白细胞介素_12临床应用研究进展

� 综述 �讲座� 白细胞介素�12临床应用研究进展 宋舸, � 袁玫, � 卢世璧 中国人民解放军总医院骨科研究所,北京 100853 Study of interleukin�12 clinical uses SON G Ge, YUA N Mei , L U Shi�bi Ins titute of Or thopaed ics , General H osp ital of Chinese Peop le s L iberation A rmy , Beij ing 100853, P. R. China !摘要∀ � 白细胞介素�12( IL�12) 最初称作自然杀伤细胞刺激因子 ( NKSF )或细胞毒性淋巴细胞成 熟因子( CLMF ) , 是一种异二聚体 细胞因子。直接使用重组蛋白 IL�12 或转基因载体都有显著的 抗肿瘤作用, 它通过诱发 NK, NKT 和 T 细胞增殖活化而介导 主动和被动免疫保护反应。除此 之外, 通过趋化因子 IP�10 诱生 IFN��阻止肿瘤血管发生。在动 物肿瘤模型中, IL�12 对移植瘤、 化学诱变瘤及自发肿瘤均有明显 治疗作用。IL�12 可以刺激抗原 特异性免疫反应而促进 T h1 和 CTL 的消瘤作用。大量的临床治 疗肿瘤试验表明, IL�12 在抗肿瘤 方面效果明显。治疗中出现的不 良反应应引起重视, 需要制定合 理的治疗以降低毒副反应确 保临床效果。 中华肿瘤防治杂志, 2007, 14(1) : 75- 79 [ ABSTRACT] � Inter leukin�12 ( IL�12) prev iously called cyt otox ic lympho� cyte matur ation factor ( CLMF) or NK cell stimulato ry facto r ( NKSF) is a r ecently char act erized het erodimer ic cyt okine composed of tw o subunits� IL�12 has demonst rated r emarkable antitumo r activ ity w hen used dir ect ly as a r ecombinant pro tein o r w hen different v ir al or non�v iral vector s tr ansfer its g enes� At enhancing tumor immunit y, IL�12 acts as a br idge between innate and adapt ive immune responses due to its ability to induce proliferat ion and activation of NK, NKT , and T cells� In addition, IL�12 inhibits tumor angio� genesis mainly through IFN�� gamma�dependent pr oduction o f the chemokine IP�10� In exper imental tumo r models, r ecombinant IL�12 treatment has a dramat ic ant i�tumor effect on tr ansplantable tumor s, on chemically induced tumo rs, and in tumo rs ar ising spontaneously in genetically modified mice� T he stimulating activ ity o f IL�12 on ant igen�specif ic immunity relies mostly on its ability to determine or augment T h1 and cytot ox ic T