12、鸡胚尿囊绒毛膜移殖

null鸡胚尿囊绒毛膜移植 鸡胚尿囊绒毛膜移植 null 把从正常环境分离的胚胎或其它组织移植到鸡胚的尿囊绒毛膜（CAM）上，使其在尿囊绒毛膜上继续生长和分化，是分析发育的一种研究方法。如 Mary Rawles（1952）把早期胚胎的囊胚层仔细地分成一定部分，放在 CAM上生长，再把移植体制成切片，检查它们的组织来确定移植体中的组织类型，根据实验结果就能把囊胚层各部分发育的潜能编成表。Weiss和Taylor（1960）应用CAM移植法去解答胚胎单个细胞的行为和相互作用。从较大的鸡胚（孵育8-14天）器官中分离出细胞，离心细胞悬液使其聚集成团，然后再移植到CAM上。在CAM上进一步发育以后，把聚集的组织制成切片，发现它们又构成原来器官的组织特点。例如，中肾聚集体发育成正常的肾小管，皮肤聚集体产生羽毛。因此了已进入分化阶段的器官所分null 离的细胞仍然具有一种潜能，能再聚集并再构成正常的组织。发育生物学上还有许多研究涉及到CAM移植，甚至已证实从蛙到人的各种组织都能在鸡的CAM上生长。但是这种技术与体外培养方法相比有些不同，体外培养必须在严格控制的条件下进行，而在CAM移植上，对研究的组织所提供的环境是不能精确确定的，随着胚胎（宿主）发育，胚胎循环中的一些物质如激素会进入CAM上而影响移植体的发育。然而CAM移植技术比体外组织培养技术要容易的多，不需要那么复杂的准备工作。这个胚外位置对研究的组织进一步发育提供了非常有利的环境，胚外液体是合适的“培养基”。如果移植块在CAM上成功生长的话，CAM上的血管将会长入移植体，为它提供氧气和营养物，同时带走代谢废物。 实验步骤 实验步骤 一、宿主的准备 1. 取孵育8-9天的鸡蛋作为宿主。先逐个照蛋，以确定尿囊绒毛膜上血管呈“Y”形的部位。并在蛋壳上作标记。血管交叉点被认为是移植的最好位置。 2. 在蛋的钝端气室处的蛋壳上用解剖针刺一个孔，这样，在切开蛋壳时，尿囊绒毛膜会下降一些，膜的下降有助于防止在后面的操作中受到损伤。用酒精消毒鸡蛋的钝端，把探针插入约0.5cm深。做这一步时，必须小心控制探针，因为要用点力气才能刺穿蛋壳，而这样又很容易穿过气室伸入胚胎。 3. 在蛋壳上原已做了标记的地方，用单面刀片切割一个四方形的“窗口”，用透明胶带封住它和钝端小孔，将鸡蛋暂放回孵育箱。实验步骤实验步骤二、供体准备 1. 供体组织可以从不同胚龄的鸡胚中取得。用早期胚胎（孵育36-48小时）的组织效果会更好，这是因为在发育过程中形态变化会更显著。用孵育72小时或更大胚龄的鸡胚组织，则容易切割供体和移植供体。但是无论是胚龄小或胚龄大的，移植眼睛、或孵育72-84小时鸡胚的肢芽、或孵育5-6天胚胎的背部组织均会得到较好的效果。 2. 供体胚胎在盛有生理盐水的培养皿中切割。先将胚胎与其下方的卵黄囊分离开，然后在供体上用二支解剖针，交叉解剖针，使针尖顶着盘底，象剪子样彼此以相反的方向拉针，将供体组织切开。一个供体能作几个移植体。 3. 留下几个与供体同龄的鸡蛋，不作任何手术，在孵育箱中继续发育，以便与相应的移植组织块作对照。