苯酚-硫酸法测定蒙药图乐朱乐赫胶囊多糖含量

苯酚-硫酸法测定蒙药图乐朱乐赫胶囊多糖含量 苯酚-硫酸法测定蒙药图乐朱乐赫胶囊多糖 含量 中国民族医药杂志2011年8月第8期 苯酚一硫酸法测定蒙药图乐朱乐赫胶囊多糖含量 韩图雅黄志刚毕力格白音夫 (1.内蒙古医学院2009级研究生,内蒙古呼和浩特010110;2.内蒙古中蒙医研究所,内蒙古呼和浩特O10020) 摘要:目的:制定药品多糖含量标准.:水提醇沉,精制法提取药品多糖,490rim波长,葡萄糖为标准品,苯酚一硫酸 法显色测定多糖相对含量.结果:标准品在1O.18,70.281~g?mL范围成线性关系,r=0.999.药品平均多糖含量为41. 5rag?g一,含量范罔在33,52m5.g之间.结论:该法可做为药品多糖含量测定方法. 关键词:图乐束乐赫胶囊剂;多糖;苯酚一硫酸显色 中图分类号:R291.2文献标识码:A文章编号:1006—6810(2011l08一O048—02 图乐朱乐赫胶囊由肉苁蓉,黄精,枸杞子等7味药组r=O.999. 成,有强壮体质作用,其多糖是主要活性成分.糖类可在强2.2样品及样品溶液:取药品粉末(100目)3og,加200mL 酸条件下水解,脱水缩合生成羟甲基呋哺甲醛,与苯酚缩合纯水,用索氏提取器与电热套内回流提取3h,趁热过滤,滤 成橘黄色化合物,溶液颜色与糖浓度成正比,在490rim处液浓缩至80mL,加乙醇至75%浓度,搅拌10rain,静止24h 有最大吸收….本文用该法测定图乐朱乐赫胶囊多糖含后过滤,过滤物为粗多糖.粗多糖加3o倍80%乙醇和丙 量,以期建立药品含量标准.酮各超声处理3次,每次10rain,离心分离(3000r?min,, 1材料10mln),60?干燥,即得多糖.精密称取10mg多糖,置 样品:图乐朱乐赫胶囊剂由内蒙古中蒙医医院蒙药制100mL量瓶中,加纯水至刻度,即得样品溶液. 剂中心出品.试剂:葡萄糖,苯酚,浓硫酸,无水乙醇,丙酮2.3稳定性:取同一样品溶液,按2.1项下,每隔1h测定1 市售,均为纯.仪器:1/10万光电天平:TG332A型(湘次,连续6次.样品溶液在6h内稳定,RSD=1.16%. 仪制造);超声清洗仪:AS2060B型(上海科学仪器公司制2.4精密度精密吸取对照品溶液lmL置比色管内,按2.1 造).分光光度计(山东高密分析仪器厂),离心机(北京医项下测定.吸光度分别为0.O48,0.O48,0.047,0.048,0. 用离心机厂).048(OD);RSD为0.94%(n=5). 2方法与结果2.5重现性:精密称取5份多糖样品,每份10rag,置25mL 2.1标准曲线:精密称取干燥至恒重的葡萄糖标准品量瓶中,加纯水至刻度,精密吸取上述溶液lmL,置5mL量 1(~mg,置于100mL容量瓶中,加纯水至刻度,精密吸取上述瓶中,加纯水至刻度,取上述溶液各1mL加到具塞比色管, 溶液0.5,l,2,3,4mL加到5mL量瓶中,加纯水至刻度,取按2.1项下测定.吸光度测定值分别为0.051,0.053,0. 上述溶液各lmL加到具塞大比色管内,分别加入5%苯酚052,0.053,0.O53(OD);RSD为1.7%. 溶液1.0mL和浓硫酸溶液5mL,振摇5rain之后置沸水浴2.6回收率测定:精密吸取多糖样品溶液SmL(0.24mg? 中加热15rain,取出冷却至室温,于490nm波长测定,以纯mL),加入标准品溶液5~L(0.06mg?mL)混合,取上 水调零点,测定标准品的线性关系.标准品在lO.18,7O.述溶液lmL加到具塞比色管,按2.1项下测定.回收率见 28?mL范围内成线性,线性方程:Y=0.0068X+0.03,1. 表1回收率测定结果 2.5药品多糖含量的测定:依照上述样品制备方法与测定 条件,测定不同批号(110405,110410,110415,110420, 110425)药品多糖含量.多糖含量分别为39.0,47.6,52.2, 35.4,33.2rag?g(n=3),平均含量为41.5rag?g,,含量 2011年8月第8期中国民族医药杂志 范围在33~52rag?g之间. 3讨论 在多糖含量测定中,得到相应多糖标准品比较困难,因 多糖组成复杂,往往采用葡萄糖代替标准品测定样品多糖 的相对含量.