lymphocy te re� sponses� Because o f this ability, IL�12 has a potent adjuvant act ivit y in cancer and other vaccines� T he prom ising data obtained in the clinical models of anti� tumo r immunotherapy have raised much hope that IL�12 could be a pow erful ther apeutic agent against cancer� H owever , excessive clinical tox icity and modest clinica l response observed in the clinical tr ials po int t o t he necessity to plan proto co ls that minimize tox icity w ithout affect ing the ant i�tumor effect o f IL�12� Chin J Cance r Pr ev T reat , 2007, 14( 1) : 75- 79 !关键词∀ � 白细胞介素�12;伽马�干扰素; 肿瘤/免疫; 临床治疗/免疫; 综述文献 [ KEYWORDS] � inter leukin�12; interfer on��; neoplasms/ immunology; clinical ther apy / immunology; review literatur e !中图分类号∀ � R737. 31 � � � !文献标识码∀ � A � � � !文章编号∀ � 1673- 5269( 2007) 01- 0075- 05 � � IL�12是 1990年由美国 Stern 等领导的研究小组 发现的一个细胞因子。按其基本生物学作用,最初称 为自然杀伤细胞刺激因子( natur al killer cell st imula� to ry factor, NKSF)或细胞毒性淋巴细胞成熟因子 !第一作者简介∀ � 宋舸,男, 山东潍坊人, 博士, 副主任医师, 主 要从事骨科临床及肿瘤免疫治疗的研究工作。 Tel: 86- 10- 81211136� E�mail: songge@ medmail� com� cn !通讯作者简介∀ � 卢世璧, 男, 湖北宜昌人, 中国工程院院士, 主要从事骨科临床及基础研究工作。 Tel: 86- 10- 66937202� E�mail: shibilu@ public. net. cn ( cy to to xic lymphocyte maturat ion factor, CLMF) [ 1, 2] 。是从 EBV 病毒转染的人 B 淋巴母细胞 系 RPM I�8866和佛波酯刺激的人 B 淋巴母细胞系 NC�37的上清液中纯化和鉴定,它由单核细胞/巨噬细 胞、B淋巴细胞等抗原递呈细胞在免疫应答中产生,其 在抗肿瘤方面的潜能仅是在最近才被认识。IL�12是 细胞免疫应答过程中的一个初始因子, 不仅对 T 细胞 及 NK/ LAK 细胞具有多种促进作用, 而且单独或协 同 IL�2诱导 IFN��产生,具有抗肿瘤生长及其抗肿瘤 转移作用,是一个多功能的免疫活性因子。 �75�中华肿瘤防治杂志 2007年 1月第 14卷第 1期 � � CH IN J CANCER PREV TREAT , January 2007, Vol� 14 � No� 1 1 � IL�12的生物学功能 1� 1 � 对 Th1细胞的诱导和对 Th2细胞的抑制 现在已认识到 IL�12具有几方面的生物学作用, 包括通过调节 T h1和 Th2细胞亚群起动细胞介导的 免疫中起重要作用[ 3]。在人体和鼠, 已证明 IL�12是 Th1产生的必需因子, 它可引起 T h1 细胞分化, 同时 抑制由 IL�4介导的 T h2细胞分化。