白芷中欧前胡素的提取方法研究

木芙蓉叶总黄酮提取的最佳工艺条件 ,用 12 倍量 70 %乙醇回流提取 3 次 ,每次 3h ,其中乙醇浓度是 影响提取率的主要因素。以此法提取的总黄酮含量 21. 62mg/ g 叶 (即 130. 48mg/ g 干膏) ,与 2 中试 验 2 含量 20. 02mg/ g 叶 (即 139. 23mg/ g 干膏)较接 近 ,而后者工艺成本较低 ,且干膏中总黄酮含量也较 高 ,所以从降低成本、节省原料考虑 ,采用 12 倍量 70 %乙醇回流提取 3h ,然后 10 倍量 70 %乙醇回流 提取 2h ,此法所得黄酮含量 21. 08mg/ g 叶。 3. 2 　从不同提取结果比较可知 ,乙醇回流法提 取总黄酮含量大大高于水煎法、温浸法 ,说明乙醇回 流提取法效果最好。 参考文献 : [ 1 ] 　中华人民共和国卫生部药品[ S] . 1992 ,16. [2 ] 　薛申如. 木芙蓉叶化学成分研究 [J ] . 基层中药杂志 ,1991 ,5 (4) :37. [ 3 ] 　陈仁通. 木芙蓉中的化学成分[J ] . 中草药 ,1993 ,24 (5) :227. [ 4 ] 　林浩然. 木芙蓉治疗滴虫性阴道炎及霉菌性阴道炎的实验和临 床研究[J ] . 医学研究通讯 ,1990 ,19 (10) :22. [5 ] 　徐娅. 木芙蓉叶的抗炎作用及其毒性研究 [J ] . 福建医药杂志 , 1989 ,11 (3) :24. [ 6 ] 　中华人民共和国药典[ S] . 一部 ,1995. 144. 白芷中欧前胡素的提取方法研究 梁明金 , 　杨广德 , 　贺浪冲 (西安医科大学药学院中心 ,陕西 西安 710061) 摘要 :目的 :建立提取白芷中香豆素类成分的方法。方法 :以欧前胡素为指标 ,用薄层色谱法对提取香豆素类成分所用的 溶剂种类、极性和提取方式进行系统研究。结果 :用 4 倍量 95 %乙醇回流提取 2 次 (每次 1h) 的方法提取白芷中的香豆 素类有效成分可以获得较高提取效率。结论 :溶剂种类和提取方式对白芷中欧前胡素的提取效率有较大影响。 关键词 :白芷 ;欧前胡素 ;香豆素 ;薄层色谱法 中图分类号 :R284. 2 　　　　　文献标识码 :A 　　　　　文章编号 :100121528 (2000) 1220829202 Solvent Extraction Methods of Imperatorin in Radix Angelicae Da hurica L IAN G Ming2jin , 　YAN G Guang2de , 　HE Lang2chong ( A nalytical Center , College of Pharmacy , Xian Medical U niversity , Xian 710061 , Chi na) Abstract : Objective : To build an extraction method of coumarins from Radix A ngelicae Dahuricae. Methods : The solvent varieties , polarities , and extraction methods were systematically studied by TLC with imperatorin as marker. Results : The more effective way to extract coumarins from Radix A ngelicae Dahurica was refluent ex2 t raction with 4 times amount of 95 % alcohol twice (one hour each time) . Conclusion : The Solvent varieties and extraction method showed greater effects than others on the extraction efficiency of imperatorin. Key words : Radix A ngelicae Dahuricae ; imperatorin ; coumarins ; TLC 收稿日期 :2000203204 基金项目 :卫生部科学研究基金资助项目 :钙拮抗剂类活性化合物的细胞膜色谱法筛选 (批准号 98212243) 作者简介 :梁明金 (1975～) ,男 ,山东潍坊市人 ,硕士生 ,主要从事中草药有效成分的筛选及其体内代谢动力学研究。电话 :02925275142.　　白芷 ( Radix A ngelicae Dahurica) 为伞型科植物白芷和杭白芷的干燥根。具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功能。白芷中的主要有效成分为香豆素类化合物 (coumarins) [1 ,2 ] ,欧前胡素 ( impera2torin)为其中之一。用细胞膜色谱法[3 ]筛选研究表 明香豆素类化合物对狗血管平滑肌细胞具有较强的活性作用。药理实验表明香豆素类化合物具有抗菌消炎、解热镇痛、降低动脉压力及离体蛙心收缩力等作用[4 ] 。通常采用薄层色谱法[5 ]对欧前胡素进行定量检测。