实验步骤实验步骤三、移植组织块 重新打开宿主鸡蛋，集中光源于鸡蛋“窗口”以便能看清尿囊绒毛膜上的“Y”字形区域。用钟表镊子移植供体组织块。把它放在血管交叉点上。也可以用细口吸管移植组织，但是吸管带来的盐溶液会造成组织漂浮而离开选择的位置。如果移植块滑出视线到窗口边缘，或者找不到了，应该移植第二块组织到此位置上。移植好以后尽可能快地重新封好蛋壳，防止鸡蛋温度下降太大和水份蒸发，把它放回孵育箱中。实验步骤实验步骤四、观察实验结果 1. 继续孵育7天后，去掉透明胶带，一片片地剥去蛋壳使“窗口”扩大，仔细观察尿囊绒毛膜上移植体生长的情况。如果移植成功的话，在膜上很容易看到一块较大的组织块，假如没有移植好，通常只能看到一块小小的红棕色或黑色斑点。 2. 把成功的移植块从尿囊绒毛膜上切下来，保存在10%的福尔玛林中。 3. 在解剖镜下仔细检查移植块，绘画每个草图，测量大小，辨认分化的结构，并与孵育箱中未动手术的供体胚胎的相应组织进行对照，比较它们的发育程度和“正常性”。实验观察 实验观察 取不同发育时期的鸡胚照蛋观察 实验观察实验观察直接观察（以孵育48小时的鸡胚发育观察为例） 操作： 1. 取孵育48小时的鸡蛋，轻轻摇动后放在小培养皿中，蛋下垫以棉花或软纸作成的垫圈使之稳固。用镊子尖端在蛋的钝端气室处打一小孔，让空气逸出。这样卵黄就下沉离开蛋壳内表面。然后用镊子从气室开始，慢慢剥去蛋壳，直至卵黄完全暴露为止，然后将卵倒入盛有39-40℃的0.85%生理盐水的小碗内，使胚胎朝上。 2. 用尖头镊子轻轻剥离胚胎上复盖的蛋白，使胚胎暴露。然后用尖锐的尖头剪刀沿胚盘外缘周围剪开，并速以左手执小铲从剪开处插在胚盘下托起，然后再将胚盘完全剪开，胚盘下也要剪一刀，胚盘就可以脱离卵黄，然后将胚盘用小铲移至盛有0.85%生理盐水的小培养皿中。然后取一尖头镊子夹住胚盘边缘，在水中轻轻摆动，吸去胚盘下面的卵黄。这样多洗几次用吸管吸干培养皿内的生理盐水，将胚盘平贴在皿底。 48小时的鸡胚发育观察48小时的鸡胚发育观察将胚盘置解剖镜下进行观察。孵育48小时的鸡胚胚体头部较大躯体已演变成圆柱形，中脑处发生头曲，使头部倾向于右方，稍向后弯曲。脑部已分化成端脑、间脑、中脑、后脑及延髓五部分。眼和耳已形成。视泡位于间脑的两侧，已呈双层视杯构造，外层为网膜层，内层为色素层，晶体也已形成。延髓两侧背方外胚层增厚凹陷形成听泡，因头曲的关系听泡位于视杯同一水平。在耳右方与主动脉球左方之间，前肠二侧壁上具有三对的鳃沟。 胚胎的循环系统已明显。心脏在有规律地跳动，心管弯曲扭成“S”形，心室在左边，前接主动脉球，心房在右边，后接静脉。观察胚胎在胚盘上的血液循环，可见有卵黄静脉和卵黄动脉否？其间分支有无数毛细血管弥散于血管区中并与血窦相连。将解剖镜小心地聚焦于血管上，如胚胎还活的话，辨别血管内血流的方向和速度。血液从胚胎的动脉流出，而由静脉流进，动脉中的血流显得起伏搏动，而静脉血流较为平稳和匀称。 观察胚体的体节数，体节位于脊索的两侧。此时已有几对体节？鸡胚发育的观察鸡胚发育的观察观察其他孵育时期（如7-8天、16-17天等）的鸡胚。