NK细胞与复发性自然流产母胎免疫紊乱

收稿日期： 2010－05－15 基金项目： 广东高校优秀青年创新人才培育项目（粤财教［2008］342 号） 作者简介： 张建平，博士生导师，教授，E-mail：zjp2570＠126．com NK细胞与复发性自然流产母胎免疫紊乱 张建平 （中山大学孙逸仙纪念医院妇产科， 广东 广州 510120） ·免疫与流产专题· 编者按：张建平教授，中山大学孙逸仙纪念医院产科主任，博士生 导师。 现为中华妇产科学会妊娠期高血压疾病学组副组长、中华妇产 科学会产科学组委员、广东省围产医学分会副主任委员、广东省优生 优育协会委员。 担任 《中华妇产科杂志》、《中华围产医学》、《生殖医 学》、《中国实用妇科与产科杂志》、《现代妇产科进展》、《实用妇产科杂 志 》 等多本杂志的编委 ， 是 International Journal of Gynecology and Obstetrics 特邀审稿专家。 从事妇产科围产医学二十余年，近十年来针 对顽固性不孕、多次试管婴儿失败、复发性流产等涉及的母体与胎儿 间细胞免疫、 体液免疫和细胞因子达等诸多环节进行深入研究，如 复发性自然流产患者外周血淋巴细胞 Fas 表达及其与 NK 细胞毒性的 相关性研究、绒毛滋养细胞凋亡相关蛋白配体的表达、NK 细胞毒性、T 淋巴细胞亚群等。另外针对流产及各种不孕患者的微循环易栓倾向又 开展了凝血因子、血栓前状态、抗凝血等一系列基础及临床研究，取得了良好的成效。 对顽固性不孕、多次试管婴儿 失败、复发性流产患者进行综合免疫学治疗，增强母体对妊娠产物的容受性从而使其获得良好的妊娠结局，成效显 著，跻身国内领先水平。 本刊特约张建平教授组织了“免疫与流产”专题。 张建平教授 摘 要： 存在于外周血与子宫内膜层面的自然杀伤细胞（NK 细胞）在妊娠免疫里面起着重要的调节作用，与复发性 自然流产（RSA）中母胎免疫免疫紊乱机制相关。 母胎界面存在各种不同的结构，促使其上不同功能的 NK 细胞亚群直接作用 于滋养细胞。 RSA 妇女妊娠前后 NK 细胞数量和 ／或活性的变化一直是临床研究的热点。 本文对 NK 细胞功能和导致 RSA 的 可能机制进行回顾和综述，总结目前已获得的对外周血 NK 细胞和子宫 NK 细胞的研究进展，以及针对 NK 细胞紊乱的免疫 治疗，探讨 RSA 的免疫学机制以及今后可行的治疗方向。 关键词： 自然杀伤细胞； 外周血自然杀伤细胞； 子宫自然杀伤细胞； 复发性自然流产 中图分类号： R714．21 文献标志码： A 文章编号： 1672-3554（2010）04-0451-06 Natural Killer Cell and Maternal-fetal Interface Immune Dysfunction in Recurrent Spontaneous Abortion ZHANG Jian-ping （Department of Obstetrics and Gynecology， Sun Yat-sen Memorial Hospital， Sun Yat-sen University， Guangzhou 510120， China） Abstract： The natural killer （NK） cells in peripheral blood and endometrial layers have been associated with the maintenance of pregnancy immunological intolerance． And the regulation roles of NK cells are reviewed in relation to maternal-fetal interface immune dysfunction in recurrent spontaneous abortions （RSA） ． The placenta has a complex anatomical structure and