作者对白芷中欧前胡素的提取方法进行 928 2000 年 12 月 第 22 卷 　第 12 期 中 成 药 Chinese Traditional Patent Medicine Dec. , 2000 Vol. 22 　No. 12 研究。 1 　仪器与试药 1. 1 　仪器 　CS2930 薄层扫描仪 (日本岛津) 。 1. 2 　试药 　欧前胡素对照品 (中国药品生物制品检 定所) ,白芷 (西安市药材市场) ,试验中所用试剂均 为分析纯 ,硅胶 G 购于中国青岛海洋化工集团公 司。 2 　方法与结果 2. 1 　欧前胡素对照品溶液 　取欧前胡素对照品约 5mg ,精密称定 ,置于 10ml 量瓶中 ,用甲醇溶解并定 容至刻度 ,摇匀即得。 2. 2 　薄层展开条件 　将欧前胡素对照品溶液点于 薄层板上 ,以石油醚2乙醚 (1∶1) 为展开剂 ,在室温下 饱和 20min 后 ,用上行法展开 ,取出 ,晾干 ,置于紫外 灯 (365nm)下检视 ,欧前胡素显暗黄色斑点 ,Rf 值为 0. 40。 2. 3 　薄层扫描条件 　将上述薄层板用薄层扫描仪 检测 ,选择双波长反射法锯齿扫描 ;λs = 313nm ,λR = 365nm ;狭缝 1. 2mm ×1. 2mm ,SX = 3。 2. 4 　标准曲线试验 　取欧前胡素对照品溶液 1μl , 2μl ,4μl ,6μl ,8μl ,10μl 分别点于同一薄层板上 ,用石 油醚2乙醚 (1∶1) 为展开剂上行展开 ,晾干后在紫外 灯 (365nm) 下定位 ,进行薄层扫描测定。线性范围 为 0. 55～5. 5μg。回归方程 : Y = - 0. 4512 + 1. 325 ×10 - 4 X( r = 0. 9996) 。 2. 5 　提取溶剂的选择 　取白芷生药饮片粉碎 ,过 120 目筛 ,取样品粉末 6 份 ,每份约 1g ,精密称定 ,分 别用石油醚、乙醚、醋酸乙脂、丙酮、95 %乙醇、甲醇 作提取溶剂 ,封闭超声处理 30min ,静置过夜 ,滤过 并定容至 25ml。将上述提取液分别点于同一薄层 板上 ,点样量为 5μl ,随行对照品溶液 ,照“薄层展开 条件”和“薄层扫描条件”项下测定 (见表 1) 。 表 1 　 提取溶剂选择试验结果 提取溶剂 称样量 (g) 测得含量 (mg/ g) 石油醚 1. 0005 2. 55 乙醚 1. 0043 2. 80 醋酸乙脂 1. 0082 2. 90 丙酮 1. 0004 2. 81 95 %乙醇 1. 0009 2. 91 甲醇 1. 0070 2. 79 　　由表 1 可见 ,95 %乙醇、醋酸乙脂、乙醚对欧前 胡素提取较充分 ,考虑溶剂的价格、环保及实际应用 等因素 ,选择 95 %乙醇作为提取溶剂。 2. 6 　提取方法选择试验 　取白芷样品粉末 6 份 ,每 份约 10g ,精密称定。以 95 %乙醇为溶剂 ,分别用不 同的提取方法进行提取。将提取液滤过并定容至 100ml ,点样于同一薄层板上 ,随行欧前胡素对照品 溶液 ,展开 ,晾干后进行薄层扫描测定 (见表 2) 。 表 2 　 提取方法选择试验 提取方法 称样量 (g) 测得量 (mg/ g) 放置过夜 10. 00 3. 01 超声 (30min) 10. 00 2. 26 超声 (60min) 10. 00 2. 34 热回流 (1h) 10. 02 3. 03 热回流 (2h) 10. 00 2. 13 热回流 (3h) 10. 00 2. 07 　　由表 2 可得 ,白芷样品加热回流 1h ,欧前胡素 的提取效率较高 ,提示在含量测定方法中应采用回 流方式提取白芷中的欧前胡素。 2. 7 　正交试验 　采用 4 因素 3 水平正交试验法对 提取溶剂量、乙醇浓度、回流时间、回流次数进行了 试验分析。结果表明 :用 4 倍量 95 %乙醇回流 2 次 (每次 1h)对欧前胡素提取比较充分 (见表 3) 。 表 3 　 正交试验 L9 (34)因素水平表 水平 溶剂量 (v/ g) 乙醇浓度 ( %) 回流时间 (h) 回流次数 1 3 75 1. 0 1 2 4 85 1. 5 2 3 5 95 2. 0 3 3 　讨论 3. 1 　白芷的药理活性成分为香豆素类化合物 ,在酸 性和中性条件下不溶于水 ,易溶于石油醚、乙醚等有 机溶剂 ;在碱性条件下与碱作用而溶于水 ,利用此性 质碱水回流提取 ,酸化得香豆素 ,但实验中发现用此 方法易混入树脂等杂质 ,后处理困难。 3. 2 　试验过程中对中国药典 (1995) 及文献报道的 薄层展开方法进行了比较 ,选定石油醚2乙醚 (1∶1) 作展开剂 ,欧前胡素与其它成分分离效果好 ,斑点圆 整且无拖尾现象 ,比移值适中 (Rf = 0. 40) 。 3. 3 　试验表明 ,白芷用水进行提取时 ,经测定其提 取物中几乎不含欧前胡素。 3. 4 　在实验中发现 ,白芷样品回流时间越长 ,测得 欧前胡素含量呈下降趋势 ,可能是欧前胡素分子中 脂键水解所致 ,提示欧前胡素对热不稳定 ,提取时不 宜长时间加热。 参考文献 : [1 ] 　张涵庆. 杭白芷根化学成分的研究[J ] . 药学通报 ,1980 ,15 (9) : 3862388. [2 ] 　周继铭. 白芷的研究Ⅴ. 化学成分的研究 [J ] . 中草药 ,1987 ,18 (6) :2422246. [3 ] 　贺浪冲. 细胞膜受体色谱法2研究药物与受体作用的新方法 [J ] . 生物医药色谱新进展 ,1996 ,3 :829. 