-aza-2,3-dione indolo, la resa 62%;mp:140-142?. ?Intermedio5-cloro-2-( N-carbossimetil-amino)-acido benzoico Prende 2.0g,11.6mmol di 2-amino-5-acidocloro a disciogliere con 15ml di 2mol/L NaCOin 23 soluzione; 0.69g,7.3mmol a disciogliere 7.5ml di 2mol/L NaCOin soluzione, lentamente goccia a goccia 23 alla soluzione.Poi la miscela agitata a 80? per 20 ore, raffreddamento a temperatura ambiente, aggiungere 50ml di etere e 8ml di 2mol/L soluzione di acido cloridrico.la separazione strato organico, secco di MgSOconcentrazione era marrone chiaro solido, gel di silice colonna di purificazione 4, cromatografia( acetato di etile:metanolo =1:1), ottenere 1.58g di bianco solido(5-cloro-2-(N-carbossimetil-amino)-acido benzoico), la resa 59%; mp:182-183?. ?Intermedio1-acetil-5-cloro-3-acetossi indolo Prende1.20g,5.2mmol di 5-cloro-2(N-carboxymethyl-amino)-acido benzoico e 0.6g,7.3mmol di anidro NaOAc sciolto in 8ml di anidride acetato, 60? in reazione 5 ore, raffreddato a temperatura ambiente, filtrazione di sodio acetato, si è concentrato il filtrato, il residuo disciolto in acetato di etile aggiunto a 100ml, dopo aggiungere 100ml di acqua e 20ml di bicarbonato di sodiosaturi, la separazione strato organico, strato d'acqua è stata estratta con acetato di etile in 50mlx2, gli strati organici combinati lavati con bicarbonato di sodio in 100mlx2, secco e concentrato, ottenere 0.84g di bianco solido - 14 - (1-acetil-5-cloro-3-acetossi indolo), la resa 64%. ?Intermedio1-acetil-5-cloro-3-idrossi indolo Mischiare la (1.0g，3.97mmol) di 1-acetil-5-bromo-3-acetossi indolo in 20ml d'acqua con (1.0g， 7.94mmol) di solfito di sodio.Riscalda la miscela a 80? per 3 ore, raffreddato a temperatura ambiente, estratto con 100mlx2 di acetato di etile, strati organici combinati, secco e concentrato, ottenere 0.55g di bianco aghiformi solido(1-acetil-5-cloro-3-idrossi indolo), la resa 66%;mp:186-188?. ?Intermedio1-metile-7-aza-2,3-dione indolo Prende 2g,15mmol di 1-metile-7-aza a disciogliere con 70ml di AcOH, 3.2g di CrOsospensione in 3 20ml d'acqua, abbinato alla soluzione di acido acetato, in reazione 0.5 ora a temperatura ambiente, miscela diluita con acqua, estratto tre volte con cloroformio, combinato fase organica è stata lavata, disidratati concentrato, ottenere intermedio arancione a 1.73g di 1-metile-7-aza-2,3-dione indolo, la resa 71.3%;mp:162-163?. ?Intermedio5-bromo-2-( N-carbossimetil-amino)-acido benzoico Prende 2g,9mmol di 2-amino-5-acido bromo a disciogliere con 15ml di 2mol/L NaCOin soluzione; 23 0.69g,7.3mmol a disciogliere 7.5ml di 2mol/L NaCOin soluzione, lentamente goccia a goccia alla 23 soluzione.Poi la miscela agitata a 80? per 20 ore, raffreddamento a temperatura ambiente, aggiungere 50ml di etere e 8ml di 2mol/L soluzione di HC1.la separazione strato organico, secco di MgSO4, concentrazione era marrone chiaro solido, gel di silice colonna di purificazione cromatografia( acetato di etile:metanolo =1:1), ottenere 1.55g di bianco solido (5-bromo-2-( N-carbossimetil-amino)-acido benzoico), la resa 60%; mp:178-180?. ?Intermedio1-acetil-5-bromo-3-acetossi indolo Prende 0.84g,3.4mmol di 5-bromo-2(N-carboxymethyl-amino)-acido benzoico e 0.6g,7.3mmol di anidro NaOAc sciolto in 8ml di anidride acetato, 60? in reazione 5 ore, raffreddato a temperatura ambiente, filtrazione di sodio acetato, si è concentrato il filtrato, il residuo disciolto in acetato di etile aggiunto a 100ml, dopo aggiungere 100ml di acqua e 20ml di NaHCOsaturi, la separazione strato 3 organico, strato d'acqua è stata estratta con acetato di etile in 50mlx2, gli strati organici combinati lavati con NaHCO in 100mlx2, secco e concentrato, ottenere 1.3g di bianco solido (1-acetil-5-bromo-3-acetossi 3 indolo), la resa 25.4%. ?Intermedio1-acetil-5-bromo-3-idrossi indolo Mischiare la (1.0g，3.38mmol) di 1-acetil-5-bromo-3-acetossi indolo in 20mlHO con (1.0g，2 7.94mmol) di solfito di sodio.Riscalda la miscela a 80? per 3 ore, raffreddato a temperatura ambiente, estratto con 100mlx2 di acetato di etile, strati organici combinati, secco e concentrato, ottenere 0.7g di bianco aghiformi solido(1-acetil-5-bromo-3-idrossi indolo), la resa 82%;mp:180-182?. Mischiare la (1.0g，3.97mmol) di 1-l-5-cloro-3-acetossi indolo in 20ml acqua con (1.0g，7.94mmol) di solfito di sodio.Riscalda la miscela a 80? per 3 ore, raffreddato a temperatura ambiente, estratto con 100mlx2 di acetato di etile, strati organici combinati, secco e concentrato, ottenere 0.55g di bianco aghiformi solido(1-acetil-5-cloro-3-idrossi indolo), la resa 66%;mp:186-188?. - 15 - Esempio 1-1 l'obiettivo composti sintesi ?1-metile-5-aza indirubin (2) Prende 0.2g(1.23mmol)di 1-metile-5-aza due chetoni aggiunto 0.21g(1.2mmol)di 1-acetile-3-indrossi indolo e 20 ml di acqua e 0.02g di p-toluensolfonico acido, riflusso sotto azoto e mescolare per 1 ora, ottenere la soluzione viola, dopo il raffreddamento, estrazione con cloroformio, lavato, concentrato, ottenere solido viola, gel di silice colonna di purificazione cromatografia( cloroformio:etere di petrilio =3:1) e ricriztallizzato da acetato di etile, ottenere 0.14g di 1-metile-5-aza indirubin (2), rosso cristalli aghiformi, la resa 44%;mp:114~116?. +ESI-MS:278.1[M+H]，CHNO(277.2); 1611321H NMR (AV-300，CDCl，ppm)δ: 3.48(s，3H，-CH)，7.08(m，1H，5’-H)，7.09(m，1H，6’-H)，33 7.16(dd，1H，J=7.6Hz，4’-H)，7.76(d，J=7.6Hz，1H，7’-H)，8.10 (s，1H，4-H)，8.26(dd，J=5.5Hz; 1H，6-H)， 9.10(dd，J=5.5Hz，1H，7-H)，10.4(bs，1H，N-H); Anal Calcd Per CHNO: C，69.31 H，3.97 N，15.16; 161132 Found: C，69.15 H，4.09 N，15.29. ? 1-benzyl-5’-cloro-5-aza indirubin (19) Con?allo stesso modo, volume molare sarà simile a?nella 1-benzyl-5-aza-2,3-dione, 1-acetile-5-cloro-3-idrossi indolo e 0.02g di p-toluensolfonico acido aggiunta all'acqua da 20ml, riflusso sotto azoto e mescolare per 1 ora, ottenere la soluzione viola, dopo il raffreddamento, estrazione con cloroformio, lavato, concentrato, ottenere solido viola, gel di silice colonna di purificazione cromatografia( cloroformio:etere di petrilio =3:1) e ricriztallizzato da acetato di etile, ottenere 0.18g di 1-benzyl-5’-cloro-5-aza indirubin (19), rosso cristalli aghiformi, la resa 39%;mp:110~112?. +ESI-MS:389[M+H]，CH Cl NO(387.9); 2214321H NMR(AV-300，CDCl ，ppm)δ:5.21(s，2H，N-CH)，10.44(s，1H，N-H)， 6.91~9.02(m，32 11H，Ar-Hs); Anal Calcd Per CH Cl NO: C，68.13 H，3.64 N，10.83; 221432 Found: C，68.42 H，3.59 N，10.89. ?1-butil-5-aza indirubin-3’-ossima (40) Prende 0.4g,1.25mmol ( ottenuti con il metodo?) di 1-butil-5-aza indirubin sciolto in metanolo da 12ml, aggiungere 6ml di piridina anidra e 0.15g di cloridrato indrossilammina(2.2mmol), riscaldamento reflusso 1 ora, concentrato di raffreddamento per rimuovere la maggior parte del solvente, il residuo è stato versato in ghiaccio in 100ml, energica egitazione, il solido arancione è stato filtrato, gel di silice colonna di purificazione cromatografia( etere di petrolio: acetato di etile =3:1), ottenere 0.32g di -butil-5-aza indirubin-3’-ossima (40), arancio solido, la resa 90%;mp:250-252?. +ESI-MS:335.1[M+H]，CHNO(334.3); 1918421H NMR(AV-300，D6-DMSO，ppm)δ:0.91(t，3H，-CH)，1.31(m，2H，-CH)， 2.28(m，2H，32 -CH)， 3.28(m，2H，N-CH)，7.10~8.81(m，7H，Ar-Hs)， 11.71(s，1H，N-H)， 13.70(s，1H，22 N-OH); Anal. Calcd. Per CHNO:C，68.25 H，5.43 N，16.76; 191842 - 16 - Found:C，68.33 H，5.56 N，16.66. ? 