苯磺酸左氨氯地平分散片的制备及质量研究

中山人学硕士学位论文 多囊卵巢综合征中慢性炎症的初步研究 第一部分PCoS血液中慢性炎症和血脂异常的研究 PCOS的发病机理尚无明确的解释，目前多数研究认为是代谢和内分泌紊乱 性疾病，且大多从下丘脑．垂体一性腺轴功能失调，糖脂异常及遗传因素等方面进 行了研究。Francesco研究发现在PCoS患者中自细胞数目增高【45】，血脂升高 【46】，并且白细胞升高和血脂异常是心血管疾病的危象因素[47】。本章主要研究 178例PCOS患者和59例正常妇女白细胞亚组分布，血脂代谢异常与体重指数 (bodymassindex，BMI)，与下丘脑．垂体．卵巢轴的关系，揭示不同类型PCOS患 者妇女白细胞分布，血脂代谢的分布情况。为不同类型PCOS患者的发病机理及 治疗提供依据。 1．1 材料 1．1．1 标本 研究对象：三个月内未行二甲双胍或达英一35治疗的PCoS患者178例，PCOS的 诊断参照鹿特丹，年龄16．40岁之间，，在月经第三天抽取30mL血液作为 标本，并用肝素抗凝，检测血浆中卵泡刺激素(folliclestimulatinghonnone，FSH)， 黄体生成素(1uteinizinghornlone，LH)，睾酮(testosterone，T)，CRP，空腹血 糖(fastingb100dglucose，FBG)，空腹胰岛素(fastingbloodinsulin，FBI)，甘油三酯 (triglyceride，TG)，低密度脂蛋白(10wdensi够lipoprotein，LDL)，高密度脂蛋白(hi曲 densitylipoprotein，HDL)，胆固醇(Cholester01)，载脂蛋白一A(apolipoprotein—A， Apo．A)，载脂蛋白一B(apolipoprotein．B，Apo．B)。 对照组：临床上由于男方不孕而进行试管婴儿治疗的59例正常妇女，年龄<40 岁。在月经第三天抽取30mL血液作为标本，用肝素抗凝，检测血浆中FSH，LH， T，CRP，FBG，FBI，TG，LDL，HDL，Cholesterol，Apo．A，Apo．B。 1．1．2 主要试剂 ARCHITECTFSH试剂盒 ARCHITECTLH试剂盒 ARCHITECTTbstosterone试剂盒 美国Abbott 美国Abbott 美国Abbott ?? ?x 万方数据 万方数据 ．2009年7月第19卷第7期·今日药学 量瓶中，加0．1mol／L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀， 作为对照品溶液。取上述两种，照分光光度法(中国 药典2005年版二部附录ⅣA)在238nm波长处分别测 定吸光度，计算每片溶出量。 1．6含量测定 避光操作。照高效液相色谱法(中国药典2005 年二部附录VO)测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为 填充剂；以甲醇一O．03mol／L磷酸二氢钾(60：40) 为流动相，检测波长238nm，理论即得板数按左氨氯 地平计算应>500。取本品10片研细，精密称取细粉 适量(约含左旋氨氯地平2．5mg)，加流动相溶解并 配制成每毫升约含25斗g的溶液，摇匀，滤过，取续 滤液作为供试品溶液。精密量取20山注入液相色谱 仪，色谱图；另精密称取苯磺酸左旋氨氯地平对 照品约17-ng，同法吸收测定，按外标法以峰面积计 算，即得。 1．7有关物质测定 避光操作。照含量测定项下测定，取本品10片， 研细，精密称量细粉适量(约含左旋氨氯地平15nag)， 置于25IIll量瓶中，加流动相溶解，超声处理5rain 后，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为 供试品溶液，取供试品溶液lml，置于100ml量瓶中， 加流动相稀释至刻度。摇匀，滤过，续滤液作为对照品 溶液。分别取上述溶液各10出注入液相色谱仪，记录 色谱图至主成分保留时间的2．