同上法将要观察的鸡胚小心从蛋壳中取出置于盛有生理盐水的培养皿中观察之。孵育7-8天的鸡胚左侧卧于卵黄囊上，胚体外被以透明的羊膜，其上覆以具血管丰富的尿囊绒毛膜（注意这三种胎膜如何分辨）。观察卵黄囊是否全部包住卵黄？卵黄之下有淡黄色的浓稠卵白及稀的无色透明卵白。 观察孵育16-17天的鸡胚，注意卵黄囊、尿囊及羊膜的形态有否变化？ 在每期观察胎膜关系后，剪开羊膜，仔细观察胚体外形。注意肢芽的发育，羽毛的形成，身体各部分相互比例的变化。实验准备实验准备1.实验材料： 受精鸡蛋 2.实验仪器： 孵蛋箱、照蛋箱、单面刀片、解剖针、钟表镊子、眼科剪、酒精灯、培养皿、解剖镜、透明胶带。 3.实验药品： 生理盐水，用前温热到孵育温度 70%酒精 脱脂棉实验技术实验技术鸡的个体发生中，许多早期发育如受精及卵裂过程并没有象蛙胚那样观察得如此清楚。困难的原因之一是鸡“卵”结构的特殊性。卵子（通常称卵黄）在排放过程中被雌性生殖道分泌的产物所包围，它包括蛋白或蛋清、壳膜和卵壳。所有这些附属层是在卵受精以后加上去的。卵本身是一个大的多卵黄的细胞，有限的细胞质区在胚盘，其中包含细胞核。卵裂只在胚盘上进行。当鸡蛋产出时，胚胎发育已处于原肠期（原条形成期）。随着温度的降低，发育停止。只有将蛋放到孵育温度下才能继续发育。 孵育孵育孵育是鸡类繁殖采用的方式，它保证了胚胎正常发育必须条件。人工孵育就是运用自然孵育规律，以人工的方法，满足胚胎发育不同时期的生理需要，使之得到良好的孵育效果。1. 孵蛋箱结构及使用方法1. 孵蛋箱结构及使用方法目前国内各地所使用的电热孵蛋箱，虽然各种型号不同，但基本结构原理是相似的，均有加热的电热丝，利用金属热胀冷缩的原理控制电路的通断，以达到调节温度的目的。温度调节旋钮一般装在箱外。箱内设有蛋架、出雏盘、温度计、湿度计、盛水盘和照明灯。有的孵蛋箱装有可调空气流量的通气窗，及调匀温湿度和空气用的电风扇。此外有的孵蛋箱还设有转蛋装置。 孵蛋前几天，将孵蛋箱擦净后，再用来苏尔、或过氧乙酸、或70%酒精消毒灭菌。然后接通电源，打开气窗，转动调温旋钮，将温度调节到37-39℃。再将同1%HCl 浸洗冲净的砂粒放于盛水盘中，加入适量蒸馏水，使箱内湿度达到50-60%的相对湿度。待温湿度稳定2-3天后，即可使用。2. 受精蛋的选择和保存2. 受精蛋的选择和保存为保证较高的孵化率，必须对蛋进行选择。最好选用刚产出一周以内的蛋。蛋的形态要正常。过圆、过长或畸形蛋都会影响孵化率。蛋壳的厚薄要均匀一致。壳上具凹凸不平条纹的蛋，也不宜使用。用照蛋灯检查时，要选气室小，无裂纹，卵白浓稠的蛋。卵黄浮起，卵黄破散，蛋内有黑点或血块的蛋均不能使用。 蛋的保存很重要，蛋产出后最好保存于10℃左右。保存环境相对湿度应为75-85%。湿度低，蛋内水份易蒸发，湿度高，蛋易发霉。温度超过20℃时，受精蛋易自行发育，低于8℃时，蛋的孵化率也受到影响。蛋的保存不宜过长，通常以10天为限，10天以上孵化率可能受影响。3. 孵育前蛋的消毒及升温处理3. 