单核细胞增生李斯特氏菌

null单核细胞增生李斯特氏菌 L.monocytogenes单核细胞增生李斯特氏菌 L.monocytogenesnull 国际上公认的李斯特菌属有7个菌种，即单核细胞增生李斯特氏菌，绵羊李斯特氏菌，英诺克李斯特氏菌，威尔斯李斯特氏菌 ，西尔李斯特氏菌 ，格氏李斯特氏菌 ，莫氏李斯特氏菌。null 李斯特氏菌的发现 流行特性 流行病学 生物学特性 致病性 控制 检测 一、单核细胞李斯特氏菌的发现一、单核细胞李斯特氏菌的发现李斯特菌属中引起食物中毒的主要是单核细胞李斯特氏菌 1926年由Murray首先发现，可引起兔子单核性白细胞急剧增加，后来发现可引起孕妇流产和脑炎 1981年，在加拿大因摄食卷心菜引起食物中毒 1983年，美国发生了牛乳中毒 1985年，加州发生奶酪中毒 1987年，荷兰发生中毒事件 ...... 因此该菌受到人们普遍关注二、流行特性二、流行特性美国疾病预防和控制中心估计美国每年有2000起李斯特菌病例 1999年底，美国发生了历史上因食用带有李斯特菌的食品而引发的最严重的食物中毒事件，在美国密歇根州有14人因食用被该菌污染的 “热狗”和熟肉而死亡，在另外22个州97人患此病，6名妇女流产。null 目前，中国输往欧、美、日的肉类产品，李斯特菌是应检项目 2001年11月以来，中国质检部门多次从美国、加拿大、法国、爱尔兰、比利时、丹麦等二十多家肉类加工厂进口的猪腰、猪肚、猪耳、小排等三十多批近千吨猪副产品中检出单增李斯特菌、沙门氏菌等致病菌。冰箱中的“杀手”！？冰箱中的“杀手”！？ 冰箱在给人们生活带来极大方便的同时，却也伴随着健康的隐患。 近年来由于吃放在冰箱里的食物而闹肚子、得胃炎，甚至患上肺炎的人数在不断增加。 更为恐怖的是，无锡市疾控中心食品污染物监测点在冰箱食物中竟然发现了一种致命细菌——李斯特氏菌，该细菌喜冷不爱热，在低温环境中可大量繁殖，如果人被感染，将有三成的病死率，且大多数都是老人。 三、流行病学三、流行病学 单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中，不易被冻融，能耐受较高的渗透压 在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在 动物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播。 null 李斯特氏菌病多发于夏季，并且无处不在 细菌通过被污染的食物，如乳及乳制品、肉类制品、水产品以及蔬菜水果，经消化道进入人体内 该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进入体内而造成感染 孕妇感染后通过胎盘或产道感染胎儿或新生儿,栖居于阴道、子宫颈的该菌也引起感染null 李斯特氏菌轻视不得，一是它能产生一种有溶血作用的外毒素 二是它属于细胞内寄生菌，有任何原因的免疫缺陷者(如糖尿病、酒精中毒、使用肾上腺皮质激素者)易于受感染。 四、生物学特性四、生物学特性（一）形态 李斯特菌为革兰氏阳性类球形杆菌直或稍弯，两端钝圆，常呈V字型排列，偶有球状、双球状，兼性厌氧、无芽胞，一般不形成荚膜，但在营养丰富的环境 中可形成荚膜。（二）生长条件及培养特性（二）生长条件及培养特性 该菌的生长范围为2--42℃（也有报道在0℃能缓慢生长），最适培养温度为35--37℃ 在pH中性至弱碱性（pH9.6）、氧分压略低、二氧化碳张力略高的条件下该菌生长良好。null羊肝浸出液琼脂上的菌落：圆形，光滑，奶油状，稍扁平，用透过光观察是透明的。 在5-7%的血平板上，菌落通常也不大，灰白色，刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。null 该菌生长需要B族维生素（生长素、核黄素、硫胺素和硫辛酸）和氨基酸。 葡萄糖能促进所有的李斯特氏菌生长并生成L(+)乳酸五、致病性五、致病性 该菌进入人体后是否发病，与李斯特氏菌的毒力和宿主的年龄、免疫状态有关null无免疫缺陷的未怀孕的健康人对单核细胞李斯特氏菌感染具有很强的抵抗力 很少有证据表明这样的健康人能够感染此菌 电镜下的单核细胞增生李斯特氏菌抵抗力抵抗力该菌对理化因素抵抗力较强。 