1-butil-5-aza indirubin-3’-ossima etere (53) Prende 1.5g，4.5mmol di 1-butil-5-aza indirubin-3’-ossima aggiunto 5% di soluzione di etanolo di idrossido di potassio in 50ml, calore disciolto, filtrato e mescolando continuamente il filtrato è stato aggiunto goccia a goccia a 50ml di CHI, reazione esotermica, precipitato rosso scuro, dopo la 3 miscelazione 0.5 ore, filtarto, lavato con acqua fino neutro, dopo l'essiccazione era buio grezzo rosso, ricristallizzazione, grazzo è stato ricristallizzato con acetone, ottenere 1-butil-5-aza indirubin-3’-ossima etere (53) da 1.20g, cristalli di colore rosso scuro, la resa 77%;mp:209-211?. +ESI-MS:349.1[M+H]，CHNO(348.2); 202041H-NMR(AV-300，D6-DMSO，ppm)δ:0.98(t，3H，-CH)，1.46(m，2H，-CH)，2.08(m，2H，32 -CH)，3..86(m，2H，N-CH)，4.16(s，3H，O-CH)，7.10~9.19(m，7H，Ar-Hs)，10.86(bs，1H，223 N-H); Anal. Calcd. Per CHNO:C，68.95 H，5.79 N，16.08 202042 Found:C，68.81 H，5.62 N，15.85. ?1-isopropilico-5-aza indirubin (73) Prende 0.4g (2.1mmol) di 1-isopropilico-5-aza-2,3-dione e 0.28g (2.1mmol)2-idrossi indolo a 10ml di etanolo, poi con 1mol/L di idrossido di sodio a pH=9，70? in reazione 2 ore, produrre un solido marrone.Dopo il raffreddamento e la filtrazione, il solido lavato con acqua e etanolo,asciugare da sottovuoto, ottenere 0.44g di 1-isopropilico-5-aza indirubin (73), solido rosso-bruno, la resa 66%;mp: 128~130?. +-ESI-MS:306.1[M+H]， 304.2[M-H]，CHNO(305.3); 1815321H NMR(AV-300，D6-DMSO，ppm)δ: 1.52(d，6H，-CH(CH))，4.81(m，1H，-CH(CH))， 3232 6.86-9.32(m，7H，Ar-Hs)， 10.96(bs，1H，N-H); Anal. Calcd. Per CHNO:C ，70.81 H，4.95 N，13.76 181532 Found: C，70.62 H，5.10 N，13.58. ?1-metile-7-aza indirubin (93) Prende 0.2g(1.23mmol)di 1-metile-7-aza due chetoni aggiunto 0.21g(1.2mmol)di 1-acetile-3-indrossi indolo e 20 ml di acqua e 0.02g di p-toluensolfonico acido, riflusso sotto azoto e mescolare per 1 ora, ottenere la soluzione viola, dopo il raffreddamento, estrazione con cloroformio, lavato, concentrato, ottenere solido viola, gel di silice colonna di purificazione cromatografia( cloroformio:etere di petrilio =3:1) e ricriztallizzato da acetato di etile, ottenere 0.14g di 1-metile-7-aza indirubin (93), rosso cristalli aghiformi, la resa 41.1%;mp:116~118?. +ESI-MS:278.1[M+H]，CHNO(277.2); 1611321H NMR (AV-300，CDCl，ppm)δ: 3.59(s，3H，-CH)，7.08(m，1H，5’-H)，7.09(m，1H，6’-H)，33 7.16(dd，1H，J=7.6Hz，4-H)，7.58(m，1H，5-H)，7.76(d，J=7.6Hz，1H，7’-H)，8.21(dd，J=5.5Hz; 1H，4-H)， 9.13(dd，J=5.5Hz，1H，6-H)，10.4(bs，1H，N-H); Anal Calcd Per CHNO: C，69.31 H，3.97 N，15.16; 161132 Found: C，69.05 H，4.18 N，15.34. - 17 - ?1-benzyl-5’-bromo-7-aza indirubin (109) Con ? allo stesso modo, volume molare sarà simile a ? nella 1-benzyl-7-aza-2,3-dione, 1-acetile-5-bromo-3-idrossi indolo e 0.02g di p-toluensolfonico acido aggiunta all;acqua da 20ml, riflusso sotto azoto e mescolare per 1 ora, ottenere la soluzione viola, dopo il raffreddamento, estrazione con cloroformio, lavato, concentrato, ottenere solido viola, gel di silice colonna di purificazione cromatografia( cloroformio:etere di petrilio =3:1) e ricriztallizzato da acetato di etile, ottenere 0.14g di 1-benzyl-5’-bromo-7-aza indirubin (109), rosso cristalli aghiformi, la resa 27%;mp:112~114?. +ESI-MS:433[M+H]，CH Br NO(432.2); 2214321H NMR(AV-300，CDCl ，ppm)δ:5.24(s，2H，N-CH)，10.44(s，1H，N-H)， 6.91~9.0(m，32 11H，Ar-Hs); Anal Calcd Per CH Br NO: C，61.13 H，3.26 N，9.72; 221432 Found: C，60.72 H，3.57 N，9.38. ?1-butil-7-aza indirubin (131) Prende 1-butil-7-aza indirubin da 1.25mmol, ottenuto con il metodo ? sciolto in metanolo da 12ml, aggiungere 6ml di piridina anidra e 0.15g di cloridrato indrossilammina(2.2mmol), riscaldamento reflusso 1 ora, concentrato di raffreddamento per rimuovere la maggior parte del solvente, il residuo è stato versato in ghiaccio in 100ml, energica egitazione, il solido arancione è stato filtrato, gel di silice colonna di purificazione cromatografia( etere di petrolio: acetato di etile =3:1), ottenere 0.31g di 1-butil-7-aza indirubin (131), arancio solido, la resa 87.7%;mp:254-256?. +ESI-MS:335.1[M+H]，CHNO(334.3); 1918421H NMR(AV-300，D6-DMSO，ppm)δ:0.92(t，3H，-CH)，1.31(m，2H，-CH)， 2.28(m，2H，32 -CH)， 3.32(m，2H，N-CH)，7.03~8.81(m，7H，Ar-Hs)， 11.7(s，1H，N-H)， 13.7(s，1H，N-OH); 22 Anal. Calcd. Per CHNO:C，68.25 H，5.43 N，16.76; 191842 Found:C，68.09 H，5.60 N，16.58. ?1-butil-7-aza indirubin-3’-ossima etere (144) Prende 1-butil-7-aza indirubin-3’-ossima da 1.5g，4.5mmol ha aggiunto il 5% KOH di etanolo anidro da 50 ml, calore disciolto, filtrato e mescolando continuamente il filtrato è stato aggiunto goccia a goccia a 50ml di CHI, reazione esotermica, precipitato rosso scuro, dopo la miscelazione 0.5 ore, filtarto, lavato 3 con acqua fino neutro, dopo l'essiccazione era buio grezzo rosso, ricristallizzazione, grazzo è stato ricristallizzato con acetone, ottenere 1-butil-7-aza indirubin-3’-ossima etere (144) da 1.26g, cristalli di colore rosso scuro, la resa 80.5%;mp:212-214?. +ESI-MS:349.1[M+H]，CHNO(348.2); 202041H-NMR(AV-300，D6-DMSO，ppm)δ:0.98(t，3H，-CH)，1.46(m，2H，-CH)，2.08(m，2H，32 -CH)，3..88(m，2H，N-CH)，4.16(s，3H，O-CH)，7.06~9.19(m，7H，Ar-Hs)，10.86(bs，1H，223 N-H); Anal. Calcd. Per CHNO:C，68.95 H，5.79 N，16.08 202042 Found:C，68.79 H，5.59 N，15.88. ?1-isopropilico-7-aza diverse indigo derivati (164) - 18 - Prende 1-isopropilico-7-aza-2,3-dione da 0.4g(2.1mmol) e 2-idrossi indolo da 0.28g(2.1mmol) in aggiunta a 10ml di etanolo, con 1mol/L NaOH portato a pH=9, 70? in reazione 2 ore, dopo produrre un solido marrone.Dopo il raffreddamento e la filtrazione, il solido lavato con acqua e etanolo,asciugare da sottovuoto, ottenere 1-isopropilico-7-aza diverse indigo derivati (164) da 0.42g, solido rosso-bruno, la resa 63.2%;mp:132~134?. +-ESI-MS:306.1[M+H]， 304.2[M-H]，CHNO(305.3); 1815321H NMR(AV-300，D6-DMSO，ppm)δ: 1.51(d，6H，-CH(CH))，4.78(m，1H，-CH(CH))， 3232 6.86-9.3(m，7H，Ar-Hs)， 10.99(bs，1H，N-H); Anal. Calcd. Per CHNO:C ，70.81 H，4.95 N，13.76 181532 Found: C，70.53 H，5.04 N，13.52. Secondo sopra la preparazione di 5-aza indirubin derivati 2,19,40 e 53 del metodo, sintesi totale di 59 5-aza indirubin composti (I), le loro strutture sono riportati nella tabella 1, tutte le parti di questi nuovi composti da spettroscopia infrarossa (IR),spettroscopia ultravioletta (UV/VIS), tutti da spettrometria 1massa (ESI-MS),NMR (H-NMR)e l'analisi elementare ha confermato la struttura. I 241'2'4' 5' La formula I, R~R，R、R、Re RDi H, il resto della tabella 1: Tabella 1 5-aza indirubin composti (I) della struttura 13'Ordine R R R 1 H H O 2 CH H O 3 3 CH OH O 3 4 CH OCH O 33 5 CH SCH O 33 6 CH H O 25 7 i-CH H O 37 8 n-CH H O 49 9 CH-Ph H O 2 10 CH Br O 3 11 CH Cl O 3 12 CH Br O 25 13 CH Cl O 25 14 i-CH Br O 37 15 i-CH Cl O 37 16 n-CH Br O 49 17 n-CH Cl O 49 18 CH-Ph Br O 2 19 CH-Ph Cl O 2 - 19 - 20 CH-Ph F O 2 21 Ribosil triacetil H