头孢哌酮钠与奥硝唑氯化钠注射液的配伍稳定性

头孢哌酮钠与奥硝唑氯化钠注射液的配伍稳定性 尹建平, 刘亦伟 摘要: � 目的 � 建立高效液相色谱法( H PLC)同时测定头孢哌酮( CPZ)和奥硝唑( ONZ )含量,研究室内光线及 25 � 下注射用 CPZ与 ONZ的配伍稳定性。 � 采用 Nova-pak C18柱( 3. 9 mm � 150 mm, 4. 0 �m) ,以磷酸盐 缓冲液-甲醇( 65� 35, pH 5. 8)为流动相,检测波长 317 nm,流速 0. 9 mL/ min,测定配伍液 8 h 内 CPZ和 ONZ的含 量变化;同时监测 pH 值、外观及气味的变化。� 结果 CPZ线性范围 80~ 1 600�g/ mL ( r= 0. 999 8) ,最小检测限 为 0. 01 �g/ mL, 平均回收率为 100. 0% , RSD< 2. 51% ( n= 5) ,日内 RSD 及日间 RSD 均< 2. 87% ( n= 5) ; ONZ 线 性范围 20~ 400�g/ mL ( r= 0. 999 6) , 最小检测限为 0. 006�g / mL ,平均回收率为 99. 8% , RSD< 2. 98% ( n= 5) , 日 内 RSD及日间 RSD均< 2. 61% ( n= 5)。25 � 6 h 内, 配伍液外观澄明, 无气体、沉淀产生, pH 值、颜色及气味均 无明显变化; CPZ 与 ONZ 含量变化均< 5% ; 6 h 后少量 CPZ 析出, 配伍液逐渐浑浊。 � 结论 CPZ 与 ONZ配伍 后于 25 � 6 h 内稳定。 关键词: � 头孢哌酮; 奥硝唑; 药物稳定性; 色谱法,高压液相 中图分类号: � R927. 11� � � 文献标识码: � A � � � 文章编号: � 1672-4194( 2006) 03-0285-03 收稿日期: 2006-02-23 � � � 修回日期: 2006-04-07 作者单位: 福建医科大学附属第一医院药学部,福州 � 350005 作者简介: 尹建平( 1956~ ) ,男,副主任药师 � � 头孢哌酮( CPZ)为临床广泛使用的广谱三代头孢菌素; 奥硝唑( ONZ)系第 3 代硝基咪唑类抗厌氧菌药物, 是继替硝 唑后的一种强效抗厌氧菌及原虫感染药物。两种药物常用 于复杂混合感染的治疗。笔者利用高效液相色谱法 ( H PLC)监测两种药物配伍后的含量变化, 同时观察配伍液 的外观和酸碱度等指标,对配伍液进行稳定性考察。 1 � 与方法 1. 1 � 仪器 高效液相色谱仪 (包括 515 高压泵、7725i进样 阀、2996 紫外检测器, 美国 Waters 公司) ; 色谱数据工作站 ( Sr2000, 上海安谱科学仪器有限公司) ; 酸度计( pH S-3C 型, 上海伟业仪器厂) ; 电子天平( AB204-S 型,瑞士梅特勒-托利 多有限公司) 1. 2 � 试药与试剂 头孢哌酮钠对照品 (美国辉瑞制药大连 有限公司提供,批号: 040811) ;奥硝唑对照品(南京圣和药业 有限公司提供,批号 20040126) ;注射用头孢哌酮钠 (石家庄 华北制药股份有限公司, 规格: 2. 0 g, 批号: T040503) ; 奥硝 唑氯化钠注射液( 100 mL � 0. 5 g , 南京圣和药业有限公司, 批号 200406081) ; 0. 9% 氯化钠注射液 (四川科伦药业股份 有限公司, 规格: 500 mL, 批号: B040725-11)。磷酸氢二钾 (上海久億化学试剂有限公司, 批号 20020310) ; 磷酸二氢钾 (广东金砂化工厂, 批号 940607) ; 甲醇 (中国福州市化工研 究所,批号 021201) ;以上试剂均为纯。 1. 3 � 色谱条件 色谱柱: N ova-pak ( 3. 9 mm � 150 mm, 4 �m) ;流动相:磷酸盐缓冲液-甲醇 ( 65� 35, pH 5. 8) ; 流速: 0. 9 mL/ min;检测波长: 317 nm; 柱温: 27 � 。在该色谱条件 下, CPZ 和 ONZ 的色谱行为见图 1。 1. 4 � 储备液的配制 CPZ标准储备液: 精密称取 CPZ 对照品 1. 0 g, 置 25 mL 量瓶,加三蒸水溶解后用 0. 9% NaCl 图 1 空白生理盐水 ( A) 与配伍溶液 ( B)高效液相 色谱图 注射液定容, 摇匀即得。ONZ 标准储备液: 精密称取 ONZ 对照品 200. 0 mg ,置 100 mL 量瓶,加三蒸水溶解后用 0. 9% NaCl注射液定容, 摇匀即得。 2� 结 � 果 2. 1� 标准曲线 分别精密吸取 CPZ 与 ONZ标准储备液适 量, 用0. 9% NaCl注射液稀释定容至 10 mL, 得 CPZ质量浓 度分别为 80, 160, 320, 640, 1 280, 1 600 �g/ mL ; ONZ 质量 浓度为 20, 40, 80, 160, 320, 400 �g / mL 的系列标准溶液,立 即取 20�L 进样分析。 � � 以 CPZ浓度为横坐标,峰面积为纵坐标进行线性回归分 285 福建医科大学学报 J Fujian Med Univ � 2006 M ay, Vo l 40 No 3 析, 得回归方程: y^ = 0. 024 3x+ 0. 