在体外用过敏原 作用于 CD4+ 细胞,导致生成T h2型的细胞, 分泌高浓 度 IL�4和低浓度 IFN��; 当有 IL�12 存在时, 则生成 Th1型细胞, 分泌 IFN��而不分泌 IL�4。另外, 使用 卵清蛋白特异的 CD4+ T CR转基因小鼠,抗原加IL�12 诱导 CD4+ 细胞分化成为 T h1细胞, 而加 IL�4则诱导 成为 T h2细胞。因此 IL�12和 IL�4作用于CD4+ 细胞 分别支持 T h1和 T h2细胞的分化。通过一定的正、负 反馈调节机制, Th1细胞分泌的 IFN��可进一步增加 单核细胞产生 IL�12, 减少 IL�10的产生; 而 T h2细胞 分泌的 IL�4和 IL�10则抑制 IL�12的产生[ 4] 。 1� 2 � 在 T细胞和 NK细胞中的应用 IL�12可明显刺激静止或激活的外周血 T 淋巴细 胞、NK 细胞分泌 IFN��[ 5, 6] ,并与 IL�2有协同作用,但 对于静止的细胞, 需要辅助细胞的参与, IL�12 增强 NK细胞活性和诱导 LAK 活性不一定仅是通过 IL�2 或 IFN��来介导的。内源性 T NF��的产生与 IL�12 诱导的 LAK 活性有关, 但它对短期培养的 NK 细胞 的溶细胞活性的增加与否,则取于是用成熟 NK 细胞 还是非成熟 NK细胞。 1� 3 � 抑制肿瘤组织新生血管的生成 肿瘤间质血管为肿瘤细胞的生长和增殖提供足够 的营养支持,随着肿瘤的扩张不断有肿瘤血管新生,并 形成肿瘤转移的途径。Wong 等[ 7] 发现 IFN��在 IL�12诱导肿瘤血管生成抑制过程中具有重要作用,通 过体外对 IFN��相对无反应的肿瘤细胞, 或体内对 IL�12反应性降低的 IFN��1�受体表达缺陷鼠肿瘤细胞 模型观察, 发现 IL�12不能抑制该肿瘤模型血管生成, 而无 IFN��1�受体表达缺陷鼠的肿瘤细胞型在 IL�12 的作用下,血管生成受到抑制。证实 IL�12通 IFN�� 作用于其受体, 导致肿瘤细胞产生具有抗血管生成活 性细胞因子 IP�10,最终抑制肿瘤的生长。 1. 4 � 对效应细胞的影响 IL�12可以激活多种免疫细胞参与其介导的抗肿 瘤作用,但只有这些效应细胞迁移并浸润到肿瘤局部 才能发挥它们的抗肿瘤作用。Chigusa 等[ 8] 发现 IFN��基因缺陷 BA LB/ C 小鼠和野生型 BALB/ C 经 CSA1M 肿瘤细胞免疫后, 来自两组小鼠的脾 T 细胞 具有相同的杀伤肿瘤的能力;对两组小鼠应用不同的 肿瘤细胞进行攻击实验, 发现野生型小鼠肿瘤缩小,局 部伴有 CD4+ 和 CD8+ 细胞浸润, 而 IFN��基因缺陷 BALB/ C小鼠肿瘤未缩小, 亦无 CD4+ 和 CD8+ 细胞浸 润,该研究结果提示, IL�12 通过诱导 IFN��生成, 而 在 T 细胞向肿瘤区迁移浸润过程中起重要作用。 2 � IL�12的抗肿瘤活性 IL�12增强 NK 细胞和 CTL 细胞的免疫应答和 引起 IFN��产生的能力表明它可能具有抗肿瘤作用。 体外试验证明 IL�12可显著增加 PBMNC 的 NK 活 性,杀伤多种肿瘤细胞株, 包括结肠癌和神经母细胞 瘤[ 9, 10] , 并能使实体瘤患者已发生缺陷的 NK 活性得 到恢复,对接受 IL�2 治疗者, 用 IL�12 与 PBMNC 共 同培养可明显加强曾对 NK 敏感或抵抗的肿瘤细胞的 杀伤作用[ 11] , IL�12还可增强 TIL 细胞对自体肿瘤包 括黑色素瘤、肾癌、卵巢等肿瘤的杀伤活性[ 12]。 2� 1 � 在头颈部鳞癌中的作用 Van H erpen等[ 13]进行了局部注射治疗头颈部鳞 癌( HNSCC)的 #期临床观察, 10 例以往未治疗的 HNSCC 患者,手术前每周一次在原发瘤部位 2~ 3处 注射 rhIL�12 ,剂量为 100或 300 ng/ kg ,治疗结果:患 者未出现 CR、PR 疗效, 只观察到 1 例患者的肿瘤缩 小了 40%。毒副反应: 当剂量达到 300 ng/ kg 时毒性 增加。在使用 rhIL�12 的 30 min 内血浆化验检出 rhIL�12。