O 22 PhCO OCH S 3 23 CHCHCO OCH S 323 24 CH Br N-OH 3 25 CH Cl N-OH 3 26 CH Ph N-OH 3 27 CH SCH N-OH 33 28 CH Br N-OH 25 29 CH Cl N-OH 25 30 i-CH Br N-OH 37 31 i-CH Cl N-OH 37 32 n-CH Br N-OH 49 33 n-CH Cl N-OH 49 34 CH-Ph Br N-OH 2 35 CH-Ph Cl N-OH 2 36 CH-Ph F N-OH 2 37 CH H N-OH 3 38 CH H N-OH 25 39 i-CH H N-OH 37 40 n-CH H N-OH 49 41 CH-Ph H N-OH 2 42 Ribosilazione H N-OH 43 Glucosyl H N-OH 44 CH H N-OCH 3345 CH Br N-OCH 3346 CH Cl N-OCH 3347 CH H N-OCH 25348 CH Br N-OCH 25349 CH Cl N-OCH 25350 i-CH H N-OCH 37351 i-CH Br N-OCH 37352 i-CH Cl N-OCH 37353 n-CH H N-OCH 49354 n-CH Br N-OCH 49355 n-CH Cl N-OCH 49356 CH-Ph H N-OCH 2357 CH-Ph F N-OCH 2358 CH-Ph Br N-OCH 2359 CH-Ph Cl N-OCH 23 Redatto in conformita 1-isopropilico-5-aza diverse indigo(73) del metodo, sintesi totale 30 di 5-aza diverse indigo composti (II), le loro strutture vedi nella tabella 2, tutti questi nuovi composti sono confermato da spettroscopia infrarossa (IR), spettroscopia ultraviolatta(UV/VIS), spettrometria di 1massa(ESI-MS), NMR(H-NMR) e l'analisi elementare. - 20 - II 242'4' 5' La formula II, R~R，R、Re RDi H, il resto della tabella 2: Tabella 2 5-aza diverse indigo composto (II) della struttura 11'3' Ordine R R R 60 CH H H 3 61 CH H Br 3 62 CH H Cl 3 63 CH H F 3 64 CH CH OH 33 65 CHCHCO H OCH 32366 PhCO H OCH 367 Ribosil triacetil H H 68 CH H H 25 69 CH CH Br 2525 70 CH H Cl 25 71 CH H F 25 72 CH CH OH 2525 73 i-CH H H 37 74 i-CH H Br 37 75 i-CH H Cl 37 76 i-CH H F 37 77 i-CH i-CH OH 3737 78 n-CH H H 49 79 n-CH H Br 49 80 n-CH H Cl 49 81 n-CH n-CH OH 4949 82 n-CH H F 49 83 n-CH n-CH OCH 4949384 CH-Ph H H 2 85 CH-Ph H Br 2 86 CH-Ph CH-Ph Cl 22 87 CH-Ph H F 2 88 CH-Ph CH-Ph OH 22 89 Ribosilazione H H Redatto in conformita 7-aza indirubin derivati 93,109,131 e 144 del metodo, sintesi totale 59 di 7-aza indirubin composti (III), le loro strutture vedi nella tabella 3, tutti questi nuovi composti sono confermato da spettroscopia infrarossa(IR), spettroscopia ultraviolatta (UV/VIS), tutte le spettrometrie di - 21 - 1massa(ESI-MS), NMR(H-NMR) e l'analisi elementare. III 241'2'4' 5' La formula III, R、R，R、R、Re RDi H, il resto della tabella 3 : Tabella 3 7-aza indirubin composto (III) della struttura 133'Ordine R R R R 92 H H H O 93 CH H H O 3 94 CH CH OH O 33 95 CH CH OCH O 33396 CH CH SCH O 33397 CH H H O 25 98 i-CH H H O 37 99 n-CH H H O 49 100 CH-Ph H H O 2 101 CH H Br O 3 102 CH H Cl O 3 103 CH H Br O 25 104 CH H Cl O 25 105 i-CH H Br O 37 106 i-CH H Cl O 37 107 n-CH H Br O 49 108 n-CH H Cl O 49 109 CH-Ph H Br O 2 110 CH-Ph H Cl O 2 111 CH-Ph NHCH F O 23 112 Ribosil triacetil CH H O 3 113 PhCO CH OCH S 33114 CHCHCO F OCH S 323115 CH H Br N-OH 3 116 CH H Cl N-OH 3 117 CH CF Ph N-OH 33 118 CH CH SCH N-OH 333119 CH H Br N-OH 25 120 CH H Cl N-OH 25 121 i-CH H Br N-OH 37 122 i-CH H Cl N-OH 37 123 n-CH H Br N-OH 49 - 22 - 124 n-CH H Cl N-OH 49 125 CH-Ph H Br N-OH 2 126 CH-Ph H Cl N-OH 2 127 CH-Ph H F N-OH 2 128 CH H H N-OH 3 129 CH H H N-OH 25 130 i-CH H H N-OH 37 131 n-CH H H N-OH 49 132 CH-Ph H H N-OH 2 133 Ribosilazione CH H N-OH 3 134 Glucosyl CH H N-OH 3 135 CH H H N-OCH 33136 CH H Br N-OCH 33137 CH H Cl N-OCH 33138 CH H H N-OCH 253139 CH H Br N-OCH 253140 CH H Cl N-OCH 253141 i-CH H H N-OCH 373142 i-CH H Br N-OCH 373143 i-CH H Cl N-OCH 373144 n-CH H H N-OCH 493145 n-CH H Br N-OCH 493146 n-CH H Cl N-OCH 493147 CH-Ph H H N-OCH 23148 CH-Ph H F N-OCH 23149 CH-Ph H Br N-OCH 23150 CH-Ph H Cl N-OCH 23 Redatto in conformita 1-isopropilico-7-aza diverse indigo(164) del metodo, sintesi totale 30 di 7-aza diverse indigo composti (IV), le loro strutture vedi nella tabella 4, tutti questi nuovi composti sono confermato da spettroscopia infrarossa(IR), spettroscopia ultraviolatta (UV/VIS), spettrometrie di 1massa(ESI-MS), NMR(H-NMR) e l'analisi elementare. IV 242'4' 5' La formula IV, R、R，R、Re RDi H, il resto della tabella 4 : Tabella 4 7-aza diverse indigo composto( IV) della struttura 11'33'0rdine R R R R 151 CH H H H 3 - 23 - 152 CH H H Br 3 153 CH H H Cl 3 154 CH H H F 3 155 CH CH CH OH 333 156 CHCHCO H F OCH 323 157 PhCO H CH OCH 33 158 Ribosil triacetil H CH H 3 159 CH H H H 25 160 CH CH H Br 2525 161 CH H H Cl 25 162 CH H H F 25 163 CH CH CF OH 25253 164 i-CH H H H 37 165 i-CH H H Br 37 166 i-CH H H Cl 37 167 i-CH H OCH F 373 168 i-CH i-CH H OH 3737 169 n-CH H H H 49 170 n-CH H H Br 49 171 n-CH H H Cl 49 172 n-CH n-CH SCH OH 49493 173 n-CH H H F 49 174 n-CH n-CH OCH OCH 494933 175 CH-Ph H H H 2 176 CH-Ph H H Br 2 177 CH-Ph CH-Ph SCH Cl 223 178 CH-Ph H OCH F 23 179 CH-Ph CH-Ph H OH 22 180 Ribosilazione H CH H 3 Esempio 2 L'attivita antitumorale di prova(1) 1、Mareriale e strumento (i)Linee cellulari: cancro alla prostata androgeno-dipendente delle cellule DU145, Acquisttato negli Stati Uniti (tipo americano culture collezione) (ii)Reagenti RPMI Medium 1640( U.S GIBCOBRL societa), siero di vitello, (Bio-societa di ingegneria a Hangzhou), MTT(Societa di Sigma), HEPES(franco shanghai dongfeng biotecnologia Co.,Ltd), L-glutammina(Giappone importati imballaggio), due dimetilsofossido( DMSO，analitici puri); Misurato campione: selezionare la parte 5-aza indirubin e 5-aza diverse indigo nuovi composti sono totale 20(produzione propria), una parte 7-aza indirubin e 7-aza diverse indigo nuovi composti sono totale 38(produzione propria) Sostanza di riferimento: 1-etilico-indirubin(90), 1-etilico-3’-ossima indirubin(91), la produzione propria, lastruttura di identificazione; e acido tutte le trans retinoico. - 24 - (iii)Preparazione dei reagneti a、Coltura soluzione delle cellule: 10.4g di coltura di media 1640 , 2.1g di sodio bicarbonato, 0.3g di glutammina, 5.95g di HEPES, 100.000 unita di penicillina e streptomicina, sciogliere a 1000ml di acqua distillata, con una membrana microporosa sterilizzazione filtro, dopo imballagio separato a ?20? conserva, prima dell'uso con l'aggiunto di siero di vitello inattivato; b、Siero di vitello: stato 56? bagnamaria per 30 minuti inattivato, dopo imballagio separato a ? 20? conserva; c、MTT:con PBS prepara a 5mg/ml, conservazione a 4?, stato buio, efficace entro due settimane; d、 PBS:8.00g di cloruro di sodio, 0.20g di cloruro di potassio, 3.4g di dodici idrogeno fosfato disodico, 0.20g di dipotassio idrogeno fosfato nella bagnamaria a 37? sotto la completa dissoluzione in acqua bidistillata, sarà tollerato 1000ml, dopo imballagio separato a 4? conserva; e、Misurato 58 campione , sostanza di riferimento 90 、91 e acido tutte le trans retinoico, quando esperimento e accoppiato con una soluzione di due dimetilsofossido, conservazione a -20?. (iv)Il principale strumento Coltura box di CO ( modello GB16, Heraeus Societa Germania); banco pulito(SW-CJ-1F，Suzhou 2 Antai aria tecnologia Co.,Ltd); Centrifuga orizzontale(modello LXJ-II, Shanghai strumento medico di fabbrica 3); immunoenzimatico per il rilevamento dello strumento(BIO RAD Modello 550, U.S); invertito microscopio biologico(XSZ-D2，chongqing fabbrica Optical Instrument); rapido dispositivo di miscelazione(modello SK-1, Changzhou Guohua Electric Appliance Co.,Ltd); Vasca di termostato elettrico(modello DK-8D,Shanghai Medical Equipment temperatura di fabbrica); citometria a flusso(FACSCa1ibur，Societa americana B-D); osillatore a piatto(modello 752-A,Shanghai strumento medico di fabbrica); bilancia elettrinica(modello BS110S Societa Germania Sartorius). 