different subsets of NK cells with various function can directly interact with trophoblasts． The alterations in NK cell numbers and ／ or activity 第 31 卷 第 4 期 2010 年 7 月 中山大学学报（医学科学版） JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY（MEDICAL SCIENCES） Vol．31 No．4 Jul． 2010 中山大学学报（医学科学版） 第 31 卷 in women with RSA before and after conception are a critical clinical concern． We have reviewed articles about NK cells subpopulations （including peripheral blood NK cells and uterine NK cells） and their functions， putative mechanism of NK cells in RSA， and immuno-therapy treated with abnormal NK cell activity status． Further studies are needed to explore the underlying mechanism of NK cells in RSA and possible immunological treatment strategy． Key words： natural killer cell； peripheral blood natural killer cell； uterine natural killer cell； recurrent spontaneous abortion ［J SUN Yat-sen Univ（Med Sci），2010，31（4）：451－456；481］ 从上世纪 Medawar 提出胎儿是特殊的同种异 基因移植物以来，随着生殖免疫学研究的进展，妊 娠被视为一个独特的半同种移植过程。 在母体免 疫功能正常时，免疫系统既保护母胎不受外来微 生物的侵犯，又维持针对宫内胚胎移植物的免疫 耐受。 这种母胎免疫关系的平衡表现为免疫排斥 反应的减弱和免疫保护作用的增强。 一旦母胎界 面免疫耐受出现紊乱，则会导致不良妊娠结局，最 常见的表现就是自然流产的发生。 复发性自然流 产（recurrent spontaneous abortion， RSA）是指连续 发生两次或两次以上的自然流产，病因复杂，约有 50％病因不明，而经过近 20 年的发展，逐渐明确 所谓原因不明自然流产 80％以上都与免疫因素相 关［1］。 自然杀伤细胞（natural killer cell， NK 细胞） 属于淋巴细胞谱系的细胞群， 也称大颗粒淋巴细 胞。 NK 细胞具有细胞毒性效应，无需抗原预先致 敏就能自发杀伤靶细胞。 NK 细胞主要分布于外周 血，占外周血淋巴细胞数量的 10％ ～ 15％，可以随 血循环游走至各组织发挥效应， 由于解剖结构和 局部受体等影响可能使其在靶器官聚集定位而发 挥作用［2］。非妊娠时期子宫 NK 细胞数量随月经周 期的不同阶段而变化。 在增殖期数量很少，排卵后 迅速增加，分泌晚期达高峰。 妊娠后，子宫细胞 （uterine NK cell， uNK 细胞）将持续存在于孕早期 蜕膜中，尤其在底蜕膜上含量最为丰富。 种植期和 早孕期间，NK 细胞是子宫上最主要的淋巴细胞群 体。 由于 uNK 细胞能够与胎儿滋养细胞直接接触 作用 ，因此 uNK 细胞的毒性杀伤作用如出现亢 进，将可能成为胚胎损伤的致命因素。 从 Aoki 首 次报道开始，NK 细胞数量和功能等状况的异常一 直被认为是导致 RSA 的重要因素［3］。 