生长规律 连续培养 灭菌[宝典]

生长规律 连续培养 灭菌[宝典] 微生物的生长及其控制 微生物的生长规律 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线称为生长曲线。 根据生长速率不同，分为几个时期。 测定微生物生长量方法。 直接法:测体积、称干重; 间接法:比浊法、生理指标法; (一)延迟期 (停滞期、调整期) 现:不立即繁殖，生长速率近于0，菌数几乎不变，细胞形态变大。 特点:分裂迟缓，合成代谢活跃，体积增长快，对外界不良环境敏感。 原因:调整代谢，合成新的酶系和中间代谢产物以适应新环境。 消除:增加接种量;采用最适菌龄接种;培养基成分(种子、发酵) (二)对数期 表现:代谢活性最强，几何级数增加，代时最短，生长速率最大。 特点:细菌数目增加与原生质总量增加，与菌液浊度增加呈正相关性。 代时(generation time):单个细胞完成一次分裂所需时间，亦即增加一代所需时间。 导出 G = t1 - t0 /3.3(lgx1 – lgx2) 影响G因素:菌种、营养成分、营养物浓度(很低时影响)、培养温度。 (三)稳定期 (最高生长期、静止期) 表现:新增殖细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，活菌数动态平衡。 特点:生长速率又趋于0，细胞总数最高。 原因:养分减少;有毒代谢物产生。 稳定期细胞内开始积累贮存物，此阶段收获菌体，也是发酵过程积累代谢产物的重要阶段。 延长:补料，调pH、温度等。 此时，菌体总数量与所消耗的营养物之间存在一定关系，称为产量常数(生长效率)。Y = X - X0 /C 其中X-稳定期细胞干重/ml， X0 -接种时干重/ml，C-限制性营养物浓度。 根据这一原理，可进行生物测定。 将未知混合物加到只缺乏特定限制性营养物的完全培养基中，测定培养基所能达到的生长量，就可以计算出原混合物中特定限制性营养物的浓度。 (四)衰亡期 表现:出现 “负生长 ”，有些细胞开始自溶。 对于丝状真菌，细胞数目不呈几何级数增加，无对数生长期，一般有调整期，最高生长期，衰退期。 微生物的连续培养 连续培养:是指向培养容器中连续流加新鲜培养液，使微生物的液体培养物长期维持稳定、高速生长状态的一种溢流培养技术，故又称开放培养，是相对于上述绘制典型生长曲线时所采用的那种单批培养或密闭培养而言的。 微生物的高密度培养 高密度培养:有时也称高密度发酵，一般是指微生物在液体培养条件下细胞群体密度超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术。 影响微生物生长的主要因素 (1)温度 影响两方面。 最低、最适、最高生长温度，致死温度。 微生物生长温度类型: 低温型(嗜冷微生物) 中温型(嗜温微生物) 高温型(嗜热微生物) (2)pH 主要影响:引起膜电荷变化，从而影响营养吸收;影响酶活性;改变营养物状态和有害物毒性。 有最适pH，此时酶活性最高，其他条件适合，生长速率最高，但不是生产的最适pH。 微生物细胞内的pH多接近于中性。 pH调节措施: (3)氧气 微生物培养法 (1)固体培养法 好氧菌的固体培养:试管斜面、培养皿琼脂平板、较大型的克氏扁瓶; 厌氧菌的固体培养:高层琼脂柱、厌氧培养皿、亨盖特滚管技术、厌氧罐技术、厌氧手套箱; (2)液体培养法 好氧菌的液体培养:试管液体培养、三角瓶浅层液体培养、摇瓶培养、台式发酵罐; 厌氧菌的液体培养 有害微生物的控制 (1) 灭菌 (2)消毒 (3)防腐 (4)化疗 物理灭菌因素的代表:高温 物理灭菌因素的种类很多，主要是高温、辐射、超声波、微波、激光和静高压等。