2、Motodo (i) Coltura cellulare Cellule di DU145 sono state inoculate con 10% di siero vitello in RPMI 1640 liquido di coltura, situato in 37? e 5% di coltura box di CO, diversi passaggi una volta ogni 2-3 giorni, gli esperimenti le 2 cellule in fase di crescita logaritmica. (ii) Esperimento divide Gli esperimenti le cellule in fase di crescita logaritmica, fatto sospensione cellulare, mescolare trypan colorazione blu, contando il numero di cellule viventi in piu del 98%, la sospensione cellulare sono stati divisi in diversi gruppi: 1. Gruppi esperimentali vuoto (sospensione cellulare); 2. Esperimento gruppo ( sospensione cellulare piu farmaco) (iii)MTT metodo per la determinazione del valore IC ( meta della quantita di inibizione), 50 - 25 - Farmaceutica da configurato con una concentrazione della soluzione riserve di 20mmol di due dimetilsofossido(esperimento 4 ore), quando esperimento in condizione sterili, con il 10% siero vitello di RPMI 1640 liquide coltura della concentrazione di 80μM preparazione della liquide, come mostrato nel fluido di lavoro,la concentrazione di farmaco per aumento di 2 volte (1.25 - 20,M). Selezionare DU145 cellule nella logaritmica fase di crescita, centrifugati,contati, contenente il 10% 4di siero vitello di RPMI 1640 liquide coltura in sospensione cellulare, la densita è 2.5×10/ml，inoculare con 96 orifizi piastre, ciascuno orifizio a 5000 cellule /200μl，la coltura a 37 ?, 5% CO2 per 24 ore sotto le condizioni, secondo la concentrazione del farmaco sono stati inoculati da 6 gruppi(compreso un gruppi esperimentali), ogni gruppo creazione di 8 fori multipli.Dopo 72 ore di incubazione, la rapida colorimetrico con MTT, nel lettore di micropiastre per la determinazione della lunghezza d'onda di 540nm, 630nm come lunghezza d'onda di riferimento di assorbanza valore (A).Il tasso di inibitoria è stata calcolata della seguente equazione ( I ): dove T è il valore di assorbanza dei gruppi sperimentali, e C è stato il valore di assorbanza del gruppo di controllo in bianco: I = (1 - T/C) × 100% Alla concentrazione-curva di tasso inibizione di regressione derivati, derivato del 50% e il 90% di concentrazione inibitoria (IC及ICμM) i dati elencati nelle tabelle 5 e 6: 5090 Tabella 5 5-aza indirubin e 5-aza diverse indigo derivati DU145 inibizione dellacrescita delle cellule ICe IC50 90 tumorali di No. IC(μM) IC(μM) No. IC(μM) IC(μM) 50905090 7 ,100 non 38 6.4 22.0 rilevamento 8 11.5 39.0 63 48.0 >100 9 12.0 85.0 67 8.0 44.0 12 8.8 28.0 71 17.0 87.0 15 9.0 48.0 75 9.7 29.0 18 6.6 23.5 78 16.0 51.0 25 1.7 12.2 79 14.5 77.0 28 4.5 14.0 82 ,100 ,100 29 2.2 6.8 30 3.3 7.0 90 7.2 31.0 31 3.7 11.5 91 4.2 21.8 35 7.3 20.0 acido ,50 retinoico Tabella 5 7-aza indirubin e 7-aza diverse indigo derivati DU145 inibizione dellacrescita delle cellule ICe IC50 90tumorali di No. IC(μM) IC(μM) No. IC(μM) IC(μM) 50905090 95 40.0 ,100 126 7.1 19.0 - 26 - 98 ,100 non 128 2.7 7.1 rilevamento 99 11.5 87.0 129 3.8 12.0 100 9.5 31.5 130 7.05 17.0 101 11.5 60.0 131 16.0 80.0 102 8.0 18.0 154 43.0 >100 103 10.0 32.2 158 10.5 49.0 104 8.5 45.0 160 14.0 61.0 105 8.1 28.5 161 14.0 45.0 106 18.5 100.0 162 17.5 89.0 107 14.0 26.0 164 9.05 19.0 108 11.0 42.0 165 8.3 28.0 109 7.0 24.0 166 10.0 31.5 111 7.4 34.0 169 14.0 47.0 116 6.9 16.0 170 15.0 90.0 119 4.0 12.0 171 9.0 46.0 120 5.4 61.0 173 ,100 ,100 121 3.1 29.0 122 8.0 25.0 90 7.0 30.0 123 3.7 5.0 91 4.1 22.0 124 1.8 12.0 acido ,50 retinoico Nota: Tabella 90 e 91 nella struttura molecolare della sostanza di riferiimento come la seguen: E come mostrato nella figura 2. 3、Discussione dei risultati (i) Dal saggio di MTT, è facile vedere la stragrande maggioranza di 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati sono forti differenze indigo attivita antitumorale di inibizione della crescita delle cellule tumorali rispetto alle cellule induttore di differenziazione acido tutte le trans retinoico molto piu forte; ancora piu importanto, per il presente studio era ancora importante ormone-dipendente cellule tumorali della prostata DU145, la stragrande maggioranza di 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati hanno mostrato un'inibizione bene; (ii) Molti ICdi 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati sono vicini o meno 50 [13]la ICdi sostanza di riferimento(90 e 91), pero il 91 è noto CDKs inibitori, le struttue di composti 50 38,129 e 91 sono molto simili, ci sono solo 5- o 7- diversi tipi di atomi, sulla questa parte si suggerisce: L'invenzione di nuovi composti sintetici che inibiscono la crescita delle cellule tumorali può essere un meccanismo d'azione simile;. (iii) In confronto, il 5- o 7-aza indirubin derivati di3’-ossima sia 5’-alogennati si inibire crescita delle - 27 - cellule tumorali è più efficace, in particolare tra i composti 25,30,116,121 e 124 piu forti, 30,121,e 124 ancora buon profilo di sicurezza. Esempio 3 L'attivita antitumorale di prova (2) 1、Cellule tumorali: epatoma cellule 7701 QGY, HepG-2，adenocarcinoma a cellule polmonari umane A549, le cellule umane leucemia mieloide cronica in originale K562, CEM cellule leucemiche umane e cellule di melanoma topo KIII. 2、Applicazione esempio 2 di metodo, testando parte del nuovo sintetici di 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati(totale 20 composti) si inibire una varieta della crescita delle cellule tumorali di attivita biologica, i risultati dei test: 50% di concentrazione inbente(IC，μM)sono 50 riportati nella tabella 7 Tabella 7 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati si inibire una varieta della crescita delle cellule tumorali di IC(μM) 50 IC(μM) 50 No.Cellule 7701 QGY HepG-2 A549 K562 CEM KIII di cancro 95 23.9 50.1 35.2 8.1 9.0 15.6 99 12.4 29.3 18.4 6.7 7.1 10.1 101 15.0 28.8 21.6 7.8 12.0 23.0 102 39.5 41.5 22.8 9.5 7.0 18.2 105 13.4 32.0 24.1 19.0 8.0 11.9 106 28.0 18.0 19.6 20.4 10.2 14.0 109 10.0 21.2 15.8 12.5 9.0 18.6 111 28.5 17.0 24.3 15.0 11.0 15.1 116 11.1 20.5 12.5 8.2 5.6 6.3 119 13.5 8.1 8.5 7.9 9.0 8.1 121 14.9 16.0 18.1 11.5 11.3 6.0 126 11.2 16.3 9.6 5.1 8.1 14.2 128 7.6 12.6 10.0 7.7 10.5 3.6 129 7.4 13.0 14.1 3.4 7.0 4.2 154 36.0 29.3 12.4 19.0 9.8 12.0 158 44.0 18.0 22.3 5.8 12.0 8.3 160 25.4 31.1 29.1 10.2 10.8 15.0 164 33.1 29.0 23.3 18.6 12.7 9.1 170 28.0 25.0 19.5 10.3 8.5 18.5 176 13.7 20.6 13.2 4.1 7.4 8.3 I risultati dei test precedenti mostrano che l'attivita antitumorale, 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati anche si inibire una varieta della crescita delle cellule tumorali di attivita biologica, Per sviluppare una nuova classe di composti antitumorali indirubin e di ricerca, abbiamo sviluppato farmaci anti-tumorali per fornire una base materiale. - 