HG颗粒对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响

历史,�内经�中已有明确记载。明代以后, 中药贴敷得到空 前发展,尤其是被后世誉为� 外治大师�的吴师机在�理瀹骈 文�中提到: � 外治之理, 即内治之理�、� 治虽在外, 无殊治内 也��与内治并行而内治之不足也。�本次对原药物进行提 取制备, 旨在通过对药物中有效成份的提取, 可以使药物的 成份更多的释放出来, 使更多的有效成份易于被组织吸收, 从而提高其临床疗效。实验结果表明, 穴贴� 扶正升白提取 膏�通过保护 CTX小鼠造血刺激因子 IL- 6, 从而促使造血 前体细胞从休眠状态进入细胞周期, 调动了机体内潜在的造 血功能, 加速了血细胞的生成, 促进外周血白细胞数量的补 充,从而对抗化疗药物 CT X 所致的白细胞降低。该穴贴可 以减轻反复化疗对骨髓的损伤,并可使骨髓中的巨噬细胞和 淋巴细胞增多,使骨髓中免疫细胞功能受到保护。 实验表明,穴贴扶正升白提取膏在一定程度上可以缓解 CTX所造成的小鼠血清 IL- 2 的下降, 通过保护小鼠血清 IL- 2,对机体细胞免疫产生良性影响。 该实验通过观察提取制备后的穴贴� 扶正升白膏�和原 粉穴贴� 扶正升白膏�对化疗药 CTX所致白细胞降低的小鼠 血象、骨髓象和免疫系统的影响, 验证了提取制备后的穴贴 � 扶正升白膏�的疗效更好,并从细胞因子 IL- 2、和 IL- 6 的 水平上探讨穴贴� 扶正升白膏�保护骨髓及免疫系统的机理 所在,为临床应用提供了更加科学的依据。 参考文献: [1]曾宝珠. 52例肿瘤化疗后骨髓抑制的辨证论治 [ J] . 河南中医, 2005, 25( 6) : 42. [2] 路玫,曹大明, 王宪龄,等.穴贴扶正升白膏对抗化疗副作用的研 究[ J ] .中国针灸, 2000, 20( 7) : 425- 427. [3] 曹大明,路玫, 赵喜新,等.穴贴扶正升白膏对多次化疗小鼠造血 及免疫系统的影响[ J] .中国针灸, 2000, 20( 11) : 697- 699. [4]林文注, 王佩.实验针灸学 [ M ] . 上海: 上海科技出版社, 1994: 287. 编辑: 韦大文 收稿日期: 2005- 12- 19 作者简介:曹大明( 1957- ) , 男,河南郑州人, 医学学士,副教 授,从事针灸推拿教学、科研、临床工作。 HG 颗粒对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 Effects of HG Granule on Mononuclear�macrophage Phagocytic Function in Hypoimmunologic Model Mice 毕红征 Bi Hongzheng1,赵君玫 Zhao Junmei2 ,黄国钧 Huang Guojun3 1.郑州大学实验动物中心,河南 郑州 � 450052 Labor ator y Animal Center of Zhengzhou Univ ersity, Zheng zhou, Henan, China, 450052 2.河南中医学院动物实验中心,河南 郑州 � 450003 Laboratory Animal Center of Henan Colleg e of TCM , Zhengzhou, Henan, China, 450003 3.成都中医药大学药学院,四川 成都 � 610075 Pharmacy Co llege of Chengdu University of TCM , Chengdu, Sichuan, China, 610075 摘要:目的: 研究HG 颗粒对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响。方法: 皮下注射环磷酰胺建立免疫功能低下小 鼠模型,分别予 HG 颗粒、盐酸左旋咪唑片灌胃治疗。对照观察药物对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬刚果红染料能力 的影响。结果:免疫功能低下小鼠吞噬刚果红染料能力显著降低。经HG 颗粒治疗后有明显提高, 综合疗效优于阳性药物组。 结论: HG颗粒能显著提高免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬能力。 