乙型肝炎病毒

nullnull第一组组员： 王盼 （0920150701） 刘兵 （0920150702） 田茂琴 （0920150703） 石砫 （0920150704） 周野 （0920150705）null乙型病毒性肝炎（HB）的病原体是乙型肝炎病毒。HBV是一种小DNA病毒，即Dane颗粒；乙型肝炎表面抗原（HBsAg）抗-DNA的表面抗原，即小球形颗粒、管状颗粒/丝状颗粒/柱状颗粒；乙型肝炎表面抗体（HBsAb），表示HBV的HBsAg的抗体，即抗-HBs;乙型肝炎核心抗原）（HBcAg），表示HBV的核心抗原；null乙型肝炎核心抗体（HBcAb），表示HBV的HBcAg的抗体，即抗-HBc；乙型肝炎E抗原（HBeAg），表示HBV的E抗原；乙型肝炎E抗体（HBeAb），表示HBV的HBeAg的抗体，即-HBe。nullnull1）小球形颗粒：大小形态不一，平均直径22nm。 2）管状颗粒：长短与形状不一，平均直径22nm，长度100~1000nm。小球形颗粒与管状颗粒，均与HBV包膜有相同的脂蛋白（即HBsAg）组成，不含核酸 null3）大球形颗粒：即Dane颗粒，是HBV的完整病毒体。大小较为一致，直径42nm，分为外壳和核心两部分，脂蛋白外壳厚7nm，用去污剂将外壳剥落后暴露核心。核心为20面体的对称结构，符合病毒构型。核心直径为28nm，核壳厚2nm。内含核心蛋白，部分环状双链HBV-DNA和HBV-DNA多聚酶。nullHBsAg即使以HBV脂蛋白包膜的形式与HBV共存；有时源于HBV复制过程中的共价闭合环状DNA在RNA转录酶作用下由2.4kbRNA\2.1kbRNA转录成大量的HBsAg除供给组装HBV外膜需要外，还有多余的HBsAg存在于肝脏、血液及其他组织和体液之内。表明HBV复制过程中HBsAg与HBV密切相关。因HBsAg不仅是HBV感染的标志，也被认为是传染性标志物之一。null在HBV复制过程中，HBsAg复制的数量多，造成组装HBV后，有HBsAg的过多剩余。HBsAg与HBV存在非伴随现象。在临床也常见到，AHB康复后，或CHB经有效HBV治疗后，无肝病症状和体征，肝功能正常，血清及肝组织内HBsAg可能不与HBV相伴随。 HBsAg：HBsAg只是HBV的表面抗原，其本身不含核酸，不能自行复制，也无传染性，但有免疫性，能刺激机体产生保护性抗体---HBsAb。HBsAg是HBV感染后的标志之一，当HBsAg伴随HBV存在或复制时才是具有传染性的间接指标之一。nullHBV:HBV是完整的病毒颗粒，含有核酸，能够复制，有传染性，并能引起机体免疫应答反应，造成肝细胞或机体组织的病理损伤。经肝组织学检查证实，慢性HBV携带者90%肝内有不同程度的炎性病变，并有部分已呈现早期肝硬化（肝硬化代偿期）。null乙型肝炎病毒是目前已知人类最小的双链DNA4病毒。基因组结构紧密，功能齐全，以最小的容量发挥高效功能。其独特的基因结构为小环装状、部分双股HBV-DNA，即乙型肝炎病毒基因组。HBV-DNA较长的一链为负链，全长约3.2kb个核苷酸，较短的一链为正链，双链长度不对称，正链不完全封闭。负链核苷序列的4个开放独架为：S基因区、C基因区、P基因区和X基因区，分别编码外膜蛋白（HBsAg）、DNA聚合酶、核壳蛋白和HBxAg。null1）HBsAg(-)/HBV-DNA（+） 李欣华[1]等报道，乙性肝炎标志物常为阴性的人群中，仍有4.3%的HBV-DNA（+），虽其含量呈低水平，但仍不容忽视。侯金林[2]等报道，中国是HBV感染高发地区，用PCR技术，已发现30%—40%HBsAg（-），所谓隐原性肝硬化、非甲非乙型慢性肝炎患者仍为慢性HBV感染者。2）HBsAb(+)/HBV-DAN(-) 李欣华等报道，在275份HBsAb(+)血清标本中有12例HBV-DNA（+）(4.4%)。吕娇健[3]等报道，临床上少数HBsAB(+),肝功能反复异常者，经血清HBV-DNA和肝穿活检免疫组化检测证实，其中39.7%患者系HBV感染。null黄利华[4]等报道，在“套式PCR检测HBsAb(+)者血清HBV-DNA及序列分析”试验中检测结果表明，64例血清标本用常规PCR法检测HBV-DNA阴性率为29.7%，套式PCR法检测阳性率为84.4%，有显著性差异。本研究发现HBsAb与HBV-DNA同时存在，HBsAg未能起到中和HBV的作用。Van Nunen[5]报道，慢性肝炎患者HBsAB 对HBsAg的中和作用不如预想的那么有效。