5—3倍，供试品溶液如含 有杂质峰(扣除溶剂峰面积和辅料的色谱峰)，各杂质 表2辅料相容性试验结果 峰的面积的总和与l％的自身对照溶液主峰的面积做比 较计算有关物质的量，有关物质的含量不得>1．0％。 1．8初步稳定性试验 将制备的苯磺酸左氨氯地平分散片模拟市售包 装，于(40±2)℃，相对湿度75％4-5％的恒温箱内 放置6个月，分别于第1个月、2个月、3个月、6个 月末分别取样一次，按稳定性重点考察项目检测与 0月比较，于(25．4-2)℃，相对湿度60％±10％恒温 箱中放置6个月，分别于3个月、6个月末分别取样 一次，按稳定性重点考察项目检测，初步考察分散片 的稳定性。 2 结果 2．1 辅料相容性试验结果 结果表明，乳糖和苯磺酸左氨氯地平混合后，与 原料药比较，混合后立即测定，无明显变化。60℃放 置5、10d，在6．4，11．5min出现杂质峰，且随着时 间延长，峰面积增大，同时乳糖与主药混合后，原料 药中的4．0min峰的峰面积随时间延长，峰面积增大， 可见乳糖和苯磺酸左氨氯地平不能配伍使用。阿斯巴 甜和苯磺酸左氨氯地平混合后。在2．9rain出峰。经 定位分析，该峰为阿斯巴甜峰，在第5、10d时，峰 形和峰面积无变化。实验中的其他辅料与苯磺酸左氨 氯地平配伍使用无明显变化，可用于苯磺酸左氨氯地 平分散片中。结果见表2、图1。 5万方数据 PharmacyToday-20097VoLl9No．7· 圈l 乳糖与主药混合结果色谱图(0、10d) 2．2处方筛选结果 2．2．1崩解荆的选择结果见表3。由表3可见，在 其他因素一定的条件下，崩解效果以PVPP内外加法 为最优。 裹3崩解剂种类及加入方法对苯磺酸左氨氯地平分散片崩解 时限的影响(t／s，i．4-5，11,=6) 2．2．2正交试验优化处方经预试验研究，选择填充 剂MCC(A)、磷酸氢钙(B)、淀粉(C)和崩解剂 PVPP(D)为因素，每个因素选择4个水平，以溶出 度为评定标准，实验结果见表4。 裹4正交试验结果 试验编号 因素 平均溶出 A B C D 度(％) l l l l l 75．93 2 1 2 2 2 98．35 3 l 3 3 3 82．12 4 2 l 2 3 85．26 5 2 2 3 l 82．78 6 2 3 l 2 粥．67 7 3 I 3 2 98．65 8 3 2 1 3 94．02 9 3 3 2 l 85．49 Kl 85．47 86．6I 89．54 81．40 K2 88．90 91．72 的．70 98．56 K3 92．72 88．76 87．85 87．13 极差R 7．25 5．10 1．85 17．16 6 本实验中4个因素极差R排列为D>A>B>C． PVPP、MCC和磷酸氢钙对溶出度有较显著影响。其 中因素D的极差最大，说明PVPP的用量是影响苯磺 酸左氨氯地平分散片溶出的主要因素(D：>D，>D。)， 其次是MCC(A3>A2>AI)和磷酸氢钙(B2>岛>B。) 的用量，淀粉的用量对溶出度影响较少。根据正交试 验结果，最佳工艺为A，B：c：D：。即苯磺酸左氨氯地平 3．47rng，MCC70mg，磷酸氢钙30mg，淀粉为 30mg，PVPP为8％(内加4％，多'l,／Jn4％)，阿斯巴 甜5mg。2．5％PVP—k30水溶液制粒，硬脂酸镁1％。 2．3工艺重现性结果 按照试验项“1．4”进行3批中试放大研究，并 对3批样品进行检验。 2．3．1溶出度测定结果按照试验项“1．5”方法，分 别在3、5、10、15、30min取样5“，并立即加入溶 出介质5IIll。与苯磺酸左氨氯地平普通片溶出度比较 结果见表5和图2。由图2可知，3min时分散片药物 累计溶出率>50％，10min已经超过80％，而普通片 15min时溶出率仍<50％，可见分散片的溶出速率明 显优于普通片。 表5分散片与普通片体外溶出数据(n=6) 3 60．舵±3．0856．56．4-20159．564-1．28孤154-3．嘴 5 78．864-28979．254-1．