硒对蛹虫草生长发育的影响

! ! 辽宁大学学报 ! ! ! 自然科学版 第 "# 卷! 第 $ 期! #%%& 年 !"#$%&’ "( ’)&"%)%* #%)+,$-)./ ! ! ! ! ! %012304 -5678579 ,:616;8 ! ! ! ! ! ! ’()* "#! +(* $! #%%& 硒对蛹虫草生长发育的影响 铁! 梅$，!杨淑琴$，娄! 虹$，陈长兰$，臧树良$，李华为# （$*辽宁大学 环境科学系，辽宁 沈阳 $$%%",；#*沈阳师范大学 化学与生命科学学院，辽宁 沈阳 $$%%"-） 摘! 要：以蛹虫草作为富集硒的载体，用不同浓度的含硒培养基分别对蛹虫草的子实体进行培养，以研究 蛹虫草的耐硒能力*结果表明：采用固体培养基培养蛹虫草子实体，在含硒 %* & . #% /0 1 20 的固体培养基 上，菌丝均能生长；在含硒 %* & . &* % /0 1 20范围内，子实体生长速度较其他浓度明显提高；在含硒 $%* % . #%* % /0 1 20范围内，子实体生长受到抑制；在含硒 "% /0 1 20以上的培养基上，菌丝不能生长* 关键词：富硒；蛹虫草；培养 * 中图分类号：34"4* 4! ! 文献标识码：5! ! 文章编号：$%%%6&7-,（#%%&）%$6%%#&6%" ! ! 硒（89）是目前已知的 $- 种人体必需的微量 元素之一，被科学家誉为“生命的火种”、“抗癌之 王”［$］*硒有许多重要的生理功能［#］，其中最重要 的是硒在人体和动物机体中以硒代半胱氨酸（896 :;<）的形式参与构成谷胱甘肽过氧化物酶（=8> ? @A），从而清除体内过多的活性氧自由基；外源 硒可诱导 =8> ? @A的活性增加*当机体处于缺硒 状态时，=8> ? @A 活性降低，引起脂质自由基和 过氧化物的积累，导致细胞膜破坏、组织损伤*研 究发现，在一定硒浓度范围内，硒的含量与 =8> ? @A活性呈正相关性* 中国营养学会对部分城市所作的营养调查报 告表明，我国成人摄硒量还不足 #B !0 1 C［"］我国 大部分地区属于缺硒地区，仅靠天然食物中的硒 不足以满足人体的正常需要* 据硒盐的毒理分析 表明，无机硒均为剧毒，且不易被人体吸收；有机 硒化合物毒性远低于无机硒化合物，且生物利用 率高［-］*通过人工方法将无机硒转化成有机硒， 具有普遍的食用和保健价值*因此，寻找和开发高 效安全的补硒食品势在必行* 冬虫夏草是某种真菌寄生于高山蝙蝠蛾幼虫 体内，真菌菌丝体在幼虫体内生长繁殖后，占据整 个虫体，形成僵虫，于 & 月 . , 月份由虫体的头部 长出子座，形成子囊孢子［&］* 冬虫夏草是中华医 药宝库中一支后起之秀，它与人参、鹿茸并列为 " 大名贵药材，具有广泛的药理活性，可以药食两 用［,，B］* 目前蛹虫草的人工栽培已取得成功，大量的 药理和化学分析证实，蛹虫草和天然的冬虫夏草 成分和药理基本相同，某些功能成分含量甚至高 于冬虫夏草［7］* 本文以蛹虫草为富硒载体，通过 大量的栽培实验对蛹虫草的富硒和耐硒能力进行 了研究，同时将无机硒在蛹虫草体内，通过菌丝细 胞内物质的代谢，结合到大分子活性物质（如多 糖和蛋白质）上，转化为有机硒多糖和硒蛋白*从 而发挥了硒和虫草固有的以及协同的生理作用， 使其具有无毒安全高效的生理活性，为开发天然 的富硒虫草提供科学的理论依据* $! 实验部分 $* $! 实验 $* $* $! 仪器设备 >D3 ? E 恒温振荡器；高压灭菌锅；FD ? 7B& 医用净化工作台；电子分析天平* ! 作者简介：铁! 梅（$4,-6），女，江苏如东县人，辽宁大学副教授，从事环境化学研究* ! 收稿日期：#%%-6$$6$7万方数据 !" !" #$ 实验菌种 沈阳农业大学食用菌研究所蛹虫草菌一级 种" !" !" % 实验药品 分析纯亚硒酸钠 &’#()*%·+,#*；硫酸镁 -.