Abstract: Object ive: T o explore the effects o f HG granule on mononuclear�macrophage phagocytic function in hypoimmunologic mice. Methods: hypoimmunolog ic model mice induced by subcutaneous injection cyclophosphamide. T rended the mice w ith HG Keli and hydrochlor ic acid laevorotationzole tablets through tube feeding respectively. Observed the function of licking up congo r ed dye of monocytes in the hypoimmunologic mice. Results: The the function of licking up congo red dye of Monocytes in the hypoimmunolog ic function mice were significantly low er than the normal g roup. After the therpy of HG Keli, t he function of licking up congo red dye of monocytes increased markedly, the comprehensive effects of HG Keli were better than that of modern medicine. Conclusion: These r esults suggested t hat HG Keli can effectively enhance the function o f monocy tes in hypoimmuno logic model mice. 关键词: HG颗粒; 免疫功能低下;单核巨噬细胞 Key words: HG Keli; Hypo immunologic; mononuclear�macrophage 中图分类号 CLC number : R575. 2 � � 文献标识码 Document code: A � � 文章编号 Article ID: 1672- 6839( 2006) 02- 0020- 02 � � 肝纤维化( hepatic fibrosis)是各种慢性肝病进展中由于 肝内纤维生成与降解失衡, 导致过多的胶原在肝内沉积所 致,常伴有炎症并可发展为肝硬化[ 1~ 2]。在各种原因所致的 肝纤维化过程中,免疫力低下是肝纤维化发生的原因, 提高 �20� 2006 年 3 月第 2 期 No. 2� Mar. 2006 � � � � � � � � � 河 南 中 医 学 院 学 报 JOURNAL OF HENAN UNIVERSIT Y OF CHINESE MEDIC INE � � � � � � � � � � 第 21卷 � 总第 123 期 Vol. 21 Serial No. 123 机体免疫力可阻止肝纤维化的发生。HG 颗粒源于知名专家 的多年临床经验,对肝纤维化有着良好的治疗效果。我 们在其治疗肝纤维化的基础上,进一步研究对机体免疫功能 的影响,以明确作用机理。 1 � 材料与方法 1. 1 � 实验药物 HG 颗粒, 10 g 生药/袋, 成都中医药大学中药炮制制剂 学教研室提供, 批号: 041014。盐酸左旋咪唑片, 25 mg /片, 桂林南药股份有限公司出品, 批号: 20041025。以上药物在 临用时以蒸馏水配成相应浓度的溶液备用。 1. 2 � 实验动物 健康昆明种小鼠 60 只, 雌雄各半, 体重 18~ 22 g, 成都 中医药大学实验动物中心提供, 动物质量合格证号: 川实动 管质第 11 号。 1. 3 � 试验仪器 7530 紫外可见分光光度计, Ag ilent 公司生产; 800B低速 离心机, 上海安亭科学仪器厂; HANGPING FA1104 电子天 平,上海良平仪器仪表有限公司。 1. 4 � 实验试剂 注射用环磷酰胺, 上海华联制药有限公司, 批号: 031112; 刚果红试剂,上海化学试剂分装厂,批号: 010815。 1. 5 � 实验方法 60 只小鼠,按性别及体重随机分成 6 组, 每组 10 只, 雌 雄各半。分别为: � 正常对照组: 蒸馏水 0. 4 ml/ 20 g 体重; � 模型对照组:蒸馏水 0. 4 ml/ 20 g体重; � ~ � HG颗粒高、 中、低三种剂量组分别 9、4. 5、2. 25 g 生药/ kg; �盐酸左旋咪 唑片组: 37. 5 mg/ kg。参照文献方法[ 3] , 除正常对照组外, 于 开始给药后第 4 天、第 5 天对各组小鼠皮下注射环磷酰胺 40 mg / kg复制免疫功能低下模型。 灌胃给药,每日 1 次, 连续 7 d。参照文献方法[ 4~ 5] , 于 末次给药 1 h 后, 用肝素处理过的定量毛细玻管, 从小鼠眶 后静脉丛取血 40 �l,立即放入 4 ml蒸馏水中, 使血标本完全 溶血作为对照管。随即从小鼠尾静脉注入刚果红溶液 0. 1 ml/ 10 g体重。