孵育前蛋的消毒及升温处理入孵前将蛋从10℃冰箱中取出，先放在20多度的室温下平衡温度3-4小时，使之逐渐升温，再用温水（30-40℃）浸洗干净蛋壳上的污物。便可按孵蛋框大小或实验要求的数量立即放入孵蛋箱中。每个蛋壳上要用铅笔注明日期，作好。 4. 孵育的日常管理 4. 孵育的日常管理孵育管理是保证鸡胚正常发育的外界条件中的重要环节。外界条件主要指孵育温度、湿度、氧气的供应与转蛋等。氧气的供应，应该随孵育时间而增加，通气窗也应随孵育的进程而开大。孵育的日常管理孵育的日常管理（1）转蛋：鸡蛋孵育时，胚胎浮于卵黄上面，如果不随时转蛋，胚胎易与蛋壳粘连，影响出壳。为了防止粘连，每天需转蛋四次。转蛋角度45-50度。转蛋还可使蛋受热均匀，起调节局部温度的作用。 （2）检蛋：为保证孵育成功，还应该经常检查胚胎发育情况。一般每批蛋要定时检查2-3次，通常在5-6天，10-11天和17-19天。检蛋用照蛋箱，照蛋箱可用自制的长方木盒，内装60-100W的灯泡，在盒的一面挖一略小于蛋径的椭圆形孔。检蛋通常在较暗的条件下，或在晚上进行。检蛋时，将鸡蛋放置孔内，慢慢转动，即可见卵黄上有一小胚胎。 第一次检蛋的目的是检查蛋的受精情况，及时查出不正常和未受精的蛋，以及死胚蛋、散黄卵等。正常蛋发育5-6天时，血管分布如蜘蛛网，颜色发红，卵黄下沉。无受精蛋此时与未孵育蛋一样，蛋中透明，卵黄呈桔黄色，悬于卵白中。散黄卵中，昏暗一片，见不到圆形卵黄投影或卵黄飘悬，呈不规则状，也见不到血管。死胚蛋中，混浊，可见血环、血弧或血点。但无清楚的血管。或胚胎模糊不清，死胚一般不动。发育不正常蛋中，可见胚胎发育迟缓，如弱胚蛋或保存时间过长或保存温度过低的蛋常发育不正常。孵育的日常管理孵育的日常管理第二次检蛋目的是检出中途停止发育的胚胎。正常发育的蛋此时除气室外，卵蛋布满血管，呈均匀黄色。鸡蛋尖端也有血管明显分布。如鸡蛋中出现黑影，并可随人转蛋而转动，周围无血管或血管模糊，蛋白混浊不透明，颜色变暗发黄不呈红色，或胚胎发育明显小于正常，这都说明胚胎已停止发育或已死亡。 第三次检蛋目的是检出不正常发育的蛋，同时为孵化出壳做准备。正常蛋此时气室下缘呈波浪状，鸡胚颈部突入气室，使气室下缘的壳膜忽上忽下闪动。如果胚胎停止发育，则血管模糊不清，近气室部分不象正常蛋为红色，而常变成黄色。如将鸡蛋放于眼皮处无热感，说明胚胎已死。 第三次检蛋后，将蛋的大头向上呈45度倾斜竖放。此后羊膜与尿囊中的液体渐渐减少。鸡胚啄伸向气室。竖放对出壳有利。鸡胚在孵育过程中的发育鸡胚在孵育过程中的发育1. 第1天，鸡胚的雏形隐约可见，最初是消化道、脊索，然后是神经系统，头、眼、血岛开始形成，胚盘长约0.7cm，但验蛋时不易辨认。 2. 第2天，神经管及前、中、后脑形成，心脏形成并开始跳动，血管出现。胚盘长约10cm，验蛋时可见在卵黄阴影中有一小黑点，血管和心跳尚看不出。 3. 第3天，胚胎约长0.55cm，卵黄囊、羊膜和浆膜出现，卵黄囊血管内径大1cm，胚胎的鼻、翼、后肢开始形成，尿囊亦开始出现，验蛋时可见卵黄上有一小黑点及血丝。 4. 