1 NK 细胞亚群及其特点 1．1 表面标志及分类 人类 NK 细胞分布在外周血，各种淋巴结及源 自 CD34＋ IL-2Rb 链阳性造血干细胞前体的非淋巴 结器官。 由于分布和作用器官不同，这些 NK 细胞 在功能和表型上都显示出差异。 绝大多数 NK 细 胞表现为缺乏 CD3 因子，但表达 CD56 抗原。 根据 CD56 抗原的密度，分为 CD56＋（CD56bright）和 CD56－ （CD56dim）NK细胞。 而是否存在 FccRIII或者 CD16 因子又可进一步对 NK 细胞进行分类。 大多数外 周血 NK 细胞为 CD56 －CD16 ＋ ， 其余为 CD56 ＋ CD16－。人类 NK 细胞大部分（近 90％）为 CD56－，几 乎不表达 NK 细胞源性的细胞因子， 但却是抗体 依赖细胞毒性反应 （ADCC）、LAK 反应和自然细 胞毒性反应的介导。 这些细胞是有效的杀伤细 胞，比其他的 NK 细胞亚群毒性更强。甚至静止态 的 CD56－细胞都比 CD56＋细胞具有更大的细胞毒 性 ［3－4］。 女性生殖道（包括子宫内膜、宫颈和输卵管） NK 细胞主要为 CD56＋CD16－CD9＋CD94＋。 CD56＋NK 细胞被视为 NK 细胞源性的细胞因子的主要来 源，也是重要的炎性和调节性亚群 ［5－6］。 CD56＋细胞 与 CD56－细胞在功能与表型上完全不同， 相较于 CD56－细胞，CD56＋细胞分泌的 IL-10 多 25 倍。 多 数的子宫 NK 细胞为 CD56＋ CD16－，因此，主要起 炎性反应或调节作用。 这些细胞是一系列促血管 生成因此的重要分泌器，诱导蜕膜上血管生成 ［7］。 1．2 抑制性受体和激活受体 迄今已发现数 10 种 NK 细胞受体， 分为抑制 性和激活性受体。 NK 细胞的活化发挥杀伤功能是 由激活和抑制性受体信号的复杂相互作用控制， 并由细胞因子调节。 1．2．1 MHC-I 抑制性受体 人类和小鼠的滋养细 胞中都不具备 MHC-II 类分子，MHC-I 类分子也是 限制性表达。 高度多态性的人类白细胞抗原 I 类 分子 HLA-A 和 HLA-B 在绒毛和绒毛外滋养细胞 上都不表达。 但是侵入子宫生长的绒毛外滋养细 胞（EVT）上却表达 HLA-C。 EVT 细胞也表达非经 典性的 MHC-I 类分子，比如 HLA-G 和 HLA-E。 侵 入生长的滋养细胞上父系 HLA-C 分子的出现，使 得这些细胞可能成为同种异体免疫反应的潜在攻 452 第 4 期 击目标。 但在正常妊娠中 HLA-C 和 HLA-G、HLA- E 都可以被 NK 细胞上的 MHC-I 特异性抑制受体 识别，而免受攻击 ［2］。 EVT 细胞能够被子宫 NK 细胞上的多种抑制 性受体识别 ，如 KIR2DL2 ／ 3 与 KIR2DL1，免疫球 蛋白样转录体 2（ILT2）和 CD94 ／ NKG2A 等，这些 受体也分别是 HLA-C，HLA-G 和 HLA-E 的特异性 受体，组成不同的 HLA ／ KIR 配对，并影响 NK 细 胞的分泌功能。 不同的 HLA ／ KIR 配对作用，维持 了 uNK 细胞的活化程度平衡。 缺乏抑制性受体信 号时，NK 细胞的活化增加；而抑制性受体过多，导 致抑制性信号占主体时，子宫 NK 细胞会表现出 低反应性，以致胎盘形成不良，引发流产。 不明原 因 RSA 妇女 MHC-I 特异性抑制受体表达受限，胎 儿表达抑制性 KIRs 也更少，导致胎儿滋养细胞被 uNK 识别而受到损伤 ［8］。 1．2．2 激活性受体 激活性受体是近年研究的结 果，分属于 MHC 型和非 MHC 型。前者一般与相对 应的抑制性受体相互交联， 传递活化激活信号。 RSA 患者在体内 MHC-I 抑制性受体表达受限同 时，MHC-I 特异性活化受体基因数量增加。这意味 着子宫 NK 细胞接受到更多的活化信号，变成高 反应性，也有可能发挥杀伤细胞作用 ［8］。 1．2．