因此，联合使用抗病毒药物、接受了HBVac注射后产生的HBsAb有时能误导我们认为产生了免疫力，而实际上仍存在HBV慢性感染。null3）HBsAg的临床意义 HBsAg是HBV感染的重要标志，也是最早出现的标志。HBsAg由酯类多肽组成，不具有传染性，具有免疫性，可刺激机体产生保护作用和相应抗体。由于完整的病毒颗粒具有HBsAg组成的外壳，故HBsAg是HBV感染的指标之一。nullHBV进入人体后其包膜蛋白，即HBsAg吸附至易感者肝细胞受体，入胞后脱壳，进入肝细胞核内。HBV-DNA正链在自身DDDP的作用下，先延伸将正链缺口封闭，而形成共价闭合环状DNA，以此为模板，在宿主肝细胞转移录酶，即DNA指导的聚合酶的作用下转录成复制中间体—前基因组RNA，在以此为模板在病毒RDDP作用下饭转录成子代负链DNA。null前基因组RNA模板即被病毒RNA酶H降解。然后在病毒RDDP作用下以子代负链DNA为模板合成正链DNA。该双链DNA环化，即完成HBV基因组的复制。HBV复制时，HBV-DNA可出现在肝细胞和血清中。其中游离4型HBV-DNA是HBV复制和传染性强的指标。为保证cccDNA在肝细胞核内稳定的储存数量，cccDNA必须 不断扩增，每日更新率为48%，以保持肝细胞内感染。nullnull周建良、吴诗品[6]报道，通过检测CHB患者血清HBV基因型和病毒定量，发现不同基因型HBV复制水平有显著差异。C型、混合型HBV-DNA水平高于B型、C型与混合型无显著性差异。提示C型HBV复制能力强。CHB病情严重程度和活动性与病情复制水平呈正相关。C型HBV水平明显高于B型，与B型比较，C型患者易慢性化，病情严重，易发展成为肝硬化或HCC，且对IFN抗病毒应答率低，预后差。HBV基因型是影响HBV复制和感染后临床表现的重要因素之一。nullHBV不同基因型有致病性差异 Lindh[7]等研究显示，基因C型与B型相比，前者与A1989 突变率及第1762-1764位TGA高突变有关。另外，C型携带者 多为HBsAg(+)，且浅C区人为野生型。 Kao[8]等报道，B型、C型为我国台湾地区的主要流 株，其中50岁以上的肝硬化和HCC患者于同年龄组的AsC比较，基因型C在前者中占主要地位；而50岁以下的HCC与AsC比较，B型在前者占主要地位，而在35岁以下的HCC患者中差异更显著（90%为B型）。null1998年范金水等对我国8个城市HBsAg 阳性和阴性HB患者的病毒亚型和基因型用测序法进行分析，HBsAg阳性和阴性HB的HBV基因型均以C型为主，其次为D型、B型，未发现基因E、F或新的基因型。null1）HBV变异的发生 HBV较易发生变异是由于：a HBV的复制由RNA中间体饭转录成负链DNA，反转录是利用病毒本身的DNAP进行的。DNAP缺乏校对酶活性，发生核苷酸替代变异难以修正，造成复制过程中反转录失真。b HBV的ORF有重叠、调节因子也与基因序列重叠，同一核苷酸的错误，可使不同编码蛋白变异。null2）HBV变异类型 a点突变 b缺失 c重复 d插入 e重组 f重排 3）体内HBV变异的分布 不同毒株在体内分布大体相同，血清与肝内的病毒对比，在近90%的病人中较一致；血清和单个核细胞中的HBV感染可相互独立。 4）HBV变异毒株的传播 病毒的传播依赖其外膜蛋白对细胞附着和侵入，稳定的HBV变异株，经体外感染和猩猩实验感染表明仍能复制；但一般变异毒株的病毒蛋白分泌较少在细胞积聚，故一般变异株传染性较弱。null5）HBV变异与临床关系 邱望龙[9]等报道，HBsAg（-）的HBV变异株感染。张景遥[10]等报道拉米夫定（LMV）治疗的患者中，已检出基因变异的HBV毒株，这些HBV变异株在其编码HBV聚合酶的基因中发生了变异，并在体外对LMV不敏感。Lai[11]等报道，发生变异后，部分患者表现为HBV-DNA升高伴肝转氨酶升高，但其升高水平低于治疗前水平。肝组织学与变异前相比未出现恶化。null尽管有人认为HBV及其HBsAg或HBcAg在纤维淤胆性肝炎可能具有直接致肝细胞病变作用，但在大多数情况下，HBV在肝细胞内复制并不引起细胞损伤；HBV抗原诱导的细胞免疫反应是导致肝细胞损伤的决定因素，同时也是病毒被清除的主要途径。这两种截然相反的功能来自同一细胞-CD8T细胞，当病毒抗原多肽被组织相容抗原（MHC-1，即MLA-A，-B，-C）类抗原限制的CD8T细胞识别后，CD8T即获得了通过非致细胞病变性、细胞因子介导的抑制病毒复制而使HBV受染细胞恢复正常能力，null又获得了通过穿孔素—Fas配体（FasL）和IFN-a介导的致死途径而破坏HBV受染细胞的能力。