在土壤、粪便、青储饲料和干草内能长期存活。 对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20min可杀死，70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min 可杀死此菌。该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感。 null李斯特菌具有较强的反抗力，秋冬时期在土壤中能存活5个月以上 在冰块内也可存活3～5个月，许多冷冻肉类都是它的“温床” 这种细菌对高温的也比较强，能在100℃下挺15～30分钟，在70℃下可存活30分钟以上李斯特氏菌患病临床症状李斯特氏菌患病临床症状 健康成人个体出现轻微类似流感症状 新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发热、抽搐、昏迷、自然流产、脑膜炎、败血症直至死亡。 潜伏期潜伏期在感染后3-70天出现症状，健康成人可出现轻微类似流感症状，易感者突然发热，剧烈头痛、恶心、呕吐、腹泻、败血症、脑膜炎、孕妇出现流产。 六、如何控制食品中的李斯特菌？六、如何控制食品中的李斯特菌？单增李斯特氏菌在一般热加工处理中能存活，热处理已杀灭了竞争性细菌群，使单增李斯特氏菌在没有竞争的环境条件下易于存活，所以在食品加工中，中心温度必须达到70℃持续2分钟以上。 由于单增李斯特氏菌在4℃下仍然能生长繁殖，所以未加热的冰箱食品增加了食物中毒的危险。冰箱食品需加热后再食用。 null针对李斯特菌病疫情，加拿大卫生管理局给出了食品安全的8项建议： 1.砧板的卫生状况很重要，要有专门切肉、蔬菜、家禽、海鲜的砧板和刀，且每次烹饪完毕后一定要对刀具与砧板进行全面清洁。 2.打开罐头食品前一定要先清洗盖子，开罐器在每次使用后也应该消毒。 3.将一些小型器具如食品加工机、绞肉机及搅拌机分开，使用后进行全面清洁与消毒。null4.就餐后应将盘子与餐具风干，或者用干净的毛巾擦干，一些清洁用的毛巾、海绵和布料，往往能阻止细菌侵入。 5.经常清扫橱柜，将食物储存在密闭的容器里。null6.一些与还未加工的食物接触的容器与器具，在重新使用前一定要彻底清洁。 7.当你的手被割伤时，要用绷带将手缠紧，然后戴上手套。在接触不同的食物时需要经常更换手套。 8.用温度计测你的食品温度，如果温度有异常，则可能受到了感染，因为李斯特菌等夺命细菌，在寄生过程中会产生热量。七、检测七、检测（一）传统分离鉴定方法 增菌培养→生化反应 →动物实验→协同溶血试验→血清型 样品：冷冻样品，2－5℃解冻，不超过18h 若不能及时检验，应置于－15 ℃保存。 非冷冻易腐样品应尽可能及时检验。 若不能及时检验，应置于4 ℃冰箱保存，在24h之内检验。 null增菌方法: 冷增菌法 ：将样品置于胰蛋胨水中4~5℃增菌一个月，再划线分离 缺点：时间太长，不适于食品卫生的常规检验。 快速增菌法 常用选择性增菌法，分步增菌，增加病原检出率 总之，传统的单核细胞增生李斯特氏菌的检测方法全过程需4~7D，而且没有一种培养基可以全面的保持所有食品基质或各种李斯特氏菌血清型null李斯特氏菌显色培养基（Listeria Chromagenic medium ）用于李斯特氏菌的选择性分离鉴别，24h可初步判定结果 微生物 菌落颜色 单增李斯特氏菌 蓝色菌落，菌落周围有一不透明环 绵阳李斯特氏菌 蓝色菌落，菌落周围有一不透明环 英诺克李特氏菌 蓝色菌落，菌落周围没有不透明环 nullFraser肉汤培养null牛津琼脂（二）免疫学检测方法（二）免疫学检测方法免疫学检测方法就是利用抗原抗体反应的显著特异性，而建立的一种快速检测食品中病原菌的方法。 目前主要利用ELISA技术 特点：操作简便，快速，可在同一时间内检测大量样品，可将纯肉汤培养物中的分离物进行术水平的鉴定，但难以进行菌种间的特异分析。 ELISA法的检测极限为105~106cfu/mL （三）核酸检测方法（三）核酸检测方法该方法以李斯特氏菌属或种特异核酸序列的互补序列为探针进行李斯特氏菌属或种水平的鉴定 目前多利用PCR技术 特点：敏感性好，但必须经过选择性增菌以稀释可能干扰检测反应的某些成分。 探针杂交技术检测极限为105~106cfu/mLnull感谢您的关注！