3 NK 细胞受体的基因调控 NK 细胞受体含 有杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）能够识别表 达在靶细胞上的 HLA-C 的特异性等位基因。 这些 KIR 具备多态性。 KIR 位点的基因变化会影响其 对于 RSA 的易感性。 同一妇女的蜕膜和外周血 NK 细胞上的 KIR 表达存在表型差异 ［9］。 因此，蜕 膜和外周血 NK 细胞上的 KIR 表达必须分别进行 探讨。 RSA 妇女的蜕膜 NK 细胞上发现了一组限 制性 KIR 家族抑制性受体（inhKIR）。许多蜕膜 NK 细胞缺乏对胎儿 KLA-Cw 抗原特异的 inhKIRs。 因 此，RSA 妇女体内母体限制性 inhKIR 与缺乏母体 inhKIR 的胎儿 HLA-C 抗原决定基无法成功匹配， 不能释放信号抑制 NK 细胞活化，保护胚胎。 减少 inhKIRs 的配体能降低由激活受体介导的 NK 细 胞活化的阈值，因而可能部分解释 RSA 的发病机 制［8］。 2 外周血淋巴细胞 综前所述，外周血 NK 细胞（pNK）与子宫 NK 细胞（uNK）在表面标志、受体表达及受体基因调 控等方面均存在不同。 外周血 NK 细胞研究由于 取样相对便捷，而且可以长期追踪，目前大部分的 研究及文章均以 pNK 细胞为主要研究对象。 2．1 外周血 NK 细胞水平 根据研究资料显示，无论在 RSA 患者或正常 对照妇女中，妊娠前后外周血 NK 细胞水平并没 有明显改变 ［1］。 具体分析到 NK 细胞亚群，相较于 非妊娠妇女 ，CD56＋ ／ 16＋ NK 细胞在妊娠妇女中 明显降调 ［10］。 37．3％的 RSA患者外周血CD56＋ NK 细胞表现为轻到中度升高 （幅度 12％ ～ 18％）， 14．7％为显著升高（ ＞ 18％）。 NK 细胞增加水平 ＜ 12％的患者， 通常可以维持妊娠至足月 ［10－11］。 在 RSA 患者中， 降调 NK 细胞水平往往能够改善 妊娠结局。 RSA 患者 CD56＋ NK 细胞表达的 CD69 也比 正常对照妇女明显升高 ［12］。 外周血高水平的 NK 细胞也意味着下次不伴染色体核型异常的妊娠可 能发生生化妊娠或自然流产 ［13］。进行概率计算，妊 娠妇女（排除供卵，或接受 ICSI 治疗，未经过 IVIg 治疗， 也不是多胎妊娠）CD56＋细胞水平升高预示 下次非染色体异常的妊娠可能发生流产，其特异 性为 87％，阳性预测值也达到 78％。该项检验的特 异性在不孕和 RSA 患者中都相当高，而在 RSA 患 者中，敏感性更达到 86％。 Yamada 等 ［14］报道采用 外周血 CD56＋ NK 细胞的比例作为染色体正常妊 娠发生生化妊娠和自然流产的预测指标 （截点选 择 CD56＋ ＞16．4％）。 其中发生生化妊娠和自然流 产的相对风险比为 4．9。 检查 CD56NK 细胞比例变化有助于有 RSA 妇女孕期监测；NK 细胞水平变化能预测病理妊娠 结局。 今后，还需要更深入的研究提高敏感性和阳 性预测值。患者的选择指标，NK 细胞亚群的测量， 新的检查指标， 研究进行的时机和分析手段都需 要进行更进一步考量。 2．2 NK 细胞毒性（活性） 许多研究 NK 细胞毒性和妊娠结局的文章已 经发表。 孕前高水平外周血 NK 细胞毒性与 RSA 妇女再次妊娠发生流产相关。 胚胎染色体正常而 发生流产的妇女， 其孕前 NK 细胞活性已经明显 比那些之后能够成功妊娠的妇女高得多 ［2，14］。 能够继续妊娠并活产的妇女，在妊娠极早期 （孕 4 ～ 5 周）的 NK 细胞活性会在之后（孕 6 ～ 7 张建平． NK细胞与复发性自然流产母胎免疫紊乱 453 中山大学学报（医学科学版） 第 31 卷 周和孕 8 ～ 9周）明显下降。 而发生流产的妇女（排 除染色体因素），NK 细胞毒性在孕 6 ～ 7 周时比 能够继续妊娠的妇女要高得多。 因为染色体异常 导致流产的妇女孕 6 ～ 7 周时的 NK 细胞毒性则 与能够继续妊娠的妇女相当。 孕前高水平的 NK 细胞毒性（ ＞ 46％，相对风险值 3．6． 95％ CI 1．