28 - Esempio 4 l'inibizione di CDKs Reagente : il composto in test viene come esempio 2.Reagenti chimici se non diversamente specificato, sono stati acquistati dalla Sigma Chemical Company negli Stati Uniti.Utilizzando gel di poliacrilammide reagente elettroforesi delle proteine, SDS, buffer per elettroforesi, potenza proteina di trasferimento del buffer, il film di nitrocellulosa sono state acquistate negli Stati Uniti(Scienze della vita le azenda).Western Blot rilevamento reagente e film sono stati acquistati negli Stati Uniti(Societa Thr160 GE).Phospho-CDK2anticorpo, Endogena del ciclo cellulare degli anticorpi inibitori della chinasi p27, anticorpo di CyclinD1e ,-Actin sono stati acquistati da Societa americana(Cell Signaling), DAKO e Santa Cruz(aziende biotecnologiche). Cellule tumorali e coltura: come esempio 2. Western Blot rilevamento reagente con Phospho-Cdc2、p27 e proteina di ciclinaD1: sara fase di crescita logaritmica DU145 cellule tumorali della prostata androgeno dipendente vedi come figura 3 e la concentrazione di 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati #124 e #126 composti [14]per 24 ore.Le cellule sono stato raccolte, lavate, con documento motodo per l'estrazione di proteine, quantitativa.50µg di proteina ottenute mediante SDS-poliacrilammide gel elettroforesi.Dopo elettroforesi, il potere al proteine di membrana di nitrocellulosa, a specifici anticorpi di Phospho-CDK2, Endogena del ciclo cellulare espressione inibitore della chinasi p27 anticorpi e ciclinaD1 per la determinazione del Western blot, e di β-Actin anticorpi come standard interno, ECL film di risultati record. Discussione e risultati Composti Indirubin sono stati segnalati per inibire la funzione delle cellule del cancro CDKs. Gli esempi sopra del 2 e 3 sono state dimostrate, La presente invenzione di 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati ha una forte soppressione della crescita cellule e della funzione.Per chiarire ulteriormente questi composti è attraverso la regolazione dell'attività della chinasi del ciclo cellulare svolgono un soppressione della crescita cellule e della funzione, il nostro metodo di Western Blot, l'uso Cdc2 di fosforilazione delle proteine anticorpi specifici e altri del ciclo cellulare importanti regolano proteine p27 e anticorpo di proteina ciclinaD1, Composti rappresentante di questa osservazione invenzione #124e #126di Cdc2 attività e delle proteine p27 e della espressione di ciclinaD1.Come la figura 3, il ormono-dipendente cellule tumorali della prostata DU145 da #124 e #126 composti per 24 ore, l'attivita enzimatica CDK2(fosforilazione) livelli in un modo dipendente dalla concentrazione è diminuita in modo significativo, allo stesso tempo il proteina ciclinaD1 di espressione è diminuita in modo significativo.Al contrario, nelle stesse condizione sperimentali, endogena del ciclo cellulare espressione inibitore della chinasi p27 era significativamente aumentata. Risultato di cambiamenti in queste proteine di segnalazione stanno facendo la crescita delle cellule è stata inibita.Di cui 5- o 7-aza indirubin derivati e 5- o 7-aza diverse indigo derivati l'induzione effetto di p27 espressione può essere causata dall'attivazione [15]del pathway del recettore AhR. Esempio 5 Studio sulla dispersione solida preparazione Esempio 5-1 Esempio 1-2 composti 110 5mg Polietilene glicole 400 50mg Processo: Prendere polietilene glicole 400 si sciogliere alla temperatura 50?, aggiungere esempio 1-2 composti 110 e miscelare, mescolando con una cura di tempra borsa del ghiaccio sotto agitazione, - 29 - dopo alla essiccatore per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di pillole o capsule. Esempio 5-2 Esempio 1-2 composti 18 5mg Polietilene glicole 6000 50mg Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 18, quantita appropriata di etanolo alcaline in sciolto, aggiungere polietilene glicole 6000 si sciogliere alla temperatura 50?, dopo miscelato aggiunto di accessori(Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1), mescolare fino a semi-secco in polvere e dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 5-3 Esempio 1-2 composti 18 5mg Polivinpirrolidone K-25 50mg Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 18, quantita appropriata di etanolo alcaline, mescolare fino a completo scioglimento, aggiungere Polivinpirrolidone K-25, mescolare per sciogliere, a aggiunto di accessori (Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1) finche uniforma miscelazione, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 5-4 Esempio 1-2 composti 31 5mg Poliossietilene 35 olio di ricino 350mg Lattosio:cellulosa microcristallina=1:4 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 31, quantita appropriata di cloroformio da sciolto, aggiungere poliossietilene 35 olio di ricino, mescolare per sciogliere, a aggiunto di accessori (Lattosio:cellulosa microcristallina=1:4) finche uniforma miscelazione, dentro una cappa aspirante con 80? di bagnamaria e volatile per nessuno odore di cloroformio, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 5-5 Esempio 1-2 composti 116 5mg Poloxamer 188 100mg Cellulosa microcristallina 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 116, quantita appropriata di etanolo alcaline in sciolto, aggiungere poloxamer 188, mescolare per sciogliere, a aggiunto di accessori (cellulosa microcristallina ) finche uniforma miscelazione, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 5-6 Esempio 1-2 composti 18 5mg Poloxamer 188 100mg Polietilene glicole 6000 50mg Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 1g - 30 - Processo: Predere esempio 1-2 composti 18, quantita appropriata di etanolo alcaline in sciolto, aggiungere poloxamer 188 e polietilene glicole 6000, mescolare per sciogliere, a aggiunto di accessori (Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 ) finche uniforma miscelazione, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 5-7 Esempio 1-2 composti 119 5mg Polivinpirrolidone K-25 50mg Poloxamer 188 50mg Polietilene glicole 6000 50mg Lattosio 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 119, quantita appropriata di etanolo alcaline in sciolto, aggiungere poloxamer 188 e polietilene glicole 6000 e polivinpirrolidone K-25, mescolare per sciogliere, a aggiunto di accessori (Lattosio ) finche uniforma miscelazione, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 5-8 Esempio 1-2 composti 18 5mg Polivinpirrolidone K-25 50mg Poloxamer 188 100mg Polietilene glicole 6000 100mg Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 18, quantita appropriata di etanolo alcaline in sciolto, aggiungere poloxamer 188 e polietilene glicole 6000 e polivinpirrolidone K-25, sciogliere mescolando, a aggiunto di accessori (Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 ) finche uniforma miscelazione, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 5-9 Esempio 1-2 composti 29 5mg Poliossietilene 40 olio di ricino 750mg Polietilene glicole 4000 50mg Processo: Predere esempio 1-2 composti 29 disciolto in etanolo soluzione di poliossietilene 40 olio di ricino, aggiungere polietilene glicole 4000, con 50? di calore per sciogliere mescolando, volatile il solvente, con una cura di tempra borsa del ghiaccio, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di granuli o capsule. Esempio 5-10 Esempio 1-2 composti 121 5mg Poliossietilene 40 olio di ricino 350mg Polivinpirrolidone K-25 50mg Lattosio:cellulosa microcristallina=7:3 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 121 disciolto in etanolo soluzione di poliossietilene 40 olio di ricino, aggiungere polivinpirrolidone K-25, sciogliere mescolando, a aggiunto di accessori - 31 - (Lattosio:cellulosa microcristallina=7:3 ) finche uniforma miscelazione, dopo a liofilizzati di -50? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o granuli. Esempio 5-11 Esempio 1-2 composti 18 5mg Poliossietilene 40 olio di ricino 350mg Polivinpirrolidone K-25 50mg Sodio dodecil solfato 10mg Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 1g Processo: Predere quantita appropriata di etanolo alcaline di poliossietilene 40 olio di ricino e sodio dodecil solfato, dopo fino a completo scioglimento, aggiungere esempio 1-2 composti 18, dopo mescolare fino a completo scioglimento, ancora aggiungere polivinpirrolidone K-25, sciogliere mescolando, a aggiunto di accessori (Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 ) finche uniforma miscelazione, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di pillole. Esempio 5-12 Esempio 1-2 composti 18 5mg Poliossietilene 40 olio di ricino 50mg Polivinpirrolidone K-17 50mg Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 18 disciolto in etanolo soluzione di poliossietilene 40 olio di ricino, aggiungere polivinpirrolidone K-17, sciogliere mescolando, a aggiunto di accessori (Lattosio:cellulosa microcristallina=10:1 ) finche uniforma miscelazione, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 5-13 Esempio 1-2 composti 34 5mg La vitamina E polietilene glicole succinato 350mg Polivinpirrolidone K-90 50mg Lattosio:cellulosa microcristallina=5:5 1g Processo: Predere esempio 1-2 composti 34 disciolto in etanolo soluzione della vitamina e polietilene glicole succinato, aggiungere polivinpirrolidone K-90, sciogliere mescolando, a aggiunto di accessori (Lattosio:cellulosa microcristallina=5:5 ) finche uniforma miscelazione, dopo al forno di 60? per 24 ore, secondo il metodo conservazionale per la produzione di compresse o capsule. Esempio 6 una parte dell'indagine solida preparazione dispersione di dissoluzione in vitro Strumenti: Intelligente scioglimento tester RCZ-5Z(Universita di Tianjin, Strumento di precisione fabbrica); Ultraviolet spettrofotometro visibile UV1900(Shanghai Instituto di Science elettronica e societa di tecnologia limitata). Metodo per la determinazione di scioglimento: Secondo la farmacopea Cinese edizione 2005 due appendice XC metodo di prova per la determinazione della dissoluzione(terzo applicazione), 100 g/miu, 37?0.5?，degadaggio ad ultrasuoni di 1% di soluzione di dodici solfato di sodio alchil 100ml, dopo 45 minuti di campionamento, immediamente nel velo d'acqua 0.8µm, il filtrato ottenuto, quantitativo diluitoi , - 32 - UV 1900 assorbanza, calcolare la precentuale di scioglimento. Discussione e risultati Prendere l'esempio precedente di parte della dispersione solida, il test di dissoluzione, i risultati sequente tabella: Tabella 8 una parte del confronto solido scioglimento dispersione Esempio Scioglimento tasso(%) Esempio 1-2 composti 18 4 5-2 27 5-3 40 5-6 15 5-8 56 5-11 71 5-12 92 Dalla tabella precedente si vede, dopo le serie di composti di questi invenzione è fatta solida preparazione e dispersione, per superare i composti idrofilia poveri e i preparativi appropriato carenze difficile.Dal momento che la dissoluzione di composti significativamente aumentata, puo essere di formulazioni valore pratico.Uso un vettore comune di preparazione dispersione solida, perche piu di una serie sinergia vettore, serie di composti di questa invenzione è superiore a solubilizzazione di un solo vettore, la dissoluzione della dispersione corrispondente migliore. Esempio 7 studio iniezione Esempio 7-1 Esempio 1-2 composti 18 10mg Trigliceridi a catena media 400mg Lecitina 200mg Glicerina 225mg Poloxamer 188 200mg Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 18, l'aggiunta di due dimetilsofossido, riscldamento a bassa temperatura sciolto con l'aggiunto trigliceridi a catena media e lecitina, riscldamento a bassa temperatura e mescolando a finche uniforma; Fase acquosa: glicerina e poloxamer 188 piu l'iniezione d'acqua si aggiunge, riscldamento a bassa temperatura, sotto energica agitazione, aggiungere lentamente alla fase oleosa, di continuare feroce mescolando da 3 minuti.Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. - 33 - Esempio 7-2 Esempio 1-2 composti 25 10mg Monooleato di glicerina 500mg Fosfolipidi 300mg Glicerina 225mg Poloxamer 188 200mg Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 25, risclamento a bassa temperatura sciolto a quantita appropriata di due dimetilsofossido, aggiunto monooleato di glicerina, riscldamento sciogliere, ancora l'aggiunto fosfolipidi con riscladamento a bassa temperatura mescolando a finche uniforma; Fase acquosa: glicerina e poloxamer 188 piu l'iniezione d'acqua a quantita appropriata si aggiunge, riscldamento, sotto energica agitazione, aggiungere lentamente alla fase oleosa, di continuare feroce mescolando da 3 minuti.Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 7-3 Esempio 1-2 composti 34 16mg Albumina umana 20% 1ml Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 34, risclamento a bassa temperatura sciolto al soluzione mista di tetraidrofurano e cloruro di metilene. Fase acquosa: la soluzione di albumina umana versare a fase oleosa, ultrasuoni per 1 minuto.Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 7-4 Esempio 1-2 composti 112 10mg Polietilene glicole 400 100mg Lecitina 50mg Idrossipropil-β-ciclodestrina 200mg Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 122, dopo solubile in etanolo alcalino, l'aggiunto lecitina - 34 - e polietilene glicole 400, mescolando sciolto; Fase acquosa: dopo idrossipropil-β-ciclodestrina sciolto in 70% etanolo a versare faes oleosa, l'aggiunto a quantita appropriata d'iniezione d'acqua mescolando a uniforma; Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 7-5 Esempio 1-2 composti 110 10mg Poloxamer 188 200mg Lecitina 30mg Idrossipropil-β-ciclodestrina 300mg Soluzione di cloruro di sodio 0.9% 10ml Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 110, dopo solubile in etanolo alcalino, l'aggiunto poloxamer 188, dissoluzione riscladamento emscolando mettere a freddo.L'aggiunto 0.9% soluzione di cloruro di sodio e a quantita appropriata di etanolo da mista, ancora l'aggiunto lecitina.Poi aggiunto idrossipropil-β-ciclodestrina da mescolando ad uniforma, ultrasuoni per 1 minuto.Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 7-6 Esempio 1-2 composti 30 10mg Poloxamer 188 200mg Lecitina di soia 20mg Idrossipropil-β-ciclodestrina 400mg Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Predere esempio 1-2 composti 30, dopo solubile in sluozione etanolo alcalino, aggiunto in lecitina e poloxamer 188, ancora aggiunto idrossipropil-β-ciclodestrina , piu l'iniezione d'acqua e quantita appropriata di soluzione di etanolo.Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 7-7 Esempio 1-2 composti 18 10mg Polietilene glicole monolaurato 200mg Lecitina 20mg - 35 - Idrossipropil-β-ciclodestrina 200mg Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 18, solubile in sluozione etanolo alcalino, l'aggiunto lecitina e polietilene glicole monolaurato, mescolando sciolto da tutto; Fase acquosa: dopo idrossipropil-β-ciclodestrina sciolto in 70% etanolo a versare faes oleosa da misto, Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 7-8 Esempio 1-2 composti 19 10mg Poliossietilene 40 olio di ricino 100mg Lecitina 50mg Idrossipropil-β-ciclodestrina 200mg Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 19, dopo solubile in etanolo alcalino; aggiunto lecitina e Poliossietilene 40 olio di ricino, mescolando sciolto; Fase acquosa: dopo idrossipropil-β-ciclodestrina sciolto in 70% etanolo a versare faes oleosa, l'aggiunto a quantita appropriata d'iniezione d'acqua mescolando a uniforma; Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 7-9 Esempio 1-2 composti 18 20mg Albumina umana 20% 5ml Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 18, disciolti in soluzione a ultrasuoni tetraidrofurano misto di tricloroetilene; Fase acquosa: dopo albumina umana sciolto in 0.1mo1/L di soluzione di acido cloriidrico, versare faes oleosa sotto la energica agitazione, poi continua energica agitazione per 5 minuti, omoheneo, raffreddamento ad acqua con 600 bar per 6 volte.Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina - 36 - di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 7-10 Esempio 1-2 composti 120 10mg Trigliceridi a catena media 600mg La vitamina E succinato estere polietilene glicole 200mg Lecitina 100mg Poloxamer 188 200mg Glicerina 225mg Processo : le seguenti operazioni sono state eseguite sotto la protezione a flusso laminare sterile. Fase oleosa: Predere esempio 1-2 composti 120 sluozione etanolo alcalino, aggiunto La vitamina E succinato estere polietilene glicole e trigliceridi a catena media e poloxamer 188 riscaldato per sciogliere; Fase acquosa: prendere il 8ml di 2.25% soluzione di glicerina a versare fase oleosa con agitazione, aggiunto soluzione di lecitina, ultrasuoni per 5 minuti.Evaporatore sottovuoto a bassa temperatura rotante per rimuovere il solvente organico. Emulsione ottenuta dal filtro-sterilizzato, versato sotto a flusso laminare protezione con fiale sterili di liofilizzato, liofilizzazione, prese di pressione, più ghiera di alluminio guarnizioni. Lifilizzazione, spina di pressione, piu la ghiera di alluminio sigillo. Esempio 8 Esperimenta solubilità Le struture di composti di 129 e 91 sono molto simili, le differenze sono solo sulla specie atomiche di 7- (la figura seguente), utilizzarli per il test di dissoluzione puo nota 7-aza indirubin essere relativo al indirubin dissolto ai cambiamenti. Metodo di test: a temperatura ambiente ( 20?), prende composti rispettivamente di 129 e 91, ciascuno prendendo 5ml, aggiunto al corrispondente solvente appropriato 2ml, a sciolto dopo la miscelazione, i risultati riportati nella tabella 9 : Tabella 9 confronto di dissoluzione per composto 129 e sostanza di riferimento 91 Solvente 129 91 Acqua deionizzata Leggermente solubile Insolubile Alcol Solubile Leggermente solubile Etanolo Leggermente solubile Solubile Acetone Leggermente solubile Facilmente solubile Cloroformio Leggermente solubile Facilmente solubile - 37 - Etere di petrolio(Ebollizione:Insolubile Leggermente solubile 60~90?) Tabella precedente si vede che 7-aza indirubin derivati 129 di idrosolubili sono aumentato significativamente, invece il liposolubili ridotta; in generale che idrosolubili e liposolubili di indirubin non è buona, ma dopo modificato gl'indirubin aumentato la liposolubili e diminuzione idrosolubili, questo composto 91 è cosi.Questo cambiamento di solubilita che riflette la necessita di ricerca per 7-aza indirubin derivati, assorbimento di farmaci in vivo e formulazione della farmaceutica nella selezione avrà una parte benefico. Nella presente invenzione sono menzionati in tutte le documenti citata in questa applicazione come riferimento, così come ognuno è un riferimento separato al documento come riferimento.Oltre ad essere compreso, dopo avre letto il precedente di contenuto della presente invenzione, i tecnici in questo campo possono effettuare varie cambia dell'invenzione o modifiche, questi rientrano anche nella forma equivalente allegato alla presente domanda potenza dalla specifiche limitata. Referenza [1] Lundberg AS, Weinberg RA., Control of the cell cycle and apoptosis, Eur J Cancer, 1999, 35: 531-539. [2] Sherr CJ. Canaer cell cycles, Science, 1996, 274: 1672-1677. [3] Keyomarsi K., Pardee AB., Redundant cyclin overexpression and amplification in breast cancer cells, Proc Natl Acad Sci USA, 1993, 90: 1112-1116. [4] Gray N, Detivand L, Meijer L, et al., ATP-site directed inhibitors of cyclin-dependent kinases, Curr Med Chem, 1999, 6: 859-875. 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Come afferma 1 i composti descritti o sale accettabile farmaceutico, composti in cui quali il tipi (I)、(II)、(III) o (IV) che segue, una formula (I) è 5-azaindirubin derivati, una formula (II) è 5-aza diverse indigo derivati, una formula (III) è 7-aza indirubin derivati,una formula (IV) è 7-aza diverse indaco derivati: - 40 - 12341'2'3'4' 5'La formula R、R R、R、R、R、R、R、Re R come definito in precedenza. 、 1 1'3. Come afferma 1 i composti descritti o sale accettabile farmaceutico, di cui, Re R indipendente rappresentano H,C,Calchilici, arilici, alchil aril, acil, aroyl, acil-protette glicosil o glicosilazione: 16 2342'3'4' 5'La formula R、R、R、R、R、Re Rè indipendente rappresentano H,alogena,idrossile,fioli,C,1 Calchil, aminoacidi, aminoacidi, amido,C,Calcossi, un zolfo, fenile, fenossi, arilici, alchil aril, 4 14 trifluorometil, acil, aroyl, solfonico, isocianati; La glicosilazione è arabinosio,xilosio,ribosio,il mannosio e glucosio: 6 6 6 R è l'atomo di ossigeno, atomo di zolfo, selenio atomo: o R è una NRo NORgruppi, Rche è H, C,C alchilici a catena lineare o ramificata, arilici, alchil aril, C,Cgrassi cicloesile, acil, aroyl, 1636 sulfonil, fosforil. 