诱发的免疫反应:瘤内应用 rhIL�12 治疗患 者, NK 细胞在原发瘤内的数目增加, 部分患者瘤周产 生了大量的淋巴细胞浸润。部分患者肿瘤周围明显有 CD20+ B 细胞浸润。CD4+ 、CD8+ T 淋巴细胞的变化 不显著。淋巴结内表达大量的 IFN��, Th2向 Th1的 漂移趋势明显。 在外周血中淋巴细胞及其亚类明显下降,特别是 NK细胞和细胞毒性 T 淋巴细胞在用药 12~ 24 h 间 更加明显。通过半定量 PCR检测外周血证明 IFN�� 的 mRNA 浓度是用药前的 2� 2 倍。T� mRNA, 即 Th1转录因子在用药 12 h 后下降了 80% , 48~ 72 h 后恢复正常,外周血中 IFN��的浓度在用药 12 h 达到 了峰值。这些细胞因子在首次用药后比再次用药更 高。观察到由于使用 rhIL�12后, 血中淋巴细胞、单核 细胞向淋巴结迁移明显, 使得外周血的淋巴细胞、单核 细胞,特别是 NK细胞发生了快速而短暂的降低。 2� 2 � 在肾癌中的应用 Port ielje等[ 14]通过对晚期肾癌使用 rhIL�12的 # 期临床研究,观察到同样剂量条件下,首次注射的不良 反应要比再次注射严重。rhIL�12首次给药的最大耐 受剂量 ( MT D) 是 500 ng/ kg, 再次给药的 MT D 是 1 000 mg/ kg。治疗晚期肾癌患者 28 例, 第 1 天使用 rhIL�12后休息 7 d, 第 8天开始重复使用 rhIL�12,每 周 3次,连续 2周, 首剂量试验 MTD范围在 100、500 �76� 宋舸,等 � 白细胞介素�12临床应用研究进展 和 1 000 ng / kg。限制性毒性( DLT )为 1 000 ng/ kg。 包括发热, 血管周围炎和白细胞减少。再次剂量的 MT D范围为 500、1 000和1 250 ng/ kg , DLT 为 1 250 ng / kg,包括体虚, 发热, 恶心, 精神衰弱及白细胞减 少。其他的显著毒性有口腔黏膜炎, 肝转氨酶升高。 而且首剂量后再次使用 rhIL�12 可以降低毒性, 虽然 诱生的炎性细胞因子及各类白细胞计数下降,仍然保 持抗肿瘤效果。我们又对 26例患者应用另一疗法,皮 下给药 1 次后, 休息 7 d。第 2 周每天注射 1 次 rhIL�12,共 6次。检测细胞因子和白细胞, 淋巴细胞 亚类。第 1 次注射 rhIL�12后, IFN��, TNF�a, IL�10, IL�6, IL�8快速上升, 时间短暂, 而淋巴细胞, 单核细 胞,中性白细胞计数暂时下降。主要淋巴细胞分类,如 CD4+ 、CD8+ 、T 细胞、B 细胞和 NK 细胞也是如此。 在临床耐受的剂量范围内使用 rhIL�12剂量递增疗法 不会降低它的免疫作用。 进一步发现 rhIL�12能使肿瘤患者发生纤溶和凝 血的机会较大, 出现的频率和顺序不同于已知的细胞 因子。使用 r hIL�12 皮下注射, 用量 500 ng/ kg 治疗 18 例肾癌患者观察凝血和纤溶反应。17 例患者 ( 94% )发生纤溶反应。纤维蛋白溶酶�2a 抗纤溶酶复 合物( PAPC)在 72 h 由( 11� 8 ∃ 6� 6) nmol/ L 上升到 最高值( 18� 8 ∃ 7� 4) nmol/ L。组织纤溶酶原激活物 ( tPA)和纤溶酶原活化抑制因子( PAI)分别在 8和 14 个患者中上升。tPA 在 72 h 从( 12� 6 ∃ 5� 2) ng/ mL 上升到( 19 ∃ 6� 7) ng/ mL。PAI 在 8 h 从( 111 ∃ 69) ng / mL 降到最小值 ( 65 ∃ 53) ng/ mL, 此后保持在基 线以下, PAPC 的上升与 tPA 的上升和 PA I的下降相 关, 9例发生了凝血反应。血栓和抗血栓复合物在 12 h从( 29 ∃ 53) ng/ mL 升到( 460 ∃ 322) ng/ mL, 无论 凝血状态改变与否, 患者体内的 rhIL�12、IFN��和 TNF�a 水平相同。 