6－ 8．0）和高浓度 NK 细胞（ ＞ 16．4％；4．9，1．7－13．8）都 预示再次妊娠，不伴染色体异常时仍可能发生生 化妊娠和自然流产 ［15］。 在既往 RSA 病史的妇女经 过免疫治疗后成功妊娠，大多数经检查发现体内 维持低水平 NK 细胞活性 ［16］。 NK 细胞毒性增加与 IL-2 升高相关；NK 细胞 毒性和 IL-2 的同时增加可能是发生 RSA 的危险 因素［17］。 a2V-ATP 酶在 PBMC 表面表达，调节细胞 外环境，促进 NK 细胞毒性或者细胞因子表达 ［18］。 RSA患者体内，CD56＋ NK细胞上的 NKp46， NKp44， NKp30 的表达和 a2V-ATP 酶都比 CD56－ NK 细胞 上显著上调［19］。这项研究显示了 RSA患者体内 NK 细胞毒性和细胞因子产物的失控状态。 流式细胞分析 NK 细胞毒性，准确可靠，能够 对患者样本进行检查。 有研究显示，外周血 NK 细 胞活性与 CD56＋ ／ 16＋， CD56＋ ／ 16－或 CD3＋ ／ 56＋淋巴 细胞亚群的计数和比例不相关。 因此，NK 细胞毒 性检查和外周血 NK 细胞数量代表了 NK 细胞作 用的不同方面，二者并不相关联 ［20］。 对外周血 NK 细胞的各种检查分析为 RSA 的诊断提供帮助。 对 NK 细胞的免疫调节也可能成为有效的治疗方式。 2．3 对 NK 细胞的免疫治疗 由于研究条件的限制， 针对 NK 细胞异常进 行的免疫治疗， 疗效观察和机制研究仍然集中于 外周血 NK 细胞的观察。 2．3．1 静脉用免疫球蛋白（IVIg） 静脉注射免疫 球蛋白制剂从人血中制备， 最早用于治疗免疫缺 陷症。最初于 20 世纪 80 年代用于预防 RSA。可能 从 3 种途径抵抗免疫缺陷的影响。 首先，它可能是 活性 NK 细胞的抑制剂。 第二，包含多种抗异型抗 体， 能够减少各种有害抗体的损伤， 从而保护胚 胎。 第三，IVIG 能够灭活参与免疫反应的活性 T 细胞和多克隆性 B 淋巴细胞。 在因 NK 细胞缺陷而导致 RSA 的小鼠模型 上，腹腔注射 IVIg 后，小鼠能够成功分娩。 Dr．Sher 等也报道 IVIg 能够明显抑制 NK 细胞活性。 一些 日本的研究者在不明原因 RSA 患者使用 IVIg 后， 发现 IVIg 通过增加外周血 NK 细胞中 CD94 的表 达发挥对胚胎的保护作用 ［21］。 Clark DA 对 3 个公 开发表临床随机对照实验结果进行了 Meta 分析， 发现使用免疫球蛋白治疗可提高活胎生产率，并 有统计学意义。 而对另外两个队列对照研究的 Meta 分析也有同样结果。 从而在更广泛的层面上 对关于免疫球蛋白治疗的效果进行了确认。 但是由于 IVIG 是血源性制品，仍存在着血源 性传染疾病的可能。 而且由于价格昂贵，临床使用 的范围并不大。 因此，研究人员也在不断寻找可以 替代 IVIG 进行治疗的新药物。 2．3．2 治疗新选择 脂肪乳剂（intralipid）能够活 化免疫系统。 动物和人类试验都证实静脉注射脂 肪乳能够增加种植成功率并能维持妊娠。 Roussev RG 等［22］发现使用 20％ Intralipid（静脉内用脂肪乳 剂） 能够在体外成功抑制反复生育失败的妇女的 外周异常 NK 细胞的细胞毒性作用。 脂肪乳剂价 格便宜，因为不是血制品，使用相对安全。 如果脂 肪乳剂的治疗效果可以得到最后的肯定， 将会在 临床获得更广泛应用。 恩利（Enbrel）为肿瘤坏死因子 TNF 受体，是 一种新型的重组蛋白药物， 最初的适应症是类风 湿关节炎。 它主要的作用机制是抑制由活化 NK 细胞分泌的内膜毒性因子 TNF-a。 最近有研究显 示 Enbrel 在阻断 TNF-a 释放的同时还可以灭活活 性 NK 细胞［23］。 如果今后的研究能够获得证实，那 么 Enbrel 将可能替代 IVIG 对升高的毒性 NK 细 胞水平进行治疗。 已经有部分试验证实 Enbrel 确 实在治疗复发性自然流产中发挥作用。 