008 1, r= 0. 999 8( n= 6)。 � � 同法测得 ONZ回归方程y^ = 0. 018 1X+ 0. 004 3, r= 0. 999 7( n= 6)。 2. 2 � 回收率 分别精密称取 CPZ 对照品约 8. 0, 40. 0, 160. 0 mg 各 5 份,置 100 mL 容量瓶中,用 0. 9% NaCl注射 液溶解并用定容,分别取 20 �L 进样分析。另分别精密称取 ONZ约 1. 0, 5. 0, 20. 0 mg 各 5 份,置 50 mL 容量瓶中,加适 量三蒸水溶解后用 0. 9% NaCl注射液定容, 分别取 20 �L 进样分析。结果见表 1。 2. 3 � 精密度 在同一日内不同时间分别取� 2. 1 回收率�试 验项下两物质三种浓度样品液进样分析, 重复 5 次、连续 5 日测定,结果见表 1。 2. 4 � 灵敏度 分别取 CPZ 与 ONZ 标准储备液, 用适量 0. 9% NaCl注射液稀释后进样分析, 测得 CPZ的最低检测限 为 0. 01�g/ mL, ONZ的最低检测限为 0. 006�g/ mL, S/ N> 3。 2. 5� 配伍试验 模拟临床药物配伍常用浓度,精密称取1. 0 g 注射用头孢哌酮钠, 溶于 50 mL 奥硝唑注射液中, 即得配 伍液。在 25 � 自然光照射下放置,分别于< 8 h 不同时间精 密吸取 0. 2 mL 配伍液置 10 mL 容量瓶中, 0. 9% NaCl注射 液定容, 取 20 �L 进样, 测定 CPZ与 ONZ的浓度。以 0 h 的 含量为 100% ,计算各时间的含量。同时测定各时刻配伍液 的 pH 值,并观察其色泽、澄明度变化情况及有无气体或异 味产生,结果见表 2。同� 2. 4 配伍试验�操作,配制配伍溶液 50 mL ,加入 5% NaH CO3溶液 100 �L , 观察 8 h, 同时测定 其含量变化, 结果见表 3。 表 1 头孢哌酮和奥硝唑回收率及精密度、稳定性试验结果 药物 质量浓度�g � mL- 1 平均回收率 % RSD % RSD/ % 日内 日间 头孢哌酮 80 99. 7 2. 51 1. 96 2. 87 400 98. 6 1. 96 1. 07 1. 83 1 600 101. 7 1. 05 0. 99 1. 60 奥硝唑 20 101. 9 1. 76 1. 53 2. 61 100 98. 0 2. 98 1. 12 1. 76 400 99. 5 0. 53 0. 95 1. 44 � � n= 5. 表 2 头孢哌酮与奥硝唑配伍稳定性试验结果 时间/ h 头孢哌酮/ % 奥硝唑/% pH 颜色 澄明度 产气 其他(味) 0 100. 00 100. 00 4. 27 淡黄色 - - - 0. 25 99. 40 99. 87 4. 27 淡黄色 - - - 0. 5 99. 11 99. 79 4. 27 淡黄色 - - - 0. 75 99. 08 99. 60 4. 28 淡黄色 - - - 1 98. 24 98. 82 4. 27 淡黄色 - - - 2 98. 87 98. 11 4. 26 淡黄色 - - - 4 97. 47 97. 13 4. 25 淡黄色 - - - 6 97. 81 97. 55 4. 26 淡黄色 - - - 8 93. 63 97. 47 4. 25 淡黄色 + - - � � n= 5. � - � :溶液澄明,无气、味产生; � + � :有稍微浑浊出现. 表 3 加入 5% NaHCO3溶液后头孢哌酮与奥硝唑配伍 稳定性试验 时间/ h � 头孢哌酮/ % � 奥硝唑/ % pH 澄明度 0 100. 0 100. 0 4. 68 - 0. 5 99. 24 99. 56 4. 66 - 1 99. 53 98. 89 4. 59 - 3 98. 96 99. 01 4. 68 - 6 98. 59 99. 12 4. 67 - 8 98. 19 98. 24 4. 66 - � � n= 5. � - � :溶液澄明;未见色泽、气味变化和产生. 3� 讨 � 论 3. 1� 波长的选择 光谱分析表明, CPZ 在230 nm 有最大吸 收, ONZ则在 317 nm 处, 考虑配伍时 ONZ 浓度低,故取 317 nm 为检测波长,此处两组分灵敏度均可达到检测要求。 3. 2� 色谱条件的优化 有报道用高效毛细管电泳法测 定 C PZ 含量 [ 1] , 中国药典则采用 H PLC 法测定 [ 2] , 所 用流动相含三乙胺醋酸溶液可影响柱效。笔者采用甲 醇代替乙腈有利于操作过程安全防护。经实验考察 , 测得样本含量与药典法测得含量差别无统计学意义。 (下转第 301 页) 286 福建医科大学学报 � 2006 年 5 月 � 第 40卷第 3期 t ions on the qualit ies of H-E staining of the teeth and periodont ium combined specimens. � Application of EDTA-M icrow ave in the decalcificat ion process w as also discussed. � Methods T hree different decalcif- y ing solutions: 10% nit ric acid, Krinstensen's so lut ion and ethy lenediamine tet ra acetic acid disodium salt ( EDT A-2N a) w ith m icrow ave t reatment w ere studied in the experiment. The teeth and periodont ium com- bined specimens of mandible of healthy adult Beagle dog w ere cho sen fo r experiments. � Then sections w ere stained by hemato xy lin- eosin( H-E ) . � T he str ucture of tissues and cells w ere surveyed w ith m icro- scope. � Results � It took 53 hours to accomplish the decalcif icat ion by the method o f EDTA-Microw ave technique. � The st ructur es of specimens such as odontoblast ic cells and periodont ium cells w ere seen clearly. � T he specimens w hich w ere decalcified by Krinstensen's solut ion to ok about 1500 hours to decalc-i fy completely. � Anatomy of teeth and periodont ium were less clear than that using EDTA-Microw ave method. � The specimens w hich were decalcified by 10% nit ric acid took about 360 hour s to decalcify, but the quality o f H-E staining w as poor. � Conclusion � T he r esults w ith microw ave t reatment in EDT A solu- t ion for decalcificat ion w er e best and the co st of time w as least , and most st ructure of teeth and periodont-i um tissues st ill r emained. KEY WORDS: � teeth; periodontium; decalcificat ion technique; microw ave; staining, edet ic acid (编辑: 常志卫) (上接第 286 页) 单独测定 ONZ 含量的方法多见 H PLC 和紫外分光光度 法[3- 4]。本实验建立 H PLC-UV 法可较好分离配伍液中 CPZ 和 ONZ 两组分,有关效能指标符合分析测定要求。 3. 3 � 配伍结果分析 25 � 6 h 内配伍液中两物质含量变 化均< 5% , 且无显著外观变化。6 h 后配伍液逐渐出现浑 浊,但配伍液紫外吸收图谱及色谱分析均表明无新物质生 成。取浑浊的配伍液定量加入 5% NaHCO3溶液后恢复澄 明,同时 CPZ 浓度恢复至 97. 83% , 提示溶液浑浊是由于 CPZ的析出所致。CPZ 的 pKa值在配伍液的 pH 值附近,配 伍时间过长可因溶解空气中 CO2使 pH 值波动, CPZ 部分处 于非离子状态存在, 药液呈浑浊状态。在同等条件下, 配伍 液加入 5% NaH CO3溶液后配伍稳定性时间延长, 与文献报 道相符[5] ,提示加入适当 5% NaH CO 3溶液可提高配伍液的 稳定性。 笔者认为,注射用头孢哌酮钠与奥硝唑注射液混合后在 25 � 6 h 内未发现明显外观变化, 且两者含量变化均小于 5% , 提示临床可以配伍使用, 但配伍后应在 6 h 内使用 完毕。 参考文献: [ 1] � 郭 � 丹,陈娜娜,杨 � 芳,等. 高效毛细管电泳法测定注射用头 孢哌酮钠的含量[ J ] . 华西药学杂志, 2004, 19( 3) : 211-212. [ 2] � 中华人民共和国药典. 2005年版-Ⅰ部[ S ] . 北京:化学工业出 版社, 2005: 148. [ 3] � 罗 � 萍,雷灼雨. 高效液相色谱法测定奥硝唑片的含量[ J] . 中 国药事, 2004, 18( 12) : 761-762. [ 4] � 陈蒂芳, 易爱纯, 张顺芝. U V 法测定奥硝唑分散片的含量 [ J] . 中国药事, 2004, 18( 1) : 44-45. [ 5] � 成跃莎,齐 � 云. 头孢哌酮钠静脉滴注液浑浊原因及对策[ J] . 中国药业, 2005, 14( 8) : 58-59. (编辑: 常志卫) 301姚丽艳等: 3 种脱钙液对牙体牙周联合切片 H-E 染色效果的对比