果蔬中维生素C的提取和定量测定

果蔬中维生素C的提取和定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法) 果蔬中维生素C的提取和定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法) 【实验目的】   1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法.   2.了解蔬菜,水果中维生素C含量情况. 【实验原理】   维生素C具有很强的还原性.还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚(DCIP),本身则氧化为脱氢型.在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,还原后变为无色.因此,当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时,维生素C尚未全部被氧化前,则滴下的染料立即被还原成无色.一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时,则滴下的染料立即使溶液变成粉红色.所以,当溶液从无色变成微红色时即示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化,此时即为滴定终点.如无其它杂质干扰,样品提取液所还原的染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比. 【仪器和试剂】 一,试剂   2%草酸溶液，1%草酸溶液，0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液（每次临用时,以标准抗坏血酸溶液标定）. 二,材料:水果,蔬菜 三,仪器 烧杯，玻棒，吸量管，长颈漏斗，漏斗架，白纱布，滤纸，容量瓶，滴定管, 锥形瓶. 【操作方法】 一、标准溶液标定 1.        配制标准抗坏血酸溶液(1mg/mL)  准确称取100mg纯抗坏血酸(应为洁白色,如变为黄色则不能用)溶于1%草酸溶液中,并稀释至100mL,贮于棕色瓶中,冷藏.最好临用前配制。 2.        标准溶液标定  准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置250mL锥形瓶中,加9mL 1%草酸,以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色,并保持15秒不褪色,即达终点.由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸（以T表示）。 3.        取10mL 1%草酸作空白对照,按以上方法滴定。 二、样品测定 1．果蔬中Vc的提取与测定：水洗干净待测的新鲜蔬菜或水果,吸干表面水分.称取20g,置于200mL烧杯中，加入30mL 2%草酸,研磨成浆状,以四层纱布过滤至100mL小烧杯中，再以快速滤纸过滤至锥形瓶中。然后以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色,并保持15秒不褪色,即达终点。计算100g果蔬中含抗坏血酸mg数。 2．取10mL 1%草酸作空白对照,按以上方法滴定。 【结果计算】 维生素C含量(mg/100g样品) = (Va-Vb)×T×5 / ms 式中: Va 为滴定样品所耗用的染料的毫升数;      Vb为滴定空白对照所耗用的染料的毫升数;      T  为1mL染料能氧化抗坏血酸毫克数(由操作方法一.2计算出);      ms 为新鲜待测样品的质量(g). 【思考】1.为了测得准确的维生素C含量,实验过程中都应注意哪些操作步骤 为什么？          2.试简述维生素C的生理意义.