琐琐葡萄乙酸乙酯提液和正丁醇提液抑菌作用初步研究

琐琐葡萄乙酸乙酯提液和正丁醇提液抑菌作用初步研究 琐琐葡萄乙酸乙酯提液和正丁醇提液抑菌 作用初步研究 662007,Vo1.28,No.09良晶科学※基础研究 琐琐葡萄乙酸乙酯提液和正丁醇提液 抑菌作用初步研究 艾克白尔?买买提,迪丽拜尔?托乎提,阿不都拉?阿巴斯 (新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046) 摘要:先用95%乙醇浸泡,然后用乙酸乙酯和正丁醇从琐琐葡萄中提 取其活性成分,并探讨了其抑菌作用.结 果表明,琐琐葡萄乙酸乙酯和正丁醇提取物对微生物有明显抑制作 用. 关键词:琐琐葡萄;提取物;抑菌作用 PreliminaryStudyonAntibacterialofEthylacetateandn—ButanolExtractingSolutionfromXinjiangVitisviniferaL AKBARMamat,DILBARTohty,ABDULLAAbbas (CollegeofLifeScienceandTechnology,XinjiangUnive~ity,Ummqi83004 6,China) Abstract:Theethylacetateextractsandthen—butanolextractsfromXinjiangVitisviniferaLwereassayedforantibacterial activityfourkindofbacteria.ResultsshowedthatextractsofXinjiangvmifera Lhasnotableinhibitingmicroorganismactivity. Keys:XinjiiangVitisviniferaL;extracts;antimicrobialactivity 中图分类号:TS201文献标识码:A文章编号:1002—6630(2007)09—0066.03 琐琐葡萄又名SUOSUO葡萄,索索葡萄,豆粒葡 萄.果粒小如胡椒.琐琐葡萄来源是葡萄科(Vitaceae) 葡萄属(Vitisvinifera)植物山葡萄,为无核红葡萄系.琐 琐葡萄可内服,煎汤,捣汁或浸酒,有补气血,强 筋骨,利小便之功效.主治气血虚弱,肺虚咳嗽, 心悸盗汗,风湿痹痛,淋病,浮肿.世界上琐琐葡 萄主要分布在东亚【1I.我国主要产于新疆的吐鲁番, 鄯善和田等地.迄今国内外对琐琐葡萄化学成分的研 究比较少,本研究采用不同提取方法从琐琐葡萄中提 取有效抗菌成分做抑菌实验,不仅有望筛选到具有抗 菌成分的药材新资源,也可获知有效的提取方法.这 对评价琐琐葡萄的药用价值,开发利用这一自然资源 具有实际意义[2-4】. 1材料与方法 1.1材料 1.1.1样品 琐琐葡萄2005年9月采于采自新疆鄯善,经新疆大 学植物教研室阿不都拉?阿巴斯教授鉴定.将全草晾 干,粉碎,备用. 1.1.2菌种 大肠肝菌(Escherichiacoli,E.C),金黄色葡萄球 菌(Staphylococcusaureus,S.a),枯草杆菌(Bacillus subtilis,B.)和短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus,B.P), 新疆维吾尔自治区药检所药理室. 1.1.3培养基 牛肉膏蛋白胨培养基【5】. 1.1_4试剂 牛肉膏,蛋白胨,琼脂,NaCl,蔗糖,葡萄糖, NaOH,HC1,乙醇. 1.1.5仪器 超净工作台,手提式灭菌锅,恒温控制箱旋转蒸 发仪,分液漏斗,冰箱等. 1.2方法 1.2.1琐琐葡萄提取液的制备[6_?o】 1.2.2菌悬液的制备[111 将各供试菌菌种接种于普通营养琼脂培养基斜面 上,37?培养20~22h活化,再将斜面活化好的各供试 菌体置于装有9ml无菌生理盐水的试管中,振荡摇匀, 分别稀释制成含菌量为10—2,10一CFu,m1的菌悬液. 1.3抑菌实验 收稿日期:2007.06.20通讯作者 作者简介:艾克白尔?