第4天，胚胎长0.77cm，卵黄囊血管包围卵黄约达1/3，胚体各器官已基本具备，胚胎形态与哺乳类相似。 5. 第5天，胚胎继续增大，长达1cm，已具有鸟类的外形，头弯向胸部，雌雄分化，尿囊发达，与卵壳膜靠近，验蛋可见心跳，翻蛋可见一透明囊，即为尿囊。 6. 第6天，胚胎长1.38cm，啄形成，卵黄囊血管包围卵黄2/3以上，翅与腿的构造可区别出来，验蛋时可见胚胎有收缩（羊膜的收缩）。 7. 第7天，胚胎长约1.42cm，尿囊急剧增大，与浆膜相贴并愈合，形成尿囊绒毛膜。眼增大，脚上已长出脚趾。 8. 第8天，胚胎长1.5cm，羽毛出现，胚胎的肋骨、肺、胃、肝明显。 9. 第9天，胚胎长2cm，开始角质化，尿囊几乎包围整个胚胎。 鸡胚在孵育过程中的发育鸡胚在孵育过程中的发育10.第10天，胚胎长2.1cm，尿囊绒毛膜在卵的小端合拢，脚趾明显，整个背部、颈部和大腿有羽毛乳头。 11.第11天，胚胎长2.5cm，眼脸几乎达于瞳孔，头部和翅上长出羽毛，腺胃可清楚区别出来。 12.第12天，胚胎长3.57cm，啄上分出鼻孔，全身复有长的绒毛，肾脏开始工作。 13.第13天，胚胎长4.34cm，头上复有绒毛，在眼的周围也长出羽毛芽。 14.第14天，胚胎长4.47cm，完全复有绒毛，胚胎以横着的位置改变为与长轴平行，头向气室。 15.第15天，胚胎长5.83cm，眼瞳盖住眼睛，胫部及脚趾上鳞片形成。 16.第16天，胚胎长6.2cm，头上的冠和肉垂已很明显。 17.第17天，胚胎长6.5cm，啄上的鼻孔已经形成，羊水和尿囊液已开始减少。 18.第18天，胚胎长7.0cm，胫部及脚被鳞片复盖，眼睛睁开，羊水和尿囊液明显地消失，啄已朝向气室。 19.第19天，胚胎长7.3cm，剩余的卵黄，自肚脐处入体腔内，尿囊动脉、静脉退化萎缩，胚胎头向蛋的钝端，啄穿入气室开始呼吸，头夹左右翼下，两腿弯曲朝向头部，以便于破壳时挣扎有力，胚胎头部肌肉特别发达，便于帮助破壳，验蛋时看到壳内胚胎呈黑色，除看到胚动外，还可在气室下看到粗的血管。贴耳细听，有时可听到雏鸡的叫声。 20.第20天，胚胎长80cm，开始破壳，尿囊萎缩，雏鸡可见，在壳内有叫声。 21.第21天，雏鸡孵出。 null第一天： 状区经过24小时的孵育，胚盘变大变厚，明区和暗区同时增大，在卵黄上可见到椭圆形的盾称为胚盾，是未来的胚区。 未受精蛋  种蛋中通常被称为“卵黄”的部分，实际上只是一个细胞，即雌性生殖细胞或卵子。卵黄绝大部分是营养物质，细胞核和大部分细胞质集中为一个不规则的小白点，浮于卵黄上面和卵黄膜的下面，如图中箭头所示。这种蛋虽经孵化但不能发育，称未受精蛋。受精蛋  鸡的卵子在输卵管的漏斗部与精子相遇而受精，受精卵在母体内滞留期间不断分裂，到种蛋产出体外时已分裂成一团细胞，此时为胚胎发育的囊胚期。从正面看囊胚像覆盖在卵黄表面的圆盘，中央为明区，边缘为暗区，通常称为胚盘。null第二天：胚盘已扩展一倍并被红色的血管围成樱桃形或椭圆形，这些血管即胚胎的卵黄囊循环的边缘血管----缘窦。胚盘中心有一变曲的透明体----胚胎，透明体中可见一搏动着的小红点，即原始心脏。 