【精品文档】高效液相色谱法测定参杞益脑胶囊中Β-细辛醚的含量药学论文_医药学论文_23874

【精品文档】高效液相色谱法测定参杞益脑胶囊中Β-细辛醚的含量药学论文_医药学论文_23874 　 论文范文 　 　 题目:高效液相色谱法测定参杞益脑胶 囊中β-细辛醚的含量药学论文_医药学 论文 　 编辑:小小 　 　 【摘要】 　　目的建立了参杞益脑胶囊中β-细辛醚的高效液相色 谱含量测定方法。方法色谱柱为Thermo BDS Hypersil C18 (250 mm×4.6 mm～5 μm),流动相为甲醇-0.1,冰醋酸溶液 ,60?40,,柱温35 ?,流速1.0 ml?min-1,检测波长为257 nm。结果β-细辛醚浓度在4.885 ， 146.55 μg/ml之间峰面积与 浓度具有良好的线性关系。其高、中、低3种浓度的平均回收率分 别为103.2,～102.1,和100.2,,RSD分别为0.4,～0.3,和 0.7,。结论方法简便灵敏～结果准确可靠～专属性强～可用于参杞 益脑胶囊中石菖蒲的质量控制。 【关键词】 参杞益脑胶囊 β-细辛醚 石菖蒲 高效液相色谱法 　　Abstract:ObjectiveTo establish a high performance liquid chromatographic method for the determination of β-asarone in Shenqiyinao Capsules. MethodsThe column was Thermo BDS Hypersil C18 (250 mm×4.6 mm～5 μm). The mobile phase was methanol - 0.1% glacial acetic acid solution (60?40) and the temperature of column was 35 ?. The flow rate was 1.0 ml?min-1 and the detection wavelength was 257 nm with external method. ResultsThe linear range of β-asarone was 4.885 ， 146.55 μg?ml-1. The average recoveries of β-asarone were 103.2%, 102.1% and 100.2% with corresponding RSD of 0.4%, 0.3% and 0.7%,respectivery. ConclusionThe method is simple, sensitive, accurate and can be used for the determination of Rhizoma Acori Tatarinowii (RAT) in Shenqiyinao Capsules. 　　Key words:Shenqiyinao Capsules, β-asarone, Rhizoma Acori Tatarinowii (RAT), HPLC 　　参杞益脑胶囊具有补益肝肾～益气养血～健脑益智等功能～适 用于肝肾不足～脑神失养所致的健忘～失眠～多梦～记忆力减退等 症。其处方来源于国家药品监督管理局～由枸杞子、黄精、白 首乌、石菖蒲、猪脑粉、荷梗、肉苁蓉、郁金、远志(蜜)、骨碎补、 紫苏子(炒)、人参、鹿茸等13味中药组成。现行质量标准中未收载 含量测定项目～目前仅有报道测定参杞益脑胶囊中毛蕊花糖苷的含 量作为肉苁蓉的质量控制,1,。石菖蒲具有化湿开胃～开窍豁痰～ 醒神益脑的功能,2,～为其主药之一。而β-细辛醚为石菖蒲的主 要活性成分之一,3,～其在市售的石菖蒲挥发油中的含量占 83.75,,4,。本实验采用高效液相色谱法测定参杞益脑胶囊中 β,细辛醚的含量～为参杞益脑胶囊中石菖蒲的含量提供了质量控 制方法。 　　1 仪器与试药 　　Agilent 1100 高效液相色谱仪～配置G1311A 四元泵,G1313A 自动进样器,G1316A 柱温箱,G1315B 二极管阵列(DAD)检测器, Agilent 化学工作站,Elmasonic S 300H 型超声波清洗器,功率1 500 W,。 　　甲醇为色谱纯～水为超纯水～其它试剂均为分析纯。β-细辛醚 对照品,广州中医药大学第一附属医院实验中心～按面积归一化法 测定～含量为98.94,,。参杞益脑胶囊,批号: 20060701～20060702～20060703～20060704～20060705～20060801 ～20060802～20060803～20060804～20060805 深圳万基药业有限公 司生产并提供,,不含石菖蒲的阴性样品,深圳万基药业有限公司 生产并提供,。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 色谱柱: Thermo BDS Hypersil C18 (250 mm×4.6 mm～5 μm),流动相:甲醇-0.1,冰醋酸溶液,60?40,,柱温:35 ?,流速1.0 ml?min-1,检测波长为257 nm～进样体积20 μl。