038 2000 年 12 月 第 22 卷 　第 12 期 中 成 药 Chinese Traditional Patent Medicine Dec. , 2000 Vol. 22 　No. 12 [4 ] 　黄泰康. 常用中药成分与药理手册[ M ] . 北京 :中国医药科技出 版社. 1994. 166121662. [ 5 ] 　王健. 中药中香豆素的测定方法 Ⅰ. 薄层扫描法测定白芷中欧前胡素含量[J ] . 药物分析杂志 ,1988 ,8 (2) :87289. 收稿日期 :2000207206 作者简介 :余　华 (1958～) ,女 ,江西南昌市人 ,副研究员 ,主要从事新药开发和科研管理 ,电话 :0791 - 8101739. 补气养血催乳口服液工艺筛选研究 余 　华 , 　曾宪仪 , 　方 　铝 , 　张爱华 (江西省药物研究所 ,江西 南昌 330029) 摘要 :目的 :筛选补气养血催乳口服液提取方法。方法 :设计出水提工艺、水提醇沉工艺及醇渗漉工艺 ,以阿魏酸及黄芪 甲甙、对正常泌乳小鼠的泌乳量作为筛选指标。结果 :醇渗漉工艺的制剂产品 ,其阿魏酸及黄芪甲甙含量均较高 ;并能显 著提高正常泌乳小鼠的泌乳量。结论 :醇渗漉工艺为补气养血催乳液的选择工艺。 关键词 :补气养血催乳液 ;工艺筛选 ;醇渗漉 ;小鼠 中图分类号 :R944. 1 　　　　　文献标识码 :A 　　　　　文章编号 :100121528 (2000) 1220831202 Study on Selection of Preparation Procedure of Buqiyangxuecuiru Oral Liquid YU Hua , 　ZEN G Xian2yi , 　FAN G L U , 　ZHAN G Ai2hua ( Jiangxi Instit ute of Materia Medica , N anchang 330029 , Chi na) Abstract : Objective : To select the optimum extraction procedure for Buqiyangxuecuiru Oral Liquid. Methods : The water2extraction , water2extraction and alcohol2precipitation , and alcohol2percolation procedures were de2 signed. Taking contents of ferulic acid and astragalus saponins I , and the lactation quantity of normal lactation mice as markers , the rational preparation procedure was selected. Results : The oral liquid prepared by the pro2 cedure of alcohol2percolation. Both ferulic acid and astragalus saponins I contents in this preparation were the highest , and it could remarkably increase the lactation quantity of normal mice. Conclusion : The alcohol2perco2 lation procedure was the optimum extraction procedure for Buqiyangxuecuira Oral Liquid. Key words : Buqiyangxuecuira Oral Liquid ; procedure selection ; alcohol2percolation ; mouse 　　补气养血催乳口服液由黄芪、党参、当归、麦冬 等药味组成 ,具补气养血 ,利气通络 ,促进产后乳汁 分泌的功能 ,用于妇女产后气血亏虚 ,乳汁不足 ,身 体虚弱等症。目前 ,正在按中药三类新药的技术要 求进行研制。 考虑到方中黄芪是为君药 ,且富含多糖 ,比如 A G21 ,A G22 等具明确的免疫促进作用 ,所以首选工 艺为传统的水提工艺 ;又考虑到 ,本处方药味用量较 大 ,制成口服液 ,每毫升药液含生药量可达到1. 14g。 所以同时设计水提醇沉工艺及稀醇渗漉工艺 ;利用 3 种工艺的制剂产品平行进行《中国药典》口服液项 下指标、黄芪甲甙 ( mg/ 10ml) 及阿魏酸 ( mg/ 10ml) 含量、对正常产鼠 (小鼠)泌乳量的影响 ,进行综合评 价 ,最终筛选出三类中药补气养血催乳口服液的最 佳工艺。 1 　工艺筛选及产品制备 (1) 水提工艺 : 药 材 净制、粉碎 水煎煮 3 次 合 并 煎 煮 液 静置、过滤 滤液 浓缩、调整容积 药液 1 (2) 水提醇沉工艺 : 药材 净制、粉碎 先后水煎煮 3 次 合 并 煎 煮 液 静置、过滤 滤液 适当浓缩 醇沉、静置、过滤 (使含醇量达 50 %) 滤液 除醇 浓缩、调整容积 药液 2 (3) 稀醇渗漉工艺 : 138 2000 年 12 月 第 22 卷 　第 12 期 中 成 药 Chinese Traditional Patent Medicine Dec. , 2000 Vol. 22 　No. 12