买买提(1981.),男,硕士研究生,主要从事资源植物研究. ※基础研究茛晶科学2007,Vo1.28,No.0967 称取样品500g l 加1O倍样量的乙醇提取溶剂500Oral l 过滤 l 滤液 l 旋转蒸发浓缩 l 加石油醚除去色素 l 用乙醚得到乙醚提取物 l 用乙酸乙酯得到乙酸乙酯提取物然后旋转蒸发浓缩至粘着状 I 用正丁醇得到正丁醇提取物然后旋转蒸发浓缩至粘着状 l 用水溶解并定容于lOml而成水悬浊液 1 分别获得乙酸乙酯提取液,正丁醇提取液 图1乙酸乙酯提液与正丁醇提液的制备流程 Fig.1Preparationprocessofethylacetateandn-butanol extractingsolutFon 1.3.1抑菌效力的测定【2】 将灭菌过的培养基制成平板,吸取0.2ml菌悬液均 匀涂抹到平板上.将各浸渍过琐琐葡萄乙酸乙酯提液和 正丁醇提液中的滤纸圆片(6mm)风干,放到每个涂有菌 液的平板上,等距离放三片,每个试验平行三次,并 用无菌水作空白对照,确定抑菌效果.在37?下培养 24h后测定抑菌圈直径大小,取平均值. 1.3-2最低抑菌浓度(MIC)的测定 配置足够量的牛肉膏蛋白胨固体培养基,121?湿 热灭菌,制成平板,置于0,4?下冷藏备用.以提取 备正丁醇提取物0.8g,用50ml蒸馏水配成0.16g/ml提取 液,10ml取该溶液加入到40ml有蒸馏水的试管中,配 成不同浓度的琐琐葡萄正丁醇提取液.以提取备乙酸乙 酯提取0.5g,用50ml蒸馏水配成0.1g/ml提取液,10ml 该溶液加入到40ml有蒸馏水的试管中,配成不同浓度的 琐琐葡萄乙酸乙酯提取液.吸取0.2ml菌悬液均匀涂抹到 平板上.将各浸渍过不同浓度的琐琐葡萄乙酸乙酯提液 和正丁醇提液中的滤纸圆片(6mm)风干,放到每个涂有菌 液的平板上,等距离放三片,每个试验平行三次,并 用无菌水作空白对照,确定抑菌效果.每个浓度做三个 重复,置适宜温度下培养(36+1)?,24h.观察实验结 果.以能抑制细菌生长的最低添加量为该提取物的最低 抑菌浓度(MIC).无菌生长的最低浓度即为提取物的最低 抑菌浓度(MIC).以上操作均在无菌条件下进行. 2结果与分析 2.1琐琐葡萄乙酸乙酯取液,正丁醇提取液对各供试 菌的影响 表1两种提取液的抑菌作用 Table1Bacteriostaticactivityoftwokindsofextra~s 由表1中结果可知,两种提取物原液对四种供试菌 的生长均有很强的抑制作用.琐琐葡萄乙酸乙酯提液对 大肠杆菌的抗菌作用稍弱之外,对其余菌具有比较强的 抗菌作用,尤其对枯草杆菌的抗菌作用更明显. 琐琐葡萄正丁醇提液对四种细菌均有很强抗菌作 用,尤其对大肠肝菌的抗菌和短小芽孢杆菌作用更明 显.其对金黄色葡萄球菌的抑菌作用比对其他菌种的抑 菌作用相比也较弱. 2.2琐琐葡萄正丁醇提液与琐琐葡萄乙酸乙酯提液对各 供试菌的最低抑菌浓度(MIC) 表2琐琐葡萄正丁醇提液对各供试菌的最低抑菌浓度(MIC) Table2MIC0fn-butanoIextractsondifferentbacteria 注:一表示无菌生长,+表示少量菌生长,++表示菌大量生长. 表3琐琐葡萄乙酸乙酯提液对各供试菌的最低抑菌浓度(MIC) Table3MICofethylacetateextractsondifferentbacteda 由表2可知,琐琐葡萄正丁醇提液物对四种供试细 菌的最低抑菌浓度分别为:大肠杆菌,金黄色葡萄球 菌为0.O0128g,枯草杆菌为0.0064g,短小芽孢杆菌为 0.032g.表3表明,琐琐葡萄乙酸乙酯提液物对各供试 细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌为0.02g,金黄色 葡萄球菌为0.O008g,枯草杆菌为0.004g,短小芽孢杆 菌为0.02g. 3结论 琐琐葡萄乙酸乙酯取液,正丁醇提取液都具有不同 682007,Vo1.28,No.09良晶科学※基础研究 基于量子化学计算的I3}一胡萝卜素溶解性能的 QSPR研究 张爱.-2,赵波-一,王正武2 (1.南京师范大学化学与环境科学学院,江苏南京210097; 2.上海交通大学农学院食品科学与工程系陆伯勋食品安全研究中心,上海201101) 摘要:应用DFT.B3LYP/6.31G*方法计算所得的14种常用溶剂分子结构单元的物性参数,对13.胡萝卜素溶解 性能做定量结构性质(QSPR)研究.采用多元线性回归法建立QSPR预测模型,其复相关系数R2=0.933,标准偏 差SD=0.316.