苯酚一硫酸法是测定多糖含量的经典方法, 本实验药品用水提取,乙醇沉淀,用80%乙醇和丙酮洗涤 除掉低聚糖,生物碱,苷类及其它醇溶性的干扰成分.实验 表明,该方法具有样品测定溶液显色稳定,灵敏度高,重现 性好,回收率高,可作为图乐朱乐赫胶囊剂质量控制方法之 一 .但缺点是药品多糖提取方法复杂,测定线性范围小,故 需要进一步改进. 参考文献 [1]董群,郑丽同,方积年.改良的苯酚一硫酸法测定多耱和 寡糖含量的研究[J].中国药学杂志,1996,31(9);550 2011年3月29日收稿 HPLC法测定腰息痛胶囊中欧前胡素的含量 蓝日春韦作干.樊立勇' (1.广西民族医药研究院,广西南宁530001;2.广西博科药业有限公司,广西南宁530003) 摘要:目的:建立高效液相色谱法测定腰息痛胶囊中欧前胡素的含量.方法:以岛津c,8柱(4.6x250ram,5pan)为色谱 柱;甲醇一水(7O:30)为流动相;流速1.0mL/min;检测波长为300nm.结果:欧前胡素进样浓度在2.O一20pg/mL范围 内与峰面积具有良好的线性关系,r=0.999(n=.5);平均回收率为97.52%,RSD=0.92%(n=9).结论:该方法操作简便, 准确,灵敏度高,重现性与精密度良好,可用于腰息痛胶囊中欧前胡素的含量测定. 关键词:腰息痛胶囊;欧前胡素;高效液相色谱法 中圈分类号:R291.8文献标识码:B文章编号:1006—6810(2011)08—0049—03 腰息痛胶囊是由白芷,草乌(制)独活,续断,牛膝等22 味中药及对乙酰氨基酚组成的中西药复方制剂,具有舒筋 活络,祛瘀止痛,活血驱风之功效.临床上主要用于风湿性 关节炎,肥大性腰椎炎,肥大性胸椎炎,颈椎炎,坐骨神经 痛,腰肌劳损.原标准(WS3一B一2256)中只有对乙酰氨 基酚的含量测定,没有中药材的含量限定.自芷是方中君 药,为伞形科植物白芷或杭白芷的干燥根.据报道【1.2用 具有散风,除湿,通窍止痛,消肿排脓之功效,其所含主要化 学成分为香豆素类化合物,包括欧前胡素,异欧前胡素,氧 化前胡素等,具有镇痛,兴奋中枢及抗菌等作用0】.有关 研究表明】,白芷提取物中总香豆素的含量越高,其疗效 也越好,而欧前胡素(C16;H14;04)是白芷的主要活性成 分】.具有抗菌药理活性,可作为白芷的指标性成分,测 定其含量来控制本品的质量,具有重要的意义,故采用欧前 胡索作为含量控制指标. 1仪器与试药 1.1仪器:电子天平(BtrZ11D赛多利斯);高效液相色谱 仪:SPD一10AP紫外检测器,LC一10ATVP高压泵(日本岛 津);紫外可见分光光度计(uV一2550日本岛津). 1.2试药:欧前胡素对照品由中国药品生物制品检定所提 供(批号;110713—200208),甲醇为色谱纯(天津科密欧化 学试剂开发公司);水为高纯水,其它试剂均为分析纯.腰 息痛胶囊由江西药都仁和制药有限公司提供. 2色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,C,.柱(岛津,4.6x 25Omm,5)甲醇一水(70;30)为流动相;流速:1.OwL? rain检测波长为300nm.柱温;30~C;理论板数按欧前胡素 峰计算应不低于30O0.对照品溶液,供试品及阴性样品溶 液各进样20L按以上色谱条件得到对照品,腰息痛胶囊供 试品及腰息痛胶囊阴性样品色谱图见图1,3. 3溶液制备 3.1对照品溶液的制备:取在105~C干燥至恒重的欧前胡 素对照品10rag,精密称定,置100mL量瓶中,加甲醇溶解并 稀释至刻度,摇匀,作为贮备液,精密吸取贮备液lmL置 10mL(量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,制成lmL含 . 101a,g的溶液,即得 3.2供试品溶液的制备:取本品内容物,混匀,取约0.3g, 精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL密塞,精 密称定重量,超声处理(功率300W,频率50Knz)In,放冷, 再称定重量,用甲酵补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取