3 子宫 NK 细胞 妊娠时，NK 细胞在母胎界面大量聚集。 种植 期和早孕期间，NK 细胞是子宫上最主要的淋巴细 胞群体。 子宫 NK 细胞能直接与胚胎滋养细胞作 用，因此，目前对于子宫 NK 细胞的研究也越来越 深入。 3．1 uNK 细胞来源 蜕膜上的 CD56＋ CD16－ NK 细胞的来源尚不清 楚，但由于它们同血液中少量无颗粒性 CD56＋ NK 细胞群紧密联系， 一种推断认为血液内的 NK 细 胞游走进入子宫增殖，分化。 但 CD56＋子宫 NK 细 胞与 CD56＋外周血 NK 细胞并不相同， 因为二者 454 第 4 期 在 CD9，CD103 和 KIR 的表达上不同 。 外周血 CD56＋ CD16－ NK 细胞由于表达 L 选择素（CD62L） 和受体 CXCR4 能够与蜕膜上的绒毛外滋养细 胞上的配体 CXCL12 作用， 而被募集到内膜和蜕 膜 ［24］。 子宫 NK 细胞（CD56＋）的募集和增加并不依 赖需要种植的胚胎的出现，它是被激素控制的（雌 激素和 ／或孕激素）［25］。 最近有报道， 蜕膜基质细胞产生 TGF-b 能够 将 CD56－ CD16＋ NK 细胞转化为 CD56＋ CD16－ NK 细胞，这意味着组织存在特异性终末分化选择 ［25］。 这可能是个可逆性的转化过程。 但是体外试验显 然是个相当复杂的过程， 并且无法模拟体内的募 集过程。 3．2 uNK 功能 妊娠时（无论正常或流产）母胎界面出现的大 量 uNK 细胞聚集，有理由认为 uNK 细胞并不仅仅 发挥细胞毒性作用， 更可能是维持妊娠的一个重 要因素。 3．2．1 血管生成作用 妊娠的发生，需要提供一 个充足的需氧环境满足胎盘的形成，早期胚胎生 长和胎儿发育。 这在进化上表现为母体螺旋小动 脉的重构。 正常的血管平滑肌弹性结构转变为螺 旋小动脉管腔更大，壁更薄，阻力最小的可扩张的 结构。 妊娠期间子宫 NK 细胞的功能就是支持子 宫螺旋动脉的重构， 通过调节滋养细胞侵入生长 而促使胎盘形成 ［27］。 人类中早孕期间，子宫 NK 细胞占蜕膜免疫细 胞的 70％左右 。 这些子宫 NK 细胞具备 CD56＋ CD16－的细胞表型标志物，而外周血中 95％的 NK 细胞为 CD56 － CD16 ＋ ， 仅有 5％表现为 CD56 ＋ CD16－。 外周血中的 CD16－ NK 细胞表现出强烈的 细胞毒性， 而 CD56＋ NK 细胞则是低毒性效应，而 且可以分泌各种细胞因子。 IFN-c 是子宫 NK 细胞 分泌的重要细胞因子，促使血管重构，以及正常内 膜的蜕膜化变化 ［28］。 子宫 NK 细胞还分泌其他几 种重要的血管生成因子， 例如血管内皮生长因子 （VEGF），血管蛋白－2 和胎盘生长因子（PIGF）［29］。 子宫 NK 细胞还能调节滋养细胞侵入生长。 子宫 NK 细胞至少在功能上可以部分促进胎 盘形成，对维持妊娠起正面影响。 3．2．2 uNK 细胞毒性作用 与活化的外周血 NK 细胞一样，子宫 NK 细胞也能表达细胞毒性受体， 并具有溶解靶细胞的能力，但是正常妊娠中表现 为低毒性和血管生成活性。 因此有研究者认为正 是因为 uNK 细胞表现出了强大的血管生成活性， 因而不表现其毒性杀伤作用 ［30］。 虽然这种机制尚 不明了，但是一旦内环境改变或者发生炎症反应， 子宫 NK 细胞可能从保护性作用转化为毒性杀伤 作用。 最近的报道都显示 RSA 患者的发病机制确 实与毒性 uNK 细胞的作用相关。 3．2．3 uNK 细胞导致 RSA 患者的病理损伤 与 选择性人工流产的患者相比 ，RSA 妇女在种植 位点上发现了更高比例的异常胎盘损伤 。 对最 终自发流产的患者进行免疫病理学检查 ， 发现 胎盘种植位点上存在明显升高的 CD57＋ NK 细胞 （29．6％），细胞滋养细胞侵蚀深度不足（54．1％），合 体滋养细胞形成不全（44．1％），蜕膜血管血栓形成 （33．9％）［31］。 这一发现显示由于缺乏细胞间信息 传导，改变了正常的种植过程，诱发了胚胎死亡， 导致了流产的发生 ［32］。 