模型所得的计算值与实验值的相关系数R=0.980,标准偏差SD=0.241.研究表明,影响13.胡萝 卜素溶解性能的因素主要有平均分子极化率o【,分子摩尔体积v,分子中最正氢原子静电荷qH+,分子摩尔质 量M等参数.用这些量子化学参数所建立的QSPR模型能对未知溶剂做简单快速的预测. 关键词:量子化学计算;QSPR;13一胡萝卜素;溶解度 QuantitativeStructure—PropertyRelationshipStudyonSolubilityofB—Caroteneon BasisofQuantumChemistryCalculation ZHANGAi一,ZHAOBo一,WANGZheng—WU (1.CollegeofChemistryandEnvironmentalScience,NanjingNormalUnive rsity,Nanjing210097,China;2.BorLuhFood SafetyCenter,DepartmentofFoodScienceandTechnology,ShanghaiJiaoTo ngUniversity,Shanghai201101,China) Abstract:ThedensityfunctionaltheorymethodattheB3LYP/6—31Glevelw erecarriedoutforcalculatingthe 收稿日期:2007.08.05通讯作者 基金项目:国家自然科学基金项目(20676051;20573048);上海交通大学重点建设资助项目(A类,AE150085) 作者简介:张爱(1982.),女,硕士研究生,研究方向为功能食品. 程度的抑菌活性,对球菌和杆菌,革兰氏阳性和阴性 都有抑菌活性,琐琐葡萄正丁醇提液与乙酸乙酯提液 抑菌效果的差异不大.这说明乙酸乙酯像正丁醇一样 将植物体内有效抑菌物质提取出来.正丁醇提液浓度 在0.00128g时对所有供试菌种均有抑制作用,乙酸乙酯 取液提液则要0.0008g.实验证明琐琐葡萄对几种造成食 品腐败的微生物具有一定的抗性,为其在这方面的开发 利用提供一定的理论依据.但对于其抗菌活性物质还有 待进一步的研究. 参考文献: 【1】董方言,弥宏,陈颖,等.中药微量元素研究进展【世界元素医学, 1998,5(3):20. 【2】刘勇民.维吾尔药志:D.乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1999: 150-155. 【3】周晓英’田树革,孙莲.等.维吾尔药琐琐葡萄中无机元素含量测定 及紫外光谱分析【中国发族医药杂志,2004(2):26-27. 中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册【M】.乌鲁木齐:新 疆 科技卫生出版社.1999:88. 沈萍,范秀容,李广武.微生物学实验【M】.3版.北京:高等教育出版 社.1999:214-215. 霍光华.高荫榆,陈明辉.乌柏叶抑菌活性功能成分的研究【食品 与发酵工业,2005,31(3):52.56. 王晓文.丛嫒嫒.堵年生,等.维吾尔药琐琐葡萄化学成分研究【 新疆医科大学,2003(6):579. 堵年生,丛嫒嫒,王晓文,等.维吾尔药琐琐葡萄的生药学鉴定【 新疆医科大学,2003(6):581. DOI?Er_BREl?,A-C,JEANDETP,ADRIANM,cta1.Changes inthephytoalexincontentofvariousviasspp.inmsponsetoultraviolet elicitation[J].JAgdcFoodChem,1999,47(10):44564461. TEGUOPW,FAUCONNEAUB,PEFFmUXG,cta1.Isolafion, identification,andantioxidantaz~ivityofthreestilbeaegluco~newly ~,XIIIlO~fromV/asv/n0~racellcultures[J].NatProd,1998.61:655?657. 严赞开.生姜提取物的抑菌试验【J】.中国食品添加剂,2005(1):74-76. 赵东亮,郁建平,周晓秋,等.博落回生物碱的抑菌作用研究【食 品科学,2005,26(1):45-47. 阿嗍?m