另外，还有自然杀伤细胞（NK）的直接杀伤作用以及抗体依赖性细胞毒性作用（ADCC）也可造成肝细胞损伤。在急性自限性HBV感染者中，针对HBV各种抗原（HBsAg、HBeAg、HBcAg及聚合酶蛋白）表位的Th和CTL反应的典型特征是多克隆、多特异性，且活性强烈。这种反应与血清ALT峰值相一致，且先于HBsAg和HBeAg的清除及HBsAb的产生。相反，尽管个别的、HBV特异性的T细胞克隆从肝活检标本分离出并得，到扩增，但慢性感染者HBV特异性免疫反应弱或检不出。null相反，尽管个别的、HBV特异性的T细胞克隆从肝活检标本分离出并得，，到扩增，但慢性感染者HBV特异性免疫反应弱或检不出。null2）免疫清除机制 在急性HBV感染中多种非特异性和特异性免疫反应被激活，并协同发挥作用以便达到病毒清除的目的。在急性HBV感染过程中，伴随ALT的升高，产生许多HBV蛋白特异性抗体，其中最关键的是HBsAb；同时出现HBcAg、HBeAg和HBsAg多重表位的强烈的CD4T细胞反应。MHC-I类抗原限制的针对HBcAg的强烈CD4T细胞反应可以暂时性从血清中清除HBV，而且通过集中途径可能对最终控制病毒血症具有重要作用。首先，HBV特异性CD4T细胞，尤其是HBcAg特异性CD4T辅助HBsAg特异性B细胞产生HBsAb。null其次，HBV特异性CD4T细胞有助于诱导HBV特异性CTL活化，其动力学变化与CD4T细胞反应相平行。相反，慢性HBV感染者CD4T细胞反应和CTL反应弱，至少在外周血中如此。在病毒清除方面，除了CD4和CD8细胞外，NK细胞也起一定作用。韩永年[12]等曾观察到，CHB患者的NK细胞活性明显低下，随病情的好转NK的活性也随之增高。null1）血源性传播 2）母婴传播 3）父婴传播 4）性接触传播 5）日常密切接触传播 6）医源性传播 7）其他途径传播 11.乙肝疫苗 目前使用的乙肝疫苗是基因疫苗--重组酵母乙肝疫苗和重组CHO乙肝疫苗，其主要成分是乙肝病毒的表面抗原，即一种乙肝病毒外衣壳蛋白，并非完整病毒。这种表面抗原不含有病毒遗传物质，不具备感染性和致病性，但保留了免疫原性，即刺激机体产生保护性抗体的能力。null乙肝表面抗原曾经是从乙肝病毒携带者的血液，经纯化灭活等严格工序制备而来，即血源性疫苗，该疫苗由于安全、来源和成本等原因已被淘汰(如，有引起血源性疾病的嫌疑和浪费大量的血浆)。基因工程乙肝疫苗是采用基因工程技术生产的，即构建含有乙肝表面抗原基因的重组质粒，然后转染相应的宿主细胞，如酵母、CHO细胞，生产乙肝表面抗原蛋白。利用重组酵母生产的叫重组酵母乙肝疫苗，利用CHO细胞生产的叫重组CHO乙肝疫苗，剂量为每支5微克。它们都可以用于预防所有已知亚型的乙肝病毒感，都可以放心选用。nullHBIg是针对HBV的HBsAb，可在血液、细胞外液与粘膜表面与侵入人体的HBV起中和作用，清除病毒，获得保护。HBIg是被动免疫制剂，注射HBIg。,只能暂时的免疫保护。HBIg不能进入肝细胞，只能HBV进入肝细胞之前与血循环中的HBV中和，所以掌握注射的时间极其重要。HBIg可在一定时间内阻止HBV的侵入起保护作用，但这种作用是相对的。也就是说一定量的HBIg可中和一定载量的HBV。null1）控制传染源 a急性乙型病毒性肝炎——进行隔离治疗及登记管理 b慢性HBV携带者（AsC）—如要生育最好在怀孕前进行有效的抗HBV治疗 —AsC不要从事饮食服务、幼教工作及参军 —AsC应节制性生活 —AsC保持愉悦的心态，均衡的营养、充足的睡眠、严禁酒、烟，使新陈代谢平衡、免疫功能协调，增加治愈的能力。null2）切断传播途径 乙型病毒性肝炎可以通过许都不同途径进行传播，切断传播途径是阻断HBV传播的重要环节，只要能完全切断HBV的传播途径，HBV就不能传染给新的易感者。但由于HBV的生物学特异所决定，有的传播途径（如生殖细胞传播）至今尚无有效的阻断措施。乙型病毒性肝炎传播源的血液、泪液、尿液、精液、乳汁、伤口分泌物、阴道分泌物、卵细胞、精细胞等都可能含有HBV，均有可能经消化道以外的多种途径进行传播。null参考文献： [1]李欣华，蒋旦平，武蓉珍，HBV-DNA定量与乙肝血清标志物之间关系讨论[J]临床肝胆病杂志，2003，3：118-119 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