第三天：由孵化的第一天开始，蛋白中的水分通过半透性卵黄膜向卵黄中移动，使卵黄中水分含量大增，新进来的水分并不与卵黄液全仙融合而主要存在于胚区。胚胎与伸展的卵黄囊血管形似蚊子，白壳种蛋通过照视可见蚊状的血管区，俗称“蚊虫珠”。 null第四天： 卵黄体积继续增大，颜色变淡，卵黄囊血管包围卵黄近1/3，由于卵黄液化膨胀的压力，使卵黄囊血管紧贴于内壳膜，可与外界进行气体交换。照蛋时卵黄不易转动，胚与卵黄囊血管形似蜘蛛，俗称“小蜘蛛”。尿囊是一个很小的水泡，眼睛开始沉积黑色素。 第五天：胚胎被包围在一个透明的水泡（羊膜）中，羊膜内充满羊水，胚体弯曲，眼睛黑色素大量沉积。卵黄囊已包围1/2的卵黄，照蛋时可见到眼睛的影子，俗称“单珠”或“黑眼”。肉眼已可见到尿囊，直径6毫米左右。 null第六天：尿囊增长迅速，一天之内增长了约4倍，尿囊血管系统迅速发育，已经覆盖羊膜与部分卵黄，但较卵黄囊血管细；卵黄囊血管分布在卵黄面积达2/3以上。胚体已初具翼和腿的外型，已眼睛黑色素更多，照蛋可见头部与躯干部两个小圆团，俗称“双珠”。 第七天：卵黄体积达到最大程度，以后将逐渐缩小，卵黄囊虽然也增大，仍有1/4卵黄未被覆盖；尿囊比第6天增长约两倍；胎儿的外形已具备禽类的特点，头和眼所占的比例相当大，前后肢分化明显，胎儿的透明度开始降低，胚胎半沉半浮横卧于羊水中。 null第八天： 尿囊较第7天扩大了一倍，几乎包围了卵黄囊。从第4天到第8天是尿囊发育的第一阶段，胚胎由卵黄囊呼吸转化为尿囊呼吸。胎儿外形发育趋于完善，上喙白色，破壳齿明显可见，胸腹腔尚未封闭，心、肝、胃都暴露于体腔外。羊水与尿囊液迅速增多。 第九天：尿囊沿内膜迅速向下端发展，包围了胎儿和卵黄，并包围部分蛋分白。胎儿皮肤透明度下降，皮肤表面出现排列整齐的小点，即羽毛原基。胸腹腔已封闭，心、肝、胃等器官已包入体腔。 null第十天：尿囊在胚胎的背面迅速向下端发展，将蛋白逐渐包围起来。当孵化的第10天结束时，尿囊虽向小端逐渐包围，但尚未合拢。羽毛原基遍及全身，翼和腿部羽毛的尖端已微露。胎儿的位置靠近气室。 第十一天：由于尿囊完全包围了卵黄、胚体和蛋白、尿囊血管已在小端吻合，此时为孵化后的第10天零半天，照蛋检验将这一现象称为“合拢”。从第8天到第11天是尿囊发育的第二阶段。尿囊的合拢与否意义重大，只有合拢完善，才能保证胎儿吞食蛋白。 null第十二天：图中尿囊在蛋白端尚有一小孔未合拢，对于12天的胚胎发育似乎嫌慢。由于个体差异，这种情形并不罕见，鸡胚短羽已遍与爪已角质化。蛋白呈淡黄褐色，粘稠，浆羊膜道形成。 第十三天：将羊膜道是输送蛋白至浆羊膜腔的细长通道。粘稠的蛋白由于尿囊 的包围和收缩，像挤牙膏一样不断进入将羊膜腔，与羊水混合，这种含有蛋白的羊水，称为蛋白羊水，胎儿开始大量吞食蛋白羊水。 null第十四天：尿囊血管充分发育并紧贴壳膜，通过内外壳膜、蛋壳排出二氧化碳和水蒸气，吸进氧气；尿囊液增加，主要集中于羊膜周围，新陈代谢旺盛，胎儿增重迅速06-06-30蛋时尿囊血管很容易破裂。 第十五天：尿囊所包围的蛋白减少，照视胚蛋，小端发亮部位缩小，胚体与卵黄的黑影部分增多。 