2� 3 � 在黑色素瘤中的应用 瘤内注射 DNA: Heinzerling 等 [ 15] 临床前期动物 实验的治疗效果比较满意。使用 2个动物模型: B16 黑素瘤鼠 C57B/ 6和裸鼠的人源黑素瘤,鼠 IL�12的质 粒 DNA 肌肉注射后阻止了 B16黑素瘤的转移。接着 进行的临床研究,在 9 例恶性黑色素瘤患者( %期)以 前接收过或非标准的治疗。在瘤内注射 IL�12的 质粒 DNA,患者总共治疗 7 个周期, 每个周期注射 3 次。注射部位在臂部, 包括 3 种剂量, 分别是 2、4、 10~ 20 mg 的质粒 DNA。3例发生了临床反应: 2例 稳定, 1例完全消退。其中 1例患者使用低剂量,疾病 稳定超过了 3年,而其他 2例接收的是高剂量的治疗。 反应部位组织切片显示局部血管生成减少, 淋巴细胞 浸润。所有患者, 特别是有疗效的, 表现出针对 MAGE�1和 MART�1(在某些患者中原来就存在的) 特异性抗原的主动性免疫保护反应。活检显示IL�12、 IP�10和 IFN��增加, 血中浓度上升, 证明质粒 DNA 的瘤内注射产生了有益的临床效果。 Peterson等 [ 16]治疗了 20 例晚期黑素瘤患者, 此 前大多数患者已接受过其他治疗,并且已有转移, M e� lan�A 疫苗体外冲击自体树突状细胞回输,每 3周1个 疗程,连续 3个疗程, rhIL�12 剂量在 30~ 100 ng/ kg, 结果 2例患者 CR, 5例患者 PR, 4例患者 SD, 全部患 者的中位生存期 12� 25个月。未见 3级和 4级毒性反 应。体外 Elispot 法检测显示接种疫苗后产生 IFN�� 的特异性 CD8+ T 细胞明显增多, 对 Melan�A 肽产生 了特异性反应。体内特异性 CD8+ T 细胞的数量与临 床效果呈正相关, 较之单纯 DC 疗法效果更好。Mor� tarini等[ 17] 的研究得出了类似的结论, 对治疗前已有 多灶转移的 3个患者, 通过免疫组化对比治疗前后的 变化, 发现治疗后 CD8+ T 细胞在瘤灶产生了追踪溶 瘤性浸润。同时观察到治疗后瘤灶的组织坏死及纤维 化明显增加。这些结果说明了 r hIL�12 能诱导 CD8+ 记忆 T 细胞浸润瘤组织, 明显提高肿瘤患者抗瘤细胞 毒性细胞的数量。 2� 4 � 在皮肤 T淋巴细胞瘤中的应用 皮肤 T 细胞淋巴瘤( CTCL)与细胞免疫缺陷有 关。rhIL�12能够扩大具有抗肿瘤作用的细胞毒性 T 细胞( CT L)的反应, 对 CT CL 具有治疗价值。Rook 等[ 18]对 10例 CT CL 患者进行的 #期临床试验中, 使 用剂量递增方案, 每周 2 次皮下或瘤内注射 rhIL�12 50~ 300 ng / kg, 连续 24周。除 1例 Sezary 综合征患 者治疗 1周后退出治疗外,其余 9例中, 5例患者中 2 例斑块完全缓解, 2 例部分缓解, 1 例轻微有效, 2 例 Sezary 综合征患者中 1 例部分缓解,总有效率 56%。 2例大细胞转化的肿瘤患者, 注射 rhIL�12 的瘤灶消 退,未注射部位出现新的损害。肿瘤消退部位的组织 学检查显示 CD8+ T 细胞增加, 肿瘤浸润程度明显减 轻,达到临床痊愈的皮损中肿瘤完全消失。 2� 5 � 在血液系统肿瘤中的应用 利妥昔单抗是一种鼠人单克隆抗体嵌合体,可以 结合于CD20 B淋巴细胞,诱发细胞凋亡,联合rhIL�12 和利妥昔单抗治疗非何杰金 B 细胞淋巴瘤可以增强 利妥昔单抗的溶瘤免疫作用。Ansell 等[ 19] 为了观察 两者联合应用是否有协同作用, 通过临床试验发现明 显增强了患者的免疫功能, IFN��和 IP�10 浓度维持 在高水平, NK细胞活性增强, 两者联合应用协同效果 明显。共有 43 例入选, 每周静脉注射利妥昔单抗一 次,连续 4周,剂量为 375 mg / m2 ; 在利妥昔用过后第 2天开始使用 rhIL�12,每周皮下 2次注射 rhIL�12,初 始剂量为 30 ng/ kg ,逐渐递增至 500 ng/ kg ,当剂量达 到 500 ng/ kg 时出现全身症状和肝脏转氨酶升高。