(*/·0,#*；磷酸氢二钾 1#,2*/；蛋白胨；维 生素 3!；白糖；马铃薯；大米" !" #$ 富硒蛹虫草子实体的培养 !" #" !$ 培养基的制备 按一定配比称取 1#,2*/、-.(*/、43!以及糖 适量溶解于一定量的自来水中，调节 5,值至 0" 6 7 0" #"将营养液平均分装大烧杯中"分别向各 烧杯加入一定量的 &’#()*%·+,#*，配成含硒浓 度分别为 6" +，!" 6，+" 6，!6，#6，%6，/6，+6，86，06， 96，:6，!66 ;. < = 的含硒营养液" 取干净的罐头 瓶，每瓶加入 %6 .大米和 %6 ;=不同浓度的含硒 培养液，用聚乙烯膜将瓶口封好，放入高压灭菌锅 中，在 6" ! -2’时灭菌 %6 ;>?"自然降压后冷却至 室温" !" #" #$ 接种与培养 将灭菌冷却后的培养基放入无菌室中，用紫 外线照射 %6 ;>?后，以无菌操作方式接入蛹虫草 菌一级种" 将接种后的培养基在温度为 !0 7 !9 @；湿度为 86A 7 06A的条件下进行培养观察" 记录发菌天数及菌丝生长状况" #$ 结果与讨论 表 !$ 不同硒浓度培养基中子实体生长情况比较 硒浓度：;. < = 硒浓度 6 6" + !" 6 +" 6 !6" 6 #6" 6 %6 7 !66 !+ B 菌丝布满瓶底 菌丝布满瓶底 菌丝布满瓶底 菌丝布满瓶底 菌丝略有生长 菌丝略有生长 菌丝不生长 %6 B 出菇高 # 7 /C; 出菇高 # 7 /C; 出菇高 # 7 /C; 出菇高 # 7 /C; 菌丝覆盖面 积增大 菌丝覆盖面 积增大 菌丝不生长 +8 B 株高 / 7 :C; 株高 / 7 :C; 株高 / 7 :C; 株高 / 7 :C; 菌丝基本布 满瓶底 菌丝基本布 满瓶底 菌丝不生长 08 B ——— ——— ——— ——— 出菇高 # 7 %C; 出菇高 # 7 %C; 菌丝不生长 $ $ 由表 ! 试验结果所示，培养基中施加不同浓 度的硒，对其子实体的生长影响各不相同"在含硒 浓度为 6" +，!" 6 和 +" 6 ;. < = 的培养基中菌丝生 长与对照组基本相同，!+ B 即长满橙黄色浓密菌 丝，%6 B出菇整齐，子实体呈棒状，头部略尖；其 中含硒 + ;. < =的样品中个别子实体生长速度略 高于其他浓度，说明硒浓度小于 + ;. < =时适宜子 实体生长" 而在含硒浓度为 !6" 6 7 #6" 6 ;. < =的培养基 中菌丝和子实体的颜色仍为橙黄色，但生长速度 却明显降低，培养近 08 B才出菇，且株高长至 # 7 % C;后无法继续生长，即将出现自溶现象"可见， 此浓度已对蛹虫草的生长产生抑制作用" 当硒浓度高于 %6 ;. < = 时，培养基中菌丝均 未生长，可知当硒浓度高于 %6 ;. < = 时菌丝无法 生长" 参 考 文 献 ： ［!］$ 王淑荣" 硒与人体健康［ D］" 渭南师范学院学报， #66%，!9（#）：+9 E 86" ［#］$ 李以暖，薛立文" 富硒保健食品硒含量的探讨 ［D］"广东微量元素科学，#666，0（+）：!0 E #!" ［%］$ 陈历程，杨方美，胡秋辉，等" 南京市主要食物含硒 量分析及居民硒营养水平［ D］" 食品科学， #666，#!（!!）：+8 E +9" ［/］$ 朱明军，吴海珍，梁世中，等" 富硒小球藻食品的开 发［D］"郑州粮食学院学报，!:::，#6（%）：00 E 96" ［+］$ 曾中平"名贵微生物培养加工利用技术［-］"北京： 中国人事出版社，!::/" :! E :/" ［8］$ 李志超，杨姗姗"食药用菌生产与消费指南［-］"北 京：中国农业出版社，!::0" !9: E #:+" ［0］$ 吴友良，贡成良" 关于虫草的药用成分和药理作用 的研究［D］"常熟高专学报，#66%，!0（#）：8+ E 8:" ［9］$ 余晓斌，罗长才，缪静" 5, 值对冬虫夏草深层发酵 8# 辽宁大学学报$ $ 自然科学版$ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ $ #66+ 年$ $ $ $ $ $ 万方数据 的影响［ !