4. Come afferma 1 i composti descritti o sale accettabile farmaceutico, di cui, i composti selezionati dal gruppo descritta: 5-aza-indirubin derivati (I) indicato nella tabella 1; 5-aza-diverse indigo derivati (II) indicato nella tabella 2; 7-aza-indirubin derivati (III) indicato nella tabella 3; 7-aza diverse indigo derivati (IV) indicato nella tabella 4; I 241'2'4' 5' La formula I, R~R，R、R、Re RDi H, il resto della tabella 1: Tabella 1 5-aza indirubin composti(I) della struttura 13'Ordine R R R - 41 - 1 H H O 2 CH H O 3 3 CH OH O 3 4 CH OCH O 335 CH SCH O 336 CH H O 25 7 i-CH H O 37 8 n-CH H O 49 9 CH-Ph H O 2 10 CH Br O 3 11 CH Cl O 3 12 CH Br O 25 13 CH Cl O 25 14 i-CH Br O 37 15 i-CH Cl O 37 16 n-CH Br O 49 17 n-CH Cl O 49 18 CH-Ph Br O 2 19 CH-Ph Cl O 2 20 CH-Ph F O 2 21 Ribosil triacetil H O 22 PhCO OCH S 323 CHCHCO OCH S 32324 CH Br N-OH 3 25 CH Cl N-OH 3 26 CH Ph N-OH 3 27 CH SCH N-OH 3328 CH Br N-OH 25 29 CH Cl N-OH 25 30 i-CH Br N-OH 37 31 i-CH Cl N-OH 37 32 n-CH Br N-OH 49 33 n-CH Cl N-OH 49 34 CH-Ph Br N-OH 2 35 CH-Ph Cl N-OH 2 36 CH-Ph F N-OH 2 37 CH H N-OH 3 38 CH H N-OH 25 39 i-CH H N-OH 37 40 n-CH H N-OH 49 41 CH-Ph H N-OH 2 42 Ribosilazione H N-OH 43 Glucosyl H N-OH 44 CH H N-OCH 33 45 CH Br N-OCH 33 46 CH Cl N-OCH 33 - 42 - 47 CH H N-OCH 25348 CH Br N-OCH 25349 CH Cl N-OCH 25350 i-CH H N-OCH 37351 i-CH Br N-OCH 37352 i-CH Cl N-OCH 37353 n-CH H N-OCH 49354 n-CH Br N-OCH 49355 n-CH Cl N-OCH 49356 CH-Ph H N-OCH 2357 CH-Ph F N-OCH 2358 CH-Ph Br N-OCH 2359 CH-Ph Cl N-OCH 23 II 242'4' 5' La formula II, R~R，R、Re RDi H, il resto della tabella 2: Tabella 2 5-aza diverse indigo composti(II) della struttura 11'3'Ordine R R R 60 CH H H 3 61 CH H Br 3 62 CH H Cl 3 63 CH H F 3 64 CH CH OH 33 65 CHCHCO H OCH 32366 PhCO H OCH 367 Ribosil triacetil H H 68 CH H H 25 69 CH CH Br 2525 70 CH H Cl 25 71 CH H F 25 72 CH CH OH 2525 73 i-CH H H 37 74 i-CH H Br 37 75 i-CH H Cl 37 76 i-CH H F 37 77 i-CH i-CH OH 3737 78 n-CH H H 49 79 n-CH H Br 49 80 n-CH H Cl 49 - 43 - H n-CH OH 81 n-C4949 82 n-CH H F 49 83 n-CH n-CH OCH 49493 84 CH-Ph H H 2 85 CH-Ph H Br 2 86 CH-Ph CH-Ph Cl 22 87 CH-Ph H F 2 88 CH-Ph CH-Ph OH 22 89 Ribosilazione H H III 241'2'4' 5' La formula III, R、R，R、R、Re RDi H, il resto della tabella 3 : Tabella 3 7-aza indirubin composti(III) della struttura 133'Ordine R R R R 92 H H H O 93 CH H H O 3 94 CH CH OH O 33 95 CH CH OCH O 33396 CH CH SCH O 33397 CH H H O 25 98 i-CH H H O 37 99 n-CH H H O 49 100 CH-Ph H H O 2 101 CH H Br O 3 102 CH H Cl O 3 103 CH H Br O 25 104 CH H Cl O 25 105 i-CH H Br O 37 106 i-CH H Cl O 37 107 n-CH H Br O 49 108 n-CH H Cl O 49 109 CH-Ph H Br O 2 110 CH-Ph H Cl O 2 111 CH-Ph NHCH F O 23 112 Ribosil triacetil CH H O 3 - 44 - 113 PhCO CH OCH S 33 114 CHCHCO F OCH S 323 115 CH H Br N-OH 3 116 CH H Cl N-OH 3 117 CH CF Ph N-OH 33 118 CH CH SCH N-OH 333 119 CH H Br N-OH 25 120 CH H Cl N-OH 25 121 i-CH H Br N-OH 37 122 i-CH H Cl N-OH 37 123 n-CH H Br N-OH 49 124 n-CH H Cl N-OH 49 125 CH-Ph H Br N-OH 2 126 CH-Ph H Cl N-OH 2 127 CH-Ph H F N-OH 2 128 CH H H N-OH 3 129 CH H H N-OH 25 130 i-CH H H N-OH 37 131 n-CH H H N-OH 49 132 CH-Ph H H N-OH 2 133 Ribosilazione CH H N-OH 3 134 Glucosyl CH H N-OH 3 135 CH H H N-OCH 33136 CH H Br N-OCH 33137 CH H Cl N-OCH 33138 CH H H N-OCH 253139 CH H Br N-OCH 253140 CH H Cl N-OCH 253141 i-CH H H N-OCH 373142 i-CH H Br N-OCH 373143 i-CH H Cl N-OCH 373144 n-CH H H N-OCH 493145 n-CH H Br N-OCH 493146 n-CH H Cl N-OCH 493147 CH-Ph H H N-OCH 23148 CH-Ph H F N-OCH 23149 CH-Ph H Br N-OCH 23150 CH-Ph H Cl N-OCH 23 IV 242'4' 5' La formula IV, R、R，R、Re RDi H, il resto della tabella 4 : - 45 - Tabella 4 7-aza diverse indigo composti(IV) della struttura 11'33'Ordine R R R R 151 CH H H H 3 152 CH H H Br 3 153 CH H H Cl 3 154 CH H H F 3 155 CH CH CH OH 333 156 CHCHCO H F OCH 323 157 PhCO H CH OCH 33 158 Ribosil triacetil H CH H 3 159 CH H H H 25 160 CH CH H Br 2525 161 CH H H Cl 25 162 CH H H F 25 163 CH CH CF OH 25253 164 i-CH H H H 37 165 i-CH H H Br 37 166 i-CH H H Cl 37 167 i-CH H OCH F 373 168 i-CH i-CH H OH 3737 169 n-CH H H H 49 170 n-CH H H Br 49 171 n-CH H H Cl 49 172 n-CH n-CH SCH OH 49493 173 n-CH H H F 49 174 n-CH n-CH OCH OCH 494933 175 CH-Ph H H H 2 176 CH-Ph H H Br 2 177 CH-Ph CH-Ph SCH Cl 223 178 CH-Ph H OCH F 23 179 CH-Ph CH-Ph H OH 22 180 Ribosilazione H CH H 3 5. Come afferma 1 i composti descritti o sale accettabile farmaceutico, di cui, inclusi sali farmaceuticamente accettabile di acidi inorganici o acidi organici con la formazione di sale, acidi inorganici includono: acido cloridrico, acido bromidrico, acido fosforico, acido nitrico, acido solforico: acidi organici includono: acido formico, acido acetico, acido propionico, acido succinico, naftalene disolfonico (1,5), acido asiatico, acido ossalico, acido tartarico, acido lattico, acido salicilico, acido benzoico, acido valerico, dietile acido acetico, acido malonico, ambra acido , acido fumarico, acido G, acido adipico, acido maleico, acido malico, amminoacidi, acido acrilico, acido glucosio, acido ascorbico, acido nicotinico, acido isonicotinico, metansolfonico acido, l'acido p-toluensolfonico , acido citrico, e aminoacidi. 6. Una composizione farmaceutica sua caratteristica del fatto che , esso contiene (a) afferma 1 i - 46 - composti descritti o sale accettabile farmaceutico ; e (b) un vettore farmaceuticamente accettabile. 7. Come afferma 6 una composizione farmaceutica la sua caratteristica del fatto che composizioni farmaceutiche delle formulazioni descritte come segue: iniezione di piccola capacità, il volume di iniezione, iniezione di grandi volumi, polvere per iniezione, iniezione di emulsione, compresse, pillole, capsule, pomate, creme, cerotti, linimento, polvere , aerosol, impianti, gocce, supposte, pomate; vari tipi di nano-preparazione; liposomi. 8. Composizione farmaceutica di un metodo di preparazione, sua caratteristica del fatto che include i passaggi: Prendere il (a) afferma 1 i composti descritti o sale accettabile farmaceutico con (b) un vettore farmaceuticamente accettabile insieme misto, per formare la composizione farmaceutica. 9. Come afferma 1 i composti descritti o sale accettabile farmaceutico, sua caratteristica del fatto che per trattamento delle seguenti malattie: anormale a causa di chinasi del ciclo cellulare, la crescita cellulare, proliferazione disturbi o malattie causate da resistenza all'insulina. 10. Una composizione, sua caratteristica del fatto che esso contiene afferma 1 i composti descritti o sale accettabile farmaceutico come l'inibizione della ciclina-dipendente inibitori della chinasi. - 47 - Estratto La presente invenzione fornisce una struttura nuova classe dell'azaindole --- Indole accoppiamento derivati .Struttura molecolare di questi derivati è una caratteristica comune :Tutti da aza-indole e giunto bimolecolari indolo accoppiamento in una posizione diversa，che formazione di estesi eterociclici coniugatiπ.Tali derivati attraverso una varietà di meccanismi per inibire la crescita cellulare e la proliferazione.L'invenzione si riferisce anche alla preparazione di questi derivati，a descrtto inclusi i derivati delle composizioni farmaceutiche e gli usi.I composti di questa invenzione per migliorare la solubilità, biodisponibilità può essere migliorato, cosi aumentando farmaco azione, riducendo il dosaggio della farmaco e reazioni avverse. Figura 1 - 48 - Figura 2 Figura 3 - 49 -