在上述色谱条件下β-细辛醚与其它组分能达到基线分离～色谱峰的理论板数为3139～并且石菖蒲阴性样品无干扰～色谱图见图1，3。 　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取β-细辛醚对照品适量～加甲醇制成每毫升含 β-细辛醚35μg的溶液～摇匀～即得。　　2.3 供试品溶液的制备 取本品20粒～求得平均装量～将内容物混合均匀～取本品内容物约0.5 g～精密称定～置50 ml量瓶中～加甲醇约30 ml～超声处理30 min～放冷～用甲醇稀释至刻度～摇匀～滤过～取续滤液～即得。 　　图1 供试品溶液色谱图,N=3 139～R,2.42,,略,　　图2 β-细辛醚对照品溶液色谱图,略, 　　图3 石菖蒲阴性样品溶液色谱图,略, 　　2.4 线性关系考察 精密称取β-细辛醚对照品19.54 mg～置20 ml量瓶中～加甲醇溶解并稀释至刻度～摇匀。精密量取 3～3～2～2～2～1 ml分别置20～25～20～50～100～200 ml量瓶中～加甲醇稀释至刻度～摇匀～分别取20 μl按“2.1”项下色谱条件注入液相色谱仪～以峰面积Y为纵坐标～对照品浓度X (μg/ml)为横坐标～进行线性回归。回归方程为: 　　Y=46.242 4X-42.458 8,r,0.999 9 　　明β-细辛醚在4.885，146.55 μg?ml-1浓度范围内具有良好的线性关系。 　　2.5 重复性实验 取同一批参杞益脑胶囊样品～按“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备6份供试品溶液～按上述色谱条件测定～结果RSD为2.2,～结果表明本法重复性良好。 　　2.6 精密度实验 精密吸取上述供试品溶液20 μl～连续进样6次～按上述色谱条件测定β-细辛醚峰面积～RSD为0.5,。　　2.7 稳定性实验 取1份供试品溶液～分别于 0～2～4～6～8～10 h进样20 μl～按上述色谱条件测定β-细辛醚的含量～RSD为0.6%～结果表明供试品溶液在10 h内稳定。 　　2.8 回收率实验 精密称取已测定含量的样品(批号20060805,含β-细辛醚1.57 mg/粒) 9份 (每种浓度3份～低浓度约0.15 g～中浓度约0.25 g～高浓度约0.70 g)～置50 ml量瓶中～分别精密加入β-细辛醚对照品溶液,0.249 6 mg?ml-1,3～5～15 ml～每种加入量平行操作3份～按“2.3”项下供试品溶液的制备方法～自“加甲醇约30 ml……”操作～各进样20 μl～色谱图～计算回收率。其高、中、低3种浓度的平均回收率分别为 103.2,～102.1,和100.2,,RSD分别为0.4,～0.3,和0.7,。 结果见表1。 　　2.9 样品含量测定 取不同批号的样品～分别按“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备～测定含量。结果见表2。 　　表1 回收率实验结果,略, 　　表2 样品中β-细辛醚的含量测定,略, 　　*为每粒中含量 　　3 讨论 　　3.1 检测波长的选择 采用二极管阵列检测器～在200，400 nm波长范围内检测 β-细辛醚在流动相中的紫外吸收图谱及参考相关文献,5,～选择257 nm为检测波长。 　　3.2 流动相的选择 考察了不同比例的甲醇-水、乙腈-水及甲醇-0.1,冰醋酸溶液等作为流动相体系～以甲醇-0.1,冰醋酸溶液(60?40)为流动相时效果最好～供试品溶液中β-细辛醚能与其它组分获得基线分离～且主峰符合要求。 　　3.3 耐用性实验 考察不同厂牌的HPLC仪:Agilent 1100 高效液相色谱仪、岛津LC-2010A高效液相色谱仪,不同厂牌的色谱柱:Thermo BDS Hypersil C18柱～Luna C18柱和LiChrospherR100 RP-18e C18柱～由不同的实验者进行实验～也可得到满意的色谱图～表明本法的耐用性好。 　　致谢:广州中医药大学第一附属医院实验中心的柯雪红老师为 本实验研究提供了β-细辛醚对照品～在此表示感谢:【参考文献】 　　,1, 邬晓鸥, 熊 英, 肖丽和. 参杞益脑胶囊中毛蕊花糖苷的HPLC分析,J,.中成药, 2004, 26 (6): 458. 　　,2, 国家药典委员会. 中国药典～?部,S,.北京:化学工业出版社, 2005:62. 　　,3, 胡锦官, 顾 健, 王志旺. 石菖蒲及其有效成分对学习记忆的实验研究,J,.中药材, 1999, 22 (11): 584.　　,4, 刘春海, 刘西京, 杨华生. 石菖蒲挥发油的GC-MS分析,J,.中医药学刊, 2006, 24 (7): 1280. 　　,5, 柯雪红～魏 刚～方永奇. HPLC测定石菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量,J,.中成药～2002～24(10):791.转贴于