］" 食品与发酵工业，#$$%，#&（%）：&’ ( )$$" ［&］* 朱爱民" 硒的营养及应用［ !］" 中国饲料，)&&+， （)’）：#$ ( ##" ［)$］* 马玉龙" 微量元素硒的研究进展［ !］" 饲料博览， )&&&，))（))）：)# ( )%" ［))］* 王* 俊，黄* 明，徐幸莲，等"硒及富硒功能食品研 究进展［!］"江苏农业科学，#$$%，（#）：,% ( ,-" ［)#］* ./012 34" 567689/: 98 ;<97; 28= >?<0;，91; =6@9>968A >96; 98 79B6;1<>C 28= D/:28;，9:079>219<8; @9 F7281 G827，#$$$，%)： )+&) ( )’$+" ［)%］* 孙琪，王万群"冬虫夏草的真伪与栽培［ !］"中国食 用菌，#$$#，#)（#）：#H ( #-" ［)H］* 罗信昌"冬虫夏草研究进展［!］"中国食用菌，)&&H （H）：% ( ," ［),］* 龙肇新" 冬虫夏草的研究与利用［ !］" 昆虫天敌， )&&#，（#）：&- ( )$$" ［)-］* 郭宏春，高继全，习欠云，等"蛹虫草研究进展［ !］" 微生物学杂志，#$$%，#%（)）：,$ ( ,," ［)+］* 王新风" 富硒食用菌栽培技术［ !］" 中国食用菌， #$$#，#)（%）：)% ( )," !"# $%%#&’ (% )#*#+,-. ’( ’"# /0(1’" (% !"#$%&’() *+,+-.#+) /+01 IJK L69)，MGN. 5D/AO98)，PQ3 R<8E)， SGN. 5D/A7928E)，PJ R/2AT69# （)! "#$%&’#()#*+, -.%)#.) /)0+&*()#* ’1 2%+’#%#3 4#%$)&5%*6，-7)#6+#3 ))$$%-，87%#+； #! 8’,,)3) ’1 "#$%&’#()#*+, +#9 2%1) -.%)#.)5 ， -7)#6+#3 :’&(+, 4#%$)&5%*6，-7)#6+#3 ))$$%H，87%#+） !"#$%&’$：* ID9; 6U06?9:681 ?6E2?=; .’&96.)05 (%,%*+&%5 ,%#; 2; ?6;62?>D 1，>/71/?98E @?/91 B<=W <@ .’&96.)05 (%,%*+&%5 ,%#; T91D 1D6 :6=9/: =9@@6?681 ><81681 ;67689/: ，1< ;1/=W 1D6 ?6;1?2986= 2B9791W @/71/?6 @?/91 B<=W <@ .’&96.)05 (%,%*+&%5 ,%#; T91D 1D6 ;<79= :6=9/: <@ 98>7/=98E $" , X #$" $ :E Y CE ;67689/:，1D6 DW0D2 >28 E?7/=98E $" , X ," $ :E Y CE ;67689/: ，1D6 E?7/=98E)$" $ X #$" $ :E Y CE ;67689/: ，1D6 E?<81681 <@ :6=9/: 2B28 8<1 E?/71/?6" （责任编辑* 崔久满） +#* * * * * * 第 ) 期* * * * * * * * 铁* 梅，等：硒对蛹虫草生长发育的影响 万方数据