当 �77�中华肿瘤防治杂志 2007年 1月第 14卷第 1期 � � CH IN J CANCER PREV TREAT , January 2007, Vol� 14 � No� 1 rhIL�12剂量&100 ng/ kg 时, 血清 IFN��水平超过正 常 20倍, IP�10上升 2� 5~ 5 倍, rhIL�12 最佳剂量为 300 ng/ kg。有 69%的患者产生了疗效, 11例患者中 有 8例在> 300 ng/ kg 剂量时肿瘤完全消退。 Younes等[ 20] 的研究旨在探明 rhIL�12对复发和 难治性非何杰金淋巴瘤( NHL)以及何杰金病( HD)的 临床治疗效果。42例患者( 32例 NHL, 10例 HD)入 组,均已接受了 3 次的化疗, 16例患者接受了自体干 细胞移植。静脉给药 11 例, 皮下给药 31例。29 例 NHL 患者中 6例有部分或完全反应,而且 15例获得 疾病稳定持续 54个月。而 10例 HD无一反应。轻度 NHL、进展 NHL 和 HD患者的无进展生存期分别为 6、2和 2� 5个月。治疗耐受性良好, rhIL�12 治疗后, 外周血 CD8+ T 淋巴细胞数从 423 !L - 1增加到了 576 !L- 1 ( P= 0� 001 9)。而且, 37%的患者降低了血管内 皮生长和成纤维细胞生长因子的血液浓度。 2� 6 � 对妇科肿瘤的作用 Wadler等 [ 21] 进行的 r hIL�12治疗宫颈癌的初步 临床试验中显示良好的耐受性及促 T 细胞免疫增殖 的作用。发现 rhIL�12可以增强机体对 HPV 的淋巴 增殖反应,而且维持这种特异性细胞免疫应答的时间 更长。34例入选的患者均有转移、复发, 半数以上曾 接受了包含顺铂的化疗。rhIL�12剂量为 250 ng/ kg, 在门诊静脉快速点滴,每天 1次连续 5 d,间隔 21 d为 1个疗程,共 4个疗程。在治疗前采集 2次全血,治疗 后每 3周评价对 H PV 16 E4、E6和 E7肽的淋巴增殖 反应性。最常见的严重毒性为外周血淋巴细胞数减 少、血清转氨酶升高, 所有毒性均是可逆的。治疗结 果: 1例( 3% )产生了部分反应。平均生存期为 6� 5个 月。18例患者治疗前后的资料可评价, 表明 rhIL�12 治疗诱发了细胞介导的针对特异性抗原的免疫反应, rhIL�12治疗后患者的淋巴细胞对 HPV 16 E4、E6和 E7病毒肽的增殖反应显著增强。患者的预后与这种 特异性的淋巴增殖反应及疗程的多少呈正相关。 Hurteau等[ 22]静脉注射 rhIL�12治疗复发性或难 治性卵巢癌患者 28例。患者有可测量的病灶,以铂类 为主的一线化疗药失败。rhIL�12 用量为 250 ng/ kg 静脉注射,第 1 次使用后休息 2 周, 以后每天注射 1 次,连续 5 d后休息 16 d为 1 个疗程。一直到疾病进 展或出现不良事件后停药。21%的患者出现骨髓抑制 4级反应, 2例出现血管渗漏现象, 1例为 2 级, 另 1例 为 4级反应。rhIL�12 对复发性患者疗效不高, 28例 中 26例有效,平均使用 2 个疗程, 无 1 例完全缓解, 1 例部分缓解( 3� 8%) , 13例疾病稳定( 50% )。 2� 7 � 在胶质瘤中的应用 Kikuchi等 [ 23]研究了应用树突状细胞与恶性胶质 瘤细胞融合后自体回输, 再给予 rhIL�12 治疗恶性胶 质瘤,结果显示应用融合细胞合并 r hIL�12 是安全的, 对一部分恶性胶质瘤患者发生了抗肿瘤作用。15例 恶性胶质瘤患者入组。外周血获得树突状细胞。每位 患者通过手术获得自体标本进行胶质瘤细胞培养建 系。使用聚乙二醇制备树突状细胞与恶性胶质瘤细胞 的融合细胞。所有患者于第 1天皮内注射融合细胞。 于第 3、7天同一部位皮下注射 rhIL�12。通过临床观 察和影像学检查评价治疗反应。未发现严重副反应。 4例患者通过 MR 检查显示较治疗前肿瘤缩小 > 50%。 