02舭12±26534．12±3．08 10 l阢03±3．6889．564-o．1588．69士3．0145．15±3．08 15 9&054-o．9099．024-1．2599．81±0．9170．86±3．08 30 蛆钙4-1．53孵81±0-9899．15±21599．124-3．08 圈2分散片与普通片体外溶出曲线(jr／．=6) 结果表明，苯磺酸左氨氯地平分散片的处方采用 流化床工艺，重现性良好。3批试验结果与小试结果 相似。 万方数据 ．2009年7月第19卷第7期·今日药学 2．3．2含量测定及有关物质测定结果按照试验项 。1．6和1．7”方法，测定3批样品的含量与有关物 质，试验结果见表6。 裹6含量和有关物质测定结果 2．4初步稳定性试验结果 与0d样品比较，苯磺酸左氨氯地平分散片在加 速试验和室温长期留样条件下放置6个月，外观仍为 白色片剂，有关物质<1．0％，含量>98％，30min体 外溶出度均>90％。符合规定的质量要求。 3讨论 3．1 辅料相容性研究一1 主药与辅料相容性研究是药物处方研究的基础， 避免药物因选择辅料不当而导致药物稳定性差，甚至 可能产生毒性杂质，降低药物质量。本文在研究苯磺 酸左氨氯地平辅料相容性试验中发现乳糖与苯磺酸左 氨氯地平具有配伍禁忌，乳糖中或多或少含有5一羟甲 基糠醛等杂质，能与胺类药物如异烟肼、苯丙胺等生 成棕黄色的加成物。处方中如同时含有酒石酸盐或醋 酸盐时，或在碱性润滑剂的影响下，能加速变色反应。 苯磺酸左氨氯地平化学名为：2一(2一氨基乙氧基)甲基 一4(2一氯苯基)一3一乙氧甲酰基一5一甲氧甲酰基-6- 甲基1，4一二氢吡啶苯磺酸盐，为胺类药物，有可能 与乳糖中的5一羟甲基糠醛等杂质发生加成反应而导致 苯磺酸左氨氯地平与乳糖具有配伍禁忌；而另外几种 辅料(淀粉、MCC、羧甲淀粉钠等)则无明显干扰， 因此如开发苯磺酸左氨氯地平相关制剂，应避免与 5一羟甲基糠醛配伍使用，为日后开发其他新处方提供 了有益的指导和参考。 3．2崩解剂加入方式 崩解剂的加入方法对苯磺酸左氨氯地平分散片的 崩解和溶出影响较大。外加崩解剂使药片崩解为粗粒， 起首次崩解的作用，而内加的崩解剂则使粗颗粒崩解 为细颗粒，使颗粒均匀分散在溶液中[3】。本试验外加 PVPP具有很高的毛细管活性及水合能力，迅速将水 吸入片中，然后膨胀崩解，内加PVPP吸水使固体颗 粒崩解为更细小的粉末，从而增加了主药的溶出。本 实验选择PVPP，采用内外加法，既有利于片剂崩解， 也有利于片剂体外溶出。 3．3正交试验 MCC具有较大的比表面积，吸附性好，遇水可迅 速崩解形成均匀的黏性混悬液，由于其优良的可压性 和崩解性，可用于调节溶出速率。黏合剂PVP—k30 具有较高的毛细管活性、较强的水合能力及相对较大 的比表面积，因而遇水可迅速吸收大量水分，使片剂 内部的膨胀压力超过片剂本身的强度，致药片瞬时崩 解；同时PVP—k30水溶液浓度增大，可使疏水性颗 粒表面亲水性增加、加快崩解，但浓度过高反而影响 崩解速纠5|。PVPP作为崩解剂，由于毛细管活性高， 水合能力强及相对较大的比表面积，可迅速将水吸收 入片中，使药片瞬间崩解，试验结果表明：PVPP在 一定浓度范围内能加速崩解。本试验结果以8％的加 入量，且以内外加具有最佳崩解和溶出作用。 本试验经过流化床一步制粒干燥工艺进行中试放 大，结果表明，该处方适合工业化生产，连续3批样品 溶出测定结果可知：本处方工艺的重现性良好，基本保 证了制剂质量的一致性。初步稳定性研究，表明本品工 艺及产品质量稳定。苯磺酸左氨氯地平分散片的处方工 艺简单合理，其质量可控，适合工业化大生产。 (收稿日期：2009一02一17) 参考文献 1高云，权正良．苯磺酸左旋氨氯地平治疗高血压临床疗效 验证．中国校医，2003，17(2)：F003． 2彭礼明．分散片处方工艺特点及其进展．药品评价。 2005，2(3)：230一233． 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