对 RSA 患者子宫内膜和蜕膜进行免疫组化研 究，仍然存在一定的局限性。 在 NK 细胞分析上存 在各种不同的意见。 每一组研究中，对 NK 细胞群 体， 标志物的选择， 调控方式都各不相同。 使用 CD57 单克隆抗体进行研究，发现蜕膜上 NK 细胞 增加；采用 CD56 就不会发现有任何变化 ［33］。 这种 差异可能是由于选择病例的指征不同， 样本采集 的时机无法掌握， 黄体功能不全出现的影响，NK 细胞亚群和标志物选择不能统一等造成 ［34］。 4 结 论 正常妊娠的维持是母胎免疫耐受的结果，不 明原因 RSA 患者是免疫耐受机制被破坏的结果， NK 细胞正是这种免疫病理损伤的部分原因。因为 表面标志物、受体和基因调控的不同，对 RSA 患 者存在影响的是外周血 NK 细胞和子宫 NK 细胞。 外周血 NK 细胞的数量 ／比例和毒性代表了 NK 细 胞作用的不同方面， 因此对于 RSA 患者进行 NK 细胞数量 ／比例和毒性检查能够对诊断和治疗提 供帮助。 母胎界面的 uNK 细胞大量聚集，直接作 用于胎儿滋养细胞， 因此在这种免疫损伤里面发 挥直接作用。 uNK 细胞与外周血 NK 同样具备细 胞毒性， 但其在未被活化时具有的血管生成功能 对维持妊娠的起重要作用， 一旦被激活则才发挥 细胞毒性， 成为胚胎损伤流产发生的直接原因。 张建平． NK细胞与复发性自然流产母胎免疫紊乱 455 中山大学学报（医学科学版） 第 31 卷 但是对 uNK 细胞进行组织学检查时仍然存在局 限性。 今后研究的方向仍然是对 NK 细胞在导致 RSA 免疫病理机制的继续研究， 并探索更可行的 治疗。 参考文献： Kwak-Kim J， Gilman-Sachs A． Clinical implication of natural killer cells and reproduction ［J］． Am J Reprod Immunol， 2008， 59（5）： 388－400． Clark DA， Chaouat G， Wong K， et al． Tolerance mechanisms in pregnancy： a reappraisal of the role of class I paternal MHC antigens ［J］ ． Am J Reprod Immunol， 2010， 63（2）： 93－103． Kalkunte S， Chichester CO， Gotsch F， et al． Evolution of non-cytotoxic uterine natural killer cells ［J］． Am J Reprod Immunol， 2008， 59（5）： 425－432． Hiby SE， Walker JJ， O’Shaughnessy KM， et al． Combinations of maternal KIR and fetal HLA-C genes influence the risk of preeclampsia and reproductive success ［J］． J Exp Med， 2004， 200（8）： 957－965． Robertson M， Ritz J． Biology and clinical relevance of human natural killer cells ［J］． Blood， 1990， 76（12）： 2421－2438． Borrego F， Masilamani M， Marusina AI， et al． The CD94 ／ NKG2 family of receptors： from molecules and cells to clinical relevance ［J］． Immunol Res， 2006， 35（3）： 263－278． Orange JS， Ballas ZK． 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