胎儿的羽毛生长迅速，颈部羽毛长度达12毫米，身体各部羽毛生长整齐，胫、趾鳞片开始形成。 null第十六天：尿囊所包围的蛋白进一小减少，尿囊液颜色变混，有少量尿酸盐积由于吞食白、胚胎代谢产物增多，排泄的尿酸盐贮存在尿囊中。 胎儿体重继续增大，羽毛加长变丰，颈部羽毛长度达15毫米。 第十七天：这是煮熟的全胚，已剥去尿囊。孵化到17天，蛋白基本上向羊膜腔输送完毕，胎儿仍被蛋白的羊水包围。小图中为胎儿的新鲜肌胃，可见到胃内的乳凝块，本是透明的蛋白羊水，被吞食到胃中受到胃酸和消化酶的作用而变成乳凝块。   胎儿由于从蛋白和卵黄中摄取了全价蛋白体重增加，外形和羽毛的发育，与出壳的雏鸡差异不大。从孵化的第12天至17天是尿囊发育的第三阶段，尿囊的合拢导致胎儿可以完全吞食蛋白。照视胚蛋，全部为胎儿和卵黄的黑影，俗称“封闭”。null第十八天： 残存的蛋白羊水被吞食完毕，尿囊液减少，气室增大，尿囊增厚并收缩，整个胚胎较易与蛋壳膜剥离，可见到两面三处尿酸盐沉淀。   由于蛋白利用较好，胎儿的羽毛像缎子一样覆盖在鸡体表面。此后胎儿的营养来源只有一种----卵黄。 null第十九天：气室继续扩大，尿囊液与羊水继续减少，快活酸盐沉积增加，尿囊血管鲜红，表明尿囊仍司呼吸器官的职能。孵化第19天在气室中可见展翅，少数雏鸡的喙已穿破内壳膜而达于气室。可听到雏鸡的鸣叫声。 雏鸡的营养全靠卵黄，部分卵黄已收入腹腔，一旦雏鸡的喙的喙进入气入气室，即开始肺的呼吸，此时雏鸡尿囊和肺的呼吸并存，并逐渐由前者过渡到后者。呼吸量大，代谢热产量大增，通常在这一天“落盘”。null 第二十天：孵化的第20天是最关键的一天。雏鸡由囊呼吸守渡到肺呼吸，剩余部分卵黄收入腹腔，雏鸡蓄积力量，准备出壳。大量啄壳应在第20天初。雏鸡的喙已穿破气室，然后用破壳齿划破外壳膜，再用喙向外顶，使蛋壳06-06-30蛋壳被啄破，雏鸡可直接由外界呼吸，此时尿囊膜开始枯萎，但仍有血管在工作。卵黄大部分收入腹腔，只有少部分露在腹外。破壳后，经过数小时的发育，雏鸡继续移动着头部，不断破坏外壳膜，在蛋上形成一个环状缺口。null第二十一天： 蛋壳被啄破，雏鸡可直接由外界呼吸，此时尿囊膜开始枯萎，但仍有血管在工作。卵黄大部分收入腹腔，只有少部分露在腹外。破壳后，经过数小时的发育，雏鸡继续移动着头部，不断破坏外壳膜，在蛋上形成一个环状缺口。 蛋壳被啄破，雏鸡可直接由外界呼吸，此时尿囊膜开始枯萎，但仍有血管在工作。卵黄大部分收入腹腔，只有少部分露在腹外。破壳后，经过数小时的发育，雏鸡继续移动着头部，不断破坏外壳膜，在蛋上形成一个环状缺口。 在第20天后期，已有雏鸡破壳而出，大批出雏在第21天的上半天。由啄壳到出壳是胚胎发育不可缺少的环节，是重要的生理过程，雏鸡在出壳过程中使呼吸、循环和运动系统得到加强，促进了卵黄的吸收和脐部的收缩。 出雏   刚破壳而出的雏06-06-30羊水浸湿，行动无力，在出雏器良好环境中羽毛干燥膨松，行动积极，鸣叫有力，此时就可以由出雏器内移出。优良种蛋受精率在93%以上，受精蛋孵化率也在93%以上。