3 � rhIL�12的毒副反应 rhIL�12在发挥它的诸多治疗效应的同时, 也有 不良反应, 1995年, 美国遗传研究所在肾癌患者体内 进行的∋期临床试验中患者出现了累及多器官的严重 不良反应,并出现 2例死亡。出现严重事件的患者的 rhIL�12剂量达到了 1 000 ng/ kg , 毒副反应主要由 IFN��介导,它远远超过了 MT D。目前, 通过大量针 对不同疾病的临床试验, 对 rhIL�12 毒副反应的认识 已经趋于统一, 产生毒副反应的靶器官包括造血系统、 肝、肺、胃肠道系统等, 临床症状包括发热、头疼、外周 血淋巴细胞数减少、血清转氨酶升高、胃肠道黏膜出血 等。rhIL�12的毒副反应往往在第 1次注射时最大,随 后的治疗过程中递减,而且这种毒副反应是可逆的。 以往认为在初次使用 rhIL�12时,预注射能减少IFN�� 的分泌, 减轻毒副反应, 而且明确了首次预剂量的 MT D 为 300 ng/ kg , 再次使用 MTD 剂量为 500 ng / kg。应采用剂量递增的方式给药。通过研究和大 量的数据表明只要在安全的 MT D范围内, 其耐受性 和安全性较好。此外, 在比较观察了瘤内注射、静脉、 皮下及基因等治疗方式, 表明皮下用药更方便安全而 且有效。 4 � 展望 rhIL�12的临床试验提示 r hIL�12 是一种极有前 景的具有多种生物学功能的细胞因子, 其抗肿瘤免疫 功能强于以往的 rhIL�2和 rhIFN��。其在抗瘤免疫中 的重要作用是通过巨噬细胞、NK 细胞调节的天然免 疫( innate immunity )以及通过 T h1 细胞、NK 细胞、 CT L 细胞介导的获得性免疫, 因此在肿瘤免疫治疗方 面有很大潜力。为发挥其杀伤肿瘤细胞的作用,又能 减低其毒副反应,以之为佐剂,与其他免疫疗法共同应 用,将发挥其积极的治疗作用。已得到肯定, 尤其是在 肿瘤治疗方面, 可以预测在今后的肿瘤免疫中,作为有 效可靠的治疗方法,它的作用不可或缺。经过不断的 探索,对它的不良反应有了较为清楚和准确的认识,逐 渐打消了以往对它不良反应的担心。IL�12 将成为有 �78� 宋舸,等 � 白细胞介素�12临床应用研究进展 重要临床意义的抗肿瘤新药。 !参考文献∀ [ 1 ] � Kobayashi M , Fit z L , Ryan M, et al� Ident if ication and purifi ca� t ion of natu ral kil ler cell st imulatory factor ( NKSF) , a cytokine w ith mul tiple b iologic effect s on human lymph ocytes [ J ]� J Ex p M ed, 1989, 170( 3) : 827- 845� [ 2 ] � Stern A S, Podlaski F J , H ulm es J D, et al� Pu rificat ion to homogeneity and part ial characterizat ion of cytotox ic lymphocyte matu rat ion factor from hum an B�l ymphoblastoid cel ls [ J ]�Proc Nat l Acad Sci U S A, 1990, 87( 17) : 6808- 6812� [ 3 ] � Germann T, Gately M K, Schoenhaut D S, et al� Interleu kin� 12/T cel l st imulat ing factor, a cytokine w ith mul tiple effects on T helper type 1 ( Th 1) but not on Th2 cel ls[ J]� Eur J Immun ol , 1993, 23( 8) : 1762- 1770� [ 4 ] � Watford 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