至注射后 30 s, 用同样方法取血 40 �l, 放 入4 ml蒸馏水中, 使其完全溶血作为实验管。然后用分光光 度计,在 510 nm 波长下, 以蒸馏水调吸光度� 0�点, 分别测定 实验管吸光度和对照管的吸光度 ( OD 值)。以实验管 OD 值 减去对照管 OD值的差值作为血清刚果红溶液的 OD值。从 刚果红的标准曲线计算出血清刚果红含量( mg% )。根据刚 果红含量多少表示单核巨噬细胞吞噬功能的强弱, 即血清刚 果红含量低说明单核巨噬细胞吞噬力强。 1. 6 � 数据处理 所有数据均采用统计软件 12. 0 进行统计学处理, 多 组间比较用单因素方差, 多组间比两两比较用 q 检验 ( SNK 法)。各项指标结果均以均数 � 标准差 ( �x � s ) 表 示。 2 � 实验结果 HG 颗粒对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬刚果红 染料能力的影响,结果见表 1。 表 1 � HG 颗粒对免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬刚果红染料 能力的结果( �x � s ) 组别 动物数(只) 刚果红含量( �g/ ml) 降低率( % ) 正常对照组 10 6. 4016 � 3. 7437 - 模型对照组 10 6. 7206 � 0. 9795 - HG颗粒高剂量组 10 3. 5547 � 2. 3635* * 47. 11 HG颗粒中剂量组 10 1. 8319 � 2. 4226* * 72. 74 HG颗粒低剂量组 10 6. 9019 � 3. 4957 - 2. 70 左旋咪唑片组 10 3. 8500 � 0. 2608* * 42. 71 � � 注: ( 1)与模型对照组比较, * P < 0. 05, * * P < 0. 01; ( 2)降低 率为与模型对照组比较的降低百分率。 从表 1 可见,小鼠皮下注射环磷酰胺造成免疫功能低下 模型后,其单核巨噬细胞吞噬刚果红染料的能力较正常对照 组有一定程度的降低,致使其血清中的刚果红含量值比正常 对照组略为增高,增高率为 9. 90% ( P > 0. 05)。而免疫功能 低下小鼠经 HG颗粒高、中剂量及盐酸左旋咪唑治疗后, 均 能显著增强免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能,使血 清中的刚果红含量值比免疫功能低下模型对照组显著降低。 HG颗粒高、中剂量降低率分别为 47. 11%和 72. 74% ( P 均 < 0. 01)。表明 HG颗粒和盐酸左旋咪唑均能增强免疫功能 低下小鼠非特异性免疫力。 3� 讨论 肝纤维化的发生发展与机体免疫状态有关。近年研究 表明 :免疫调控在肝纤维化中起重要的作用, 这主要是由于 肝脏供血丰富,是机体进行物质交换和代谢的中心, 易与外 来异物抗原接触, 从而激活细胞免疫系统而发生免疫反应, 并进一步释放细胞因子, 激活贮脂细胞而导致胶原代谢紊 乱,引起肝纤维化的发生。 HG 颗粒由丹参、桃仁、白芍、柴胡等药物组成 ,丹参活血 养血,化瘀止痛为君; 桃仁活血化瘀为臣; 白芍、柴胡柔肝养 肝为使,全方配伍,共奏活血化瘀, 软坚散结, 补养正气之效。 本试验结果表明: HG颗粒可显著提高机体单核巨噬细胞能 力,疗效与模型对照组小鼠相比有显著性差异。机理与其提 高机体免疫水平和能量代谢水平, 促进有害物质、病理产物 的清除有关。 参考文献: [ 1]肝脏病学会肝纤维化学组.肝纤维化诊断及疗效评估共识[ J] . 中 华肝脏病杂志, 2002, 10( 5) : 327- 328. [ 2]杨敏,梁鹤.中医药抗肝纤维化的实验研究进展 [ J ] .河南中医, 2004, 24( 2) : 85. [3] 邵兰,于庆海, 徐静华,等.合成鱼腥草素对环磷腺胺模型小鼠免 疫功能的影响[ J] .沈阳医科大学学报, 2000, 7( 2) : 133- 135. [ 4]严宣左,赵琳,杨燕玲.小鼠刚果红吞噬实验方法的研究[ J] .北京 中医学院学报, 1982; ( 1) : 40. [ 5]秦林,张少华,李晓丽.川乌与白芍配伍的免疫调节作用初探[ J ] . 中国中药杂志, 2002, 7( 7) : 541- 543. 编辑: 韦大文 收稿日期: 2005- 12- 09 作者简介: 毕红征 ( 1975- ) ,女 ,河南鲁山人, 研究生, 博士, 讲师。 �21� 2006 年 3 月第 2 期 No. 2� Mar. 2006 � � � 河 南 中 医 学 院 学 报JOURNAL OF HENAN UNIVERSIT Y OF CHINESE MEDIC INE HG 颗粒�Effect s of�� 毕红征�Bi Hongzheng� � � � � 第 21 卷 � 总第 123 期 Vol. 21 Serial No. 123